中国猪业 2023年5期

发布时间:2023-11-01 | 杂志分类:其他
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中国猪业 2023年5期

China Swine Industry2023 年 第 5 期渊下转第101页冤流行趋势及防控对策》 一文,被引频次是 63 次。2.7 发文期刊分析对刊登文献的来源期刊进行分析,可以了解该研究领域的主要信息源[8]。CNKI 数据库在统计范围内,猪伪狂犬病净化领域方向发文量 20 篇以上的期刊见表 4。由表 4 可以看出,发文量 20 篇以上的期刊总发文数为 571 篇,占总量的 47.98%,其中 《猪业科学》 发文数最多为 67 篇,占总量的 5.63%, 《养猪》 次之,发文量为 53 篇,占总量的 4.45%, 《中国畜牧兽医文摘》 居第 3 位,出版量为 48 篇,占总量的 4.03%;其余期刊发文数为 21~40 篇,占总量的 1.76%~3.36%。2.8 研究层次分析 [3]从表 5 可知,关于猪伪狂犬病净化研究主要集中在技术开发与应用基础研究方面,分别为 133 篇和 103篇,相关论文合计占比为 19.84%;紧接着为工程研究及技术研究,分别为 57 篇和 48 篇,相关论文合计占比为8.82%;而在工程与项目管理方面的研究较少,仅 4 篇。3 结论本文以 CN... [收起]
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中国猪业 2023年5期
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第101页

China Swine Industry

2023 年 第 5 期

渊下转第101页冤

流行趋势及防控对策》 一文,被引频次是 63 次。

2.7 发文期刊分析

对刊登文献的来源期刊进行分析,可以了解该研究

领域的主要信息源[8]。CNKI 数据库在统计范围内,猪伪

狂犬病净化领域方向发文量 20 篇以上的期刊见表 4。

由表 4 可以看出,发文量 20 篇以上的期刊总发文

数为 571 篇,占总量的 47.98%,其中 《猪业科学》 发

文数最多为 67 篇,占总量的 5.63%, 《养猪》 次之,

发文量为 53 篇,占总量的 4.45%, 《中国畜牧兽医文

摘》 居第 3 位,出版量为 48 篇,占总量的 4.03%;其

余期刊发文数为 21~40 篇,占总量的 1.76%~3.36%。

2.8 研究层次分析 [3]

从表 5 可知,关于猪伪狂犬病净化研究主要集中在

技术开发与应用基础研究方面,分别为 133 篇和 103

篇,相关论文合计占比为 19.84%;紧接着为工程研究

及技术研究,分别为 57 篇和 48 篇,相关论文合计占比为

8.82%;而在工程与项目管理方面的研究较少,仅 4 篇。

3 结论

本文以 CNKI 数据库为基础,结合限定检索方法检

索出 1 190 篇文献;利用 CNKI 的计量可视化分析功能

和 Excel、VOSviewer 等软件对发文数量、核心作者、

研究机构等指标进行分析,得到以下结论:⑴2000 年以

来,该领域发文量呈现先上升、后震荡下降趋势,发文

量先从 4 篇 (2000 年) 上升到 154 篇 (2016 年)、后又

下降至 51 篇 (2022 年);可以看出我国整体上对猪伪狂

犬病净化的研究越来越重视。⑵无论采用普赖斯定律计

算还是使用 VOSviewer 软件分析,均表明我国猪伪狂犬

病净化研究领域尚未形成稳定的核心作者群。⑶对猪伪

狂犬病净化研究发展贡献最大的研究机构前 3 名分别

为:贵州大学、华中农业大学、南京农业大学。⑷虽然

有 35 个基金资助了猪伪狂犬病净化研究,但基金论文

比例不足 10%。⑸关键词共现知识图谱揭示出了该领域

的研究热点有:猪伪狂犬病、净化、免疫等。⑹邓仕伟

等发表的 《我国伪狂犬病流行现状及新特点》 一文被引

频次最高, 《猪业科学》 期刊发文数最多,表明上述文

章及杂志在该领域的影响力较大;猪伪狂犬病净化的研

究层次主要集中在技术开发与应用基础研究。

4 建议

为使我国猪伪狂犬病净化研究能得到进一步发展,

针对上述分析结论,笔者特提出以下 3 点建议:⑴各研

究机构应尽可能创造并提供合作平台,以吸引更多优秀

学者加入、扩展研究群体;各从业者提高合作意识、加

强学术交流,以形成稳定的研究网络系统,这样才能更

表4 发文量 20 篇以上的期刊

期刊名称 发文篇数/篇 发文百分比/%

猪业科学 67 5.63

养猪 53 4.45

中国畜牧兽医文摘 48 4.03

今日养猪业 40 3.36

福建畜牧兽医 36 3.03

畜牧兽医科技信息 33 2.77

兽医导刊 32 2.69

中国动物检疫 32 2.69

畜禽业 29 2.44

中国畜禽种业 29 2.44

中国猪业 28 2.35

中国畜牧业 28 2.35

北方牧业 27 2.27

黑龙江畜牧兽医 24 2.02

今日畜牧兽医 22 1.85

中国动物保健 22 1.85

当代畜牧 21 1.76

合计 571 47.98

表 5 猪伪狂犬病净化研究层次分析

研究层次分布 文献篇数/篇 百分比/%

技术开发 133 11.18

应用基础研究 103 8.66

工程研究 57 4.79

技术研究 48 4.03

工程与项目管理 4 0.34

合计 345 28.99

猪病防控 Swine Disease

Prevention and Control

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第102页

China Swine Industry

2023 年 第 5 期

DOI:10.16174/j.issn.1673-4645.2023.05.021

收稿日期:2022-12-13

作者简介:吴丽艳 (1981-),女,苗族,硕士,中级兽医师,主要从事优化养猪生产模式和生产操作及丹系母猪饲养管理方面的研究

规模猪场的猪瘟净化新思路及实例初探

吴丽艳 1 王 杨 2 曾容愚 2 韩金凤 1 戴 琦 1

1佳和农牧股份有限公司袁 湖南长沙 410000曰

2天康生物制药有限公司袁 江苏苏州 215028冤

摘 要院 为研究猪瘟 E2基因工程疫苗在推进猪瘟净化进程中的实际使用效果袁 并探究猪瘟净化新思路袁 猪场首先选择健康

的同批次保育仔猪80头袁 随机分成试验组和对照组袁 每组 40头猪袁 试验组接种猪瘟 E2基因工程苗袁 对照组接种猪瘟传统

弱毒苗遥 分别在首免前尧 首免后 21 d 以及二免后 30 d采血检测猪瘟抗体遥 结果表明袁 猪瘟 E2 基因工程苗的免疫效果明显

优于传统弱毒苗遥 此后袁 该猪场开始调整母猪群猪瘟疫苗袁 由传统活疫苗更换为猪瘟 E2 基因工程苗袁 更换疫苗后的 2 年

中袁 持续跟踪猪场母猪尧 商品猪的 E0 抗体的阳性率与猪场野毒的感染情况袁 跟踪结果表明使用猪瘟 E2 基因工程苗后袁 猪

群中猪瘟 E2抗体水平较好尧 保护力高袁 E0抗体阳性率有明显下降趋势袁 猪场无猪瘟野毒感染袁 且生产成绩稳定袁 初步验证

使用了猪瘟 E2 基因工程亚单位疫苗的猪瘟净化效果袁 为指导猪场猪瘟净化提供参考依据遥

关键词院 猪场曰 疾病净化曰 E2 苗曰 猪瘟曰 母猪曰 商品猪

中图分类号院 S828曰S852.65 文献标识码院 A 文章编号院 1673-4645(2023)05-0096-06

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猪瘟 (Classical swine fever, CSF) 是由猪瘟病毒

