SILIAO GONGYE 2023年第44卷第20期 总第689期

2.4 饲料中添加磷脂对仔蟹肝胰腺中Neverland基因

（Nvd）相对表达量的影响

如图 4所示，饲料磷脂添加水平显著影响了仔蟹

肝胰腺 Nvd 基因表达量。随着磷脂添加水平升高至

2%，Nvd表达量显著增加了1.9倍（P<0.05），之后随着

磷脂水平的进一步提高，Nvd的转录水平显著降低至

对照组水平（P<0.05）。相对表达量

1 2 3 4 5

3.75

3.00

2.25

1.50

0.75

0

磷脂添加水平（%）

图4 磷脂水平对中华绒螯蟹仔蟹肝胰腺Neverland表达的影响

3 讨论

本研究中，仔蟹存活率均高于 80%，由于甲壳动

物个体之间的相互蚕食是不可避免的，因此本实验中

仔蟹的成活率是可接受的。本研究发现饲料中添加

磷脂未对仔蟹存活率产生显著影响，但适量添加磷脂

（1%）显著提高了仔蟹的增重率和特定生长率。本研

究结果与三疣梭子蟹[18，42]

、斑节对虾[43]

、长毛对虾[44]

、

金头鲷[45]

中的研究结果相似，但与中华绒螯蟹[46]

、三

疣梭子蟹[17]

、锯缘青蟹[47-48]

中的研究结果不一致，后

者发现饲料中磷脂最适添加量为 2%~3%。上述研究

结果差异的原因可能与不同种类实验动物、不同生长

阶段和磷脂源的添加种类有关[24]

。磷虾油对中华绒

螯蟹幼蟹[初始体质量（0.26±0.01） g]的促生长效果最

好，其次是卵黄磷脂，大豆卵磷脂的促生长效果最

差[24]

。另外，本研究发现饲料中添加磷脂不同程度降

低了仔蟹的饲料系数，其中磷脂添加水平为1%时，饲

料系数最低，这说明饲料中添加 1% 磷脂不仅能显著

提高仔蟹的生长性能，还可以在一定程度上提高饲料

转化效率，降低养殖饲料成本。

肝胰腺是甲壳动物重要的消化器官，它不仅负

责营养物质的储存和转运，也参与激素和酶的合成

与分泌，在新陈代谢调控中发挥着重要作用[49]

。本

研究中，与对照组和低磷脂添加组相比，仔蟹胰蛋白

酶、纤维素酶和淀粉酶活性在较高磷脂水平（3%~

4%）添加时显著降低。这说明大豆卵磷脂过量添加

会降低仔蟹的消化率，陈永坡[50]

的研究也发现饲料

磷脂水平高于 3.29% 时，幼草鱼肝胰腺的胰蛋白酶

和淀粉酶活性降低。一方面可能是由于磷脂添加提

高了脂类乳化和消化能力，提高了脂类营养供能比

例，从而降低了其他营养素的消化（如脂肪对蛋白质

的节约效应[51-53]

），另一方面可能是由于大豆卵磷脂

中富含的亚油酸引起的炎症反应有关[54-56]

，特别是

肠道炎症反应造成肠道损伤，降低了消化酶的分

泌[57-58]

。而脂肪酶的活性则是随着磷脂水平的提高

表现出先降后升的趋势，在磷脂水平 2% 时，脂肪酶

的活性最低。我们认为这可能与仔蟹对营养物质种

类需求的转变有关。当磷脂水平较低时，仔蟹的器

官发育尚不完善，消化脂肪的能力较弱，因此需要更

多的脂肪酶来消化肠道中的脂质，此时仔蟹的主要

供能物质是碳水化合物和蛋白质。当磷脂水平逐渐

升高，由于磷脂能够促进脂质乳化，帮助肠道吸收，

仔蟹消化脂肪的压力降低，因而脂肪酶的活性也随

之下降。而随着磷脂水平的进一步上升，大量脂质

被磷脂乳化，导致脂肪酶的活性也随之升高[59]

，而大

量的脂质被仔蟹利用并用于提供能量，因此仔蟹降

低了对于碳水化合物的依赖[60]

。本研究中三酰甘油

图3 磷脂水平对中华绒螯蟹仔蟹肝胰腺中三酰甘油和总胆固醇含量的影响

三酰甘油(mmol/g prot.)

1 2 3 4 5

6

5

4

3

2

1

0

磷脂添加水平（%）

总胆固醇(μmol/g prot.) 225

180

135

90

45

0

1 2 3 4 5

脂类添加水平（%）

71

水 产 动 物 2023年第44卷第20期 总第689期

这种供能脂类的含量在磷脂水平为 3% 时出现显著

降低，这与林志灯[46]

的研究一致，他认为磷脂水平的

提高会促进供能脂类从肝胰腺向肌肉组织转运以满

足生长所需。

钙是构成蟹壳的主要成分也是多种酶的激活剂，

对激素、神经和肌肉的正常功能起着重要作用[61]

。钙

对中华绒螯蟹蜕壳有着重要影响，中华绒螯蟹会在蜕

壳前摄取大量钙质储存于血淋巴和肝胰腺以确保蜕

壳[62]

，并在蜕壳后期摄取钙来进行外壳钙化及促进机

体机能恢复[63]

。中华绒螯蟹会通过肠道和鳃来吸收

水体中的钙[64]

，再通过血液将钙运输到组织中去。胆

固醇是维生素D的前体，它先脱氢转化为7-脱氢胆固

醇，然后在酶的催化作用下转化成维生素 D3，而维生

素 D3对促进水产动物肠道钙的吸收和调节血钙浓度

有着重要的影响[65-66]

，因此胆固醇有可能通过转变为

维生素D3来影响中华绒螯蟹血钙水平。不过，有学者

认为中华绒螯蟹身披碳酸钙质外壳，这可能会使表皮

无法通过接触紫外线 7-脱氢胆固醇转变为维生

素 D3。但根据实际观察，中华绒螯蟹喜在水浅、阳光

明媚的白天蜕壳，中华绒螯蟹从旧壳中蜕出来，表皮

会裸露出来，暴露在紫外线下，刚蜕完壳的中华绒螯

蟹背部呈黑色，这可能会有助于中华绒螯蟹吸收阳光

产生维生素D3，有报道称不同的光照强度会影响中国

对虾的生长[67]

。Nvd 的转录产物能将胆固醇转化成

7-脱氢胆固醇，在维生素 D 的合成过程发挥作用。

Nvd的表达水平在一定程度反映了维生素D的合成水

平，而甲壳动物获得维生素 D 的途径除了自身合成，

还有从食物中获取，Liu 等[39]

发现由于维生素 D 是一

种脂溶性维生素，充足的脂肪摄入可以帮助机体吸收

更多的维生素D，脂肪酶的活性在磷脂水平为1%~2%

是下降的，这说明机体吸收的维生素 D 会减少，为了

满足蜕皮和生长所需，仔蟹需要合成更多的维生素

D，因此Nvd的表达水平在磷脂水平为1%~2%有明显

的提高。

4 结论

综上所述，饲料中添加 1% 磷脂显著提高了中华

绒螯蟹仔蟹的生长和饲料转化率，2% 磷脂显著提高

了仔蟹肝胰腺维生素 D合成调控基因 Nvd的表达量，

而较高磷脂添加水平（3%~4%）显著降低了仔蟹肝胰

腺中胰蛋白酶、纤维素酶和淀粉酶的活性。综合存活

率和生长性能，中华绒螯蟹仔蟹饲料中磷脂的最适添

加水平为1%。

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（编辑：沈桂宇，guiyush@126.com）

74

SILIAO GONGYE 2023年第44卷第20期 总第689期

摘 要：为探讨β-谷甾醇对泌乳动物乳腺乳蛋白和乳脂肪合成的影响，研究首先利用MTT法筛

选出对小鼠乳腺上皮细胞生长增殖不受抑制的β-谷甾醇剂量；采用qRT-PCR技术检测β-谷甾醇处

理乳腺上皮细胞后乳蛋白合成相关基因和乳脂肪合成相关基因的mRNA表达水平。结果表明：较高

剂量（40~120 μmol/L）的 β-谷甾醇明显抑制小鼠乳腺上皮细胞的活力（P<0.05），故后续试验添加 5、

10、20 μmol/L的β-谷甾醇处理乳腺上皮细胞。β-谷甾醇明显提高酪蛋白基因CSN1S1、CSN2、CSN3 及

乳蛋白合成通路相关基因 JAK2、STAT5、mTOR、S6K1 的 mRNA 表达水平（P<0.05），但 5、10 μmol/L

的β-谷甾醇对4EBP1 基因的mRNA表达水平无显著影响（P>0.05）。β-谷甾醇显著上调乳脂肪合成

关键调控因子SREBF1、PPARG、PPARGC1A和脂肪酸合成相关基因ACC、FAS、SCD的mRNA表达（P<

0.05）。由此可见，β-谷甾醇能通过调节小鼠乳腺上皮细胞乳蛋白和乳脂肪合成相关基因的表达，进

而促进乳腺细胞乳蛋白和乳脂肪的合成。

关键词：β-谷甾醇；乳腺上皮细胞；乳蛋白；乳脂肪；基因表达

doi:10.13302/j.cnki.fi.2023.20.012

中图分类号：S816.7 文献标识码：A 文章编号：1001-991X（2023）20-0075-05

Effect of β-sitosterol on Milk Protein Synthesis and Milk Fat Synthesis in Mouse Mammary

Epithelial Cells

LIU Lili CHEN Min

(College of Pharmacy, Heilongjiang University of Chinese Medicine, Heilongjiang Harbin 150040, China)

Abstract：To explore the effect of β-sitosterol on the synthesis of milk protein and milk fat in the mam⁃

mary gland of lactating animals. Firstly, MTT method was used to screen the β -sitosterol dose that

were not inhibited the growth and proliferation of mouse mammary epithelial cells. The mRNA expres⁃

sion levels of the genes related to milk protein synthesis and the genes related to milk fat synthesis

in mammary epithelial cells after β -sitosterol treatment were detected by qRT-PCR. The results

showed that the higher dose (40-120 μmol/L) β -sitosterol significantly inhibited the cell viability of

mouse mammary epithelial cells (P<0.05). Thus, the mammary epithelial cells were treated with 5, 10,

20 μmol/L β -sitosterol in subsequent experiments. β -sitosterol significantly increased the mRNA ex⁃

pression level of casein genes CSN1S1, CSN2, CSN3 and the genes related to milk protein synthesis

pathway JAK2, STAT5, mTOR, S6K1 (P<0.05). But the mRNA expression level of 4EBP1 was not signifi⁃

cantly affected by 5, 10 μmol/L β-sitosterol (P>0.05). β-sitosterol significantly up-regulated the mRNA

expression of the key regulatory factors of milk fat synthesis SREBF1, PPARG, PPARGC1A and the

genes related to fatty acid synthesis ACC, FAS and SCD (P<0.05). Thus, β -sitosterol can promote the

synthesis of milk protein and milk fat by regulat⁃

ing the expression of genes related to milk pro⁃

tein synthesis and milk fat synthesis in mouse

mammary epithelial cells.

Key words：β-sitosterol; mammary epithelial cells;

milk protein; milk fat; gene expression

β-谷甾醇对小鼠乳腺上皮细胞乳蛋白

和乳脂肪合成的影响

■ 刘莉莉 陈 敏

（黑龙江中医药大学药学院，黑龙江哈尔滨 150040）

作者简介：刘莉莉，博士，教授，研究方向为中药对泌乳的

调控。

收稿日期：2023-05-18

基金项目：国家自然科学基金项目[82003930]

75

试 验 研 究 2023年第44卷第20期 总第689期

哺乳动物乳汁是最适合新生动物健康生长发育

的天然营养物，乳汁含有丰富的蛋白质和脂肪，这些

乳营养成分的合成与乳腺上皮细胞一些重要功能基

因及信号转导通路的调控密切相关。乳蛋白主要由

酪蛋白和乳清蛋白组成，其中酪蛋白约占乳蛋白的

80%，故其含量的高低常作为评价乳汁营养价值的重

要指标。雷帕霉素靶点（mTOR）信号途径以及酪氨酸

激酶 2/信号转导和转录激活因子 5（JAK2/STAT5）信

号途径主要调控乳蛋白的合成，而且mTOR信号通路

与JAK2/STAT5信号通路可相互影响协同调控乳蛋白

的合成[1]

。乳脂的主要成分是三酰甘油，主要由脂肪

酸和磷酸甘油在乳腺上皮细胞中合成。过氧化物酶

体增殖物激活受体（PPARG）和固醇调节元件结合转

录因子 1（SREBF1）是乳脂肪合成与分泌过程中最重

要的两个调控因子，在乳脂肪合成基因网络中处于枢

纽位置，二者可通过结合靶基因，影响乳腺对脂肪酸

的摄取、转运、从头合成和酯化过程[2]

。

提高乳质量及泌乳量是目前哺乳动物亟待解决的

重要问题，天然药用植物及其提取物具有低毒、无残留、

不易产生耐药性等优点，用于增乳有其独特优势。研究

发现低剂量葛根素能增强小鼠乳腺乳蛋白和乳脂肪合

成相关蛋白表达，提升乳品质[3]