(Classical swine fever virus, CSFV) 引起的一种急性、

热性、高度接触性传染病,因其对养猪业危害严重,该

病被世界动物卫生组织 (OIE) 列入须申报的动物疫病

目录,我国将其列为一类动物传染病[1,2]。猪瘟对养猪业

的危害主要表现在以下 4 方面,一是造成了严重的经济

损失;二是阻碍养猪业的健康发展,挫伤养猪生产者的

积极性;三是造成母猪带毒综合症和先天感染仔猪,严

重影响母猪的繁殖性能和育肥猪的生产性能,降低饲料

报酬、延迟上市时间,影响种猪和猪肉销售;四是造成

猪只出现免疫抑制和免疫耐受,严重影响猪群健康水

平,增加其他猪病防控难度等[3-6]。由于猪瘟对养猪业的

危害较大,因此,被定义为猪场中需要防控的最重要的

疫病之一[7]。

动物疫病净化是经过国内外实践证明了的非常有效

的疫病消灭方法[8],欧盟于 20 世纪 80 年代开始实施猪

瘟净化项目,主要是通过采用 C 株疫苗免疫,降低感染

率,然后再采取非免疫和扑杀策略,并通过限制生猪及

猪产品的流通,从而使一些国家净化了猪瘟[9,10]。我国猪

瘟净化的难点主要存在于生物安全防范不严格、疫苗免

疫覆盖率低、免疫不到位及综合防控措施不到位等[11,12]。

2018 年我国发生非洲猪瘟后,集约化进程越来越快,新

建猪场生物安全等级更高,同时猪瘟标记疫苗及相应配

套的鉴别诊断技术也开始发展与成熟,在抵御非洲猪瘟

疫情的前提下,猪瘟净化时机及条件均已具备[13]。猪瘟

净化按进程分为免疫净化阶段和非免疫净化阶段,在免

疫净化阶段,疫苗的防治作用仍不容忽视,国内许多规

模化猪场一直使用猪瘟兔化弱毒疫苗 (C 株) 来防控猪

瘟,但由于弱毒疫苗对保存和运输温度、免疫程序和免

疫时机具有较高的要求,同时不能阻断病毒的传播途

猪病防控 Swine Disease

Prevention and Control

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China Swine Industry

2023 年 第 5 期

径,且诱导产生的抗体与野生毒株诱导产生的抗体因极

其相似而无法区别[14,15],因此,需要通过猪瘟标记疫苗

来实现猪瘟净化。区别于猪瘟活疫苗、猪瘟 E2 亚单位

疫苗的唯一抗原为猪瘟病毒 E2 蛋白,是最主要的保护

性抗原,免疫猪后只产生针对 E2 的抗体。猪场可以通

过对 E2 疫苗免疫猪只的 E0 蛋白抗体检测,来区分免疫

和野毒感染猪,进而为猪瘟的防控和净化提供科学诊断

和依据。本研究通过 2 个试验分别对比了猪瘟传统弱毒

疫苗与猪瘟 E2 基因工程苗的免疫效果,并进一步验证

了猪瘟 E2 基因工程苗在推进猪瘟净化进程中的实际使

用效果,以期为猪瘟净化提供新的思路。

1 试验材料与方法

1.1 试验材料

猪瘟 E2 基因工程苗、猪瘟传统弱毒疫苗、英迪康

CSFV Erns Ab Test Kit、IDEXX 猪瘟病毒 ELISA 抗体检

测 试 剂 盒 , TaKaRa 反 转 录 试 剂 盒 , 恒 温 培 养 箱

KE054N、HNGY-YQ-027、酶标仪 KE082M、HNGYYQ-082、全自动核酸提取仪 HNGY-YQ-109、基因扩

增仪 HNGY-YQ-013、电泳仪 HNGY-YQ-037、凝胶

成像分析系统 HNGY-YQ-033 等。

1.2 试验时间与地点

试验于 2018 年 9 月至 2022 年 3 月在湖南省某集团

规模猪场完成。

1.3 试验方法与分组

1.3.1 2 种猪瘟疫苗免疫效果对比试验

选择健康的同批次保育仔猪 80 头,随机分为试验

组和对照组,每组 40 头猪,试验组接种猪瘟基因工程

苗 (E2),对照组接种传统弱毒疫苗。分别在首免前、

首免后 21 d 及二免后 30 d 采血,进行猪瘟抗体水平检

测,对比 2 种猪瘟疫苗的实际免疫效果。

1.3.2 猪瘟 E2 基因工程苗的免疫效果试验

2019 年 3 月后,猪场母猪群使用猪瘟 E2 基因工程

苗,商品猪继续使用猪瘟传统弱毒苗,持续跟踪猪场母

猪群更换使用猪瘟 E2 基因工程苗后的情况,对母猪群

和商品猪按照不同胎次、不同日龄进行采血检测,并采

集病死猪病料进行检测,评估该猪场 E2 和 E0 的抗体水

平和猪瘟野毒感染情况。试验分组与设计详见表 1、表

2 和表 3。

1.3.3 评估指标

猪瘟 E2 抗体 (IDEXX 的阻断法);猪瘟 E0 抗体

(INDICAL 的 间 接 ELISA); 猪 瘟 病 毒 核 酸 PCR

(TaKaRa 的 RT-PCR)。

1.4 数据处理

用 Excel 软件进行试验数据录入、整理和初步分析,

用 SPSS 统计分析软件进行方差分析,结果用“平均数±

标准差 (X±SD)”表示。 <0.05 表示有显著差异。

2 结果与分析

2.1 猪瘟 E2 抗体检测结果

从表 4、图 1、图 2、图 3 和图 4 可知,对照组猪群

在首免后 21 d 时猪瘟抗体阳性率为 25.00%,阻断率均

值为 29.40%,离散度为 51.80%;试验组猪群在首免后

21 d 时的猪瘟抗体阳性率为 55.00%,阻断率均值为

40.49%,离散度为 27.40%。对照组猪群在二免后 30 d

表 3 不同剂量的益生菌制剂对仔猪血清免疫指标的影响 表1 试验分组

分组 猪瘟苗 使用周期 时间段 检测项目

A E2 基因工程苗 2 年以上 2021 年 4 月至 2022 年 3 月 E2、E0 抗体

B E2 基因工程苗 1~2 年 2020 年 4 月至 2021 年 3 月 E2、E0 抗体

表 2 母猪群采血表

胎次 0~2 胎 3 胎及以上

数量/头 20 20

表3 商品猪群采血表

日龄 首免前 1 周 二免前 1 周

数量/头 20 20

猪病防控 Swine Disease

Prevention and Control

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2023 年 第 5 期

图1 对照组猪瘟抗体水平

时猪瘟抗体阳性率为 80.00%,阻断率

均值为 55.48%,离散度为 32.70%;实

验组猪群在二免后 30 d 时猪瘟抗体阳

性率为 100%,阻断率均值为 76.32%,

离散度为 10.3%。

2.2 猪瘟 E2基因工程苗的免疫效果

2.2.1 猪瘟 E2 抗体

由表 5、图 5、图 6 可知,A 组 0~

2 胎次母猪的 猪瘟 E2 抗体阳性 率为

100.00%,3 胎次及以上母猪猪瘟 E2 抗

体阳性率为 100.00%,37 日龄仔猪猪瘟

E2 抗体阳性率为 100.00%,58 日龄仔

猪猪瘟 E2 抗体阳性率为 91.67%。B 组

0~2 胎次母猪的猪瘟 E2 抗体阳性率为

100.00%,3 胎次及以上母猪猪瘟 E2 抗

体阳性率为 100.00%,28 日龄仔猪猪瘟

E2 抗体阳性率为 100.00%,62 日龄仔

猪猪瘟 E2 抗体阳性率为 100.00%。

2.2.2 猪瘟 E0 抗体

由表 6、图 7 可知,A 组 0~2 胎次

母猪猪瘟 E0 抗体阳性率为 0%,3 胎次

及 以 上 母 猪 猪 瘟 E0 抗 体 阳 性 率 为

8.33%,37 日龄仔猪猪瘟 E0 抗体阳性

率为 0%,58 日龄仔猪猪瘟 E0 抗体阳

性率为 8.33%。B 组 0~2 胎次母猪猪

瘟 E0 抗体阳性率为 0%,3 胎及以上母

猪猪瘟 E0 抗体阳性率为 25.00%。

2.2.3 病猪猪 瘟 E0 抗 体及 猪 瘟病 原

PCR 检测

由表 7 可知,对 5 头断奶前病猪

(病死猪均采集自 3 胎次以上高胎龄母

猪所产仔猪) 采血检测猪瘟 E0 抗体,

有 4 头猪只呈阳性,阳性率 80%;而对病死猪猪瘟病毒

核酸检测全部为阴性。

3 讨论

传统猪瘟弱毒苗在首免后受母源抗体影响较大,其

免疫效果不佳,CSFV 抗体水平低、整齐度差,无法提

供较好的保护,且在二免后其免疫效果仍不理想。猪瘟

E2 基因工程苗首免后在一定程度上仍会受到母源抗体影

响,但相较传统猪瘟弱毒苗,其受影响较小。且在二免

后,CSFV 抗体水平明显上升,阳性率及保护率均达

100%,抗体水平整齐度好,免疫效果佳,表明猪瘟 E2

组别 阶段 阳性率/% 平均阻断率/% 离散度/%

首免后 21 d 25.00 29.40 51.80

对照组

二免后 30 d 80.00 55.48 32.70

首免后 21 d 55.00 40.49 27.40

试验组

二免后 30 d 100 76.32 10.30

表 4 免疫猪瘟疫苗后 E2抗体检测水平

注:细线以上为阳性率 (阻断率>40%),粗线以上为保护率 (阻断率>50%),下同。

图 2 试验组猪瘟抗体水平

猪病防控 Swine Disease

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亚单位疫苗在二免后能为猪群提供

强有力的保护。

猪瘟 E2 抗体结果显示,A、B

组母猪 E2 抗体的阳性率均高达

100%,A 组相较 B 组整齐度更好、

阻断率更高,表明猪场更换 E2 基

因工程苗后,母猪的猪瘟抗体水平

较高,且随着 E2 基因工程苗使用

时间越长,E2 抗体整齐度越好、

保护力越高;A、B 组商品猪的 E2

抗体水平整体均较好,首免前抗体

阳性率均为 100%,二免前抗体阳

性率均可达 90%以上,阻断率稍

低,在 72%~75%;首免至二免的

抗体水平变化说明目前猪场的免疫

程序较合适,但仔猪首免前抗体水

平较高,为减少母源抗体干扰,首

免时间可从当前实施的 5 周龄适当

延后至 6~7 周龄。

猪瘟 E0 抗体检测结果显示,

A、B 组 0~2 胎次母猪 E0 抗体阳

性率均为 0,而 3 胎次及以上母猪

E0 抗体阳性率均超过 5%,这可能

是由于猪场有过猪瘟感染史,且猪

场之前使用弱毒疫苗造成的 E0 抗

体阳性率较高,随着时间的推移,

在母猪群调整使用猪瘟 E2 基因工

程苗 2 年后 E0 抗体阳性率从 25%

下降至 8.33%,有明显下降的趋

势。

5 头病死猪的死因均与猪瘟感

染无关,而其中 4 头猪的猪瘟 E0

抗体阳性,有可能是母猪的猪瘟

E0 抗体为阳性,通过乳汁将 E0 抗

体传递给仔猪所造成的。病死猪均

采集自 3 胎次以上高胎龄母猪所产

仔猪,该结果与上述 E0 抗体结果

相符,说明 3 胎及以上母猪所产仔猪病症情况更多,且

随着母猪调整使用 E2 苗,E0 抗体阳性率下降明显,病

症减轻。

综上所述,猪场在更换 E2 基因工程苗后不同时间

图3 猪瘟抗体阳性率尧 保护率

图4 猪瘟抗体平均阻断率尧 离散度

表5 猪瘟 E2抗体检测情况表

组别 猪只 平均阻断率/% 阳性率/% 离散度/%

0~2 胎次母猪 92.50 100.00 2.67

3 胎次及以上母猪 93.09 100.00 2.01

37 日龄(首免前) 79.57 100.00 11.21

A

58 日龄(二免前) 72.79 91.67 24.05

0~2 胎次母猪 84.63 100.00 10

3 胎次及以上母猪 86.27 100.00 6

28 日龄(首免前) 86.27 100.00 15

B

62 日龄(二免前) 75.71 100.00 13

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Prevention and Control

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段监测猪瘟 E2 抗体水平均较好,

E0 抗体阳性率也呈明显下降的趋

势,通过核酸检测跟踪发现,猪场

无猪瘟野毒感染,猪场在免疫猪瘟

E2 苗后免疫效果较好,保护力较

强。

4 结论

本研究通过评估 E2 基因工程

苗的实际免疫效果,并跟踪猪场母

猪群更换使用 E2 苗 2 年后的情况,

对比使用不同猪瘟疫苗后猪场的母

猪、商品猪的 E0 抗体的阳性率与

病原情况,了解猪场的野毒感染情

况,同时通过对比使用猪瘟 E2 基

因工程苗与使用传统猪瘟弱毒苗在

猪瘟抗体水平及猪瘟野毒感染上的

差异,验证了使用猪瘟 E2 基因工

程苗猪场的猪瘟净化效果,为指导

猪场猪瘟净化提供参考依据。

对比传统猪瘟弱毒苗,E2 基因

工程苗具有明显优势,且猪场在更

换使用猪瘟 E2 基因工程苗后猪瘟

E2 抗体水平较好、保护力高,E0

抗体阳性率有明显下降的趋势,猪

场无猪瘟野毒感染现象,生产成绩

稳定,可以继续依照调整后的免疫

程序实施、推进猪瘟净化进程。本

研究结果初步验证了 E2 基因工程

苗在临床上评估猪瘟净化进展的可

行性,且作为猪瘟净化的实例,具

有可推广性。

参考文献

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minireview[J]. Veterinary Microbiology, 2014, 172(1-2):1-6.

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科技信息, 2008(5):65-66.

[4] 周明旭, 张恒博, 李华明, 等. 规模化猪场猪瘟的控制与净化

技术初探[J]. 国外畜牧学(猪与禽), 2008(4):64-65.

[5] 王在时, 王玮琳. 我国猪瘟长期持续存在的根源及综合防制

对策[J]. 中国猪业, 2012, 7(11):31-33.

图5 A组猪瘟 E2抗体阳性率尧 平均阻断率尧 离散度

图 6 B组猪瘟E2抗体阳性率尧 平均阻断率尧 离散度

表6 猪瘟 E0抗体检测情况表

组别 猪只 平均值 阳性率/%

0~2 胎次母猪 -0.048 0

3 胎次母猪 0.055 8.33

37 日龄(首免前) 0.000 0

A

58 日龄(二免前) -0.083 8.33

0~2 胎次母猪 -3.15 0

B

3 胎次及以上母猪 23.3 25.00

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China Swine Industry

2023 年 第 5 期

DOI:10.16174/j.issn.1673-4645.2023.05.022

收稿日期:2022-12-01

作者简介:胡新艳 (1981-),女,陕西汉中人,本科,兽医师,主要从事畜牧兽医工作

* 通信作者:陈博 (1977-),男,陕西汉中人,大专,畜牧师,主要从事畜牧兽医工作

猪支原体肺炎

对生猪养殖的危害及综合防制措施

胡新艳 1 汤丽娟 2 陈 博 3*

1 陕西省汉中市略阳县横现河街道办畜牧兽医站袁 陕西汉中 724300曰

2 略阳县畜牧兽医技术推广中心袁 陕西汉中

724300曰

3陕西省汉中市勉县黑河猪种猪场袁 陕西汉中 724200冤

摘 要院 猪支原体引起猪的肺部炎症袁 损伤肺组织袁 破坏呼吸道防御系统和猪免疫系统袁 继发如猪蓝耳病尧 猪传染性胸膜肺

炎等造成的混合感染袁 常被称为呼吸道综合征的 野钥匙病冶遥 因其常呈慢性或隐性临床症状袁 发病死亡率低袁 并常与其他疫

病并发或继发袁 而易被忽视袁 导致大范围流行曰 又因其感染率高袁 具有消耗性特点袁 为生猪养殖带来巨大的经济损失遥 猪支

原体肺炎的传播途径复杂袁 易感幼龄猪只袁 且具有免疫抑制性袁 抗生素不能将病原彻底杀死袁 为治疗和预防增加了难度遥 笔

者根据猪支原体的流行特点尧 致病机理及其危害等袁 从做好猪场生物安全防控尧 进行药物治疗及预防尧 疫苗免疫尧 实施感染

猪群净化等方面的工作入手袁 采取综合防制措施控制该病袁 以期为猪场防治猪支原体肺炎提供参考遥

关键词院 生猪曰 支原体肺炎曰 免疫抑制曰 空气传播曰 危害曰 防制

中图分类号院 S828曰S858.28 文献标识码院 A 文章编号院 1673-4645(2023)05-0102-05

开放科学渊资源服务冤标识码渊OSID冤袁扫一扫袁了解文章更多内容

猪支原体肺炎是由猪肺炎支原体 (猪霉形体) 感染

猪群而引发猪呼吸道疾病的一种慢性接触性传染病,一

般呈散发和地方性流行,故称猪地方性流行性肺炎,因

其典型临床症状表现为咳嗽和气喘,俗称猪气喘病[1]。

早期,英国的 Goodwin 和 Whittestone 与美国的 Mare

和 Switzer 几乎在 1965 年的同一时间,从患肺炎猪的肺

组织中分离出病原,经试验复制出病菌并命名[2]。猪支

原体肺炎在世界各地广泛流行,猪群的感染率达 30%~

80%[3],甚至有很多国家的猪场感染率达到 100%[4]。我

国在 20 世纪 50、60 年代曾发生过大规模猪支原体肺炎

的流行,随后趋于缓和。但随着我国养殖模式向规模

化、集约化方向的发展,猪场为了防止种猪品种退化,

猪场间引种交流频繁,加之该病具有除易造成新疫区猪

场发病率高、病情重、致死率高外,一般老疫区猪场则

表现为典型的慢性症状和隐性感染,除猪只生长缓慢、

饲料转化率低等消耗性特点外无明显症状,猪只的采食

正常,病死率也低,并常伴随细菌、病毒和寄生虫混合

感染的“危害隐蔽性”特点,常被人们所忽视,导致该

病近年来在我国大部分区域存在。我国猪群的感染率为

70%~90%[5],存在猪肺炎支原体的猪场接近 100%[6],

发病率 40%以上,每年由该病造成的经济损失高达 100

亿元。现结合其流行特点、致病机理,就其对生猪养殖

的危害和综合防治进行探讨,以期为养猪场防控该病提

供参考。

猪病防控 Swine Disease

Prevention and Control

102

第109页

China Swine Industry

2023 年 第 5 期

1 流行特点

猪支原体肺炎自然状态下仅在家猪和野猪间流行,

任何年龄、性别、品种的猪均可感染,尤以哺乳期和断

奶前后的仔猪感染率和发病率最高,死亡率亦高,其次

为妊娠后期和哺乳期母猪[7],成年公猪和育肥猪发病较

少、较轻,常呈慢性和隐性感染,如果在良好的饲养管

理条件下,公猪可正常配种,育肥猪可正常生长肥育,

但肺部有不同程度的炎症病变,且体内长期带毒、排

毒,甚至症状消失后的 1 年多时间还出现排毒现象。我

国地方猪易感,陕西省略阳县的 1 个地方猪养殖场,存

栏有地方猪、引进猪种、土猪与引进猪种的杂交后代

猪,猪群在感染猪支原体肺炎后,发现地方猪与杂交猪

发病率及病死率远高于引进猪种和其他杂交猪。

病原主要存在于病猪肺组织中,呼吸道为该病的主

要传染途径。病猪和无明显症状表现的带毒、排毒猪在

咳嗽、喘气和喷嚏时病原体随分泌物排出体外,形成飞

沫或气溶胶,当健康猪与带毒、排毒猪接触或同处一个

圈舍时,吸入携带病原的空气而传染。感染母猪可通过

哺乳直接传染给哺乳仔猪。也可通过空气传播引起猪场

间的传染,该病的最远传播距离可达 9.2 km。

猪支原体肺炎病在 1 年中任何季节均可发生,但在

寒冷的冬季及早春易发,尤其是在阴冷潮湿气候条件下

最易发,且病症较重,发病致死率也高于其他季节。除

气候因素外,圈舍通风不良、潮湿,空气中粉尘及氨气

等有毒有害气体浓度过高,饲料营养不全、不均衡,饲

养密度过大等不良的饲养管理因素和应激均可诱发该病。

2 致病机理

猪肺炎支原体病原随空气被猪吸入,进入呼吸道后

粘附在气管、支气管及细支气管的上皮细胞纤毛上而定

植,引起感染细胞逐渐发生病变、死亡,甚至破坏呼吸

道黏膜层,导致纤毛脱落或萎缩,纤毛变少变短,摆动

功能显著下降,无法有效排出肺泡分泌物、空气源性粉

尘及致病原,破坏呼吸道天然防御功能,从而引发猪蓝

耳病、猪圆环病毒病、猪伪狂犬病、猪链球菌病、猪线

虫病等多种疾病的继发、混合感染,被认为是引起猪呼

吸道疾病综合征的“钥匙病”[8]。

猪肺部感染后引起支气管肺炎,使支气管附近淋巴

组织增生,肺泡间隙增厚,增生的淋巴小结压迫支气管

引起支气管扩张困难,导致病猪呼吸困难,出现喘气现

象。同时造成肺部尖叶和心叶实质性病变,即使自我康

复,也会造成永久性的组织伤痕和明显的肺泡萎缩。若

再继发感染其他病原,常会引起肺与胸膜的纤维素性、

化脓性病灶,甚至坏死灶,严重影响肺的正常功能。

猪在感染肺炎支原体后,血液淋巴细胞和支气管淋

巴结会发生有丝分裂,机体的淋巴细胞会对非相关抗原

产生抗体的能力显著下降,导致机体免疫应答反应受到

抑制,导致多种疫病的疫苗免疫失败。此外,巨噬细胞、

T 细胞、B 细胞的功能均受到抑制,使细胞免疫力下降,

造成病猪抵抗力降低,极易继发感染内、外源性疾病,

从而引起严重的临床病症[9]。

3 对养猪业的危害

猪支原体肺炎会引起猪呼吸系统炎症及肺部组织损

伤,致使呼吸障碍,从而影响猪正常生长,导致饲料转

化率和日增重下降,使猪表现出吃料不长肉、长得慢、

整齐度差、出栏时间推迟等现象。感染猪日增重下降

12%~16%,饲料转化率下降 14%;肺部组织每感染

10%,平均日增重则下降 37 g;如果肺部组织感染达

20%,胴体重下降 25 kg;猪支原体肺炎血清学阳性的

猪平均日增重降低 38 g。猪肺炎支原体病会导致猪的日

增重下降 16%,饲料转化率降低 20%,出栏时间延长 2

周以上,直接导致经济损失超过 100 元 / 头[10]。我国生

猪存栏量达 4 亿头以上,猪支原体肺炎在我国猪群中的

感染率和发病率均不低,除由该病自身感染造成的损

失,再加上对感染猪群的治疗、保健投入的精力和财力

及死淘的出现,每年由此而造成的巨大经济损失成为制

约我国养猪效益的重要障碍之一。

猪肺炎支原体可损害感染猪呼吸道上皮组织,破坏

呼吸道防御屏障,同时可破坏猪的免疫系统,引起猪的

免疫抑制,使猪免疫功能下降,为细菌、病毒等致病微

生物打开易感之门,常伴随传染性胸膜肺炎、猪伪狂犬

病、猪蓝耳病等多种疫病的发生或相互继发,引起严重

的临床症状,为确诊、治疗及净化带来难度。

猪病防控 Swine Disease

Prevention and Control

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第110页

China Swine Industry

2023 年 第 5 期

该病发生早,最早可感染 2~3 周龄的哺乳仔猪,

地方品种可见于 9 日龄的哺乳仔猪;潜伏期长,许多猪

普遍在 6~10 周龄感染,直至 3~6 月龄才出现明显的

症状;传播途径广,可通过直接接触、母猪垂直传播哺

乳仔猪、空气和气溶胶进行传播,且空气传播距离远;