。槲皮素可以改善乳质

量，提高小鼠乳蛋白、乳糖和乳脂肪合成相关基因的表

达[4]

。β-谷甾醇作为一种植物甾醇，是很多药用植物的

重要组成成分。临床试验研究证实β-谷甾醇具有降胆

固醇、降血糖、抗氧化、抗炎、抑菌和抗癌等多种生物活

性。此外，研究发现β-谷甾醇还可通过雌激素受体途

径调节下游靶基因的表达而发挥植物雌激素样活性的

作用[5-6]

。植物雌激素是许多植物中的天然化学成分，

结构类似于雌激素17-β-雌二醇，可以与动物雌激素受

体结合，发挥雌激素样活性[7]

。许多增乳药用植物的活

性成分中含有植物雌激素，其可通过调节泌乳相关激素

的活性，促进乳腺发育，进而影响动物泌乳性能。然而

关于β-谷甾醇对小鼠乳腺上皮细胞（HC11）乳蛋白、乳

脂肪的合成是否有影响尚未见报道。

本研究以 HC11细胞为模型，采用 MTT法检测不

同浓度β-谷甾醇对HC11细胞增殖能力的影响，qRTPCR 技术检测 β-谷甾醇作用的 HC11 细胞中乳蛋白

和乳脂肪合成相关基因的表达情况，为探讨β-谷甾醇

对HC11细胞乳蛋白和乳脂肪合成的调节机理提供理

论基础，为利用天然植物活性成分提高哺乳动物乳品

质提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

小鼠乳腺上皮细胞（HC11）购自北京北纳创联生

物技术研究院。

β-谷甾醇购自成都瑞芬思生物科技有限公司；

MTT 法细胞活力检测试剂盒购自上海碧云天生物技

术有限公司；RPMI-1640 干粉、胎牛血清（FBS）购自

Gibco 公司；Trizol 购自 Invitrogen 公司；Prime ScriptTM

RT reagent Kit 试剂盒、SYBR Premix Ex TaqTM试剂盒

购自TaKaRa公司。

1.2 HC11细胞的培养

37 ℃、5% CO2培养条件下，利用生长培养基（RP⁃

MI-1640+10% FBS）培养 HC11 细胞，每隔 24 h 更换

新鲜培养基。

1.3 β-谷甾醇对HC11细胞活力影响的检测

试验分为对照组（接种HC11细胞但不加药处理）

和不同浓度（5、10、20、40、80、100、120 μmol/L）β-谷甾

醇组。每组 5 个重复孔。于 96 孔板中接种对数生长

期的 HC11细胞（1×104

个/孔），培养过夜，更换新鲜培

养基并添加 β-谷甾醇，作用 24 h 后，各孔加入 10 μL

MTT（5 mg/mL）继续培养4 h，吸出培养液，各孔分别加

入 100 μL DMSO，振荡 10 min，酶标仪检测 490 nm 的

各孔吸光度（OD）值并进行计算，试验重复3次。

1.4 β-谷甾醇对 HC11 细胞乳蛋白和乳脂肪合成相

关基因表达影响的检测

取对数生长期的 HC11 细胞接种于 6 孔板中，待

培养板中细胞融合度达到 70%~80% 时，更换新鲜培

养基，对照组HC11细胞添加正常细胞培养基，各试验

组 HC11 细胞在添加正常细胞培养基的基础上，同时

分别添加不同浓度的β-谷甾醇（5、10、20 μmol/L），每

组设置 5个重复孔。β-谷甾醇作用细胞 48 h，收集细

胞，Trizol 法提取 RNA，根据 Prime ScriptTM RT reagent

Kit试剂盒说明书进行反转录，利用 qRT-PCR 试剂盒

（SYBR Premix Ex TaqTM）检 测 HC11 细 胞 CSN1S1、

CSN2、CSN3、mTOR、STAT5、JAK2、S6K1、4EBP1、

SREBF1、PPARG、PPARGC1A、ACC、FAS、SCD 基因的

mRNA 表达水平。各基因的引物序列见表 1，β-actin

为内参基因。采用 2-ΔΔCt相对定量的方法计算各基因

的mRNA表达丰度。

1.5 数据处理

试验数据均以“平均数±标准差”表示；采用 SPSS

22.0软件对试验数据进行单因素方差分析，P<0.05表

示具有统计学差异。

2 结果与分析

2.1 β-谷甾醇对HC11细胞活力的影响

不同浓度 β-谷甾醇对 HC11 细胞活力的影响如

76

SILIAO GONGYE 2023年第44卷第20期 总第689期

图 1 所示。与对照组相比，20 μmol/L 以内的 β-谷甾

醇对 HC11细胞活力均无显著影响（P>0.05），而 β-谷

甾醇添加量达到 40 μmol/L 后，细胞活力随 β-谷甾醇

添加浓度的升高而显著下降（P<0.05）。后续试验采

用对 HC11 细胞活力无抑制效果的 5、10、20 μmol/L

β-谷甾醇处理细胞，以探究其对 HC11细胞乳蛋白和

乳脂肪合成相关基因表达的影响。

表1 实时荧光定量 PCR引物序列

基因

CSN1S1

CSN2

CSN3

STAT5

JAK2

mTOR

4EBP1

S6K1

ACC

FAS

SCD

SREBF1

PPARG

PPARGC1A

β-actin

引物序列（5'~3'）

F: TGCAGCATCTGAGGAACAAG

R: TTCCAGGGTGCACTGGTTG

F: TCACTCCAGCATCCAGTCACA

R: GGCCCAAGAGATGGCACCA

F: TTCAAACTGCCGTGGTGAGA

R: GGCTAGCAGTAGCAGGCAAA

F: TTTGTGATTGCTCGGTGTG

R: AAGGGATGGTGGGAACG

F: CGAGCGAAGATCCAAGAC

R: GCAGGGTTTCCAGGTTTAT

F: TCATCGAGGTGGATGACGAG

R: CGCTGATCCGGACCACATA

F: AAGCAGGAGAAGCCAAAG

R: GAAGAACCACAGAACCCAC

F: CATGGCAGGAGTGTTTGA

R: TCATATGGTCCAACTCCC

F: GAGAGGGGTCAAGTCCTTCC

R: ACATCCACTTCCACACACGA

F: ATCAGAAATTCAGCCCGTTG

R: AAGTTGCATCCACCCAAATC

F: CTAGGCTTGCCTTTGTCCAG

R: GGTAGGGAGGATCTGGAAGC

F: CTTCTGGAGACATCGCAAAC

R: GGTAGACAACAGCCGCATC

F: GGAAGACCACTCGCATTCCTT

R: GTAATCAGCAACCATTGGGTCA

F: CCATACACAACCGCAGTCGC

R: GTGGGAGGAGTTAGGCCTGC

F: ACCGTGAAAAGATGACCCAG

R: AGCCTGGATGGCTACGTACA

细胞活力(%)

0 5 10 20 100

120

100

80

60

40

20

0 40 80

a a a a

b c d

β-谷甾醇浓度（μmol/L）

注：柱顶字母不含有相同小写字母表示差异显著（P<0.05），含有相

同字母表示差异不显著（P>0.05）；下图同。

图1 β-谷甾醇对HC11细胞活力的影响

2.2 β-谷甾醇对 HC11 细胞酪蛋白及乳蛋白合成相

关基因表达的影响

不同浓度 β-谷甾醇对 HC11 细胞酪蛋白基因

mRNA 表达的影响如图 2 所示，与对照组相比，5、10、

20 μmol/L 的 β - 谷 甾 醇 均 能 显 著 提 高 HC11 细 胞

CSN1S1、CSN2、CSN3 基因 mRNA 表达水平（P<0.05），

其中 5 μmol/L β-谷甾醇组细胞 CSN1S1、CSN2、CSN3

基因mRNA表达水平相对更高。基因相对表达量

CSN1S1

8

6

4

2

0 CSN2 CSN3

d d

a

a a

b a

b

b c

c

0 μmol/L

10 μmol/L

5 μmol/L

20 μmol/L

c

酪蛋白基因

图2 β-谷甾醇对HC11细胞酪蛋白基因mRNA表达的影响

不同浓度 β-谷甾醇作用下 HC11 细胞中乳蛋白

合 成 信 号 通 路（JAK2/STAT5 和 mTOR）相 关 基 因

mRNA表达水平的变化如图3所示，与对照组相比，5、

10、20 μmol/L的β-谷甾醇组HC11细胞STAT5、JAK2、

mTOR 和 S6K1 基因 mRNA 表达水平均显著升高（P<

0.05）。 其 中 5 μmol/L β -谷 甾 醇 组 细 胞 STAT5 和

JAK2基因mRNA表达水平相对最高，10 μmol/L β-谷

甾醇组细胞 mTOR 基因和 S6K1 基因 mRNA 表达水平

更高。与对照组相比，5 μmol/L 和 10 μmol/L 的 β-谷

甾醇组HC11细胞4EBP1基因mRNA表达水平无显著

变化（P>0.05），而 20 μmol/L 的 β-谷甾醇能显著提高

HC11细胞4EBP1基因的mRNA表达（P<0.05）。基因相对表达量

STAT5

8

6

4

2

0 JAK2 mTOR

d

a

a

b

a b

a

b

b

d c

0 μmol/L

10 μmol/L

5 μmol/L

20 μmol/L

S6K1 4EBP1

c c

c

a

b

b b b

a

乳蛋白合成信号通路相关基因

图3 β-谷甾醇对HC11细胞乳蛋白合成信号通路相关基因

mRNA表达的影响

2.3 β-谷甾醇对 HC11 细胞乳脂肪合成相关基因表

达的影响

77

试 验 研 究 2023年第44卷第20期 总第689期

不同浓度 β-谷甾醇对 HC11 细胞脂肪酸合成相

关基因mRNA水平影响的检测结果如图4所示，与对照

组相比，5、10、20 μmol/L 的 β-谷甾醇均能明显上调

HC11细胞ACC基因和SCD基因的mRNA表达水平（P<

0.05），其中5 μmol/L β-谷甾醇组细胞ACC和SCD基因

mRNA表达水平相对更高。但与对照组相比，5 μmol/L

和 10 μmol/L 的 β-谷甾醇对 HC11细胞 FAS 基因表达

无显著影响（P>0.05）；而 20 μmol/L 的 β-谷甾醇能显

著提高FAS基因mRNA的表达（P<0.05）。基因相对表达量

ACC

6

4

2

0 FAS SCD

c d

a

b b

a

a

a

b

c

b

0 μmol/L

10 μmol/L

5 μmol/L

20 μmol/L

b

脂肪酸合成相关基因

图4 β-谷甾醇对HC11细胞脂肪酸合成相关基因mRNA

表达的影响

不同浓度 β-谷甾醇作用下 HC11 细胞中乳脂肪

合成关键调控因子基因（SREBF1 和 PPARG）及其辅

助因子PPARGC1A基因mRNA表达水平的变化如图5

所示，与对照组 HC11 细胞相比，5、10、20 μmol/L 的

β-谷甾醇均能显著提高 HC11 细胞 SREBF1、PPARG

和 PPARGC1A 基因 mRNA 表达水平（P<0.05）。其中

5 μmol/L β-谷甾醇组细胞 PPARG 基因和 PPARGC1A

基因 mRNA 表达水平相对最高，10 μmol/L β-谷甾醇

组细胞SREBF1基因mRNA表达水平相对最高。基因相对表达量

SREBF1

6

4

2

0 PPARG PPARGC1A

c c

a

a

b

a

a

c

b b

d

0 μmol/L

10 μmol/L

5 μmol/L

20 μmol/L

b

乳脂肪合成信号通路相关基因

图5 β-谷甾醇对HC11细胞乳脂肪合成信号通路相关基因

mRNA表达的影响

3 讨论

乳腺上皮细胞是乳蛋白、乳脂肪等营养物质合成

的主要场所。哺乳动物的泌乳功能与乳腺上皮细胞

的数目以及其分泌与合成乳成分的能力密切相关。

郭惠中[8]

研究表明低剂量 β-谷甾醇对瘢痕疙瘩成纤

维细胞活性无显著影响，而高剂量β-谷甾醇表现出明

显抑制作用。王凯等[9]

研究发现随着 β-谷甾醇添加

剂量的升高，肝癌细胞Hep3B和HepG2的细胞活力逐

渐降低。与前人的研究结果一致，本研究发现低浓度

的 β-谷甾醇对 HC11细胞活力无明显影响，而高浓度

β-谷甾醇对 HC11细胞活力具有显著抑制作用，因此

后续试验选择对 HC11 细胞活力无抑制作用的 β-谷

甾醇剂量来研究其对HC11细胞泌乳功能的影响。

乳蛋白主要由酪蛋白和乳清蛋白组成[10]

。乳中含量

最高的蛋白质是酪蛋白，约占总乳蛋白的80%，主要分为

4种：αs1-酪蛋白（CSN1S1）、αs2-酪蛋白（CSN1S2）、β酪蛋白（CSN2）以及 κ-酪蛋白（CSN1S3）[11]