该病在公猪、母猪和育肥猪中多呈隐性感染,容易被忽

略,造成猪的长期带毒、排毒。猪支原体肺炎主要用抗

生素进行治疗,抗生素主要抑制病原的生长,不能有效

地杀灭和清除体内的病原,容易复发;治疗过程长,易

使病原产生耐药性,同时也加大了药残风险。猪群一旦

感染,为治疗和根除带来极大的困难。

4 综合防制措施

生产中,为防止猪肺炎支原体感染猪群导致该病在

群体中蔓延,引起临床症状及死淘而造成损失,应充分

认识到仅用药物或疫苗达不到理想的防治效果,必须树

立“防重于治,防治结合”的理念[11],提高猪场管理人

员的生物安全意识,以“减少和消灭病原、阻断传播途

径、降低猪的易感性”为防控目标[12],制定生物安全措

施,加强猪群饲养管理,科学地进行疫苗免疫,结合感

染猪药物治疗及预防,多措并举,综合防控,有效地降

低猪群的感染率、发病率,达到良好的防制效果。

4.1 做到自繁自养

拥有繁育体系的猪场,尤其未受到猪支原体肺炎感

染的,应坚持“自繁自养”原则[13],做到非必要不向外

引种或购猪。如必须引种或购猪,首先应充分了解和掌

握引种猪场和地区该病的流行和发生情况,杜绝从健康

状况不明的猪场和地区引种或购猪;其次严格实施检

疫,如果条件允许可采样进行实验室检测,确定为健康

猪后再引种或购入。新引进的猪必须隔离观察 1 个月以

上,通过 X 光检查结合实验室检测,证实确定为健康猪

后再并入猪群,将病原的输入传播风险尽量降低。

4.2 符合猪场生物安全要求的场区选址及布局

猪场建设应按照 《动物防疫法》 及猪场建设国家标

准要求,结合猪场生物安全需求进行选址和布局。场址

应选在隔离条件良好、地势高燥、通风良好、远离居民

区 1 km 以上,距离其他猪场、公路干线、生猪屠宰厂

3 km 以上[14]。场区布局要将办公区、生活区、生产区分

开,同时建造粪污处理区和病死猪无害化处理区,按照

猪场所在地的主导风向,将粪污及病死猪处理区设置于

下风向或侧风向,各区之间设置隔离带隔开并设置专用

通道和消毒设备。将生产区按照接触病原的风险划分为

净区和污区,并设置物理界限严格区分开;设立人员通

道和赶猪通道,将净、污道分开;在生产区的下风向设

置病畜隔离观察区,建造隔离观察舍,将健康猪与病猪

分开管理。猪场四周建围墙,装猪台最好设在围墙外,

并处于生产区的下风向处。猪舍前后间距应大于 8 m,

中间设立隔离绿化带,左右间距应大于 5 m [15]。同时应

按照猪群在生产中的重要程度施行分群管理,将生产区

按饲养的群体进行区分,施行分区管理。科学合理的进

行猪场选址和场区布局,可有效预防该病的空气、气溶

胶传染和人员、工具、车辆及猪之间的接触感染,同时

也有效地预防了其他疫病的传播感染。

4.3 做好环境消毒和驱蝇

猪肺炎支原体在体外环境中的生存能力不强,一般

在室温下不超过 36 h 就会失去活性,普通的消毒药即可

将其杀死。制定合理的猪场消毒制度并严格实施,可有

效减少病原在空气中的存活,降低该病通过空气、气溶

胶、气雾在猪场、猪舍、圈舍及猪只间的传播。在进行

定期消毒时,应将圈舍带畜消毒药物使用与环境消毒和

空圈舍消毒区分开来,带畜消毒应选用刺激性小的消毒

药,以防损伤猪呼吸道黏膜,并选择不同的消毒药交替

使用,做到彻底、不留死角。在蚊蝇孳生的夏季,应做

好场区及环境的蚊蝇驱杀工作,以阻断传播途径。

4.4 加强饲养管理

加强猪群日常饲养管理,提高猪只对疫病的抵抗力,

降低其对病原的易感性。一是根据猪只的生长发育、营

养需求提供营养均衡的全价饲料;确保饲料没有受到霉

菌毒素的污染,按照干料∶水为 1∶1.25 或 1∶1.5 的比

例混合搅拌为湿料 (干料易产生粉尘,污染圈舍空气),

适量添加饲喂,并保证充足饮水。二是创造良好的圈舍

环境;做好圈舍的通风换气,及时为圈舍更换新鲜空气,

降低圈舍内氨气、二氧化硫等有毒有害气体及粉尘浓

猪病防控 Swine Disease

Prevention and Control

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第111页

China Swine Industry

2023 年 第 5 期

度,减少对猪呼吸道的刺激和损伤,以免引起猪呼吸道

炎症。保持圈舍干净、卫生、干燥,防止细菌、霉菌等

有害微生物孳生。三是在秋冬季、初春气温较低的时期,

做好圈舍防寒保暖工作,慎防圈舍“贼风”侵袭;对气

温骤降天气应提前进行预防,以免圈舍温度过低导致猪

感冒等呼吸道疾病的发生,引起该病的混合感染或继发

感染。在阴冷潮湿气候条件下,应对圈舍进行加热,保

持圈舍的干燥和适宜的温度,尤其是哺乳仔猪舍和保育

舍。母猪产房的环境温度控制在 16℃左右;初生哺乳仔

猪的环境温度控制在 35℃左右,此后,随着仔猪日龄的

增加逐渐降低温度,至 3 周龄左右控制在 27℃左右;保

育舍温度保育前期控制在 27℃左右,后期控制在 24℃

左右;其他猪舍温度以 16℃为宜,最低温度不宜低于

10℃,同时产房和保育舍应保持温度的恒定,禁忌温差

过大[16]。哺乳仔猪的环境湿度应控制在 60%~70%,其

他圈舍的环境湿度应控制在 60%~80%。四是将饲养密

度及每栏的饲养头数控制在适宜范围;减少因密度过大

造成猪的应激,栏舍环境的污染和猪之间的接触机会,

降低该病的发生率与传播速度。后备母猪、保育仔猪、

育肥猪饲养密度分别应掌握在每头占地面积为 1.0~1.5

m2、0.3~0.5 m2、0.8~1.2 m2 为宜,每栏饲养头数分别

为 5~6 头、9~11 头、9~10 头为宜。五是做好每栋圈

舍猪整齐度控制;按照年龄、体重和生产状况等进行分

群,将状态相同的猪同舍饲养,实行全进全出,在进圈

前和出圈后对圈舍进行彻底的清扫和消毒,减少群体间

的交叉感染。六是制定猪群寄生虫驱虫计划并定期实

施;减少因寄生虫感染而造成的呼吸道损害和免疫力下

降,引发该病。

4.5 药物治疗及预防

对病猪应及时采取隔离措施,根据病症的临床表

现,标本兼顾,进行止咳平喘缓解症状的同时选用药敏

性高的抗生素合理给药治疗,可有效地减缓病情和避免

继发感染疫病的发生。猪肺炎支原体对泰乐菌素、泰妙

菌素、土霉素、卡那霉素、林可霉素、土霉素、多西环

素、环丙沙星及氟苯尼考等抗生素均有不同程度的敏感

性[6],据体外药敏试验发现,猪肺炎支原体尤其对泰妙

菌素和环丙沙星最敏感[17]。由于抗生素不能彻底杀死猪

肺炎支原体,且给药剂量或用药时间不够,还不能有效

抑制病原,一旦停止给药易复发。一般选择脉冲式给药

方式,根据具体情况选择合适的抗生素[19],一般针对该

病用药,需连续肌肉注射 3 d 抗生素,提高药物在体内

的有效治疗浓度,停药 1 d,然后减半给药 3 d 进行巩

固 , 同 时 可 配 合 黄 芪 多 糖 注 射 液 每 10 kg 体 重

2 mL/ 次·d,连续肌注 5~7 d,以增强体质,提高免疫

力,可有效抑制感染,减少复发。

猪支原体肺炎的潜伏期长,猪感染后可长期带毒、

排毒,老疫区常呈慢性和隐性病症,传播方式复杂,故

一旦发现病例出现,有可能整栋圈舍甚至整个猪群已感

染,此时,仅对发病猪进行隔离和治疗,无法阻止该病

在猪群中的传播,生产中一般在饲料中添加抗生素全群

用药进行防治。如每吨饲料中拌入泰乐菌素 500 g 加盐

酸多西环素 150 g 连续饲喂 1 周,减半剂量再连续饲喂

2 周;或者在每吨饲料中加入支原净 200 g 混合均匀连

喂 7 d,然后减半剂量再连续饲喂 1~2 周,其他如林可

霉素、土霉素等猪肺炎支原体敏感的药物均可拌料饲

喂,可较好地控制和预防群体感染。如出现混合感染,

可用磺胺二甲嘧与泰乐菌素混合制剂按使用量拌入饲料

中连续饲喂 3~5 d。

4.6 接种疫苗主动免疫预防

仔猪可从接种过疫苗及感染过该病的母猪母乳中获

得母源抗体被动免疫,但母源抗体具有不稳定性,保护

时间短,不能为仔猪提供全面的保护,确保新生仔猪免

受感染[19]。在自然感染下也会形成抗体,可有效减少母

猪排毒,但由于猪肺炎支原体的免疫原性较差,要想提

高免疫力,获得较长时间的免疫保护,需经多次感染诱

发的自然免疫,费时费力,风险性较大。要想以最短的

时间获得较高水平的免疫抗体,使猪群得到全面保护,

应对猪群实施疫苗接种,刺激机体产生主动免疫。该病

具有免疫抑制性[20],易造成感染猪只疫苗接种的失败,

若要取得良好的疫苗免疫效果,制定合理的免疫程序和

选择高质量的疫苗是关键。在使用猪支原体肺炎疫苗

时,一般在后备母猪配种前接种 1 次,经产母猪和种公

猪每年接种 2 次,初生仔猪 1 日龄口服庆大霉素 0.5

mL,5~7 日龄用灭活苗首免,21 日龄可用弱毒苗进行

第 2 次免疫[21],对于支原体肺炎感染比较严重的猪场可

在 60~80 日龄再免疫 1 次。由于育肥猪饲养时间短,

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China Swine Industry

2023 年 第 5 期

渊下转第110页冤

在做好仔猪和保育猪免疫的前提下,一般不采取疫苗免

疫,平时掌握好该病的发生规律,在高发期前半个月左

右进行药物预防即可。疫苗的选择与接种时间、接种方

式和接种剂量有关,可结合猪场生产实际,并参照不同

疫苗的使用说明进行。

4.7 净化建立健康猪群

猪支原体肺炎的传染源具有隐蔽性、传播途径复

杂、易感猪群幼龄化、免疫抑制性、抗生素不能将病原

彻底杀灭、感染猪长期带毒排毒等特点,猪场一旦传入

此病,就很难完全使猪群免受猪肺炎支原体的感染和侵

害。若要达到有效控制该病对猪场的危害,在做好猪场

生物安全防控的前提下,对该病实施净化措施。国内在

这方面已有许多成功的经验和方法,“瑞士减群法”就

是最经济、简便、灵活且成功率高的一种方法。主要原

理是猪群感染该病后,将低于 10 月龄的猪只与高于 10

月龄的种猪分开,再用猪肺炎支原体敏感药物治疗 10

月龄以上的种猪,治疗期间停止种猪分娩,同时对空栏

舍彻底清洗消毒,达到净化的效果。具体做好以下 3

步:一是移走感染猪群中所有 10 月龄以下的哺乳仔猪、

断奶仔猪、生长育肥猪,留下大于 10 月龄的公、母猪,

并且确保以后的 14 d 内没有新生仔猪;二是通过饲料或

饮水添加抗生素药物对保留下来的种猪进行治疗,治疗

周期 14 d;三是对所有空栏舍彻底清洗和消毒。具体生

产中可根据猪场实际情况灵活采用 10 月龄限制法改为

8~9 月龄限制的方法,也可以不停止母猪分娩,所产仔

猪在 1、7 和 14 日龄注射治疗药物,后备母猪分群治疗

达到 10 月龄转回原群等[22]。在净化该病的同时应根据猪

场及所在地区疫病流行情况,加强其他猪易感且烈性疫

病的免疫和控制,培育无特定病原的健康猪群。

5 小结

综上所述,养猪企业应提高猪场生物安全的防控措

施,把握猪支原体肺炎的流行特点和致病机理,加大防

护力度,强化源头管理,有效阻断传染源、切断传播途

径和提高猪群对疾病的抵抗力,切实做到防患于未然。

如果有猪只感染,应理性看待,做到早发现早治疗,积

极寻求治疗和防控的最佳方案,做到有效降低该病对生

猪健康造成的危害,促进生猪养殖业的健康、高效发展。

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第113页

China Swine Industry

2023 年 第 5 期

DOI:10.16174/j.issn.1673-4645.2023.05.023

收稿日期:2023-03-16

作者简介:杨希川 (1971-),男,汉族,山东临沂人,本科,高级兽医师,研究方向为动物疫病与防控

病毒样颗粒疫苗在猪病防控中的应用

杨希川

渊山东省临沭县动物疫病预防控制中心袁 山东临沂 276700冤

摘 要院 一些猪病如猪瘟尧 猪圆环病毒病等袁 其病毒可能会通过肉类食品传播给人类袁 对人体健康造成威胁袁 且危害公共卫

生安全遥 因此袁 猪病防控在养猪生产中占有至关重要的地位袁 不仅关系到养殖户的经济效益尧 我国肉类供应稳定袁 还关系着

国家食品安全与公共健康遥 病毒样颗粒 渊VLPs冤 疫苗具有安全性高尧 免疫原性好等优势袁 是目前研究预防动物病毒性疾病

的疫苗的最热关注点遥 文章结合实践经验袁 对病毒样颗粒及其表达系统进行简要介绍袁 并对病毒样颗粒疫苗在多种猪病防控

中的应用情况进行综述袁 包括猪细小病毒病尧 猪圆环病毒病尧 猪传染性胃肠炎尧 猪乙型脑炎尧 猪瘟等袁 旨在为病毒样颗粒疫

苗在猪病防控中的推广与使用提供更多依据遥

关键词院 病毒样颗粒疫苗曰 猪病防控曰 猪细小病毒病曰 猪瘟

中图分类号院 S828曰S851 文献标识码院 A 文章编号院 1673-4645(2023)05-0107-04

开放科学渊资源服务冤标识码渊OSID冤袁扫一扫袁了解文章更多内容

病毒样颗粒 (VLPs) 是一种空心颗粒,由病毒结构

蛋白自动组合而成,结构蛋白可以是 1 个或多个,在形

态上与天然病毒粒子相似,被称为“假病毒”或“伪病

毒”。病毒样颗粒虽然具有较强的免疫原性,但没有传

染性,其主要通过与病毒感染一致的途径呈递到 T、B

淋巴细胞群体中,从而对免疫系统产生免疫保护反应进

行诱导[1]。现阶段,国内外针对动物的病毒性疾病,至

少研发了 35 种病毒样颗粒疫苗进行预防。猪传染性疾

病种类较多,对生猪养殖产生了严重的影响,科学防控

猪传染性疾病是稳定养猪生产的重要任务。疫苗是防控

动物疾病的最佳方法,但是也会产生一定的副作用,如

疫苗所选用辅料溶剂的纯度、安全性及弱毒疫苗的返强

风险等。因此,科研人员需要对疫苗研发多加关注,为

研发更多安全的疫苗而努力。近年来,随着 DNA 应用

技术的不断发展和基因工程技术的进步,用于猪病防控

的新型疫苗数量逐渐增多,病毒样颗粒疫苗也逐渐受到

关注。本文以几种常见的猪病为切入点,对病毒样颗粒

疫苗在猪病防控中的应用进展加以分析,为养猪企业在

疫苗选择方面提供参考。

1 病毒样颗粒及其表达系统

病毒样颗粒是由一种或多种组织蛋白、衣壳蛋白通

过自我组装而成的,具有特定空间构象的空心颗粒,直

径约为 20~150 nm,不含遗传物质和病毒核酸,既不

能自主复制,也不具有感染力,但是该空间结构和形态

与活病毒极其相似,具有纳米材料特性[2]。根据病毒样

颗粒结构,可将其分为 2 类,一类是无囊膜病毒样颗

粒,一类是有囊膜病毒样颗粒。无囊膜病毒样颗粒不含

宿主成分,主要是由病毒衣壳蛋白自我组装而成,如猪

圆环病毒、乙肝病毒、人类乳头状瘤病毒的衣壳蛋白均

能形成无囊膜病毒样颗粒[3]。有囊膜病毒样颗粒由表面

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宿主细胞膜、衣壳蛋白组成,其可同时对异源病原体及

同源病原体的多种抗原进行整合,并从细胞膜中释放,

如丙肝病毒、流感病毒可形成有囊膜的病毒样颗粒。病

毒样颗粒有 3 个突出的优势:一是病毒样颗粒以基因工

程或者化学交联等方式对自身结构进行修饰 (或改造);

二是病毒样颗粒能够对核酸分子 (电荷数量适中)、非

核酸分子及分子质量进行包裹;三是部分病毒的病毒样

颗粒可分别在原核表达系统、真核表达系统中进行自我

组装。上述优势的发现,为病毒样颗粒疫苗的研发提供

一定支持。现有研究已经证实,病毒样颗粒在制备过程

中,表达系统的选择对其产生深远影响,在不同表达系

统中,衣壳蛋白特性存在较大差异,因此,对其组装和

折叠产生一定影响[4]。自 20 世纪 80 年代开始,病毒样

颗粒抗原表达中已经广泛使用了多种表达系统,在已经

成功表达的病毒样颗粒中,植物类、哺乳动物类、酵母

类、昆虫细胞类、细菌类等的病毒样颗粒占比分别为

9%、15%、20%、28%、28%。

2 病毒样颗粒疫苗在猪病防控中的应用

2.1 对猪圆环病毒病的防控研究

在猪圆环病毒病中,2 型猪圆环病毒 (PCV2) 是引

起 6~12 周龄仔猪 PMWS 的典型病原。目前,PCV2 的

感染严重危害生猪健康,对产业发展造成不良影响。赵

晓云等[5]根据 PCV2 ORF2 基因的编码特点,发现 PCV2

免疫原性蛋白 Cap 能够在体外自我合成病毒样颗粒,结

合 SUMO 表达技术,首次体外制备成 Cap 蛋白病毒样

颗粒,为猪圆环病毒病病毒样颗粒疫苗的研制奠定了基

础,并且通过其他学者的验证表明,PCV2 病毒样颗粒

疫苗能够对机体细胞免疫反应产生刺激作用,并且具有

刺激机体体液产生免疫反应的功能[6]。徐嫄等[7]研究发

现,采用 Bac-to-Bac 杆状病毒 - 昆虫细胞表达系统,

能够获得 PCV2b 重组杆状病毒,其感染 HighFiveTM 细

胞后,在细胞培养中检测到相关蛋白,并且自动组装成

病毒样颗粒,直径在 15~17 nm,此研究从侧面证实细

胞培养液的上清液中存在大量病毒样颗粒,为目的蛋白

纯化处理及疫苗研制提供了理论基础。王宇[8]研究发现,

在无免疫佐剂的迁移下,用带有 2 型猪圆环病毒抗原表

位的猪细小病毒样颗粒疫苗免疫小鼠,不仅能够诱导小

鼠机体产生 2 型猪圆环病毒特异性的 CTLA 反应,还能

使小鼠体内产生猪细小病毒特异性抗体,并且这种抗体

是高效价的。何至远等[9]研究证实,将 2 型猪圆环病毒

ORF2 蛋白插入猪细小病毒 VP2 蛋白的 2 个位点,形成

了 2 个重组体,该重组体对病毒样颗粒疫苗位点的形成

并不产生影响,且具有较好的免疫原性,为病毒样颗粒

多价疫苗研制找到理论根据。

2.2 对猪细小病毒病的防控研究

Cartwright 首次在流产母猪体内分离到猪细小病毒,

其基因组内包含 ORF,且从进化角度看,猪细小病毒

NS 序列相对保守,编码的非结构蛋白在猪细小病毒

DNA 复制上发挥一定作用[10]。普遍认为,引发母猪繁殖

障碍的主要病原就是猪细小病毒,感染此病毒后,可引

起胚胎及胎儿死亡,增加母猪流产风险[11]。对于猪细小

病毒,传统疫苗以灭活疫苗为主,也包括弱毒苗,如

NADL-2 弱毒株疫苗。国外学者 Paul 等人收集猪细小病

毒强毒株,并对其进行了 50 余次的细胞连续传代,获

得用于制备弱毒苗的猪细小病毒弱毒株,最终发现经口

鼻为母猪接种弱毒苗后,致弱的猪细小病毒无法直接经

过胎盘感染胎儿;而经子宫内接种致弱的猪细小病毒,

则可对胎儿造成感染,甚至引发胎儿死亡,这也导致弱

毒苗的应用被限制在非妊娠母猪中[12]。猪细小病毒基因

组编码中共包含 VP1、VP2、VP3 等 3 种结构蛋白,其

中 VP2 具有中和抗体的功能,是构成病毒粒子的主要靶

蛋白 (衣壳蛋白),猪细小病毒 VP2 结构蛋白基因免疫

原性良好,可在哺乳动物杆状病毒表达系统中进行体外

表达,从而形成病毒样颗粒,对中和抗体的生成起到诱

导作用,具有高稳定性,可替代传统的猪细小病毒病疫

苗[13]。根据上述研究结果,陆续又有多位学者将猪细小

病毒 VP2 基因克隆到杆状病毒表达系统中,经蛋白质表

达结果显示,成功获取了猪细小病毒类病毒粒子,并诱

导产生抗体[14]。还有学者将猪细小病毒 VP2 基因成功在

酵母表达系统中表达,同时通过体外装配方式形成病毒

样颗粒,经验证,其免疫效果良好。

2.3 对猪传染性胃肠炎的防控研究

TGEV 是引发猪传染性胃肠炎的主要病原,感染后

可导致病猪出现严重腹泻,同时伴有呕吐、脱水症状,

猪病防控 Swine Disease

Prevention and Control

108

第115页

China Swine Industry

2023 年 第 5 期

具有高度的传染性,低于 2 周龄的仔猪患猪传染性胃肠

后,病死率高达 100%,对生猪养殖造成严重经济损失[15]。

研究发现,体外共表达的猪传染性胃肠炎病毒 (TGEV)