。乳蛋白

合成主要由 2条信号通路调控，分别是在催乳素或其

他泌乳相关细胞因子作用下从基因转录水平调节乳

蛋白合成的JAK2/STAT5信号通路和从蛋白质翻译水

平调节乳蛋白合成的 mTOR 信号通路。当催乳素等

配体与乳腺细胞表面的受体结合后激活 JAK2，活化

的 JAK2 磷酸化转录因子 STAT5，激活的 STAT5 蛋白

形成二聚体，进入细胞核调控下游乳蛋白相关基因的

表达，促进泌乳以及乳蛋白的合成[12]

。激活的 mTOR

磷酸化其下游效应因子真核细胞翻译启动因子4E结

合蛋白 1（4EBP1）和核糖体蛋白 S6 激酶 1（S6K1），被

激活的 S6K1 能增强含嘧啶基因 mRNA 的翻译效率，

调节乳蛋白的合成[13]

。而真核细胞翻译起始因子 4E

（eIF4E）与未磷酸化的 4EBP1 结合，对蛋白质的翻译

产生抑制作用，4EBP1 经 mTOR 磷酸化后会与 eIF4E

脱离，减弱 4EBP1和 eIF4E 结合对蛋白质翻译的抑制

作用，促进乳蛋白的合成[14]

。研究发现具有植物雌激

素作用的芦丁能显著提高奶牛乳腺上皮细胞CSN1S1

基因和 CSN2 基因的 mRNA 表达，对乳蛋白合成具有

促进作用[15]

。作为黄酮类植物激素的槲皮素能显著

上调产后缺乳小鼠 CSN2 基因的表达量[4]

。植物雌激

素葛根素可能通过催乳素受体激活 JAK2/STAT5a 信

号通路提高β-酪蛋白的表达，实现对小鼠乳腺泌乳过

程的调控[3]

。和雌激素、催乳素作用相似的王不留行

能提高磷酸化 STAT5、mTOR 及 S6K1 的表达，进而促

进奶牛乳腺上皮细胞乳蛋白的合成[16]

。与以往的研

究结果类似，本试验结果表明，添加低剂量 β-谷甾醇

能显著提高 CSN1S1、CSN2和 CSN3的 mRNA 水平，同

时显著上调 JAK2、STAT5、mTOR 和 S6K1 的 mRNA 表

达，但低剂量 β-谷甾醇对 4EBP1 的 mRNA 表达无显

78

SILIAO GONGYE 2023年第44卷第20期 总第689期

著影响。这些结果提示低剂量的 β-谷甾醇可能发挥

植物雌激素的作用，激活HC11细胞JAK2/STAT5通路

和mTOR通路，进而促进乳蛋白的合成。但相比较而

言，高剂量的β-谷甾醇可能会减弱乳腺上皮细胞合成

分泌乳蛋白。

SREBF1 是调节乳脂肪合成的关键转录因子，参

与调控乳脂肪合成过程中多种转运蛋白和关键酶的

表达，影响乳腺三酰甘油的合成和分泌[17]

。Ma等[18]

研

究发现 SREBF1 基因的低表达会抑制脂肪酸从头合

成相关基因ACC、FAS、SCD和脂肪酸结合蛋白FABP3

的表达 。PPARG属于核激素受体家族中的配体激活

受体，可通过调节乳腺中与脂肪酸摄取、活化、运输、

从头合成、去饱和、三酰甘油合成相关的生脂基因表

达及 SREBP1 的表达而在乳脂肪合成中发挥关键作

用[19]

。PPARGC1A是PPARG基因的共激活因子，它通

过与转录因子PPARG的互作而结合在靶基因的启动

子区，协助调节基因表达[20]

。Kadegowda 等[21]

使用

PPARG 激动剂罗格列酮处理奶牛乳腺上皮细胞，发

现脂肪酸从头合成基因（ACC、FAS、SCD）及转录调控

基因（SREBF1）的表达量均上调。乳脂肪合成的过程

也受到 mTOR 信号通路的调节，激活的 mTOR 信号通

路可以通过eIF4E、4EBP1和S6K等下游信号分子，上

调 SREBF1 和 PPARG 等转录调控因子的表达以促进

乳脂肪合成[22-23]

。研究发现类激素物质大豆异黄酮

能明显促进奶牛乳腺上皮细胞 β-酪蛋白和三酰甘油

的合成和分泌[24]

。槲皮素可以提高产后缺乳小鼠乳

腺脂肪酸合成相关基因FAS和SCD的表达[4]

。王不留

行黄酮苷能上调mTOR和SREBF1c的表达，促进奶牛

乳腺上皮细胞 β-酪蛋白和三酰甘油合成[25]

。与以前

的研究结果相似，本研究发现β-谷甾醇上调乳脂肪合

成转录因子 SREBF1、PPARG 及辅助因子 PPARGC1A

基因表达的同时，也促进了 ACC、FAS、SCD 基因的表

达，提示β-谷甾醇可能通过激活mTOR信号通路调控

以SREBF1与PPARG为核心的乳脂肪合成基因网络，

上调脂肪酸合成关键酶相关基因的表达，进而促进乳

腺三酰甘油的合成与分泌。

4 结论

β-谷甾醇可通过JAK2/STAT5和mTOR信号通路

调节酪蛋白基因 CSN1S1、CSN2和 CSN3的表达；也可

上调 PPARG 与 SREBF1 乳脂肪合成关键转录因子的

表达进而调控脂肪酸合成相关基因 ACC、FAS 和 SCD

的表达。当 β-谷甾醇添加浓度为 5~10 μmol/L时，对

小鼠乳腺上皮细胞乳蛋白和乳脂肪合成相关基因表

达的促进效果较好。

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（编辑：王博瑶，wangboyaowby@qq.com）

双 酶 法 制 备 大 米 多 肽 的 研 究

■ 顾杰瑞 刘可意 丁 烽 刘午若 文颖月 李丕武*

（齐鲁工业大学（山东省科学院）生物基材料与绿色造纸国家重点实验室，山东济南 250353）

摘 要：试验以大米蛋白为原料，利用碱性蛋白酶和中性蛋白酶复合酶解的方法，结合超声处理

技术，制备大米蛋白肽，并通过傅里叶变换红外光谱仪和氨基酸分析仪对产物性质进行分析。试验

结果表明，大米蛋白经过复合酶解后，溶解度和溶液中短肽含量都有显著提高，产物的红外出峰位置

与蛋白肽基本一致，具备多肽基本结构，并且产物具有8种必需氨基酸，氨基酸组成丰富，具有较高营

养价值。

关键词：大米蛋白；中性蛋白酶；碱性蛋白酶；傅里叶变换红外光谱；氨基酸组成

doi:10.13302/j.cnki.fi.2023.20.013

中图分类号：S816 文献标识码：A 文章编号：1001-991X（2023）20-0080-06

Study on The Preparation of Rice Peptides by Double Enzymatic Method

GU Jierui LIU Keyi DING Feng LIU Wuruo WEN Yingyue LI Piwu*

(State Key Laboratory of Biobased Materisls and Green Papermaking, Qilu University of Technology

(Shandong Academy of Sciences), Shandong Ji’nan 250353, China)

Abstract：Rice protein peptides were prepared by using alkaline protease and neutral protease complex en⁃

zymatic solutions, combined with ultrasonic treatment technology, and the properties of the products were

analyzed by Fourier infrared spectrometer and amino acid analyzer. The experimental results show that af⁃

ter the rice protein is compounded, the solubility and the content of short peptides in the solution are sig⁃

nificantly improved, the infrared peak position of the product is basically consistent with the protein pep⁃

tide, has the basic structure of the polypeptide, and

the product has eight kinds of amino acids neces⁃

sary for the human body, and the amino acid com⁃

position is abundant and has high nutritional value.

Key words：rice protein; neutral proteases; alka⁃

line proteases; Fourier transform infrared spectros⁃

copy; amino acid composition

作者简介：顾杰瑞，硕士，研究方向为生物工程。

*通讯作者：李丕武，博士，教授，硕士生导师。

收稿日期：2023-08-15

基金项目：国家重点研发计划[2019YFC1905902]；山东省

重大科技创新工程[2020CXGC010603]

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80

SILIAO GONGYE 2023年第44卷第20期 总第689期

大米是我国重要的粮食作物之一，2021年度我国

大米总产量约为1.47亿吨，占全球大米产量的29%[1]

。

大米中主要成分包括碳水化合物（75%~80%）、蛋白

质（7%~8%）和脂质（1.3%~1.8%），过去在我国食品加

工行业中多以大米为原料生产淀粉和糖浆等产品，作

为其生产副产物的大米蛋白却没有得到很好的利用，

以往多被直接用作动物饲料，少数被开发利用成相关

产品，大量的高质量蛋白资源遭到浪费。

随着近年来我国市场对蛋白粉需求量的不断扩

大，可作为食用蛋白粉直接生产原料的大米蛋白受到

社会和市场越来越多的关注[2]

。大米蛋白（rice pro⁃

tein，RP）具有易于消化吸收、低致敏性等特点，其生物

效价为77，与WHO/FAO建议的营养模型相近，是一种

优质的植源性膳食蛋白。由大米蛋白制备的大米多肽

不仅有着很高的营养价值，还具有增强机体免疫力等

作用[3]

。大米蛋白主要由清蛋白（2%~5%）、球蛋白

（2%~10%）、谷蛋白（66%~78%）和醇溶蛋白（1%~5%）

组成，其中，水不溶性的谷蛋白和醇溶蛋白占 80% 以

上[4]

。现有大米蛋白肽制备方法中最常用的是通过碱

液溶解，然后加酸沉淀的方式，但是，在高碱性环境中，

蛋白质的产率通常很低，且容易发生交叉耦合和重

排[5]

，从而降低蛋白质的营养价值。目前研究和实践方

法中多采用酶制剂对大米蛋白进行增溶改性，并对其

水解产物大米多肽进行功能特性和营养价值的开发。

马晓雨等[6]

采用胰蛋白酶法将大米蛋白酶解，使大米蛋

白的溶解和乳化性能得到明显的提高，其抗氧化能力

明显增强，并可有效地改善其功能性。Singh等[7]

利用

木瓜蛋白酶处理米糠蛋白，得到的水解产物 RBPH具

有较高的溶解度和消化率，其潜在的生物活性有一定

程度增加。许多研究者对超声辅助酶处理大米蛋白的

工艺进行了探究，如Fathi等[8]

使用超声-Alcalase联合

处理的方法水解米糠蛋白（RBP），证实了超声处理通

过影响蛋白质的结构来增强酶水解的作用，并在超声

条件（150 W，40 min）下取得最高的水解度（[ 27.35±

0.45）%]。与非水解样品相比，生成水解物的蛋白质和

肽拥有更低的分子量。还有研究者运用多酶共同作用

复合酶解等方式处理大米蛋白，如徐珍珍等[9]

以大米蛋

白为原料，采用优化后的酶解法，制备大米蛋白肽，其

蛋白质的回收率可达43.9%，且分子量较低，感官评定

及生物活性均较好。为了进一步提高酶法水解大米蛋

白的效力，本研究采用碱性蛋白酶与中性蛋白酶复合

酶解大米蛋白的工艺，结合超声预处理技术，进行大米

蛋白肽制备，检测其溶解度和溶液中短肽含量的变化，

并通过傅里叶变换红外光谱（Fourier transform infra⁃

red spectroscopy，FTIR）技术和氨基酸分析仪对复合酶

解产物进行分子结构和氨基酸成分分析，进而优化大

米蛋白肽生产工艺，为大米蛋白的深加工技术提供进

一步的研究基础。

1 材料与方法

1.1 主要材料与试剂

大米蛋白粉，山东大树达孚特膳食品有限公司；

碱性蛋白酶（酶活力单位 200 000 U/g）、中性蛋白酶

（酶活力单位 200 000 U/g），山东隆科特酶制剂有限

公司；Methyl red 甲基红指示剂、Bromocresol Green 溴

甲酚绿指示剂，北京酷来搏科技有限公司；混合氨基

酸标品，北京索莱宝科技有限公司；氢氧化钠、盐酸、

硼酸、三氯乙酸，均为国药集团化学试剂有限公司的

分析纯试剂。

1.2 主要仪器与设备

SCIENTZ-HF5000超声波循环提取机，宁波新芝

生物科技股份有限公司；ES-E系列标准分析天平，天

津市德安特传感技术有限公司；PHS-3C 精密 pH 计，

济南欧莱博生物科技有限公司；ZQZY-CF8E 三层组

合式全温振荡培养箱，上海知楚仪器有限公司；

DSHZ-300 旋转式水浴恒温振荡器，苏州培英实验设

备有限公司；德国Hermle（哈默）大容量冷冻型高速离

心机Z326K，贺默(上海)仪器科技有限公司；KDN-16C

数显温控消化炉、KDN-1000全自动定氮仪，上海新嘉

电子有限公司；FT-IRTracer100 傅里叶变换红外光

谱，日本岛津公司;日立氨基酸自动分析仪L-8900，广

州仪德精密科学仪器股份有限公司。

1.3 试验方法

1.3.1 样品制备

称取 10 g（精确至 0.000 1 g）大米蛋白粉置于

250 mL玻璃烧杯中，加入0.1 mol/L NaOH溶液120 mL，

在磁力搅拌器上搅拌15 min，混匀，配置成固液比1∶12

的大米蛋白悬液，进行超声预处理[10（] 超声处理的条

件为：在每升处理液施加超声功率 250 W、超声处理

时间10 min、超声工作间歇比1∶2、循环速率30 r/s）。

冷却至室温后，在8 000 r/min、18 ℃条件下离心15 min，

取上清液，微滤、超滤后置于4 ℃保存，此为对照组。

将超声预处理过的溶液pH调至10，在50 ℃条件

下，按质量比0.8%加入碱性蛋白酶酶解2 h，酶解过程中

保持pH不变，酶解结束后90 ℃水浴灭酶10 min，待冷却

到室温，在8 000 r/min 、18 ℃条件下离心15 min，取上清

液，微滤、超滤后置于4 ℃保存，此为单一酶解组。

81

试 验 研 究 2023年第44卷第20期 总第689期

用0.2 mol/L HCl溶液将单一酶解组初始pH调节

为 7.5，按质量比 0.8% 加入中性蛋白酶，在 50 ℃条件

下酶解 2 h，酶解过程中维持 pH 不变，复合酶解液水

浴 90 ℃灭酶 10 min，冷却至室温后，在 8 000 r/min 、

18 ℃条件下离心15 min，取上清液，微滤、超滤后置于

4 ℃保存，此为复合酶解组。

1.3.2 总氮含量的测定

总氮含量的测定采用凯氏定氮法[11]

。使用移液

器吸取 1 mL样品溶液置于 250 mL消化管底部，加入

0.4 g五水硫酸铜和 6 g无水硫酸钾，然后在通风橱内

分次沿壁缓慢加入10 mL浓硫酸，用掌心轻拍消化管

外壁，将样品和试剂小心混匀，在消化管口处放置弯

颈漏斗，静置过夜。放入消化炉中消解，首先设置

240 ℃，不盖盖子保持 30 min，然后转为 420 ℃，直至

溶液变为淡蓝色，继续保持 1 h后，将消化炉关掉，室

温冷却、待测。利用全自动凯氏定氮仪对消化管进行

蒸馏，设置程序为加入50 mL超纯水、40 mL质量分数

为 40% 的氢氧化钠溶液，反应 2 min后，开始加热，用

20 mL质量分数为2%的硼酸溶液吸收。在蒸馏过程

中，硼酸溶液会不断吸收蒸馏出的氨水。在蒸馏结束

后的硼酸吸收液中滴加1~2滴甲基红-溴甲酚绿指示

剂，混匀，用酸性滴定管向蒸馏液中加入 0.1 mol/L 盐

酸标准溶液进行滴定，直至溶液由蓝绿色变为灰红

色，并记录盐酸标准溶液的消耗体积。

X=

（V1 − V2

）× c × 0.014

V3

式中：X——试样中总氮含量（g/mL）；

V1——滴定试样时所消耗的盐酸体积（mL）；

V2——滴定空白试样时所消耗的盐酸体积（mL）；

V3——试样取用量（mL）；

c——盐酸标准滴定溶液的浓度（mol/L）；

0.014——与 1.00 mL 标准 HCl 溶液相当氮的质

量（g）。

1.3.3 大米蛋白粉溶解度测定

使用量程为10 mL玻璃量筒分别准确量取对照组、

单一酶解组和复合酶解组的大米蛋白溶液各 10 mL，

置于50 mL玻璃烧杯中，在磁力搅拌器上搅拌15 min，

混匀，将溶液转移至离心管中，以 4 200 r/min 离心

10 min，小心移取上清液 1 mL，放入消化管中，通过

1.2.2中的方法测定上清液中蛋白质含量，同时测定同

一样品总蛋白质含量[12]

。

溶解度（%）=上清液中总氮含量

样品中总氮含量

×100

1.3.4 大米蛋白溶液中短肽含量评价

用三氯乙酸氮溶指数（TCA-NSI）来衡量大米多

肽中短肽含量[13]

。使用量程为 10 mL 的玻璃量筒分

别准确称取对照组、单一酶解组和复合酶解组大米蛋

白溶液各10 mL，置于50 mL玻璃烧杯中，在磁力搅拌

器上搅拌 15 min，混匀，使用 10 mL 移液管分别准

确加入10 mL 10%的三氯乙酸（TCA），静置30 min后

4 200 r/min 离心 10 min，取上清液 2 mL 进行微量凯

氏定氮，测定其三氯乙酸氮溶指数（TCA-NSI）。

氮溶指数(%)=加入TCA后上清液总氮含量

样品中总氮含量

×100

1.3.5 大米蛋白肽的结构鉴定

将 45 ℃烘干至恒重的大米蛋白粉状样品与 KBr

按 1∶100比例在研钵中研磨混匀，压片后均匀地平铺

于 FTIR Tracer100 傅里叶红外光谱仪的金刚石检测

窗口，旋转压力旋钮至指示压力，确保试样和测试面

窗口保持紧密的接触，以减少在试验中的红外光束损

耗。记录每个样品在波数 400~4 000 cm-1

光谱范围

内以 4 cm-1

的分辨率扫描 32 次光谱的平均值。在做

样品之前须做空白干净金刚石的背景扫描。检测到

的光谱数据采用 FT-IR Tracer100光谱仪所配备的软

件 OMNIC 进行基线校正和均一化处理，最后计算光

谱差值，得到红外光谱[14]

。

1.3.6 氨基酸成分分析

将样品称重后放入玻璃水解管，并加入 6 mol/L

盐酸 10 mL，在减压下密封水解管，垂直氮吹 3 min

后，压盖密封，使用水解器在 110 ℃的加热温度下分

解 22 h。加热结束后，将水解管取出冷却至室温，在

减压下干燥成固体，去除盐酸。最后使用 0.02 mol/L

盐酸稀释至一定浓度后用作样品，最终标准浓度为

0.5 mg prot./mL。样品上机前用 0.22 μm 滤膜进行过

滤，收集滤液进行分析，进样量为 20 μL，检测器波长

为570 nm和440 nm，色谱柱型号为LCA K06/Na，流动

相为缓冲液A、缓冲液B、缓冲液D（再生液）和水，洗脱

泵流速：0.45 mL/min，衍生泵流速：0.25 mL/min，温度

为58~75 ℃梯度温控，压力为3~7 MPa[15]

。

1.3.7 数据统计分析

采用 Microsoft Excel 2010 软件对数据进行处理

和绘图，采用 SPSS 18.0 软件进行单因素分析（oneway ANOVA），用 Duncan’s法进行多重比较。P<0.05

为差异显著，P<0.01为差异极显著。

2 结果与分析

2.1 大米蛋白溶液溶解度的测定结果分析

82

SILIAO GONGYE 2023年第44卷第20期 总第689期

如图1所示，对照组溶解度为37.05%，与对照组相

比，单一酶解组溶解度（51.55%）极显著提高（P<0.01）；

复合酶解组溶解度（56.18%）极显著提高（P<0.01）。复

合酶解组溶解度显著高于单一酶解组（P<0.05）。溶解度(%)

对照组 单一酶解组 复合酶解组

80

60

40

20

0

**

** *

注：“*”表示不同组别之间溶解度差异显著（P<0.05）；“**”表示不

同组别之间溶解度差异极显著（P<0.01）；图2同。

图1 不同酶解条件大米多肽溶液溶解度

2.2 大米蛋白溶液中短肽含量的测定结果分析

如图 2 所示，对照组的短肽含量仅为 12.15%，与

对照组相比，单一酶解组短肽含量（71.44%）极显著提

高（P<0.01）；复合酶解组短肽含量（89.38%）极显著提

高（P<0.01）。复合酶解组溶解度显著高于单一酶解

组（P<0.05）。短肽含量(%)

对照组 单一酶解组 复合酶解组

120

100

80

60

40

20

0

**

** *

图2 不同酶解条件大米蛋白溶液中短肽含量

2.3 大米蛋白肽的结构分析

如图3所示，3 309.23 cm-1

附近吸收峰主要归因于

酰胺Ⅱ带的泛频和费米振动；2 892.65 cm-1

附近吸收峰

处于酰胺 B 带，归属于 C―H 伸缩振动；1 632.72 cm-1

附近吸收峰属于酰胺Ⅰ带，主要是由 80% C?O伸缩

振动所导致，表现为 α-螺旋结构；1 557.31 cm-1

附近

吸收峰主要是由 60%―H 面内弯曲振动和 40%C―N

伸缩振动所导致；1 406.90 cm-1

附近吸收峰主要归属

于―CH3和―CH2的不对称变形振动；1 240.58 cm-1

附

近吸收峰属于酰胺Ⅲ带，主要是C?O弯曲振动和C―N

伸缩振动所产生；1 097.57 cm-1

附近吸收峰可归为少

量胱氨酸氧化物。吸收强度

4 000 3 500 3 000

0.05

0.04

0.03

0.02

0.01

0

3 309.23

2 500 2 000 1 500 1 000 500

2 892.65

1 632.72

1 557.31

1 406.90

1 240.58

大米多肽

波长（cm-1

）

图3 复合酶解组大米多肽红外光谱分峰图

2.4 大米蛋白肽的氨基酸成分分析

如图4、图5所示，样品中含量最高的是谷氨酸，含

量达到了8.8 nmol/L，接下来依次是天冬氨酸、亮氨酸、

丙氨酸和甘氨酸，含量均达到了4 nmol/L以上，主要氨

基酸成分中还有丝氨酸、缬氨酸和精氨酸，含量分别为

3.631、3.309、3.181 nmol/L。除了含量排名前8位的氨

基酸之外，其他氨基酸（苏氨酸、脯氨酸、蛋氨酸、异亮氨

酸、酪氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、组氨酸）共占比28.31%。

含量(nmol/L)

天冬氨酸 丝氨酸 谷氨酸

16

14

12

10

8

6

4

2

0 甘氨酸 丙氨酸 缬氨酸 亮氨酸 精氨酸 其他氨基酸

图4 复合酶解组大米多肽中主要氨基酸成分及其含量

3 讨论

溶解度是蛋白质的一种功能特性，是在不同加工

条件下判断蛋白质潜在应用价值的关键因素，可以作

为评价指标在食品和饲料研究领域发挥重要作

83

试 验 研 究 2023年第44卷第20期 总第689期

用[16-17]

。物质溶解能力的大小往往取决于其内在组

成部分。未经处理的大米蛋白溶解度较低，与其中所

含高比例的谷蛋白和醇溶蛋白有较大关系。由图 1

可得，经过超声和碱处理的大米蛋白溶液溶解度可达

37.05%，这是因为经过超声波处理后蛋白内部结构发

生了一定的改变，增强了其溶解性，并且经过超声处

理可以使蛋白酶更好地作用于蛋白内部结构，而部分

碱溶性蛋白在碱性环境下有着更好的溶解效果。与

对照组相比，单一酶解组和复合酶解组使得大米蛋白

溶液溶解度得到进一步提升，说明碱性蛋白酶和中性

蛋白酶的复合酶解对大米蛋白的溶解度有显著提升

作用，这很大程度上是因为碱性蛋白酶的作用位点多

存在于谷蛋白和醇溶蛋白上，经过酶解作用后，使两

者的肽链被切断，结构发生改变，溶解度显著提高，而

中性蛋白酶作为碱性蛋白酶的补充，使得大米蛋白的

水解更为彻底。

三氯乙酸可以作为蛋白质沉淀剂，将大米蛋白溶

液中的可溶性蛋白质和肽链较长的肽沉淀，并用酸将

短肽溶解出来，所以可以利用三氯乙酸氮溶指数

(TCA-NSI)与相同条件下蛋白溶液溶解度的比值，来

反映短肽在蛋白溶液的溶质中所占比例，简称短肽含

量。相比于游离氨基酸，动物机体以短肽形式吸收的

氨基酸强度要更高，并且短肽这种易吸收特性有利于

动物体内肠道益生菌的繁殖和微量元素的吸收，以促

进动物体的生长发育[18]

。与对照组和单一酶解组相

比，复合酶解组中短肽在溶液溶质中所占的比例有显

著的提高，可以说明碱性蛋白酶和中性蛋白酶对大米

蛋白有着极佳的酶解效果，能够使大米蛋白内部的功

能区更多地被释放出来，从而使其具有制备各种功能

短肽的条件，增进其利用价值。

据相关研究表明[19-20]

，大米多肽可以调节人体内

多个生理过程，还具备抗衰老、增强机体免疫力等作

用。为了进一步证明经过碱性蛋白酶和中性蛋白酶

作用的大米蛋白溶液中，主要成分为具有多种生物学

功能的多肽，而非小分子氨基酸，我们利用FTIR技术

对复合酶解组中的溶质进行了分析检测，由图 3分析

可得，复合酶解组中溶质的特征峰位置与蛋白肽相吻

合[21]