中含有 sM 蛋白和 M 蛋白,可形成病毒样颗粒,可对干

扰素 -琢 产生诱导效果,对猪传染性胃肠炎具有防御作

用[16]。有学者通过家蚕 BAC-to-BAC 杆状病毒表达系

统,成功表达了具有 sM 蛋白、N 蛋白和 M 蛋白的重组

病毒,且病毒样颗粒体外组装试验结果显示,M 蛋白在

sf9 细胞中单独表达,且 M 蛋白分别于 sM 蛋白、N 蛋

白共表达,均可组装成病毒样颗粒,但是大小不尽相

同,为研究和制备预防猪传染性胃肠炎的病毒样颗粒疫

苗提供理论依据[17]。

2.4 对猪乙型脑炎的防控研究

在众多猪病中,猪乙型脑炎是一种人畜共患传染

病,日本脑炎病毒 (JEV) 是引发猪乙型脑炎的重要病

原,日本脑炎病毒 E 蛋白中包含 ED-Ⅲ结构,即结构域

-Ⅲ,该区域负责对中和抗体进行诱导。体外试验结果

显示,结构域 -Ⅲ中 loop3 环肽可对病毒感染进行有效

抑制,小鼠攻毒试验结果发现,loop3 环肽能够发挥最

强保护作用[18]。秦佳仪[19]深入研究证实,在乙肝病毒

(HBV) 中,乙肝核心蛋白 (HBC) 是该蛋白的核心结

构,其不仅能够在真核细胞中被高效表达,同时可在哺

乳动物细胞、细菌中进行表达,并且自动装配成病毒样

颗粒。试验结果表明,在乙肝核心蛋白特定部位插入短

肽序列 (外源性 loop3 环肽),不仅不会对乙肝核心蛋白

的构象产生影响,同时也不会限制其自我组装,并且短

肽能够以多次重复形式出现在病毒样颗粒的表面,使表

位肽自身免疫原性得到大幅强化。因此,将 loop3 环肽

基因与乙肝核心蛋白基因进行重组,病毒样颗粒可视为

免疫载体,进一步强化 loop3 环肽表位的免疫抗原性。

通过上述研究结果,国内学者将乙肝核心蛋白作为载

体,重组 HBC-loop3,经过纯化处理后,采用透射电镜

进行观察,发现大量病毒样颗粒,为猪乙型脑炎病毒样

颗粒疫苗的研制提供了思路。

2.5 对猪瘟防控的研究

猪瘟是常见的猪急性传染性疾病,传播速度快,死

亡率高,尤其非洲猪瘟。我国 2018 年 8 月在沈阳市首

次发现非洲猪瘟疫病,随后短时间内在我国多个省份点

状发病,导致我国生猪存栏急剧下降,对我国生猪养殖

产业造成严重影响。

引发猪瘟的主要病原为猪瘟病毒 (CSFV),该病毒

主要包括多肽 E290 及非结构蛋白 NS2-3。有研究发现

猪瘟病毒中含有的 CTL 细胞表位,不仅在细胞免疫中发

挥重要作用,同时对体液免疫也产生影响。范京惠等[20]

利用共转染昆虫细胞 sf9 对杆状病毒进行重组,并在体

外进行表达,并发现表达的蛋白不仅具备天然蛋白的生

物学特征,同时能够自我组装并形成病毒样颗粒,在无

免疫佐剂的基础上对小鼠进行免疫,成功在小鼠机体内

诱导出高效价抗猪瘟病毒的特异 CTL 反应,经对比试验

证实,其抗体效应明显比灭活疫苗要高。Kurtovic 等[21]用

乳酸菌表达了猪瘟病毒 CTL 细胞表位,成功诱导出猪黏

膜免疫反应,可帮助生猪抵抗致死剂量猪瘟病毒的攻击。

2.6 对其他猪病防控的研究

病毒样颗粒疫苗在其他猪病防控中的应用研究也有

一定进展,如猪伪狂犬病、口蹄疫、猪蓝耳病等[22]。如

国内研究者利用杆状病毒表达系统,成功表达猪蓝耳病

病毒的 N 蛋白、M 蛋白以及 GP5、GP2b,并证实 M 蛋

白与 GP5 共表达可组装成病毒样颗粒,且 GP2b 在其中

发挥帮助病毒样颗粒释放的作用[23]。

3 小结

综上所述,病毒样颗粒疫苗免疫优势明显,不仅容

易被免疫系统识别,并且因其无法自主复制、不含核酸,

在血清中的半衰期较长,可发挥良好的免疫效果,将有

助于病毒慢性感染及肿瘤所带来的免疫耐受,使病毒样

颗粒疫苗能够直接用于预防和治疗某些动物疫病。与传

统疫苗相比,病毒样颗粒疫苗有效弥补了基因工程疫苗

安全性方面的缺陷,是动物最具发展前景的候选疫苗之

一,在猪病防控方面有良好且广阔的应用前景,未来需

要加强病毒样颗粒的剂量与佐剂比例的研究,并且根据

不同猪病确定最佳疫苗使用剂量及免疫途径。随着对病

毒样颗粒研究的不断深入,病毒样颗粒疫苗的制备问题

也将得到解决,届时将有更多的病毒样颗粒疫苗问世,

为生猪疫病防控提供更多支持。

猪病防控 Swine Disease

Prevention and Control

109

第116页

China Swine Industry

2023 年 第 5 期

渊上接第 106 页冤

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2023 年 第 5 期

DOI:10.16174/j.issn.1673-4645.2023.05.024

收稿日期:2023-01-16

作者简介:乔晓光 (1984-),男,河南长垣人,大专,畜牧师,主要从事畜禽疫病防治工作

猪源多杀性巴氏杆菌荚膜血清 PCR

分型鉴定

乔晓光

渊河南省长垣市农业农村局袁 河南新乡 453400冤

摘 要院 本研究旨在了解河南省长垣市猪源多杀性巴氏杆菌的流行情况袁 采集不同猪场 127 份疑似多杀性巴氏杆菌病的鼻

咽拭子袁 应用细菌分离纯培养尧 生化反应试验尧 16S rRNA PCR扩增和测序尧 荚膜血清分型和动物致病性试验对分离菌株进

行鉴定遥 结果鉴定出10株多杀性巴氏杆菌袁 检出率为 7.87%袁 其中 1 株为荚膜血清型基因 B 型 渊capB冤袁 3 株为荚膜血清

型基因D 型 渊capD冤袁 6株为荚膜血清型基因A 型 渊capA冤遥 动物致病性试验结果显示袁 有34 只小鼠在接种该菌后 36 h 内

死亡袁 表明该分离菌致病力较强遥 长垣市多杀性巴氏杆菌的主要流行菌株为荚膜血清型 A 型和 D 型袁 本研究为猪多杀性巴

氏杆菌病防治和疫苗的研发提供了基础依据遥

关键词院 生猪曰 多杀性巴氏杆菌曰 分离鉴定曰 荚膜血清曰 PCR

中图分类号院 S828袁S852.61垣2 文献标识码院 A 文章编号院 1673-4645(2023)05-0111-04

开放科学渊资源服务冤标识码渊OSID冤袁扫一扫袁了解文章更多内容

多杀性巴氏杆菌 (Pasteurella multocida, Pm) 是巴

氏杆菌科巴氏杆菌属成员,革兰氏染色阴性,球杆菌或

短杆状菌,需氧或兼性厌氧,无鞭毛、无芽胞、无运动

性,能够引起多种畜禽出血性败血症或传染性肺炎[1]。

多杀性巴氏杆菌的血清型较多,根据其荚膜抗原差异,

多杀性巴氏杆菌可分为 A、B、D、E、F 等 5 种血清

型[2]。不同血清型对宿主有不同的易感性,如多杀性巴

氏杆菌血清型 A 和 D 型通常与猪的肺炎和胸膜炎有关,

血清型 B 和 E 型菌株与牛出血性败血病有关[3,4],此外多

杀性巴氏杆菌血清型不同,其交叉免疫保护力较差,因

此,对病原鉴定时有必要鉴定其血清型。

本研究对河南省长垣市部分养猪场发病猪采集鼻咽

拭子进行多杀性巴氏杆菌的分离与鉴定,并进行 PCR 荚

膜血清型检测和分离株对抗菌药物耐药性的检测,以期

为猪多杀性巴氏杆菌病防治和疫苗研发提供参考。

1 材料与方法

1.1 病料采集

采集长垣市部分养猪场疑似猪肺疫、猪萎缩性鼻炎

病猪的鼻拭子 127 份,装入含有 TSB 液体的培养基收集

管中,送实验室 4℃保存备用。

1.2 试验材料和试验动物

胰酶大豆琼脂培养基 (TSA,含有 5%犊牛血清和

5%脱纤维绵羊血)、酶大豆肉汤培养基 (TSB) 均购自

天津一方科技有限公司;细菌基因组 DNA 提取试剂盒

购自天根生化科技 (北京) 有限公司;2×Taq PCR

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2023 年 第 5 期

Master Mix 由 Solarbio 公司生产;抗生素药敏纸片,细

菌生化反应鉴定试剂购自杭州天和微生物试剂有限公

司。5 周龄 SPF 级小鼠 55 只,购自河南科技学院动物

医学实验室。

1.3 细菌的分离培养

将 127 份病料分别接种于含有 5%犊牛血清和 5%脱

纤维绵羊血 TSA 培养基中,37℃纯化培养 24 h,然后

挑取单个菌落制作涂片,对菌落分别进行革兰氏染色和

瑞氏染色,油镜观察细菌染色和形态特性。

1.4 生化鉴定试验

挑取纯化的分离菌落,按照细菌生化鉴定说明书分

别接种于蔗糖、葡萄糖、乳糖、果糖、硝酸盐、枸橼酸

盐、麦芽糖、V-P、M-R、硫化氢、蛋白胨水、甘露

醇、H2S 等细菌生化鉴定管中,37℃培养 24 h,观察反

应结果。

1.5 分离菌株 16S rRNA 鉴定

取纯化的分离菌株,接种于含有 5%犊牛血清的

TSB 培养基中,摇床震荡,37℃培养 24 h,按照细菌基

因组 DNA 提取试剂盒说明书提取分离菌株的基因组

DNA。参考朱飞舟等[5]合成细菌 16S rRNA 通用引物,引

物 序 列 为 : 27F: 5’ -AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3’,1492R:5’-ACGGCTACCTTGTTACGACTT-3’,由中美泰和生物技术 (北京) 有限公司合

成。预期扩增目的片段 1 450 bp。PCR 反应体系 20

滋L:分离菌株 DNA 模板 2 滋L,上下游引物各 0.5 滋L,

2×Taq PCR Master Mix 12 滋L,ddH2O 补足至 20 滋L。

PCR 反应程序:94℃ 5 min,94℃ 30 s,53℃ 30 s,

72℃ 60 s,共 35 个循环,72℃延伸 10 min。PCR 产物

经 1.5%琼脂糖凝胶电泳检测,获取的目的片段,经回收

后送中美泰和生物技术 (北京) 有限公司进行分离菌株

16S rRNA 测序,测序结果与 NCBI 数据库收录的多杀性

巴氏杆菌基因组序列进行 BLAST 同源性比对分析,以

鉴别分离菌株种类。

1.6 荚膜血清型 PCR 鉴定

参照李红婕等[6]设计的荚膜血清型特异性引物 capA、capB、capD、capE、capF 序列,分别合成引物,

由中美泰和生物技术 (北京) 有限公司合成。除所有鉴

定引物退火温度均为 55℃外,其他 PCR 反应体系和反

应程序与上述 1.5 内容相同。引物生物信息见表 1。

1.7 对小鼠的致病性试验

用无菌生理盐水稀释纯培养菌落,分光光度计测定

菌液浓度,使其终浓度为 1×108 CFU/mL。将 5 周龄

SPF 昆明小鼠分成 1 个对照组和 10 个试验组,每组 5

只。试验组腹腔注射菌液 0.2 mL/ 只,对照组注射等体

积的生理盐水。观察小鼠精神状态,记录死亡时间和数

量。采集死亡小鼠肝脏、肺脏、脾脏等组织器官,分离

培养和革兰氏染色、瑞氏染色。

表表3 1不同剂量的益生菌制剂对仔猪血清免疫指标的影响 多杀性巴氏杆菌荚膜血清型鉴定引物生物信息

血清型 名称 序列(5’-3’) 长度/bp GenBank 登录号

CAPA-FWD TGCCAAAATCGCAGTCAG

capA

CAPA-REV TTGCCATCATTGTCAGTG

1 050 AF067175

CAPB-FWD CATTTATCCAAGCTCCACC

capB

CAPB-REV GCCCGAGAGTTTCAATCC

760 AF169324.

CAPD-FWD TTACAAAAGAAAGACTAGGAGCCC

capD

CAPD-REV CATCTACCCACTCAACCATATCAG

648 AF302465

CAPE-FWD TCCGCAGAAAATTATTGACTC

capE

CAPE-REV GCTTGCTGCTTGATTTTGTC

511 AF302466

CAPF-FWD AATCGGAGAACGCAGAAATCAG

capF

CAPF-REV TTCCGCCGTCAATTACTCTG

851 AF302467

猪病防控 Swine Disease

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2023 年 第 5 期

图2 分离菌株荚膜血清 PCR分型鉴定电泳结果

图1 A院 分离菌在 TSA培养基上的菌落特性曰 B院 革兰氏染色镜检 渊10伊100冤曰

C院 瑞氏染色镜检 渊10伊100冤

2 结果与分析

2.1 细菌染色镜检与分离鉴定

本研究共有 10 株分离菌在含

有绵羊血和犊牛血清的 TSA 培养基

上形成稍微隆起、表面光滑湿润、

呈露珠状的灰白色圆形菌落 (图

1A);镜检观察到分离菌革兰染色

为阴性,菌体呈两极浓染的短杆

状、圆形或卵圆形 (图 1B)。瑞氏染色镜检可见蓝色两

极浓染、大小不一的短球杆菌 (图 1C)。

2.2 细菌生化鉴定结果

分离菌在接种于细菌生化鉴定管培养后,生化试验

结果显示上述 10 株分离菌均发酵果糖、蔗糖、麦芽糖,

硝酸盐、甘露醇、过氧化氢和蛋白胨水试验结果为阳性;

M-R、V-P 试验结果为阴性;基本符合多杀性巴氏杆菌

的生化特征。对 10 株分离菌命名分别编号为 CY01~

CY10。

2.3 分离菌的 16S rRNA 鉴定

利用 PCR 扩增分离菌 16S rRNA 基因获得 1 条长度

为 1 450 bp 的特异性条带 (图 2),符合预期目的基因

片段大小。测序结果与 NCBI 数据库的猪多杀性巴氏杆

菌参考菌株序列进行 BLAST 同源性比对,结果显示分

离菌的 16S rRNA 基因序列与猪多杀性巴氏杆菌的序列

相似性均为 100%。结合分离菌培养特性和生化试验结

果,表明这 10 株分离菌为猪多杀性巴氏杆菌,其检出

率为 7.87% (10/127)。

2.4 分离菌荚膜血清 PCR 分型鉴定

利用多杀性巴氏杆菌荚膜血清特异性基因引物进行

PCR 鉴定 (图 3),结果显示有 3 株分离菌株提取的基

因片段中,扩增的目的条带长度约为 648 bp,符合

capD,占 30.00%;1 株分离菌目的条带约为 760 bp,

符合 capB,占 10.00%;6 株分离菌长度约为 1 050 bp,

符合 capA,占 60.00%。

2.5 小鼠致病性试验结果

试验组小鼠于注射菌株后 3 h 开始精神不振,呆立

颤抖,8 h 后陆续出现死亡,36 h 内死亡 34 只。剖检可

见小鼠肝脏、肺脏等器官出血肿胀。无菌采集死亡小鼠

肝脏、肺脏病料接种于 TSA 培养基上,培养出的菌落形

态特性以及革兰氏染色和瑞氏染色镜检结果均与上述分

离菌一致。

3 讨论

猪多杀性巴氏杆菌广泛存在于养猪环境和猪体正常

M:DL 2 000 Marker DNA;1~10:分离菌株 (CY01~CY10)

PCR 产物

图 3 10 株分离菌株荚膜血清型PCR分型电泳结果

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菌群内,是一种条件致病菌,通常在猪体免疫下降或外

界环境应激作用下发病,并且与其他病原体混合协同感

染猪体,增加诊断和防治的难度。目前多杀性巴氏杆菌

的检测技术主要是分离鉴定、PCR、ELISA、限制性酶

切分析和 DNA 杂交等,其中应用较普遍、灵敏快速的

是 PCR 检测,而 PCR 检测扩增用引物大多根据多杀性

巴氏杆菌 16S rDNA 确定[7,8],16S rDNA 基因序列越来越

多地用于细菌的鉴定和分类,PCR 技术是在 DNA 聚合

酶和核苷酸底物作用下,以母链 DNA 为模板,经过预

变性、变性、退火、延伸等反应程序,体外扩增复制出

与母链模板 DNA 互补的子链 DNA[9]。

多杀性巴氏杆菌荚膜决定其致病力,不同荚膜血清

型致病力存在差异,且它们之间交叉免疫保护力较弱,

因此,荚膜血清分型鉴定对提高诊治效率和有效性具有

重要意义。彭忠等[10]报道,当前在我国猪群中流行的多

杀性巴氏杆菌主要为 A 型和 D 型菌株。张哲玮等[11]对来

自广西、湖北、内蒙古 3 个地区规模化猪场中有呼吸道

症状猪的口鼻拭子及组织病料进行病原菌分离鉴定。结

果显示,分离得到 6 株猪多杀性巴氏杆菌,其中血清 A

型 1 株、血清 D 型 5 株。林星宇等[12]从四川、重庆、云

南等地 8 个规模化养殖场的 125 份病死猪肺炎样品中,

分离出 11 株多杀性巴氏杆菌,其中有 7 株为 A 血清型

(63.6%)、3 株为 D 血清型 (27.3%)。本研究结果显示,

从河南长垣市猪群采集的 127 份病料中,分离鉴定出 10

株多杀性巴氏杆菌,检出率为 7.87%,优势荚膜血清流

行株为 A 型 (60.00%) 和 D 型 (30.00%),与上述学者

报道结果相一致,且符合我国动物源多杀性巴氏杆菌血

清型多为荚膜 A 型的流行情况[13-15]。本次动物致病力试

验小鼠死亡率较高,为 68.00% (34/50),表明多杀性巴

氏杆菌致病性较强。本研究虽然采样数量偏少,但也可

以说明多杀性巴氏杆菌病在该地有一定的流行性,应引

起重视。

4 小结

本研究对河南省长垣市部分猪场多杀性巴氏杆菌进

行分离培养、生化鉴定、PCR 分子鉴定和荚膜血清分

型,结果发现,从 127 份鼻拭子样品中检测出 10 株多

杀性巴氏杆菌,检出率为 7.87%,血清 A 和 D 型为当地

主要优势血清型,动物试验证明分离菌株致病菌毒力较

强。应加强监测,开展综合防治。

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(8):1012-1017.

猪病防控 Swine Disease

Prevention and Control

114

第121页

China Swine Industry

2023 年 第 5 期

DOI:10.16174/j.issn.1673-4645.2023.05.025

猪圆环病毒 (Porcine circovirus, PCV) 属圆环病毒

科、圆环病毒属,病毒基因组为单股负链环状 DNA,病

毒呈二十面体对称,无囊膜结构,是迄今为止发现的一

种最小的动物病毒[1-3]。猪圆环病毒 2 型 (PCV2) 是 4

个 PCV 基因型中的一个[4],也是引起猪圆环病毒病和猪

圆环病毒相关疾病 (PCVAD) 的主要致病原,通常造成

猪皮炎肾病综合征 (PDNS)、断奶仔猪多系统衰竭综合

征 (PMWS)、猪呼吸道综合征 (PRDC)、猪繁殖障碍、

猪增生性坏死性肺炎 (PNP) 和新生仔猪先天性震颤

(PCT) 等多系统功能性障碍疾病[5]。病猪表现为渐进性消

瘦、呼吸困难、淋巴结肿大、贫血等多种症状。目前已有

研究报道 PCV 单独感染动物不会导致明显的 PCVAD[6],

但是,PCV2 主要破坏猪免疫系统,导致感染猪产生免疫

抑制,容易继发感染猪细小病毒病、猪伪狂犬病、猪繁

殖与呼吸障碍病、猪瘟等病毒性疾病和链球菌、大肠杆

菌、副猪嗜血杆菌等细菌性疾病[7-9],使猪病诊断和防治

复杂化,严重危害养猪业健康发展。1997 年,PCV2 首

先在加拿大被分离鉴定出来,2001 年,郎洪武等[10]首次

从我国猪体内分离到 PCV2,目前该病广泛分布于我国

各地养猪场,成为重点关注和防控的临床常见疫病。

为了解济源市规模化养猪场 PCV2 流行情况,本研

究选取 5 家规模化未免疫 PCV2 的养猪场中不同生长阶

段的猪 1 332 头,采用 ELISA 法检测血清 PCV2 抗体,

旨在为 PCV2 防治提供基础性参考资料。

1 试验材料与方法

1.1 样品来源

2021 年 2—8 月,从河南省济源市 5 家未接种免疫

PCV2 的规模化养猪场,按 5%比例选取健康仔猪、育肥

猪、母猪、种公猪,进行前腔静脉或耳静脉采血 5 mL,

室温静置 2 h,3 500 rpm 离心 3 min,取上清血清,

收稿日期:2022-12-06

作者简介:栗卫东 (1982-),男,本科,兽医师,主要从事动物疫病防治技术的研究推广工作

* 通信作者:许军,兽医师,主要从事动物疫病防治和卫生监督执法工作

河南省济源市规模化猪场

猪圆环病毒 2 型流行病学调查

栗卫东 1 许 军 2*

1济源市农业综合行政执法支队袁 河南济源 459000曰

2平顶山市农业综合行政执法支队袁 河南平顶山 467000冤冤

摘 要院 为了解 2021 年河南省济源市规模化猪场 PCV2 血清流行病学情况袁 本研究选取 5 家规模化养猪场中的外观健康尧

未免疫 PCV2 疫苗的不同生长阶段生猪袁 共采集血清 1 332 份袁 利用 ELISA 法进行血清抗体检测遥 结果显示袁 共检测出阳

性血清样本 444 份袁 平均阳性率为 33.33%袁 猪场阳性率为 100%遥 种公猪尧 母猪尧 仔猪尧 育肥猪平均阳性率分别为

21.57%尧 36.78%尧 18.01%尧 42.62%遥 结果表明袁 济源市规模化猪场普遍存在PCV2感染情况遥 本研究为济源市 PCV2防

控提供参考袁 提示应引起重视袁 加强PCV2 病综合防治遥

关键词院 生猪曰 猪场曰 PCV2曰 血清学曰 调查

中图分类号院 S828曰S852 文献标识码院 A 文章编号院 1673-4645(2023)05-0115-03

开放科学渊资源服务冤标识码渊OSID冤袁扫一扫袁了解文章更多内容

猪病防控 Swine Disease

Prevention and Control

115

第122页

China Swine Industry

2023 年 第 5 期

表 1 5家规模化猪场 PCV2血清抗体检测结果

猪场 送检数/份 阳性数/份 阳性率/%

1 号 216 90 41.67

2 号 214 82 38.32

3 号 237 68 28.69

4 号 223 63 28.25

5 号 442 141 31.90

合计 1 332 444 33.33

-20℃下保存备用。试验共采集血清样本 1 332 份,按

猪场来源、猪群不同生长阶段进行编号。

1.2 试剂和仪器

猪 PCV2 酶联免疫吸附抗体检测 (ELISA) 试剂盒

为武汉科前动物生物制品有限责任公司生产,Varioskan

LUX 多功能酶标仪为赛默飞世尔科技 (中国) 有限公司

生产。实验室备有离心机、微量振荡器、37℃恒温箱、

自动洗板机等。

1.3 试验方法

PCV2 血清抗体 ELISA 检测方法按照试剂盒说明书

操作。取预包被抗原的微孔酶标板,室温平衡 20 min

后,设置样本孔和标准孔,将 10 滋L 待检血清和 40 滋L

样本稀释液加入样本孔,标准孔加入 50 滋L 不同浓度的

标准品,设空白孔,加稀释液 100 滋L。将辣根过氧化酶

(HRP) 标记过的检测抗体分别加入样本孔和标准品孔,

100 滋L/ 孔,用封板膜密封板孔。37℃恒温箱温育 1 h,

弃封板膜,吸水纸拍干液体,再加入用去离子水 20 倍

稀释的 20×洗涤缓冲液,静置 3 min,用吸水纸拍干液

体,反复 5 次,每孔加入底物 A、B 液各 50 mL,混匀,

37℃避光孵育显色 15 min。每孔内加 50 滋L 终止液终

止反应。以空白对照孔调零,在酶标仪上 10 min 内以

630 nm 波长测定各孔的吸光度 OD630 nm 值。结果判定:

试验成立条件为阴性对照孔平均 OD630 nm 值<0.25,阳

性对照孔平均 OD630 nm 值≥1.0。待检血 清孔 OD630 nm

值>0.42 时,结果判定为阳性,待检血清孔 OD630 nm

值<0.38 时,结果判定为阴性,待检血清孔 OD630 nm 值

为 0.38~0.42,结果判为可疑,需再检测。

2 结果与分析

2.1 5 家规模化猪场 PCV2 血清抗体检测结果

由表 1 可知,1 332 份血清中有 444 份抗体阳性血

清,平均 阳性率为 33.33%,阳 性率 介 于 28.25%~

41.67%。在 5 家规模化猪场均检测到阳性血清,表明猪

场阳性率为 100%。

2.2 5 家规模化猪场不同生长阶段猪 PCV2 血清

抗体检测结果

由表 2 可知,按照不同生产阶段 PCV2 抗体检测结

果统计分析,种公猪、母猪、仔猪、育肥猪平均阳性率

分别为 21.57%、36.78%、18.01%、42.62%,种公猪阳

性率以 1 号猪场最高,为 28.57%;母猪阳性率以 2 号

猪场最高,为 44.44%;仔猪阳性率以 2 号猪场最高,为

26.53%;育肥猪阳性率以 1 号猪场最高,为 50.00%。

每个猪场的不同生长阶段猪群都有血清阳性样品。

3 讨论

本次调查选择 5 家未免疫 PCV2 的规模化猪场中外

观健康的猪群,对 1 332 份血样采用 ELISA 方法进行

PCV2 抗体检测,共检出阳性血清样本 444 份,总平均

阳性率为 33.33%,猪场阳性率为 100%。虽然抽样个体

数较少,但是具有一定代表性,表明河南济源市规模化

猪场广泛存在 PCV2,有的猪场相当严重,比如 1 号猪

场阳性率达到 41.67%,高于平均值 8.34 个百分点,应

引起畜牧兽医部门和养殖场注意。胡慧等[11]对来自河南

12 个地区的 226 份猪血清样品 PCV2 抗体检测,结果显

示总抗体的阳性率为 53.10%。刘琨等[12]报道,河南信阳

地区猪 PCV2 总体阳性率为 48.9%。尽管本次研究的总

体阳性率低于上述地区检测结果,但是 PCV2 感染猪群

是潜在的带毒者,病毒可以通过分泌物、鼻液和粪尿等

排出,是威胁其他猪群健康的主要传染源,一旦这些携

带病毒的猪群受到外界应激,机体免疫机能会下降,很

容易转化为明显症状的发病猪,且继发其他致病性微生

物感染。

从生猪不同生长阶段的 PCV2 抗体检测结果看,种

公猪、母猪、仔猪、育肥猪均存在 PCV2 感染情况,仔

猪阳性率最低,为 18.01%,这与仔猪受母源抗体的保

护有关。种公猪阳性率为 21.57%,表明由于种公猪价

值较高,在猪场生产中的具有重要作用,5 家猪场比较

猪病防控 Swine Disease

Prevention and Control

116

第123页

China Swine Industry

2023 年 第 5 期

重视种公猪的饲养管理和疫苗接种。母猪、育肥猪平均

阳性率分别为 36.78%、42.62%,均高于平均阳性率,

可能与母猪饲养周期长增加 PCV2 感染机会和育肥猪后

期临近出栏饲养管理不严格等因素有关,需要进一步具

体检测。连慧香等[13]报道,在河南部分地区的非疫苗免

疫猪群中,种用公、母猪的 PCV2 抗体阳性率最低,育

肥猪和断奶仔猪抗体阳性率较高。施德兰[14]等对 15 家规

模化猪场 PCV2 抗体检测,发现哺乳仔猪总阳性率为

7.20%,商品猪总阳性率为 11.00%,育成猪总阳性率为

40.00%,种公猪总阳性率为 38.57%,种母猪总阳性率

为 40.76%。上述学者报道与本研究在不同阶段猪群

PCV2 结果有所差异,这与受检猪场饲养管理、抽样设

计等不同有关,但是在不同生长阶段的猪群均有 PCV2

感染方面的研究结果一致。

根据本次研究检测结果,建议济源市规模化猪场应

强化商品化 PCV2 疫苗接种,定期开展检测,加强饲养

管理,降低或避免应激因素,提高猪群营养水平,严格

消毒防疫,提高猪体免疫力,重点采取药物预防方案控

制如副猪嗜血杆菌等病原菌的继发感染[15],最大限度地

降低猪群的死亡率,减少经济损失。

4 小结

本研究对 2021 年济源市 5 家未接种免疫 PCV2 的

规模化养猪场采用 ELISA 进行 PCV2 抗体检测,结果发

现猪场感染 PCV2 比较严重,猪场阳性率为 100%,不

同生长阶段猪群均有 PCV2 感染。研究为开展 PCV2 疾

病的诊断与防控奠定了基础。

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表3表不同剂量的益生菌制剂对仔猪血清免疫指标的影响 2 不同生长阶段猪PCV2 血清抗体检测结果

种公猪 母猪 仔猪 育肥猪

猪场 送检数

/份

阳性数

/份

阳性率

/%

送检数

/份

阳性数

/份

阳性率

/%

送检数

/份

阳性数

/份

阳性率

/%

送检数

/份

阳性数

/份

阳性率

/%

1 号 7 2 28.57 56 17 30.36 21 5 23.81 132 66 50.00

2 号 8 1 12.50 72 32 44.44 49 13 26.53 85 36 42.36

3 号 12 3 25.00 84 23 27.38 67 14 20.90 74 28 37.84

4 号 9 2 22.22 48 17 35.42 88 15 17.05 78 29 37.18

5 号 15 3 20.00 107 46 42.99 147 20 13.61 173 72 41.62

合计 51 11 21.57 367 135 36.78 372 67 18.01 542 231 42.62

猪病防控 Swine Disease

Prevention and Control

117

第124页

China Swine Industry

2023 年 第 5 期

DOI:10.16174/j.issn.1673-4645.2023.05.026

收稿日期:2023-06-29

基金项目:铜仁市科技计划项目 (铜市科研[2022]6 号);贵州省生猪产业技术体系建设专项 (GZSZCYJSTX-06);铜仁职业技术学院畜牧

兽医专业群技术技能平台项目 ([2022]02 号);贵州省科技计划项目 (黔科合支撑[2020]1Y038 号)

作者简介:毛同辉 (1979-),湖南武冈人,高级畜牧师,主要从事畜牧技术推广工作

* 通信作者:罗杰,博士,副教授,主要从事农业废弃物资源化利用、中兽医与中兽药的研究与推广工作

畜禽粪污资源化利用国内外研究进展

毛同辉 1,3 罗 杰 2,3,5* 吴光松 4 罗晓玲 2,3

1铜仁市畜牧技术推广站袁 贵州铜仁 554300曰

2铜仁职业技术学院袁 贵州铜仁 554300曰

3农业废弃物资源化利用工程技

术研究中心袁 贵州铜仁 554300曰

4开阳县畜禽品种改良站袁 贵州贵阳 550300曰

5国家民委中兽药重点开放实验室袁 贵州

铜仁 554300冤

摘 要院 推进畜禽粪污资源化利用是我国发展低碳农业的必由之路袁 也是解决养殖污染问题的必要措施袁 其在实现农业农村

碳达峰尧 碳中和中发挥着重要的作用遥 畜禽粪污资源化利用领域的新研究尧 新技术尧 新成果发展迅速袁 且具有不同的优缺

点遥 本文简述了畜禽粪污的成分及危害袁 重点对目前正在应用或研究的国内外畜禽粪污资源化利用技术进行了综述袁 包括好

氧堆肥发酵技术尧 异位发酵床技术尧 厌氧发酵沼气技术尧 水热碳化技术尧 热解技术尧 氧化塘技术尧 生态处理技术尧 厌氧氨氧

化技术尧 饲料化利用技术袁 旨在为提升畜禽粪污资源化处理的关键技术尧 提高畜禽粪污资源化处理效果等提供参考遥

关键词院 畜禽粪污曰 资源化利用曰 研究进展

中图分类号院 S828曰X713 文献标识码院 A 文章编号院 1673-4645(2023)05-0118-04

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1 畜禽粪污成分及危害

畜禽粪污是指畜禽养殖业中产生的畜禽粪便和养殖

废水,这些粪污既含有营养成分,也含有残留药物、病

原微生物等有害成分。畜禽粪污是养殖场的污染源,一

方面,因其含有较多的病原体[1],处理不及时可能造成

疫病传播;另一方面,未经处理的粪便直接排入环境

中,会造成环境严重污染,影响土质、危害农作物生长,

导致水体富营养化;而且在露天环境下还会释放有害气

体,易造成大气污染并影响环境安全。畜禽粪污污染会

严重影响畜禽养殖产业发展,因此,畜禽养殖场粪污处

理的资源化利用很有必要。

2 畜禽粪污资源化利用技术

2.1 好氧堆肥发酵技术

好氧堆肥法利用需氧微生物的氧化效应,将畜禽粪

污中的有机物分解、矿化,并经过腐化转变为腐殖质的

生物化学反应过程。好氧堆肥过程中存在局部高温环

境,能够杀灭活性种子及病原微生物,将粪污转化为有

机肥。常见的好氧堆肥模式有静态垛式、条垛式、反应

器式和槽式,其中,反应器式处理周期短、堆肥占地面

积小、产能高,是较好的堆肥模式之一。经堆肥后得到

的有机肥产品能够作为肥料,改善土质、促进植物生长、

促进产能提升,实现种养循环[2]。

环境保护 Environmental Conservation

118

第125页

China Swine Industry

2023 年 第 5 期

传统的好氧堆肥处理技术目前仍存在许多不足,如

有害气体排放量大、重金属残留、腐殖化程度较低、抗

生素和兽药残留、养分损失过大等[3]。针对这些问题,

学者们进行了很多相关参数优化研究。周海宾等[4]研究

了筒仓式反应器,可提升堆肥中氮养分含量。李开发[5]