，可以判定通过碱性蛋白酶和中性蛋白酶复合酶

解所制得的大米蛋白肽具有多肽的基本结构，而不是

小分子氨基酸结构。

将复合酶解组制得的产物大米多肽溶液进行氨

基酸成分分析[22]

，根据图 4、图 5 可得，经复合酶解后

的大米多肽中，具有 8 种人体必需的氨基酸，氨基酸

组成和种类十分丰富。将所测得的大米蛋白肽氨基

酸成分与豆粕蛋白、玉米蛋白相比[23]

，大米蛋白的生物

价相对较高，其营养价值可与动物源蛋白相媲美。在

保健功能方面，大米多肽还能够降低人体内的胆固醇

水平，预防高血压，并具有促进伤口愈合的功效[24-25]

。

根据上表分析，大米蛋白与豆粕蛋白、玉米蛋白相比，

三者含有的氨基酸种类齐全，均含有人体所需的 8种

必需氨基酸和 2 种半必需氨基酸。虽然大米蛋白必

需氨基酸总量较豆粕蛋白略低，但大米蛋白的氨基酸

电压(mV)

2.5 5.0 7.5

120

100

80

60

40

20

0 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5 25.0 27.5 30.0

出峰时间（min）

图5 复合酶解组大米多肽VIS1和VIS2整体色谱图

84

SILIAO GONGYE 2023年第44卷第20期 总第689期

组成较为均衡，符合世界卫生组织的建议。并且大米

蛋白具有低抗原性，更有利于生产婴幼儿食品。

本试验使用了碱性蛋白酶和中性蛋白酶复合酶

解大米蛋白，结合超声预处理技术，优化其生产工艺，

显著提高了大米多肽溶液的溶解度和短肽含量，并分

析了大米蛋白肽的分子结构和氨基酸成分，为大米蛋

白的深加工技术提供进一步的研究基础。

但本试验未对蛋白肽中所含的风味物质展开研

究，未来市场会对蛋白肽相关产品表现出极大兴趣，

相应的功能性饮料和保健饮品也会随之逐渐面世。

在未来的研究中，可以尝试多种不同的酶对植物蛋白

进行复合酶解，结合超声处理，提高产物浓度，改善其

风味和口感，并对产物多肽的功能性展开研究，生产

出更多对身体健康有益的产品，减少大米蛋白资源的

浪费，促进中国食品深加工技术的发展。

4 结论

本研究首次通过碱性蛋白酶和中性蛋白酶对大

米蛋白溶液的复合酶解作用，与超声预处理技术相结

合，工艺简单，成本低廉，使所得大米多肽溶液溶解度

提高到56.18%，且溶质中短肽含量占比高达89.38%。

通过 FTIR 技术进行检测，发现复合酶解产物红外光

谱特征峰位置与蛋白肽基本符合，具有多肽的基本结

构。氨基酸分析仪的检测结果表明，其氨基酸组成丰

富，含有 8 种必需氨基酸，大米蛋白营养价值得到了

充分地提高。

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（编辑：王博瑶，wangboyaowby@qq.com）

85

试 验 研 究 2023年第44卷第20期 总第689期

摘 要：试验旨在研究不同乳酸菌对籽鹅肠道菌群、形态结构、pH和免疫器官指数的影响。选取

28日龄、体重接近（875.23±33.18） g的健康籽鹅 90只，随机分为 3组，每组 3个重复，每个重复 10只，

公母各半。空白对照组饲喂基础饲粮，试验组饲粮为分别在基础饲粮中添加植物乳杆菌109

CFU/kg

（普通乳酸菌，试验组Ⅰ）、乳酸片球菌109

CFU/kg（自主筛选的乳酸菌，试验组Ⅱ），试验期28 d。结果

表明：①试验组Ⅱ籽鹅盲肠中乳酸菌数量极显著高于试验组Ⅰ和对照组（P<0.01），试验组Ⅱ籽鹅盲

肠中大肠杆菌数量和沙门氏菌数量均显著低于对照组（P<0.05）。②试验组Ⅱ籽鹅空肠的绒毛高度

显著高于对照组（P<0.05），隐窝深度显著低于对照组（P<0.05），绒毛高度/隐窝深度极显著高于试验

组Ⅰ和对照组（P<0.01），试验组I籽鹅空肠的绒毛高度/隐窝深度显著高于对照组（P<0.05）；试验组Ⅱ

籽鹅回肠的绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度均显著高于试验组Ⅰ和对照组（P<0.05）。③试验组Ⅱ的

空肠 pH 显著低于对照组（P<0.05）。④试验组Ⅱ籽鹅的胸腺指数和法氏囊指数均显著高于对照组

（P<0.05），试验组Ⅱ籽鹅的脾脏指数显著高于试验组Ⅰ和对照组（P<0.05）。由此可见，饲粮中添加自

主筛选的乳酸菌能够维持籽鹅肠道菌群平衡，改善其肠道形态结构，提高其免疫能力，且效果优于普

通乳酸菌。

关键词：籽鹅；乳酸菌；肠道菌群；肠道形态结构；肠道pH；免疫器官指数

doi:10.13302/j.cnki.fi.2023.20.014

中图分类号：S835.5 文献标识码：A 文章编号：1001-991X（2023）20-0086-06

Effects of Different Lactic Acid Bacteria in Dietary on Intestinal Flora, Morphology,

pH and Immune Organ Indexes of Zi Geese

BAI Changsheng1

YIN Junyi1

WANG Huan1

WANG Yan1

TIAN Qiufeng1

LIU Qiujin1

MENG Weishan2

ZHAO Jinbo3

(1. Heilongjiang Engineering Technology Research Center of Fermented with Chinese Herbs for Feed,

Branch of Animal Husbandry and Veterinary of Heilongjiang Academy of Agricultural Sciences,

Heilongjiang Qiqihar 161005, China; 2. Heilongjiang Key Laboratory of Veterinary Drugs, Branch of

Animal Husbandry and Veterinary of Heilongjiang Academy of Agricultural Sciences, Heilongjiang Qiqihar

161005, China; 3. Branch of Animal Husbandry and Veterinary of Heilongjiang Academy of

Agricultural Sciences, Heilongjiang Qiqihar 161005, China)

Abstract：This experiment was conducted to inves⁃

tigate the effects of different lactic acid bacteria

(LAB) on the intestinal flora, morphology, pH and

immune organ indexes of Zi geese. A total of 90

healthy Zi geese of 28 days old with similar body

weight of (875.23±33.18) g were selected and ran⁃

domly divided into 3 groups with 3 replicates per

group, and 10 Zi geese per replicate(half male

饲粮中添加不同乳酸菌对籽鹅肠道菌群、

形态结构、pH及免疫器官指数的影响

■ 白长胜1 尹珺伊1 王 欢1 王 岩1 田秋丰1 刘秋瑾1 孟维珊2 赵金波3

（1.黑龙江省农业科学院畜牧兽医分院，黑龙江省饲用中草药发酵工程技术研究中心，黑龙江齐齐哈尔 161005；

2.黑龙江省农业科学院畜牧兽医分院，黑龙江省兽用药物重点实验室，黑龙江齐齐哈尔 161005；

3.黑龙江省农业科学院畜牧兽医分院，黑龙江齐齐哈尔 161005）

作者简介：白长胜，硕士，工程师，研究方向为菌种选育及

微生物产品制备。

收稿日期：2023-05-18

基金项目：齐齐哈尔市科技计划创新激励项目[CNYGG2021008]；黑 龙 江 省 农 业 科 学 院 畜 牧 兽 医 分 院 自 拟 课 题

[ZNKT202022、ZNKT-202214]

86

SILIAO GONGYE 2023年第44卷第20期 总第689期

随着现代畜禽养殖业规模化、产业化程度的迅速

提高，由于抗生素或化学药物的无节制使用导致的药

物残留、动物源细菌耐药和环境污染等问题日益凸

显，对畜禽产品质量、公共卫生安全及生态环境造成

严重危害[1-2]

。从 1986 年瑞典在猪饲料中禁抗开始，

世界多国相继颁布并实施了禁止或限制抗生素或

化学药物在畜禽养殖业使用的相关法规，我国也在

2015 年和 2018 年陆续出台了禁抗的相关规定，由此

可见，减少或禁止抗生素在养殖业中使用已成为必然

趋势。但是，在新的养殖形势下，极可能对养殖水平

造成不利影响，因此，开发安全、高效及低成本的产品

替代抗生素的应用成为现代畜牧养殖行业高质量发

展的核心和关键[3-4]

。

乳酸菌是动物肠道内定植的主要微生物，具有

维持肠道菌群平衡、提高肠道健康、增强机体免疫功

能等有益生理特性[5-7]

，是抗生素或化学药物的有效

替代品之一。乳酸菌具有无毒副作用、绿色环保和

安全可靠等优点，是我国允许使用的微生物类饲料

添加剂，已广泛应用在畜禽养殖过程中。目前对乳

酸菌的应用研究更多的是猪、牛和羊等动物生产，在

鹅生产上应用研究相对较少。生产上往往将适用于

家畜的乳酸菌直接应用于鹅的生产中，而鹅的生理

特点与家畜区别较大，因此饲喂效果并不显著。王

利红[8]

从肉鸡消化道中分离筛选乳酸菌可以提高肉

鸡生产性能，冯会贤等[9]

从鸡肠道中分离乳酸菌具有

较强的抑制致病性大肠杆菌的活性。本研究将前期

分离筛选到的乳酸菌与市售乳酸菌同时饲喂籽鹅，

旨在通过饲养试验研究不同乳酸菌对籽鹅肠道菌

群、肠道形态结构、肠道 pH 及免疫器官指数的影响，

筛选到更适合家禽生产的乳酸菌。在我国养殖业绿

色发展的时代背景下，为提高家禽养殖水平提供科

学依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 试验菌种

植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）为市购普通

乳酸菌；乳酸片球菌（Pediococcus acidilactici）为自主

筛选乳酸菌，分离自酸菜汤，保存于黑龙江省农业科

and half female.) Zi geese in control group were fed a basal diet, and experimental groups were fed the

basal diets supplemented with 109

CFU/kg Lactobacillus plantarum (common LAB, group Ⅰ), 109

CFU/kg

Pediococcus acidilactici (LAB isolated in our laboratory, group Ⅱ), respectively. The experimental period

was 28 days. The results showed as follow: ① the number of LAB in group II was extremely significantly

higher than that in group I and control group (P<0.01). The number of Escherichia coli and salmonella in

group II was significantly lower than that in control group (P<0.05). ② In jejunum, the villus height

(VH) in group Ⅱ was significantly higher than that in control group (P<0.05), the crypt depth (CD) in

group Ⅱ was significantly lower than that in control group (P<0.05), and the ratio of villus height to

crypt depth (V/C) in group Ⅱ was extremely significantly higher than that in group Ⅰ and control group

(P<0.01), the ratio of villus height to crypt depth (V/C) in group Ⅰ was significantly higher than that in

control group (P<0.05), in Ileum, the villus height (VH) and the ratio of villus height to crypt depth(V/C)

in group Ⅱ were significantly higher than those in group I and control group (P< 0.05). ③ The Jejunum

pH in group Ⅱ was significantly lower than that in control group (P<0.05). ④ The thymus index and bur⁃

sa index in group Ⅱ were significantly higher than those in control group (P<0.05), and the spleen index

in group Ⅱ was significantly higher than that in group I and control group (P<0.05). In conclusion, add⁃

ing lactic acid bacteria in diets can regulate the intestinal flora balance, improve the intestinal morpholo⁃

gy decrease the intestinal pH and increase the immune organ index of Zi geese, furthermore, the effect of

LAB which isolated in our laboratory was better than that of common LAB.

Key words：Zi geese; lactic acid bacteria; intestinal flora; intestinal morphology; intestinal pH; immune

organ index

87

试 验 研 究 2023年第44卷第20期 总第689期

学院畜牧兽医分院微生物实验室。2种乳酸菌的生物

学特性见表1。

表1 乳酸菌生物学特性

菌株

植物乳杆菌

乳酸片球菌

MRS肉汤培养基培养24 h

pH

3.72±0.03

3.75±0.02

活菌数(CFU/mL)

(1.71±0.35)×109

(1.48±0.29)×109

最适生长温度(℃)

37

42

1.1.2 试验动物

黑龙江省农业科学院畜牧兽医分院选育的纯种

籽鹅。

1.1.3 基础饲粮

购自齐齐哈尔某饲料厂，基础饲粮组成及营养水

平见表2。

表2 基础饲粮组成及营养水平（风干基础）

项目

原料组成（%）

玉米

豆粕

麸皮

石粉

碳酸氢钙

食盐

DL-蛋氨酸

预混料

合计

营养水平

代谢能（MJ/kg）

粗蛋白（%）

粗纤维（%）

钙（%）

总磷（%）

赖氨酸（%）

蛋氨酸（%）

含量

61.60

23.40

9.60

1.25

0.70

0.30

0.15

3.00

100.00

11.24

17.21

2.99

0.76

0.56

0.84

0.42

注：1. 预混料为每千克饲粮提供：VA 6 000 IU、VD3 1 200 IU、VE

20 mg、VK3 0.45 mg、VB1 0.6 mg、VB2 3.6 mg、VB6 1.2 mg、

VB12 0.006 mg、烟酸 18 mg、泛酸 8.4 mg、叶酸 0.54 mg、生

物素 0.06 mg、Fe 60 mg、Cu 9 mg、Zn 60 mg、Mn 69 mg、I

0.50 mg、Se 0.10 mg；

2. 代谢能为计算值，其余营养水平为实测值。

1.2 试验设计

选用 28 日龄健康，体重（[ 875.23±33.18） g]相近

的籽鹅 90只，随机分为 3组，每组 3个重复，每个重复

10只，公母各半。对照组饲喂基础饲粮，试验组分别

在基础饲粮中添加植物乳杆菌109

CFU/kg（试验组I）、

乳酸片球菌 109

CFU/kg（试验组Ⅱ），试验期 28 d。乳

酸菌活化后接种在MRS肉汤培养基中培养24 h，按设

计量添加到饲粮中拌匀。

1.3 饲养管理

试验开始前对鹅舍和器具全面消毒，网床平养，

每个重复籽鹅置于一栏。试验鹅自由采食、饮水。在

整个试验期间避免使用任何抗生素及添加剂。按照

常规免疫程序进行免疫，其他饲养管理按常规进行，

试验期间详细记录各组试验籽鹅的健康状况。

1.4 测定指标及方法

1.4.1 肠道菌群

试验结束时，从每个重复中选取 2只体重与平均

体重接近的试验籽鹅（禁食12 h，自由饮水），屠宰，在

无菌环境中准确称取 1 g 盲肠内容物，加入灭菌的生

理盐水进行梯度稀释。采用平板菌落计数法测定肠

道内容物中乳酸菌、大肠杆菌和沙门氏菌的数量[10]

，

菌群数量以 1 g 肠道内容物中所含菌落数的对数

（lg CFU/g）表示[11]

。

1.4.2 肠道形态结构

上述屠宰的籽鹅剪取空肠和回肠组织，去除内

容物，置于甲醛固定液中，脱水包埋后制成空肠和回

肠组织石蜡切片，随后进行苏木精-伊红（H.E.）染

色。在光学显微镜下观察形态，分别测量各肠段绒

毛高度（VH）、隐窝深度（CD），并计算绒毛高度/隐窝

深度（V/C）值。

1.4.3 肠道pH

上述屠宰籽鹅的空肠、回肠和盲肠内容物，直接

使用pH计测定pH[12]

。

1.4.4 免疫器官指数

上述屠宰的籽鹅仔细摘取胸腺、脾脏和法氏囊，

并剔除脂肪和结缔组织，然后用感量为 0.01 g的电子

天平称重，计算免疫器官指数[11]

。

免疫器官指数（mg/g）=免疫器官鲜重 (mg )

宰前空腹体重 (g )

1.5 数据分析

试验数据采用 SPSS 26.0 统计软件进行 one-way

ANOVA单因素方差分析以及Duncan’s法进行组间多

重比较，P<0.05 为差异显著，P<0.01 为差异极显著。

结果用“平均值±标准差”表示。

2 结果与分析

2.1 不同乳酸菌对籽鹅肠道菌群的影响

88

SILIAO GONGYE 2023年第44卷第20期 总第689期

试验期间籽鹅的健康状况良好，无死亡。由表 3

可知，试验组Ⅱ籽鹅盲肠中的乳酸菌数量极显著高于

试验组Ⅰ和对照组（P<0.01），试验组Ⅰ籽鹅盲肠中的

乳酸菌数量高于对照组，但无显著差异（P>0.05）；试

验组Ⅱ籽鹅盲肠中的大肠杆菌数量和沙门氏菌数量

均显著低于对照组（P<0.05）；试验组Ⅰ籽鹅盲肠中的

大肠杆菌数量和沙门氏菌数量低于对照组，但无显著

差异（P>0.05）。

2.2 不同乳酸菌对籽鹅肠道形态结构的影响

由表4可知，试验组Ⅱ籽鹅空肠VH显著高于对照

组（P<0.05），CD显著低于对照组（P<0.05），V/C极显著

高于试验组Ⅰ和对照组（P<0.01），试验组Ⅰ籽鹅空肠

的 V/C 显著高于对照组（P<0.05）；试验组Ⅱ籽鹅回肠

的VH和V/C均显著高于试验组Ⅰ和对照组（P<0.05）。

表3 饲喂不同乳酸菌对籽鹅肠道菌群的影响（lg CFU/g）

项目

乳酸菌

大肠杆菌

沙门氏菌

对照组

8.26±0.12Bb

8.63±0.19a

6.78±0.21a

试验组Ⅰ

8.46±0.11Bb

8.48±0.14ab

6.65±0.18ab

试验组Ⅱ

8.87±0.16Aa

8.21±0.12b

6.32±0.14b

P值

0.003

0.041

0.047

注：同行数据肩标含有相同小写字母或无字母表示差异不显著（P>

0.05），不含有相同小写字母表示差异显著（P<0.05），不含有相

同大写字母表示差异极显著（P<0.01）；下表同。

项目

空肠

VH（μm）

CD（μm）

V/C

回肠

VH（μm）

CD（μm）

V/C

对照组

1 191.01±59.99b

226.38±13.04a

5.27±0.24Bb

943.52±33.51b

174.22±18.09

5.43±0.37b

试验组Ⅰ

1 255.17±68.80ab

215.67±8.99ab

5.82±0.22Bb

962.35±24.31b

167.18±12.32

5.67±0.34b

试验组Ⅱ

1 362.34±55.31a

196.39±9.78b

6.94±0.14Aa

1 020.61±26.99a

155.46±12.48

6.57±0.44a

P值

0.038

0.037

0.001

0.038

0.346

0.032

表4 饲喂不同乳酸菌对籽鹅肠道形态结构的影响

2.3 不同乳酸菌对籽鹅肠道pH的影响

由表5可知，试验组Ⅱ籽鹅的空肠pH显著低于对

照组（P<0.05），试验组Ⅱ籽鹅的空肠、回肠和盲肠 pH

均低于试验组Ⅰ和对照组，试验组Ⅰ籽鹅的空肠、回肠

和盲肠pH均低于对照组，但均无显著差异（P>0.05）。

表5 饲喂不同乳酸菌对籽鹅肠道pH的影响

项目

空肠

回肠

盲肠

对照组

6.31±0.09a

6.42±0.12

6.68±0.11

试验组Ⅰ

6.28±0.09ab

6.38±0.11

6.62±0.09

试验组Ⅱ

6.12±0.04b

6.20±0.09

6.51±0.08

P值

0.045

0.096

0.168

2.4 不同乳酸菌对籽鹅免疫器官指数的影响

由表 6可知，试验组Ⅱ籽鹅的胸腺指数和法氏囊

指数均显著高于对照组（P<0.05），试验组Ⅱ籽鹅的脾

脏指数显著高于试验组Ⅰ和对照组（P<0.05）。

表6 饲喂不同乳酸菌对籽鹅免疫器官指数的影响（mg/g）

项目

胸腺指数

法氏囊指数

脾脏指数

对照组

0.91±0.14b

0.58±0.08b

1.05±0.08b

试验组Ⅰ

1.07±0.13ab

0.64±0.06ab

1.14±0.05b

试验组Ⅱ

1.24±0.10a

0.75±0.06a

1.35±0.04a

P值

0.048

0.046

0.027

3 讨论

3.1 不同乳酸菌对籽鹅肠道菌群的影响

肠道菌群平衡对维持机体健康，保障宿主处于正

常生理状态十分重要[13]

。乳酸菌产生挥发性脂肪酸

和乳酸，使肠道中的 pH 和氧化还原电位（Eh）值降

低，从而间接抑制致病菌的增殖[14]

；乳酸菌还产生

H2O2、细菌素、二乙酰、乙醛等广谱抗菌物质，抑制或

杀灭链球菌、大肠杆菌和沙门氏菌等有害菌，减少内

毒素及有害物质的产生；乳酸菌能黏附在肠道黏膜

表面，形成黏膜屏障，拮抗病原菌的黏附和定植。乳

酸菌通过拮抗、抑制和定植抗力等方式抑制有害微

生物过度繁殖，维持肠道菌群动态平衡[15-16]

。李雪

莉[17]

研究表明，使用植物乳杆菌饲喂断奶仔猪，可显

著提高盲肠和结肠中的乳酸菌数量，同时显著降低

大肠杆菌数量。本试验结果表明，饲喂乳酸菌可以

提高籽鹅肠道中乳酸菌数量，降低大肠杆菌数量和

沙门氏菌数量，且试验组Ⅱ乳酸菌数量高于试验组Ⅰ，

大肠杆菌和沙门氏菌数量低于试验组Ⅰ，说明饲粮

中添加乳酸菌可以调节籽鹅肠道菌群结构平衡，改善

肠道健康，自主筛选的乳酸菌调节肠道菌群平衡效果

89

试 验 研 究 2023年第44卷第20期 总第689期

优于普通乳酸菌。

3.2 不同乳酸菌对籽鹅肠道形态结构的影响

肠道组织形态结构与肠道消化吸收功能密切相

关[18-20]

。VH 与肠道内表面积有关，CD 代表肠上皮细

胞的成熟程度，V/C 反映肠黏膜功能状态，VH、CD 和

V/C是考察肠道消化吸收能力的关键参数，VH 增加，

CD降低，V/C提高，说明肠黏膜结构改善，消化吸收能

力增强[21-24]

。乳酸菌能够促进益生菌在畜禽肠道内

黏附定植，其自身能产生许多特殊的酶系及各种维生

素，二者均有利于肠上皮细胞生长，改善肠道形态结

构。玄家洁[25]

在肉鸡饮水中添加 3% 的复合乳酸菌

菌液，其十二指肠、空肠的 VH 及 V/C 显著提高。张

彩凤[26]

研究发现，在艾拔益加（AA）肉仔鸡饲喂添加

0.1% 乳酸菌和酵母菌复合菌剂的日粮，可显著提高

空肠的 VH 和 V/C。本试验结果表明，饲喂乳酸菌可

以增加籽鹅空肠、回肠的 VH，降低 CD，提高 V/C。试

验组Ⅱ空肠V/C极显著高于试验组Ⅰ，试验组Ⅱ回肠

VH 和 V/C 均显著高于试验组Ⅰ，说明乳酸菌可以改

善籽鹅肠道黏膜形态，自主筛选的乳酸菌保护效果优

于普通乳酸菌。

3.3 不同乳酸菌对籽鹅肠道pH的影响

适宜的肠道 pH 能保证消化酶的活性，同时为肠

道益生菌提供适宜的环境[27-29]

。乳酸菌利用碳水化

合物发酵产生多种有机酸，不仅可降低肠道内pH，从

而增强肠道对营养物质的吸收，而且还能抑制肠道内

大肠杆菌等病原菌的生长和定植[14]

。谢童等[12]

使用

复合乳酸菌制剂（乳酸杆菌、乳酸和苯乳酸）饲喂黄羽

肉鸡，0.3% 添加组肉鸡腺胃 pH 显著降低，0.2% 和

0.3%添加组十二指肠pH显著降低。刘虎传等[30]

使用

益生菌制剂（屎肠球菌、植物乳杆菌和枯草芽孢杆菌）

饲喂断奶仔猪，可显著降低 28 日龄仔猪回肠内容物

pH。本试验结果表明，饲喂乳酸菌可以降低籽鹅肠

道pH。试验组Ⅱ的空肠pH显著低于对照组，试验组

Ⅱ的空肠、回肠和盲肠pH均低于试验组Ⅰ，但差异不

显著，说明自主筛选的乳酸菌降低肠道 pH 效果优于

普通乳酸菌。

3.4 不同乳酸菌对籽鹅免疫器官指数的影响

禽类体内主要的免疫器官是胸腺、脾脏和法氏

囊。胸腺和法氏囊分别是T淋巴细胞和B淋巴细胞分

化增殖的主要场所[11,31]

；脾脏参与体液免疫和细胞免

疫[32]

。免疫器官指数与机体免疫水平密切相关，免疫

器官指数升高，说明机体免疫功能增强[33-35]

。程鹏

等[36]