研究发现堆肥过程中添加微生物菌剂,能够加快堆肥各个

阶段的反应进程,同时改变不同时期菌落的组成结构和数

量,进而影响整个堆肥过程。为解决传统的好氧堆肥处理

技术中氮素损失及二次污染,功能膜法好氧堆肥技术近年

来受到关注。孙晓曦等[6]研究发现功能膜法好氧堆肥技术

作为一种改良型的强制通风、静态垛式好氧堆肥模式,解

决了传统条垛式、槽式发酵空间不均匀、产排大量臭气等

问题,相较传统技术,具有能耗低、有害气体逸散少、发

酵程度高和周期短、效率高等优点,成为越来越重要的发

展方向。同时,近年还研究出超高温好氧堆肥、分子膜堆

肥、智能分子膜覆盖堆肥技术等新型工艺[7]。

2.2 异位发酵床技术

异位发酵床技术相较于传统接触式发酵床养殖技

术,在技术上可实现粪污“零排放”。其原理是通过人工

构建的高效发酵系统,利用活性微生物复合菌群,长期、

持续、稳定地将集中收集的畜禽粪尿在发酵床中完全降

解为有机肥和能量,从而达到粪污无害化处理的目的[8]。

该方法将畜禽养殖和粪污处理有效分开,在实现养殖粪

污持续消纳的同时,可高效转化氮、磷等营养元素为可

利用的有机肥,实现粪污的资源化利用[9,10]。

李念等[11]以蜂窝体的概念为基本模型,以木屑、稻

壳和秸秆残渣为基质,添加复合微生物菌剂制成微生物

反应堆。将适量的粪水喷洒到微生物反应堆中,粪水中

所包含的氮和碳大分子有机物都会被微生物菌群循环分

解,慢慢转化成一些易被植物吸收的物质,如氨态氮、

腐殖酸、硝酸盐氮等,并且在发酵过程中还会释放大量

热能。整个反应堆存在大量微生物,将粪水固形物连续

分解消纳吸收,同时产生热量,在高温下实现液体蒸发,

适时补充垫料和微生物菌剂,从而实现畜禽养殖粪水循

环清理。

2.3 厌氧发酵沼气技术

厌氧发酵沼气技术是畜禽粪污资源化利用的主要途

径。它是将多种有机物质 (如粪污、植物残渣等) 经厌

氧消化,获得沼气、沼液和沼渣的技术[12]。目前,国内

厌氧发酵技术的推广和应用符合我国国情,发展迅速。

该技术能实现农作物废物与畜禽粪污的高效、绿色、安

全综合利用,成为当前的重点研究与应用技术热点之

一。而且,农业和养殖业废弃物等通过发酵形成的副产

品,含有大量的营养物质及活性物质,成为了可直接还

田的有机肥[13]。

2.4 水热碳化技术

水热碳化是将适当比例的粪污和水置于密闭的反应

器中,在一定的温度和压力下生成富碳固体产物的过

程[14]。畜禽粪污经水热碳化后,原料中的无机成分主要

存在于液相中,具有较高的应用潜力,可应用在土壤改

良、生物能源、功能型材料辅料,吸附除杂等方面;但

水热碳化技术也存在重金属含量高的缺点,会影响应用

前景,要解决这一难题,需要利用微波炉快速加热,使

重金属快速反应分解,达到降低重金属含量,提高畜禽

粪污资源化利用的目的[15]。

2.5 热解技术

生物质热解是指在缺氧或者低氧状态下,通过高温

将生物质分解为焦炭、生物油、可冷凝液体和气体产物

的反应过程,具有周期短、效率高、抗病原能力强等特

点。王立华等[16]以畜禽粪污为原料,对热解工艺进行了

优化研究,提升了热解技术的应用程度。但该技术由于

能耗较高,对推广应用造成了一定的限制。

2.6 氧化塘技术

氧化塘技术是利用水中的微生物、藻类对畜禽污水

进行生物处理,以实现污水净化。此方法具有使用成本

低、投资价格少及副产物种类少等优点,具有良好的经

济效益。畜禽污水经过此方法处理后,可用于水肥一体

化施用,可实现粪污全量还田,还可利用处理后的废水

养鱼、养鸭等,具有广阔的应用前景。近年来,随着科

学技术的迅速发展,通过氧化塘技术改进,调整氮磷添

加量、光照时长和强度、氧化池结构、曝气设备、搅拌

方式、增加水体微生物活性等方法,氧化塘处理粪污技

术也得到了较大的发展,粪污处理效率也得到了较大提

升,在实践中的应用得到较大发展,养殖主体的接受程

度也越来越高。近年来,针对不同的粪污,已有 4 种氧化

塘类型,分别为好氧塘、厌氧塘、兼性塘、曝气池[17];根

据不同技术处理,氧化塘可分为高效藻类塘、超深厌氧

Environmental Conservation 环境保护

119

第126页

China Swine Industry

2023 年 第 5 期

塘、移动式曝气塘、水生植物塘等[18],其中属高效藻类

塘发展优势最大,高效藻类塘是利用好氧细菌将池塘中

的有机物进行降解,产生二氧化碳,进而促进池塘中藻

类进行光合作用吸收养分,实现能量转化的过程。反应

过程中,配合紫外线照射,菌藻介导的 pH 值环境与氧

气浓度可高效杀灭病原体,产生藻类生物,提升净水效

果[19]。其具有占地面积少、净水效果好、运行费用低等

优势,同时还能对藻类进行二次利用,深受广大养殖主

体青睐。但氧化塘技术也存在一些问题,如塘内微藻、

微生物、植物等受环境影响较大,易造成水分丢失、微

生物流失等问题。

2.7 生态处理技术

昆虫可高效转化畜禽粪便,同时消减温室气体排

放,并产生优质的虫体蛋白、脂肪和虫沙,实现养分流

动循环和畜禽粪便资源化利用。以黑水虻为代表的昆虫

生物转化畜禽粪便具有低耗能、低排放,保护社会生态

环境、提高经济效益的优势,是治理畜禽粪便污染最有

潜力的策略之一。黑水虻营腐生生活,幼虫阶段可利用

粪污中的有机物,实现对畜禽粪污快速无害化处理,转

化为蛋白、脂肪等营养物质,黑水虻的幼虫可作为动物

饲料原料,有效提升了粪污的资源化利用效率[20]。已有

较多的研究显示了其价值,王小波等[21]发现黑水虻在将

猪粪转化为虫粪的过程中,畜禽粪污中重金属含量显著

降低。Beskin 等[22]研究发现,黑水虻减少畜禽粪污中挥

发性废弃物产量达 87%以上。由于黑水虻的繁殖对光照

和 温 度 要 求 较 高,目 前 对 其 生 长 繁 殖 技 术 掌 握 不

全[23],此外,黑水虻蛹中含较多不饱和脂肪酸、几丁质,

降低了其营养价值,因此,对黑水虻的养殖和利用技术

有待完善[24]。

2.8 厌氧氨氧化技术

厌氧氨氧化技术是在厌氧条件下,以氨为电子供

体,以硝酸盐或亚硝酸盐为电子受体,将氨氧化为氮气

的一个化学反应过程,具有高效低耗的特点,比硝化

(氨氧化为硝酸盐) 处理粪污节省 60%以上的供氧量,

还可节省生物脱氮工艺中所需的碳源,对环境体系中碳

氮循环尤为重要[25]。影响厌氧氨氧化工艺处理效果的因

素有很多,例如污水的 pH 值、厌氧反应容器体积、氧

含量、温度、基质浓度等。对处理养殖粪水而言,粪水

中的氮浓度、氧含 量对厌氧氨 氧菌活性 影响最 大。

Pekyavas 等[26]运用厌氧氨氧化技术对鸡场污水进行处理

时发现,碳氮比对微生物组成影响较大。Miao 等[27]发现

污水碳氮比从 1.1 调高到 1.5 时,厌氧氨氧化细菌脱氮

能力增强,而碳氮比高于 2.5 时,会抑制厌氧氨氧化细

菌,促进反硝化细菌的生长。Meng 等[28]发现水温在

15℃以上,脱氮效果较好。Deng 等[29]用厌氧氨氧化菌

与新型复合式厌氧—好氧折流板反应器 (HAOBR) 处理

猪场废水,发现可以有效去除其中的氨氮、总氮,实现

对污水的净化。

2.9 饲料化利用技术

饲料化利用技术是指将畜禽粪便和饲料按照一定比

例混匀后,使用青贮发酵的一种技术,该技术将粪便中

的病原微生物杀死,能够改善饲料的适口性和提高饲料

的粗蛋白水平。此技术在禽类粪便处理中被广泛使用,

尤其是在鸡粪处理中尤为常见,将鸡粪经过处理后,制

作成颗粒饲料,能够显著降低饲料成本。佟艳妍[30]研究

表明,以鸡粪、豆秸、酒糟、花生秧等为原料,发酵处

理后可作为精饲料饲喂肉牛。祁成年等[31]用发酵鸡粪饲

料代替部分精料饲喂肉羊,发现可提高料肉比。

3 结论

目前,畜禽粪污资源化利用技术相关研究逐渐增多,

但多数处于研究阶段,未投入应用。持续推进畜禽粪污

治理,是我国畜牧业健康发展的必然要求,也是保障农

产品供给的必然选择,是我国由农业大国迈向农业强国

的必由之路。新时代引领新方向,需要优化好氧堆肥发

酵技术、沼气工程等主流技术,关注氧化塘、生态处理

技术、水热碳化技术等应用前景较好的技术,因地制宜

选择畜禽粪污治理路径,科学推进畜禽粪污资源化利

用,使有限的资源得到充分的利用。

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China Swine Industry

2023 年 第 5 期

DOI:10.16174/j.issn.1673-4645.2023.05.027

收稿日期:2023-05-31

作者简介:肖斌 (1974-),男,本科,兽医师,主要从事畜牧兽医技术研究与推广工作

白三叶牧草资源研究

以及猪粪尿施肥试验报告

肖 斌

渊湖南省城步县儒林镇农业综合服务站袁 湖南邵阳 422500冤

摘 要院 基于对白三叶牧草资源的研究袁 笔者参加了湖南省邵阳市城步县南山牧场白三叶草地猪粪尿施肥试验袁 进行了牧草

施肥尧 牧草增产尧 载畜量以及动物粪污资源化利用的研究遥 试验结果表明袁 白三叶草地施肥放牧区载畜量可达 14.15 头/

hm2黄牛单位或 4.72 头/hm2奶牛单位袁 白三叶草施肥禁牧区产鲜草 88 069 kg/hm2袁 较不施肥禁牧区增产鲜草 56.1%遥

白三叶草施肥禁牧区圈养载畜量为 16.99 头/hm2 黄牛或 5.66 头/hm2 奶牛单位袁 白三叶草地猪粪尿消纳量为 26.1 t/

hm2遥 本研究为猪粪污资源化利用和白三叶牧草开发利用提供了科学依据遥

关键词院 白三叶草地曰 猪粪尿肥料曰 消纳量曰 载畜量曰 施肥试验

中图分类号院 S828曰S814 文献标识码院 A 文章编号院 1673-4645(2023)05-0122-03

开放科学渊资源服务冤标识码渊OSID冤袁扫一扫袁了解文章更多内容

1 白三叶牧草资源研究

白三叶草又称白车轴草,豆科酢浆草属的多年生草

本植物。白三叶草可单播也可与禾本科牧草混播。白三

叶草适宜与禾本科牧草混播并作为放牧型草地,混播协

调性最好的有多年生黑麦草、扁穗牛鞭草、鸭茅、羊茅、

猫尾草、无芒雀麦、鸡脚草等。一般白三叶草与禾本科

草以 1∶2 的比例播种产量最好,在大型牧场还可以采

用飞播的方式,使种子撒播均匀,节省劳动力。

白三叶草在温带地区被广泛栽培,以新西兰、西欧、

北欧和北美东部等海洋性气候区栽培最多,我国长江中

下游平原和云南、贵州、四川等低山丘陵区广泛栽培。

贵州省草业科学研究所试验基地对引自美国赛贝科公司

的 5 种三叶草品种于 2000—2001 年进行了牧草品种比

较试验,分别是草莓三叶草、红三叶草 (RENEGADE)、

白三叶草 (CIS CSTR303)、绛红三叶草 (AUROBIN)、

箭斑一年生红三叶草 (ARROWLEAF CLOVER)。结果

表明,红三叶草、绛红三叶草这 2 个品种比其他试验品

种好,病虫害少、产量高,适宜在贵州黔西南地区推广

种植[1],表明红三叶草、绛红三叶草品种也适宜在中国

南方种植。

白三叶草对环境的要求为温暖湿润气候条件,生长

最适宜温度为 15~25℃。抗寒能力强,能够忍受冬季

-20~-15℃的低温,耐热性强,能够忍受 30~35℃的高

温。牧草生长的适宜年降水量为 500~800 mm,生长期间

需要持续和稳定的灌溉条件,抗旱能力很差,耐涝性强。

白三叶草对土地和肥料有一定的要求。要选择排水

良好、土层深厚、富含有机质的中壤质或粘壤质土来种

植。地形要平坦开阔,能排能灌。白三叶草播前要求精

环境保护 Environmental Conservation

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China Swine Industry

2023 年 第 5 期

细整地,秋翻深度要达到 25 cm 以上,翻后要及时耙地

和压地,做到内松外实。白三叶草为固氮植物,根瘤形

成前需供给充足的养料,基肥以优质厩肥为主,施用量

为 30~45 t/hm2,白三叶草需磷钾肥也较多。另外,白

三叶草对土壤要求不严,耐阴、耐贫瘠、耐酸、不耐碱。

白三叶草是优良的牧草资源品种之一。白三叶草耐

寒、耐热性能比红三叶草强,种子落在土壤中自行出

苗,可多年不衰,再生能力强[2],三叶草属植物根系发

达、茎叶茂密、花色鲜艳、适应性较强,因其具有耐践

踏、扩展快及形成群落后与杂草竞争能力较强等特点[3],

是半干旱地区重要的草坪类牧草,为放牧场上的主栽草

种。其 3 月上旬开始返青,生育期为 220~230 d,绿色

期为 210~230 d。白三叶草每年可刈割 4~5 次,鲜草

产量 4 000~5 000 kg/ 亩,白三叶草适口性好,各种畜

禽均喜食,白三叶草的现蕾期和盛花期的干物质为

11.5%~14.5%,粗蛋白含量分别为 3.2%和 3.1%。影响

白三叶草营养成分的因素主要是品种、收割时期、收割

部位———茎和叶、海拔高度等[4]。

白三叶草是豆科植物,其根部的根瘤能够进行生物

固氮,增加土壤肥力,茎叶自身可以产生蛋白质,因此,

白三叶草营养丰富。据测定,每 100 kg 白三叶草鲜草可

晒成 15 kg 干草,干草营养成分中含水量为 10%,粗蛋

白为 24%、粗脂肪为 3.4%、粗纤维为 12%、无氮浸出

物为 39%、粗灰分为 10%、钙为 1.3%、磷为 0.3%。用

白三叶草饲养土鸡、鹅可以取代 50%的精饲料,降低了

畜禽养殖饲料成本。饲喂猪以鲜喂效果最佳,适口性更

好,可以取代部分精饲料。喂羊时,刈割后需稍晾晒再

饲喂,再搭配饲喂禾本科的牧草,可以满足羊的营养需

求。因此,大力发展豆科牧草,是获得成本较低的蛋白

质饲料的重要手段,也是增进土壤肥力、改善农业生产

环境的重要途径[5,6]。

湖南省城步县南山牧场,平均海拔 1 760 m,地理

位置好,拥有平地及溪水,是华南最大的现代化山地牧

场和奶粉加工厂。饲养的奶牛品种是荷兰黑白花奶牛,

饲草主要品种是白三叶草,牧场管理采取围栏分片轮牧

方式。成年母牛体重为 590 kg 左右,奶牛吃草量为自

身的 4%,牧草饲料占日粮的 40%~60%。

湖南省南山牧场通过进行人工草场施肥研究,包括

播种施肥和放牧草场追肥 2 项试验,试验结果提出了南

山人工草场施肥种肥与追肥的最适肥料品种和最佳用

量,播种时用磷肥作种肥,施入纯磷以 60 kg/hm2 为最

佳用量。新建人工草场投产后,在放牧条件下要及时追

施肥料,3 年内每年施 1 次氮、磷、钾肥,用量以纯氮

40 kg/hm2、纯磷 60 kg/hm2、纯钾 40 kg/hm2 为最佳[7]。

城步县近 2 年来实施国家畜禽粪污资源化利用整县

推进项目,总投资 720 万元,其中财政奖补资金 298 万

元,养殖场自筹 422 万元。建设雨污分离管道 7 259 m,

沉淀池 5 108 m2,沼气池 2 016 m3,干粪棚 3 352 m2,

粪污车 9 台,粪污泵 35 台,高压冲洗机 37 台。为了更

好地使猪粪尿资源化利用,城步县畜牧水产事务中心开

展猪粪污施肥白三叶牧草地试验课题,试验如下。

2 白三叶草地猪粪尿施肥试验

2.1 试验目的

通过对种植白三叶草猪粪尿施肥试验,研究牧草地

粪尿肥料承受值、施肥量与牧草产量相关指数、牧草增

产量和圈养载畜量以及自然放牧区载畜量。

2.2 试验方法

2.2.1 试验材料

试验土地、白三叶草种、猪粪沼液肥料、牛羊若干。

2.2.2 试验地选择

选择城步县南山牧场 1 块以白三叶草为主要品种的

牧草地,面积为 9.22 hm2。将 9.22 hm2 分为:A01 (地

块代号,下同):8.02 hm2 (自然放牧区),A02:0.8

hm2 (施肥禁牧区),A03:0.4 hm2 (不施肥禁牧区)。

2.2.3 试验地管理和施肥方法

将干猪粪沤肥 (沤肥池发酵 20 d) 后施肥,种植前

的底肥要施足 5 250 kg/hm2 干粪量。逐年增加自然放牧

区牛羊养殖量和施肥量,观察饲草能否满足牛羊生长营

养需要和猪粪尿消纳量,并计算自然放牧区载畜量。

2.2.4 试验时间

2018 年 3 月—2019 年 12 月。

3 试验结果

白三叶草自然放牧区第 1 年 (2018 年) 施肥量:

Environmental Conservation 环境保护

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China Swine Industry

2023 年 第 5 期

渊下转第129页冤

51 879+125 369=177 248 kg,第 2 年 (2019 年) 施

肥量:70 555+17 1376=241 931 kg,较第 1 年增加施

肥量 64 683 kg,同比增加 36.5%。第 1 年黄牛的养殖

量为 93 头,羊的养殖量为 112 头。第 2 年黄牛的养殖

量为 114 头,羊的养殖量为 186 头。观察到牛羊生长正

常,饲草能满足牛羊生长需要。2018 年和 2019 年的施

肥量、载畜量、收割干草量试验数据见表 1。

试验结果计算:

①猪粪尿消纳量。2018 年白三叶草放牧区施肥

177 248 kg÷8.02=22 101 kg/hm2=22.1 t/hm2。2019

年白 三 叶草 放 牧 区施 肥 241 931 kg÷8.02=30 166

kg/hm2=30.2 t/hm2。2 年平均白三叶草放牧区施肥 26.1

t/hm2。

②白三叶草干草产量。施肥禁牧区,A02 试验地 2

年共 收 割干 草 10 216 kg,平 均 产白 三 叶草 12 770

kg/hm2,干草率 14.5%,收割鲜草 88.069 t/hm2。不施

肥禁牧区,A03 试验地 2 年收割干草 3.273 t,平均收获

干草 8.183 t/hm2,收割鲜草 56.434 t/hm2。施肥地牧草

产量增产 56.1%。

③施肥放牧区载畜量。从 15 头羊载畜量折成 1 个

黄牛单位载畜量计算,2018 年载畜量为 12.53 个黄牛单

位 /hm2。2019 年为 15.76 个黄牛单位 /hm2。1 头奶牛载

畜量为 3 个黄牛单位载畜量,则 15.76÷3=5.25 头奶牛

单位 /hm2。2 年平均为 14.15 个黄牛单位 /hm2、4.72 头

奶牛单位 /hm2。

④圈养载畜量。圈养黄牛每天饲喂 18 kg 鲜草,以

白三叶草生长期平均 288 d 计算,则 1 头湘西黄牛采食

鲜草 5 184 kg,施肥后圈养,每 1 hm2 鲜草供 16.99 个

黄牛单位。1 头奶牛载畜量为 3 个黄牛单位载畜量,则

圈养载畜量为 16.99÷3=5.66 (头奶牛单位 /hm2)。

4 讨论

4.1 本试验与其他试验比较

本试验白三叶草自然放牧区施肥后载畜量为 14.15

个黄牛单位 /hm2 或 4.72 头奶牛单位 /hm2,施肥后圈养

载畜量为 16.89 个黄牛单位 /hm2 或 5.66 头奶牛单位

/hm2,施肥后圈养载畜量比施肥后自然放牧区载畜量增

加 20.1%。说明牧草地践踏性对牧草产量有一定影响。

施肥禁牧区产干草 12 770 kg/hm2,比不施肥禁牧区产

干草 8 183 kg/hm2 增加 56.1%,肖勇[8]的研究表明,狗

牙根施肥禁牧区产干草量为 11 947 kg/hm2,比不施肥

禁牧区的产干草量 4 873 kg/hm2,增产 145.2%。本试

验施肥禁牧区产干草量与肖勇的研究相比增加了 6.9%,

但不施肥禁牧区产干草相差较大,增加了 67.9%,说明

狗牙根地比白三叶草地需肥量更大。

4.2 猪粪尿还田还土与种草情况讨论

邱桂玉[9]和陈远清[10]施肥试验证明,以 667 m2 为单

位,水田可消纳 8.68 头猪粪污,种柑桔土地可消纳 8.2

头猪粪污,种茶叶土地可消纳 12.9 头猪粪污,蔬菜用地

可消纳 11.71 头猪粪污。本试验白三叶草地猪粪污来源

较复杂,无法进行白三叶草地以 667 m2 为单位猪粪污消

纳量的试验。

甘肃定西市安定区实施了猪粪污资源化利用,按照

“以草带畜、以粪产肥、有机肥还田、草畜肥相结合”的

发展思路,将粪污加工成有机肥或农家肥,大部分施用

在规模养殖场自身流转的土地中,种植饲草料和其他经

表1 2018表年和3 不同剂量的益生菌制剂对仔猪血清免疫指标的影响 2019年城步县白三叶草地施肥载畜量干草产量试验数据表

放牧黄牛/头 放牧羊/头 收割干草

年份 项目

试验地面积

/hm² 施肥前 施肥后 施肥前 施肥后

施肥干猪粪

/kg

施肥猪沼液

/kg kg kg/hm²

A01 8.02 51 93 82 112 51 879 125 369

2018 年 A02 0.8 5 175 12 506 9 229 11 536

A03 0.4 3 198 7 995

A01 8.02 114 186 70 555 171 376

2019 年 A02 0.8 7 038 17 095 11 203 14 004

A03 0.4 3 348 8 370

环境保护 Environmental Conservation

124

第131页

China Swine Industry

2023 年 第 5 期

DOI:10.16174/j.issn.1673-4645.2023.05.028

收稿日期:2023-02-06

作者简介:吴浩 (1990-),男,安徽马鞍山人,本科,兽医师,主要从事动物疫病预防与控制方面的工作

江苏省南京市

生猪屠宰企业现状与问题对策浅析

吴 浩 匡 伟 刘 永 王哲剑

渊南京市畜牧兽医站袁 江苏南京 210000冤

摘 要院 随着我国经济社会繁荣发展袁 人民生活水平不断提高袁 对于动物产品的食品安全和品质质量也提出了更高要求遥 猪

肉作为居民日常消费占比最大的畜禽动物产品袁 事关老百姓 野舌尖上的安全冶袁 优化生猪屠宰企业管理对于保障基础民生尧

防控疫病传播尧 维护公共安全具有重要意义遥 本文通过对南京市 4 家生猪屠宰企业进行调查袁 发现 4 家屠宰企业在场区布

局上均设有隔离区尧 消毒池尧 屠宰加工区域尧 独立检疫室 渊旋毛虫检测室及相关检疫岗冤尧 瘦肉精检测室以及无害化处理区遥

但均未建立独立的肉品品质 渊药残尧 重金属及细菌冤 检测实验室和独立的无害化处理设施设备遥 4 家企业的动物防疫技术人

员中无本科及以上学历袁 队伍整体学历和专业水平较低袁 部分制度在具体落实过程中存在执行不到位的问题遥

关键词院 生猪曰 屠宰企业曰 现状曰 问题曰 对策

中图分类号院 S828曰S851.43 文献标识码院 A 文章编号院 1673-4645(2023)05-0125-05

开放科学渊资源服务冤标识码渊OSID冤袁扫一扫袁了解文章更多内容

为了解江苏省南京市生猪屠宰企业现状,并就优化

生猪屠宰管理提出合理建议,2022 年 6—9 月,通过现

场查看、座谈交流和数据分析等调查方式,对南京市目

前正在运营的生猪屠宰企业进行了走访调研[1]。

1 基本情况

1.1 屠宰企业概况

截至 2022 年 9 月,南京市注册运营的生猪屠宰企

业共有 4 家,分别是江北新区南京市大厂欣乐肉类食

品中心 (设计屠宰量 8 万头 / 年)、江宁区南京元润食品

有限公司 (设计屠宰量 100 万头 / 年)、溧水区南京溧水

众鑫食品有限公司 (设计屠宰量 5 万头 / 年) 和高淳区高

淳食品有限公司淳溪分公司 (设计屠宰量 10 万头 / 年)。

调查结果显示,2021 年南京市共屠宰生猪 36.50 万

头,占设计屠宰量的 29.67%。其中,大厂欣乐肉类食

品 中 心 屠 宰 生 猪 11.70 万 头 , 占 设 计 屠 宰 量 的

146.25%;元润食品有限公司屠宰生猪 11.41 万头,占

设计屠宰量的 11.41%;溧水众鑫食品有限公司屠宰生

猪 4.65 万头,占设计屠宰量的 93.00%;高淳食品有限

公司淳溪分公司屠宰生猪 8.74 万头,占设计屠宰量的

87.40%[2]。

1.2 场区布局

根据 《生猪屠宰管理条例》 《生猪屠宰管理条例实

施办法》 《动物防疫条件审查办法》 以及非洲猪瘟防控

等相关法律法规[3],着重从“整体布局”“卫生消毒”

“屠宰加工”“检验检测”“动物检疫”以及“无害化处

Quality Safety 质量安全

125

第132页

China Swine Industry

2023 年 第 5 期

理”等 6 个方面对生猪屠宰企业的场区布局进行调研。

1.2.1 整体布局

4 家生猪屠宰企业均建有围墙等隔离设施,生产经

营区与生活办公区分开,场内清洁区与非清洁区分开,

且分别设置有动物入场口和动物产品出场口。

1.2.2 卫生消毒

4 家生猪屠宰企业均在车辆出入口设置了长 4 m、

深 0.3 m 以上的消毒池。按照加强非洲猪瘟疫情防控相

关工作要求,各场都在入场动物卸载区建设了固定的车

辆洗消中心,对入场车辆进行清洗消毒,并在屠宰车间

入口处设置了员工更衣消毒室。

1.2.3 屠宰加工

4 家生猪屠宰企业的屠宰加工区域主要分为宰前区

域、急宰间和屠宰间,宰前区域包括卸猪台、赶猪通道、

验收间、待宰圈 (含冲淋设施) 和隔离圈,各区域间布局

设置与生产工艺流程较为匹配,人流、物流互不干扰[4]。

1.2.4 检验检测

4 家生猪屠宰企业目前均建有独立的瘦肉精检测实

验室,对入场生猪按照每批次 10%的比例进行抽检,但

均未建立药残、重金属及细菌检测实验室,主要采取第

三方委托的方式开展检测。4 家生猪屠宰企业均建有独

立的非洲猪瘟病毒检测实验室,按照“头头采、批批检、

全覆盖”的原则,对入场生猪进行非洲猪瘟病原检测。

1.2.5 动物检疫

4 家生猪屠宰企业均已按照 《动物防疫条件审查管

理办法》 的要求,设置了与屠宰规模相适应的独立检疫

室 (旋毛虫检测室及相关检疫岗)、办公室 (出证室)、

休息室以及瘦肉精检测室[5]。

1.2.6 无害化处理

4 家生猪屠宰企业均设置了符合国家规定的病死动

物和病害动物产品无害化处理区,对屠宰加工过程中产

生的污水、固体废物,屠宰前确认的病害生猪,屠宰过

程中经检疫或肉品品质检验确认为不可食用的生猪产

品,以及其他不达标的生猪及其产品进行无害化处理。

1.3 设施设备

根据生猪屠宰企业日常经营管理所需设施设备,主

要从“屠宰加工”“卫生消毒”“品质检验”“疫病检

测”“无害化处理”5 个方面对生猪屠宰企业的设施设

备情况进行调研。

1.3.1 屠宰加工

4 家生猪屠宰企业均采用流水线工艺,配有悬挂输

送,三点式麻电机,机械烫毛、刨毛设备,劈半机等屠

宰加工设备[6]。

1.3.2 卫生消毒

4 家生猪屠宰企业的车辆洗消中心内均配置了车辆

清洗消毒设施,车辆经清洗消毒后,凭屠宰企业发放的

洗消证明出场。赶猪通道内安装了喷淋设施,屠宰前对

生猪进行淋浴清洗[7]。生产线上各岗位附近均安装有刀

具及洗手消毒设施。作业结束后,对屠宰加工车间内的

扁担钩、托盘等设施设备以及环境进行全面清洗、消毒

和杀菌[8]。

1.3.3 品质检验

4 家生猪屠宰企业目前均未建立独立的肉品品质

(药残、重金属及细菌) 检测实验室,也未配备超净工作

台、凯氏定氮蒸馏装置、酶标仪、恒温培养箱等设施设

备。瘦肉精检测主要使用胶体金快速检测卡[9]。

1.3.4 疫病检测

4 家生猪屠宰企业的非洲猪瘟检测实验室均配有荧

光 PCR 仪、高压灭菌器等仪器[10]。除南京溧水众鑫食品

有限公司外,其余 3 家生猪屠宰企业还配有生物安全

柜。其中,江宁区南京元润食品有限公司配备了全自动

核酸提取仪,其他 3 家目前通过人工方式提取核酸[11]。

1.3.5 无害化处理

4 家生猪屠宰企业目前均通过委托第三方无害化处

理机构,以上门接收的方式,处理其产生的病死猪及病

害动物产品,因此,均未设有独立的无害化处理设施设

备[12],但配有符合防疫卫生要求、具有温度监控的病死

猪及病害动物产品冷冻储存设施。

1.4 人员情况

屠宰场的动物防疫技术人员包括从事“品质检验”

“试验检测”“环境洗消”“无害化处理”及“从事其他

动物疫病防控”等岗位的人员。部分生猪屠宰企业的同

一员工会承担多个岗位的工作。

1.4.1 整体情况

目前,4 家生猪屠宰企业共聘用各类动物防疫技术

人员 69 人,其中高淳区食品有限公司淳溪分公司 15

质量安全 Quality Safety

126

第133页

China Swine Industry

2023 年 第 5 期

人、江北新区南京市大厂欣乐食品有限公司 26 人、江

宁区南京元润食品有限公司 12 人、溧水区南京溧水众

鑫食品有限公司 12 人。

1.4.2 性别情况

由于生猪屠宰工作的行业特殊性,从业人员主要以

男性为主。4 家生猪屠宰企业动物防疫技术人员中男性

52 人、女性 17 人,男性员工占人员总数的 75.36%。

1.4.3 年龄情况

动物防疫技术人员中 35 岁以下的共有 20 人,占比

28.99%;35~55 岁共有 43 人,占比 62.32%;55 岁以

上 4 人占比 5.80%。

1.4.4 学历情况

动物防疫技术人员中具有专科以下学历的共有 48

人,占比 69.57%;具有专科学历的共有 21 人,占比

30.43%;无本科及以上学历人员。

1.4.5 专业情况

动物防疫技术人员中具有兽医相关专业学习经历的

共有 15 人,占比 21.74%;其他类共有 54 人,占比

78.26%。

1.4.6 从业年限

所有在职动物防疫技术人员均已从业 3 年以上,人

员稳定性较高,从业经验较为丰富。

1.4.7 人员资质

动物防疫技术人员均持有当地医疗卫生部门颁发的

健康证,且在有效期内。按照 《生猪屠宰管理条例实施

办法》,生猪屠宰企业肉品品质检验人员应持证上岗。

目前,4 家生猪屠宰企业共有 25 人持有肉品品质检验资

格证书,占肉品品质检验人员总数的 80.64%。

1.4.8 参训情况

2021 年动物防疫技术人员共参加各区组织开展的各

类技术培训 54 次,培训内容主要为疫病防控理论知识、

品质检验、实践操作和相关法律法规等。

2 存在的问题

2.1 基础设施设备欠缺

4 家生猪屠宰企业均未建立药残、重金属和细菌检

测实验室,无法对销售的生猪产品质量进行全面检测。

高淳食品有限公司淳溪分公司、江北新区大厂欣乐食品

有限公司和溧水众鑫食品有限公司的非洲猪瘟病毒检测

实验室未配备全自动核酸提取仪,采用人工方式提取核

酸可能存在交叉污染、效率低下、无法进行过程监控等

问题。溧水众鑫食品有限公司未配置生物安全柜和高压

灭菌器,检测的过程中可能存在样本污染和生物安全隐

患。4 家生猪屠宰企业均未建立病死生猪及病害动物产

品无害化处理设施,无法及时对产生的病死猪及病害产

品进行处理。

2.2 防疫队伍文化水平不高

生猪屠宰企业中 35 岁以下动物防疫技术人员为 20

人,仅占总数的 28.99%,年轻从业人员较少。动物防

疫技术人员中无本科及以上学历,队伍整体学历水平较

低。动物防疫技术人员中具有兽医相关专业的为 15 人,

仅占总数的 21.74%,队伍整体专业水平较低[13]。

2.3 部分制度落实不力

4 家生猪屠宰企业虽然均已建立起进场核查、待宰

巡查、屠宰加工、检验检疫、消毒卫生和无害化处理等

环节的相关管理制度,但在具体落实过程中仍存在执行

不到位或不完全等问题[14]。例如,南京溧水众鑫食品有

限公司未在生猪入场环节落实进场核查制度,高淳食品

有限公司淳溪分公司存在运输车辆未凭洗消证明出场,

以及部分生猪屠宰企业还存在未定期更换消毒药、消毒

效果不佳等问题。

3 原因分析

3.1 行业发展处于低谷

由于非洲猪瘟疫情叠加新冠肺炎疫情等因素,生猪

养殖、调运、消费等环节受到剧烈冲击,猪肉价格长期

低位徘徊,处于产业链中游的生猪屠宰企业两端承压,

利润萎缩[15]。同时,随着屠宰加工行业监管日趋完善,

企业在疫病防控、食品安全、环境保护中的投入不断提

高,成本攀升,造成企业基础设施设备投资建设动力不

足[16]。

3.2 薪资福利待遇不高

受经营环境影响,生猪屠宰企业压缩成本、降低开

Quality Safety 质量安全

127

第134页

China Swine Industry

2023 年 第 5 期

支,提供的薪酬福利待遇有限。此外,动物防疫技术岗

位人员的工作时间处于凌晨,工作环境脏乱吵闹、工作

节奏紧张繁忙。较低的薪资与艰苦的工作内容难以吸引

年轻、专业人才从事该行业。

3.3 规范履职能力不强

部分企业工作人员对自身岗位职责认识不清,对企

业管理制度掌握不牢,工作中存在松懈麻痹思想,未能

严格按照制度规范履行职责。此外,虽然 2021 年各区

共同组织了生猪屠宰企业参加各类疫病防控、品质检

验、实践操作和相关法律法规等的培训,但企业内部对

于员工的岗位培训和法律宣贯较少,导致部分制度在执

行过程中流于形式,未能达到应有的效果[17]。

4 意见及建议

4.1 加强指导技术服务袁 提升经营能力水平

针对生猪屠宰企业面临的经营问题,一方面主管部

门可以指导企业申请专项资金,帮助企业优化管理程

序,提供疫病防控、质量检测、人员培训等技术服务,

激发企业经营活力,降低企业经营成本。另一方面,生

猪屠宰企业应在保障产品质量的前提下,聚焦市场需求

变化,丰富产品供应类型,创新营销渠道模式,提升经

营能力水平[18]。

4.2 保障人员薪资待遇袁 严格岗位标准要求

生猪屠宰企业应与员工签订正规劳动合同,给予其

符合市场水平和工作能力的薪酬福利,落实劳动保护、

社会保险等保障措施。按照 《生猪屠宰管理条例》 《生

猪屠宰管理条例实施办法》 等法律法规,肉品品质检验

人员必须具有相应的学历水平,并经培训合格后,方可

持证上岗。生猪屠宰企业应严格按照肉品品质检验岗位

职责标准,合理安排人员,定期组织肉品品质检验人员

参加主管部门或行业协会举办的技能培训,不断提高其

技能水平和能力素质。

4.3 加强企业内部管理袁 完善制度管理体系

生猪屠宰企业应健全人员职责考评机制,制定细化

岗位工作流程标准,定期开展日常履职监督检查,将人

员履职情况作为职务晋升、绩效奖励及考核评优的重要

依据。同时,积极开展企业内部职工培训,建立健全人

员培训制度,根据不同岗位职责组织开展各类符合工作

实际、内容形式多样的技能操作和法律法规培训,不断

提升企业员工生物安全和产品质量意识。此外,生猪屠

宰企业可以在国家、省市相关法律法规的基础上,根据

本场实际,科学制订各项生产管理制度,组织制度落实

情况调查,开展制度执行效果评价,不断提高制度制订

的科学性、可行性和有效性。

5 小结

综上所述,南京市生猪屠宰企业可以从积极挖掘市

场潜力、持续强化人员队伍和不断完善制度体系等多个

方面,进一步提高企业运营管理水平,以满足居民肉类

消费需求为目标,以构建专业技术人才队伍为依托,以

完善管理制度规范体系为保障,融合新设备、新技术、

新理念,强化优质产品供给能力,提升检疫品质监督水

平,实现企业效益、社会效益协同增长。

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质量安全 Quality Safety

128

第135页

China Swine Industry

2023 年 第 5 期

渊上接第124页冤

济作物,取得绿色循环新的经济增长点[11]。土壤中某种

营养元素的缺少,易导致牧草生长受阻,产草量下降,

需进行土壤化验及肥料试验[12]。以多年生黑麦草和白三

叶草组成的人工草地在 1981 年投产后,连续几年分区

轮施了钙镁磷肥,使牧草在初期的 5~6 年时间内保持

旺盛的长势,近 2 年牧草长势却有衰落趋势,对草地施

肥的营养元素不平衡可能是重要原因之一。

施用猪粪尿有机肥种植白三叶牧草,还需配合磷

肥、钾肥。每年应给每公顷低磷土壤黑麦草和白三叶草

混播草地施用三重磷酸盐形式的磷 100 kg,可提高 10%

牧草干物质。白三叶草葡匐茎节间长,每平方米葡匐茎

节间长和每平方米生长点数与增施磷肥呈正相关,说明

施磷肥可促进白三叶草的生长[13]。

5 结论

本试验结果表明,白三叶草地施肥放牧区载畜量可

达 14.15 头 /hm2 黄牛单位或 4.72 头 /hm2 奶牛单位,白

三叶草施肥禁牧区产鲜草 88 069 kg/hm2,比不施肥禁

牧区每平方公顷增产鲜草 56.1%。白三叶草施肥禁牧区

圈养载畜量为 16.99 头 /hm2 黄牛单位或 5.66 头 /hm2 奶

牛单位,白三叶草地猪粪尿消纳量为 26.1 t/hm2。因此,

利用白三叶草抗逆性强的特点,进行白三叶草地种植施

肥和牛羊草食动物自然放牧试验,证明了白三叶草是较

好的饲用牧草之一,并有进一步开展大面积田间试验的

必要。

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Quality Safety 质量安全

129

第136页

2024 年全国畜牧兽医期刊征订目录

序号期刊名称邮发代号刊期年定价 / 元联系人电话地址邮编E-mail

1中国畜牧杂志82-147月刊600.00 池艳伶010-82893871北京市海淀区圆明园西路 2 号院中国农业科学院畜牧兽医研究所牧医 6 号楼100193 chiyanling@boyar.cn

2畜牧兽医学报82-453月刊600.00 刘 凌010-62815987 北京市海淀区圆明园西路2号中国农业科学院北京畜牧兽医研究所100193 xmsyxb@caas.cn

3动物营养学报80-591月刊1800.00 景正芳010-62817823北京市海淀区圆明园西路2号中国农业大学动科动医大楼153室编辑部100193 yyxb@cau.edu.cn

4中国家禽28-87月刊216.00 汪杏平0514-87200013江苏省扬州市邗江区仓颉路58

号225125 zgjqzz@263.net

5中国禽业导刊28-153月刊240.00 汪杏平0514-87200013江苏省扬州市邗江区仓颉路58

号225125 qydk@263.net

6中国畜牧兽医2-215月刊600.00 白如丽010-62811226 北京市海淀区圆明园西路2号中国农业科学院北京畜牧兽医研究所100193 zgxmsy@caas.cn

7畜牧与兽医28-42月刊336.00 陈 雯025-84395701江苏省南京市卫岗1号南京农业大学内210095 muyizz@njau.edu.cn

8中国兽药杂志2-924月刊144.00 杨思琦010-62103878北京市海淀区中关村南大街8号100081 zgsy@vip.163.com

9河南畜牧兽医(上半月) 36-193月刊180.00 杨 丽0371-65778792河南省郑州市经三路91

号450008 hnxmsygj@163.com

10河南畜牧兽医(下半月) 36-352月刊180.00 杨 丽0371-65778792河南省郑州市经三路91

号450008 hnxmsyscb@163.com

11黑龙江畜牧兽医14-28半月刊960.00 朱海虹0451-51522883黑龙江省哈尔滨市松北区创新三路 800 号 国际农业科技创新中心 13 层 1316 房间 黑龙江 畜牧兽医编辑部150023 hljxmsy@163.com

12现代畜牧兽医8-75月刊180.00 舒 斐024-23226552辽宁省沈阳市皇姑区金山北路 97 号110000 ggb23448255@163.com

13饲料工业8-163半月刊144.00 张 雷 024-86391926辽宁省沈阳市金沙江街16

号6门110036 747334055@qq.com

14饲料研究2-216半月刊480.00 吕婧儒010-86399469北京市右安门外东滨河路4号100069 siliaoyanjiu@qq.com

15饲料博览14-184双月刊90.00 倪树森0451-55190639黑龙江省哈尔滨市香坊区东北农业大学内150030 slbl@vip.163.com

16经济动物学报自办发行季刊100.00 于 静0431-84533130 吉林省长春市新城大街2888号吉林农业大学130118 jjdwxb@163.com

17广东饲料自办发行月刊120.00 周风珍020-37288820广东省广州市天河区燕岭路 89 号燕侨大厦 2106 房510500 gdfeed@vip.163.com

18 Journal of Animal Science and Biotechnology自办发行双月刊600.00 刘 萍010-62734403北京市海淀区圆明园西路2号中国农业大学动物科技学院154

室100193 jasbeditor@gmail.com

19中国兽医科学54-33月刊180.00 张文举0931-8342195 0931-8310086甘肃省兰州市盐场堡徐家坪1号730046 zgsykx@zgsykx.com

20中国兽医杂志2-137月刊300.00 黄长钦010-62733040北京市海淀区圆明园西路2号中国农大动物医学院100193 vetzzhi@cau.edu.cn

21中国乳业82-764月刊240.00 张爱华010-82106274北京市海淀区中关村南大街12

号100081 zhgry@caas.cn

22中国猪业80-493双月刊180.00 张爱华010-82106274北京市海淀区中关村南大街12

号100081 zhuye@caas.cn

23中国牛业科学52-113双月刊72.00 张 琪029-87091423陕西杨凌西北农林科技大学动物科技学院712100 Huangn2002813@aliyun. com

24动物医学进展52-60月刊180.00 黄建文029-87092574陕西杨凌西北农林科技大学动物医学院712100 dyjzyilan@263.net

25家畜生态学报52-112月刊360.00 陈小强029-87091130陕西杨凌西北农林科技大学动物科技学院712100 jcst@x263.net

26畜牧产业82-612月刊180.00 黄 伟010-62166260北京市海淀区中关村南大街12号农科院饲料所辅助楼504 100081 xmcy@caaa.cn

27畜牧与饲料科学16-101双月刊90.00 赵俊利0471-5294608内蒙古呼和浩特市昭君路22号内蒙古农牧业科学院010031 cnmxky@vip.163.com

28内蒙古畜牧业(蒙古文) 16-50双月刊42.00 春 梅0471-5259723内蒙古呼和浩特市玉泉区昭君路22号内蒙古自治区农牧业科学院010030 nmgxmy@sohu.com

29当代畜禽养殖业16-49双月刊60.00 菅瑞珍0471-5259377内蒙古呼和浩特市玉泉区昭君路22号内蒙古自治区农牧业科学院010031 nmgxmy2008@sina.com

30四川畜牧兽医62-43月刊180.00 何 军 028-85571780四川省成都市武侯祠大街4号省农业农村厅内610041 scxmsy@sina.com

31中国动物检疫24-112月刊240.00 倪志娟0532-85622559山东省青岛市南京路369

号266032 zgdwjy2016@cahec.cn

32中国畜禽种业80-222月刊420.00 张跃武010-82106255北京市中关村南大街12号中国农科院中国畜禽种业编辑部100081 xqzy@caas.cn

33家禽科学24-146月刊120.00 孙 凯0531-85990243山东省济南市历城区工业北路23788

号250100 jqkxzz@163.com

34青海畜牧兽医杂志56-10双月刊30.00 张 琳0971-5318387青海省西宁市生物园区纬二路1号青海省牧科院810016 qhxmsyzz@163.com

35草业学报54-84月刊300.00 裴世芳0931-8913494甘肃省兰州市城关区兰州大学一分部730020 cyxb@lzu.edu.cn

36草原与草坪54-13双月刊60.00 靳奇峰0931-7631885甘肃省兰州市安宁区营门村 1 号甘肃农业大学730070 cyycp@gsau.edu.cn

37贵州畜牧兽医66-58双月刊96.00 刘 辉0851-85400593贵州省贵阳市南明区小碧乡老里坡550005 gzxmsy@163.com

38浙江畜牧兽医自办发行双月刊42.00 徐宁迎 / 黄利权0571-86971701杭州市西湖区余杭塘路866号,浙江大学紫金港校区310058 zjxmsy@zju.edu.cn

第137页

39福建畜牧兽医34-81双月刊48.00 谢新东0591-87807454福建省福州市鼓屏路183

号350003 fjxmsy@163.com

40草业科学54-51月刊240.00 张 瑾0931-8912486甘肃省兰州市嘉峪关西路768

号730020 cykx@lzu.edu.cn

41中国预防兽医学报14-70月刊180.00 彭永刚0451-51051812黑龙江省哈尔滨市香坊区哈平路678

号150069 zgyfsyxbhvri@vip.163. com

42中国草食动物科学54-57双月刊72.00 魏云霞0931-2115279甘肃省兰州市七里河区硷沟沿335

号730050 xumuchj@163.com

43中南农业科技38-352月刊240.00 龙小玲027-87389001湖北省武汉市洪山区南湖瑶苑 2 号湖北省农科院农经所内430064 znnykj@hbaas.com

44养殖与饲料38-381月刊180.00 汪长春027-87287074湖北省武汉市洪山区华中农业大学校内430070 yzcl@mail.hzau.edu.cn

45安徽畜牧兽医自办发行季刊免费王桂军0551-62658681安徽省合肥市徽州大道197号农业大厦1601

室230002 ahxmsyxh@163.com

46今日畜牧兽医18-339月刊96.00 付盈娇15373096649河北省石家庄市裕华区槐中路 113 号050021 jrxmsy@126.com

47北方牧业18-505 /18-323上月刊 / 下月刊96.00 /96.00孙秀娟13931175960河北省石家庄市裕华区槐中路 113 号050021 beifangmuye88@sohu. com

48山东畜牧兽医24-231月刊96.00 孙玲玉0538-8242644山东省泰安市山东农业大学转271018 xmxh@sdau.edu.cn

49中国奶牛80-401月刊240.00 王 丽010 62673764北京海淀区圆明园西路2号中国农科院北京畜牧兽医研究所牧医3号楼206 100193 zgnn126@126.com

50中国动物传染病学报4-748双月刊240.00 郑海红021-34293142上海市闵行区紫月路518号中国农业科学院上海兽医研究所200241 bianjibu@shvri.ac.cn

51中国动物保健82-991月刊180.00 张小清 010-62899836北京市海淀区天秀路 10 号农大国际创业园 3 号楼 3010 100193 zgdwbj@163.com

52现代畜牧科技14-304月刊216.00 金 峰0452-6116741黑龙江省齐齐哈尔市龙沙区合意大街2号161005 xdxmkj@126.com

53中兽医医药杂志54-55双月刊72.00 陆金萍0931-2115280甘肃省兰州市七里河区硷沟沿335

号730050 zsyyyzz@caas.cn

54草食家畜58-71双月刊72.00 杨 志0991-3075315 新疆乌鲁木齐市经济技术开发区阿里山街468号新疆畜牧科学院830011 caoshijiachu@sina.cn

55畜牧兽医科学自办发行半月刊480.00 金 峰010-64882916北京德胜门外北沙滩 1 号(中国农机化科学研究院) 100083 xmsykxbjb@163.com

56今日养猪业80-261双月刊90.00 赵秋菊010-51503820北京市海淀区曙光花园中路 9 号北京市农林科学院数据科学与农业经济研究所100097 pigstoday@vip.163.com

57广西畜牧兽医48-107 双月刊30.00 罗 林0771-3235650广西省南宁市秀灵路广西大学东校园530005 gxsm@chinajournal.net.cn

58中国兽医学报12-105月刊240.00 李文红0431-87836534吉林省长春市西安大路5333

号130062 xbcjvs@jlu.edu.cn

59当代畜牧82-338月刊120.00 李建秋010-82070129北京市朝阳区德胜门外清河南镇洼里乡仓营6号北京奶牛中心100192 tougao@bjddxm.com

60畜禽业62-184月刊192.00 邓成玲028-86783176四川省成都市大慈寺路32

号610016 xqyzzs@163.com

61畜牧兽医杂志52-56双月刊54.00 刘炳琪029-87092806陕西省杨凌区西农路22号西北农林科技大学动物科技学院712100 xmsy2806@163.com

62云南畜牧兽医自办发行双月刊30.00 蒋文俊0871-65017073云南省昆明市盘龙区金殿青龙山云南省畜牧兽医科学院650224 ynxmsy@188.com

63粮食与饲料工业38-151双月刊60.00 梅 竹02787406138 /027-50657966湖北省武汉市卓刀泉南路3号430079 gaojianfeng@yeah.net

64畜牧兽医科技信息14-48月刊180.00 朱明艳0451-51051813黑龙江省哈尔滨市香坊区哈平路 678 号中国农业科学院哈尔滨兽医研究所150069 xmsykjxx@caas.cn

65国外畜牧学-猪与禽4-361双月刊120.00 王晶晶021-62204554上海市闵行区北翟路2901

号201106 shzyq2005@126.com

66中国畜牧兽医报1-155周刊150.00 魏敬秋010-85835474北京市朝阳区惠新西街15

号100029 zgxmsyb@sina.com

67养禽与禽病防治46-9月刊60.00 林秋燕020-85283636广东省广州市天河区五山路 483 号华南农业大学兽医学院 23 号楼 210 室《养禽与禽病防治》 编辑部510642 scvm@21cn.net

68湖南畜牧兽医42-276双月刊36.00 蔡文杰0731-84615356湖南省长沙市芙蓉区长榔路 8 号湖南省畜牧兽医研究所内410131 hiavs@163.com

69广东畜牧兽医科技自办发行双月刊90.00 邢亚琪020-87576452广东省广州市天河区五山大丰一街1号510640 gdxmsykj@163.com

70中国农业科学2-138半月刊1188.00 林鉴非010-82109808北京市海淀区中关村南大街 12 号100081 zgnykx@caas.cn

71农业大数据学报80-388季刊200.00 范仁雪010-82106275北京市海淀区中关村南大街 12 号100081 agbigdata@caas.cn

72上海畜牧兽医通讯自办发行双月刊60.00 郭佳宏021-62206294上海市闵行区北翟路 2901 号201106 shxmsytx@163.com

73中国畜牧业82-855半月刊432.00 鹿红敏01057266581 /17701135850北京市朝阳区惠新东街 23 号100029 myfaxing@126.com

74中国饲料82-554半月刊360.00 李建军13520471580北京市海淀区天秀路 10 号中国农大国际创业园 2 号楼 5019 100193 851423028@qq.com

75畜牧业环境82-517半月刊480.00 唐湘方010-62815864北京市海淀区圆明园西路 2 号中国农业科学院北京畜牧兽医研究所100193 tangxiangfang@caas.cn

76黑龙江动物繁殖14-264双月刊180.00 邰丽萍0451-51522851黑龙江省哈尔滨市松北区创新三路 800 号 国际农业科技创新中心 13 层 1317 室150023 hljdwfz010@163.com

77南方农业学报 48-3月刊540.00 兰宗宝0771-3243905广西南宁市西乡塘区大学东路 174 号 530007 nfnyxb@163.com

78吉林畜牧兽医12-75月刊240.00 董 辉0431-86814288吉林省长春市西安大路 4510 号吉林牧业大厦130062 jlxmsy@163.com

79中国草地学报16-32月刊300.00胡晓然0471-4926907/ 4928361内蒙古呼和浩特市乌兰察布东街 120 号中国农业科学院草原研究所010010 zgcdxb@126.com

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