研究表明，肉鸡饲喂乳酸菌菌液可提高生产性能

及免疫功能，其中拌料组和饮水组可显著提高1~21日

龄胸腺指数，灌服组可显著提高 22~42 日龄胸腺指

数。本试验结果表明，饲喂乳酸菌可以提高籽鹅的免

疫器官指数。试验组Ⅱ的胸腺指数、法氏囊指数和脾

脏指数均显著高于对照组，而试验组Ⅰ的胸腺指数、

法氏囊指数和脾脏指数虽高于对照组，但差异不显

著，说明自主筛选的乳酸菌提高籽鹅免疫力的能力优

于普通乳酸菌。

每种微生物都有其最适生长温度，当环境温度

明显高于该最适温度时，微生物体内的生物活性物

质，如蛋白质、核酸及各种酶类因热力作用活性降低

或消失，导致生长代谢受到抑制甚至菌体死亡。本

研究分离的乳酸片球菌的最适生长温度为 42 ℃，与

籽鹅体温一致，可以更好地适应籽鹅肠道环境，从而

在较短时间内成为肠道优势菌群，发挥益生作用。

而目前市售普通乳酸菌主要应用在家畜养殖过程

中，其最适生长温度为 37 ℃，与家畜的体温一致。

本研究结果显示，普通乳酸菌在 42 ℃条件下，其生

长代谢受到抑制，难以充分发挥益生作用。所以本

研究分离的乳酸片球菌相比市售普通乳酸菌，可以

更好地改善籽鹅肠道菌群平衡，增强机体免疫力，提

高生长性能。

4 结论

① 饲粮中添加乳酸菌可以提高籽鹅肠道中乳酸

菌数量，降低大肠杆菌数量和沙门氏菌数量；增加籽

鹅肠道 VH，降低 CD，提高 V/C；降低籽鹅肠道 pH；提

高籽鹅的免疫器官指数。

② 自主分离乳酸菌在维持籽鹅肠道菌群平衡、

改善肠道黏膜形态及增强机体免疫力等方面的效果

优于普通乳酸菌。

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（编辑：王博瑶，wangboyaowby@qq.com）

91

问 题 探 讨 2023年第44卷第20期 总第689期

云南省滇中温暖区青贮玉米全程机械化

综合效益评价体系构建与分析

■ 郑嘉鑫1，2 胡 池1，2 付宏财1，2 王占洪3 戴冲云3 宋丽红4*

（1.云南农业大学机电工程学院，云南昆明 650201；2.云南高校高原特色现代农业装备研究中心，云南昆明 650201；

3.陆良县农业机械技术试验推广站，云南曲靖 655600；4.云南农业大学经济管理学院，云南昆明 650201）

摘 要：文章旨在解决云南省青贮玉米主产区机械化生产缺少综合效益评价体系的问题，基于

Delphi法与AHP法，通过专家咨询、走访调研、数据采集等方式，构建了以保护农业生态环境、提高农

业机械化综合效益为目标的青贮玉米全程机械化综合效益评价体系。该体系构建了 3 个一级指

标、7 个二级指标和 17个三级指标，确定了综合效益指标权重与分值。以该区域典型合作社青贮玉

米全程机械化模式进行验证，并针对合作社得分给予诊断性意见。通过分析得到：一级指标的权重

比为6∶2∶2，满分值为100分；经济效益二级指标单位面积纯收入、人均年收入的权重比为1∶1；生

态效益二级指标资源消耗与保护性耕作权重比为3∶1；社会效益二级指标社会贡献每亩用工量、抗

逆减灾、推广度之间的权重比为4∶3∶3；通过计算陆良县召夸农村机械农田作物专业合作社得分为

88.2分。该研究对青贮玉米的生产与发展具有一定的指导作用，也为政府及企业提供有益参考。

关键词：青贮玉米；滇中温暖区；全程机械化；综合效益；评价体系

doi:10.13302/j.cnki.fi.2023.20.015

中图分类号：S817.19 文献标识码：A 文章编号：1001-991X（2023）20-0092-05

Construction and Analysis of a Comprehensive Benefit Assessment System for Silage Corn

Full-Course Mechanization in Middle Yunnan Temperate Zone

ZHENG Jiaxin1,2

HU Chi1,2

FU Hongcai1,2

WANG Zhanhong3

DAI Chongyun3

SONG Lihong4*

(1. Faculty of Mechanical & Electrical Engineering, Yunnan Agricultural University, Yunnan Kunming

650201, China; 2. Plateau-Characteristic Modern Agricultural Equipment Research Center for Colleges and

Universities in Yunnan, Yunnan Kunming 650201, China; 3. Luliang County Agricultural Machinery

Technology Testing Promotion Station, Yunnan Qujing 655600, China; 4. Faculty of Economic

Management, Yunnan Agricultural University, Yunnan Kunming 650201, China)

Abstract：This study is targeted at the lack of comprehensive benefit assessment systems during mecha⁃

nized production in the silage corn zone of Yunnan. Based on Delphi method, AHP, expert consultation,

interview, investigation and data collection, a silage corn full-course mechanized comprehensive benefit

assessment system was built, which was aimed at protecting agricultural ecoenvironment and improving

the comprehensive benefits of agricultural mechanization. This system involved three first-level indices,

seven second-level indices and seventeen third-level indices, and clarified the weights and scores of the

comprehensive benefit indices. Then the system was validated with the silage corn full-course mechaniza⁃

tion mode in a representative cooperative in

this zone, and the scores of the cooperative

were rendered with diagnostic suggestions.

Analysis showed the weight ratio of the firstlevel indices was 6∶2∶2, and the full mark

score was 100. Among the second-level indi⁃

ces, the weight ratio of net income per unit

area∶ annual per capita income was 1∶ 1,

and the weight ratio of resource consump⁃

tion∶ conservation tillage was 3∶ 1. More⁃

作者简介：郑嘉鑫，博士，副教授，硕士生导师，研究方向

为高原特色农业全程机械化及仿生智能农业装备。

*通讯作者：宋丽红，博士，高级经济师。

收稿日期：2023-08-21

基金项目：云南省重大科技专项-云南绿色食品国际合

作研究中心项目“绿色新型饲料与养殖产业化关键技术研究

与示范”[2019ZG00902-03];云南省农业农村厅科技专项“云

南省玉米全程机械化生产模式研究”[K2420220021]

92

SILIAO GONGYE 2023年第44卷第20期 总第689期

over, the weight ratio of labor use per unit area in social contribution∶resistance and disaster reduction :

promotion degree was 4∶3∶3. The score of Luliang County Zhaokua Rural Machinery Farmland Crop

Professional Cooperative was 88.2. This study offers some guidance for production and development of si⁃

lage corn, and provides reference for governments and enterprises.

Key words：silage corn; Middle Yunnan temperate zone; full-course mechanization; comprehensive ben⁃

efits; assessment system

青贮玉米是我国重要的动物饲料和生物质能源、

发酵剂等工业原料，也是云南省重要的玉米生产类型

及城乡居民的重要经济来源[1]

。目前云南省青贮玉米

种植模式多样，使得青贮玉米农机与农艺结合形式多

样、经济效益分析方法和评价体系不完备，对云南地

区青贮玉米全程机械化和农民增产增收有很大的影

响[2]

。青贮玉米全程机械化是指运用先进适用的农业

机械装备代替人力进行青贮玉米大田生产，不断提高

青贮玉米的生产技术水平和经济效益、生态效益的过

程。大田生产主要包括耕整地、播种、施肥、田间管

理、收获等关键环节。在评价体系构建的相关研究

中，李名威等[3]

针对河北省小麦—玉米节水丰产增效技

术，建立了新的社会效益评价模型，证明了评价指标体

系的可行性；范成方等[4]

通过分析种粮成本、商品率等关

系，以山东省玉米和小麦种植为例进行经济效益分析，

研究表明小麦种植的经济效益高于玉米的种植；胡桧

等[5]

通过分析山地丘陵地区玉米小麦种植模式和作业机

具，证明复式耕种技术对山地丘陵地区的玉米小麦种植

较为适宜；甄文超等[6]

为使河北地区土壤生产力具有可

持续性，探究了一种新型小麦-玉米轮作种植模式；姚艳

春等[7]

通过分析平原地区玉米-小麦轮作成本、土地流

转等费用，建立一套新的小麦-玉米种植模式。

本研究构建了一种适用于云南省青贮玉米主产区

滇中温暖区的青贮玉米全程机械化生产的综合效益评

价体系，以滇中温暖区种植青贮玉米的农机合作社及高

级职称以上的农机、农业专家调研为基准，基于Delphi

法与AHP法构建综合效益评价体系；根据各层次的单

排序进行加权综合，计算各指标的权重及分值；以云南

省陆良县召夸农村机械农田作物专业合作社为例进行综

合效益评价，并展开分析讨论。证明本评价体系的可行

性。为云南省滇中温暖区及其他丘陵山区青贮玉米全程

机械化率的提高、农民增收提供一定的参考价值[8-10]

。

1 数据来源

为保证本评价体系的合理性，本研究采用实地调

研的方法进行获取数据。调研地区为昆明、曲靖、楚

雄、大理等多个地区。收集整理青贮玉米耕、种、管、

收等各个环节的数据后，以曲靖、昆明这两个滇中温

暖区的 4家合作社为例，对其经济、生态、社会及综合

效益进行分析。

2 综合效益评价体系构建

2.1 评价指标选取原则[11]

①定量与变量相结合原则；②定量与定性相结合

原则；③易操作性原则。

2.2 综合效益指标与权重的确定

根据所调研地区的原始数据，采用 Delphi 法，向

云南省研究员、合作社负责人、涉农高校相关教授等

30位专业人员召开座谈会、填写调查问卷。根据专业

人员的意见以及相关参考文献[12-14]

采用 AHP 法确定

各级指标及权重。

确定权重的基本步骤如下：①建立层次结构Del⁃

phi法与 AHP 法模型。在本文研究中，该模型就是青

贮玉米全程机械化技术模式综合效益评价指标构成

框架；②运用 Delphi 法构建判断矩阵，以上一层次的

指标M为准则，对2个指标Ai

和Aj

的相对重要性作判

断矩阵通式，如表1所示。

所谓层次单排序是指对于上一层某因素而言，本

层次各因素的重要性的排序。其计算方法[15]

如下。

第一步，将判断矩阵每列进行归一化：

Wi

= ai1 ai2 ai3 ai4

n (i=1,2,3,4...n)

第二步，对向量 

W=（W1,W2,W3...Wn

）t

进行正规化

处理，即W′i =Wi ∑i = 1

n

W 2

i 则

W′=（W1',W2',W3'...Wn'）

即为所求的单层次排序向量（权重向量）。

第三步，计算最大特征值，求一致性指标和随机

一致性比值：

λ=1

n ∑i = 1

n BWi

n - 1

一致性指标:

CI=

λmax - n

n - 1

一致性比值:

CR=CI/RI

若 CR<0.1，则判断矩阵的一致性较为满意。若

CR>0.1则需要调整判断值[16]

。

93

问 题 探 讨 2023年第44卷第20期 总第689期

检验一致性原因：由于人们认识问题的多样性，

多个元素两两比较时并没有固定的参照物，那么得出

的最终结果可能会出现 A>B，B 大于 C，但是 A 小于 C

的判断发生。因此当判断矩阵构建完成后要进行一

致性检验来判断矩阵的正确性[17]

。

平均一致性指标RI值如表2所示。

表2 平均一致性指标RI值

1

0.00

2

0.00

3

0.58

4

0.90

5

1.12

6

1.24

7

1.32

8

1.41

9

1.45

设置社会、经济、生态为本体系的一级指标[18]

；经济

指标下又设置有综合机械化率和经济收益2个二级指

标；综合机械化率有耕地、整地、播种、施肥、田间管理、

收获6个三级指标；经济收益下设有人均年收入、单位

面积纯收入2个三级指标；生态效益分为保护性耕作及

资源消耗 2个二级指标，资源消耗下设置有肥料使用

量、病虫害防治2个二级指标；保护性耕作下设1个三级

指标少耕免耕；社会效益设置3个二级指标：社会贡献

每亩用工量、抗逆减灾、推广度，社会贡献每亩用工量下

设2个三级指标普通劳动力、技术人员；抗逆减灾下设

置有提升品质、新技术使用量2个三级指标；推广度下

设2个三级指标辐射面积、培养培训人员。

本体系通过互相比较不同因素之间的权重，根据

专家打分情况建立判断矩阵，进而测算出经济效益、

生态效益、社会效益之间的权重占比为 W1∶W2∶

W3=6∶2∶2，进而对体系中各二、三级指标之间的权

重进行计算。

3 层次总排序

根据各层次的单排序进行加权综合，计算同一层

的指标对于上级指标的权重，计算结果如表3所示。

3.1 综合效益指标分值确定

针对综合经济指标权重表经过表决。根据下级

各权重占比资源消耗（S1

）∶保护性耕作（S2

）=3∶1，社

会贡献每亩用工量（S3）∶抗逆减灾（S4）∶推广度

（S5）≈20∶15∶14；三级指标权重比例确定采用与二

级指标权重比例同样方法。采用满分为 100分，根据

不同权重计算出各项指标所占分值，作为标准用来检

验周边青贮玉米全程机械化所得分值是否合格从而

进行针对性的改进。

表3 综合经济指标权重

一级指标

经济效益

生态效益

社会效益

权重

0.600

0.200

0.200

二级指标

经济收益

综合机械化率

资源消耗

保护性耕作

社会贡献

每亩用工量

抗逆减灾

推广度

权重

0.500

0.500

0.750

0.250

0.409

0.311

0.280

三级指标

单位面积纯收入

人均年收入

耕地

整地

播种

施肥

田间管理

收获

病虫害防治

肥料使用量

少耕免耕

普通劳动力

技术人员

新技术使用量

品质提升

辐射面积

培养培训人员

权重

0.500

0.500

0.137

0.104

0.186

0.113

0.216

0.244

0.800

0.200

1.000

0.500

0.500

0.800

0.200

0.667

0.333

经济效益类指标：本研究主要针对云南滇中温暖

区，以丘陵山区为主，故设置经济指标总分值为60分，

经济指标下设置有综合机械化率、经济收益两个二级

指标；综合机械化率满分为30分，基准值为24分。下

设 6 个三级指标分别为耕地、整地、播种、施肥、田间

管理、收获，各项满分分别为5分，基准分值均为0分。

经济收益满分与基准值与综合机械化率分值设置相

同；经济收益下设置有人均年收入和单位面积纯收

入，基准值均为12分，满分为15分。

生态效益指标：生态效益指标满分设置为 20分；

由二级指标保护性耕作和资源消耗构成，其中保护性

耕作满分 5 分，下设置少耕免耕三级指标，满分为 5

分；资源消耗满分为 15 分，设置肥料使用量、病虫害

防治两个三级指标；病虫害防治设置分值为 15分，肥

料使用量设置为5分。

表1 判断矩阵通式

M

1

3

5

7

9

2、4、6、8

倒数

含义

表示两个元素相比，两者具有同样的重要性

表示两个元素相比，前者表现得比后者稍微重要

表示两个元素相比，前者表现得比后者显著重要

表示两个元素相比，前者表现得比后者尤为重要

表示两个元素相比，前者表现得比后者非常重要

表示两个元素的重要性比较为上述相邻两个判断的中间值

若元素i和元素j的重要性之比为aij，那么元素j与元素i的重要性之比为aji=1/aij

94

SILIAO GONGYE 2023年第44卷第20期 总第689期

社会效益指标：社会效益指标满分设置为 20分，

又分为社会贡献每亩用工量（8分）、抗逆减灾（6分）、

推广度（6分）3个二级指标。社会贡献每亩用工量又

分为普通劳动力（4分）和技术人员（4分）两个三级指

标；抗逆减灾指标（6 分）由新技术使用量（4.8 分）、品

质提升（1.2 分）两个三级指标组成；二级指标推广度

满分值为6分，其下面设置有辐射面积（4分）、培养培

训人员（2分）两个三级指标。选取云南滇中温暖区的

四家合作社进行数值代入，其数值在上下小范围变

动，具有一定代表性。

3.2 案例分析

以云南省陆良县召夸农村机械农田作物专业合作

社为例（以下简称陆良召夸合作社），此合作社采用自

有机械深松，机械播种，除草杀虫相结合，自有机械收

获的种植模式。从上述经济、生态、社会3种效益出发

进行评判，得分如表4所示，评分原则如表5所示。

表4 云南省召夸农村机械农用作物专业合作社综合效益得分

一级指标

经济效益

生态效益

社会效益

满分(分)

60

20

20

二级指标

经济收益

综合机械化率

资源消耗

保护性耕作

社会贡献

每亩用工量

抗逆减灾

推广度

三级指标

单位面积纯收入

人均年收入

耕地

整地

播种

施肥

田间管理

收获

病虫害防治

肥料使用量

少耕免耕

普通劳动力

技术人员

新技术使用量

品质提升

辐射面积

培养培训人员

满分(分)

15

15

5

5

5

5

5

5

12

3

5

4

4

4.8

1.2

4

2

基准分值(分)

12

12

0

0

0

0

0

0

9.6

2.4

4

3.2

3.2

3.8

1

3.2

1.6

评分标准

以6 000元/ hm²为基准，每增加或减少

300元/hm²，分值以1分为单位上下增减

以30 000元为基准，每增加或减少5 000元，

分值以1分为单位上下增减

在作物种植过程耕地环节中，采用机械化

耕作得满分，否则得0分

在作物种植过程整地的环节中，采用机械化

整地得满分，否则得0分

在作物种植过程播种的环节中，采用机械化

播种得满分，否则得0分

在作物种植过程施肥的环节中，采用机械化

施肥得满分，否则得0分

在作物种植过程田间管理的环节中，采用

机械化田间管理得满分，否则得0分

在作物种植过程收获的环节中，采用机械

化收获得满分，否则得0分

采用少量农药，为最理想状态得满分；农药使用量

为最近当地三年的均值，得中档分；农药使用量

大于当地三年的均值，得低档分

每公顷施肥量根据当地施肥量均值，以减少土地

污染判定，一般青贮玉米施肥总量取1 200 kg/hm²

为基准值，每增30 kg/hm²的化肥使用，

分值减少0.1分

保护性耕作（少免耕）得满分，否则根据整地

面积相应减少分数

雇佣田间劳动人员，以被调研单位近三年

劳动力人员均值为基准，相同的种植面积，

雇佣的田间劳动人员越少，分值越高

雇佣田间技术人员，以被调研单位近三年技术人

员均值为基准。合作社每增加1名技术服务人

员，服务自身和相邻合作社加0.5分

技术使用量使用3项时，得满分

选用经国家、省鉴定青贮玉米的优良品种，

如青贮玉米抗旱、高产等优质品种，得1分

辐射面积以选择打分的单位以及带动周边地区使

用该技模式，种植面积以30 000 hm²为基准

培养培训人员，包括培养研究生、农业技术人员、

管理人员等多种人员，以被调研单位近三年

培训人员均值为基准

4 陆良召夸合作社经济效益分析与讨论

4.1 陆良召夸合作社经济效益分析

陆良召夸合作社经济收益经过分析，人均年收入

得分为13分，单位面积纯收入为12分，经济收益总得

分为 25分，略高于均值，这是由于该合作社使用自有

机械进行青贮玉米的耕种管收作业从而使得该合作

社有较高的经济效益得分。

4.2 陆良召夸合作社生态效益分析

95

问 题 探 讨 2023年第44卷第20期 总第689期

通过计算，该合作社生态效益总得分为 16分，肥

料使用量得分为2.8分，病虫害防治得分为10.2分，资

源消耗得分为 13 分，少耕免耕得分为 3 分；该合作社

生态效益总分略高于平均分，表明该合作社注意化肥

农药的使用，资源利用率较高，土壤保护较好，但是病

虫害的防护能力应适当提高。

4.3 陆良召夸社会效益分析

该合作社抗逆减灾的得分为5.5分，推广度得分为

4.7分，经济效益总得分为17.2分远高于平均值。表明

该合作社在抗逆减灾、技术推广等方面优于其他同行。

建议陆良县召夸合作社更加注重技术推广，提高

病虫害防范与管理能力，加强有机肥的使用量，提高

经济效益得分。

5 结论

① 基于 Delphi 法与 AHP 法，依据云南省滇中温

暖区青贮玉米种植区农机合作社数据，根据专家评价

与层次分析，设定社会、经济、生态效益 3个一级指标

以及经济收益、综合机械化率、资源消耗、保护性耕

作、社会贡献每亩用工量、抗逆减灾、推广度 7个二级

指标和17个3级指标。建立各自的权重比分，构建了

一套针对云南省滇中温暖区的青贮玉米种植区全程

机械化经济效益评价体系。

② 根据建立的经济效益评价体系，以陆良县召

夸农村机械农田作物专业合作社为例，进行综合效益

评价打分，并与当地 4家合作社的各项分值进行对比

分析，表明各合作社之间打分在平均值上下小范围浮

动，具有一定的代表性。

研究结论符合实际，给出的评价方法简单易行，

对其他合作社进行理论验证，并有指导意义。构建的

综合效益评价体系能较好地反映云南省滇中温暖区

青贮玉米种植机械化合作社、农户等经营主体发展现

状，在一定程度上对西南地区农业机械生产与研发企

业等具有指导意义，对丘陵山区合作社青贮玉米种植

与机械化作业有指导作用，对我国农业机械化的发展

以及农民增收具有参考价值。本研究的统计方法需

要大量样本和反复修正，可通过增加省内外行业专家

调研数据量，反复修正综合效益指标与权重，进一步

改进、完善评价体系。

参考文献

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表5 综合效益指标及评分标准

一级指标

经济效益

生态效益

社会效益

二级指标

经济收益

综合机械化率

资源消耗

保护性耕作

社会贡献每亩用工量

抗逆减灾

推广度

得分(分)

25

30

13

3

7

5.5

4.7

4家调研合作社均值(分)

21

25

12

3

5

4.8

4.4

三级指标

单位面积纯收入

年人均收入

耕地

整地

播种

施肥

田间管理

收获

病虫害防治

肥料施用量

少耕免耕

普通劳动力

技术人员

品质提升

新技术使用量

辐射面积

培养培训人员

得分(分)

12

13

5

5

5

5

5

5

10.2

2.8

3

4

3

1

4.5

3

1.7

调研合作社均值(分)

10

11

5

5

5

5

0

5

10.5

1.5

3

3

2

0.8

4

2.9

1.5

96

SILIAO GONGYE 2023年第44卷第20期 总第689期

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（编辑：王博瑶，wangboyaowby@qq.com）

金 鱼 饲 料 营 养 成 分 比 较

■ 范 瑾 汪佩佩 李京鸿 申月晨 任春燕*

（甘肃农业大学动物科学技术学院，甘肃兰州 730070）

摘 要:为了掌握目前市面上常见的金鱼饲料中常规营养成分含量以及水中稳定性的变化情况，

从市场上选择了11种金鱼常规饲料（浮性饲料）进行营养成分含量及其水中稳定性检测，包括对饲料

中的干物质、粗纤维、粗蛋白、粗灰分、钙、磷含量及其水中稳定性的检测。每个试样均做了两次试验,

检测结果均遵循《饲料检测结果判定的允许误差》（GB/T 18823—2010），以两个重复试验的算术平均

数作为最终结果。试验结果表明,当前市面上常见金鱼饲料营养成分的含水量<9%，粗灰分<16%，粗

脂肪<15%，粗蛋白>25%，粗纤维<12%，钙<4%，磷<3%。一般要求鱼饲料浸泡 30 min，水中散失率<

20%，试验得出，市面上常见的11种饲料基本符合该标准。

关键词：金鱼；配合饲料；水中稳定性；概略养分；快速测试技术

doi:10.13302/j.cnki.fi.2023.20.016

中图分类号：S816.11 文献标识码：A 文章编号：1001-991X（2023）20-0097-05

Goldfish Feed Nutritional Composition Comparison

FAN Jin WANG Peipei LI Jinghong SHEN Yuechen REN Chunyan*

(Major in Aquaculture in the College of Animal Science and Technology of Gansu Agricultural University,

Gansu Lanzhou 730070, China)

Abstract：In order to grasp the market commonly used conventional nutrients content in the fish feed, and

the change of the water stability, selected 11 kinds of conventional goldfish feed (floating feed) from the mar⁃

ket to analyze their nutrient content and water stability, including the dry matter, crude fiber, crude protein,

crude ash, calcium phosphorus content and water stability. Each sample was tested twice, and the test re⁃

sults folbwed the \"Allowable Error for Determination of feed Detection Results\" (GB/T 18823—2010). The

arithmetic mean of two parallel experiments was taken as the final result. The experimental results showed

that the moisture content of commonly available fish feeds in the market is < 9%, crude ash is < 16%, crude

fat is < 15%, crude protein is > 25%, crude fiber

is < 12%, calcium is < 4%, and phosphorus is <

3%. Generally, fish feed is required to be soaked

for 30 minutes, and the water loss rate is 20%. The

test results showed that the 11 commonly available

fish feeds basically meet this standard.

Key words: goldfish; formulated feed; water sta⁃

bility; summary nutrient; rapid testing technology

作者简介：范瑾，研究方向为动物科学。

*通讯作者：任春燕，讲师。

收稿日期：2023-06-15

基金项目:甘肃农业大学学生创新创业训练计划项目

[202204039]；公招博士科研启动金[GAU-KYQD-2018-28]；甘

肃省青年科技基金计划[20JR5RA01]

?????????????????????????????????????????????????

97

特 种 养 殖 2023年第44卷第20期 总第689期

金鱼起源于我国浙江地区，金鱼的祖先是野生的

鲫鱼，金鱼先是生存在野外，后因其具有观赏性，逐渐

转变为家养动物，通过一代代养殖人对金鱼的人工选

择和定向培育，逐渐繁衍出了多种多样的金鱼（多达

400种以上）。目前将这些众多品种的金鱼大致分为

四大类，分别为草种、文种、龙蛋和蛋种[1]

。金鱼体色

艳丽，泳姿优美动人，很受欢迎且养殖人数很多的一

种观赏鱼。然而目前来说，我国对金鱼营养和饲料的

研究较缺乏。因而我们很有必要对金鱼的营养需求

进行相关的研究，并建立观赏鱼饲料产品基地。

金鱼虽是一种经人类完全驯化的杂食性鱼类，但

是，饲养环境、饲料营养成分、饲料投喂量、人为管理

等因素也直接关系到金鱼的正常生长发育、体色表

达、繁殖性能以及抗病力，这决定了金鱼是否可以长

期作为一种人们喜闻乐见的观赏鱼的存在。因此，在

制作金鱼饲料配方时，应合理添加符合金鱼生长需求

的脂肪、维生素、蛋白质和微量元素等。文章主要研究

当地花鸟鱼虫市场上不同品牌金鱼饲料之间的营养成

分含量差异和其水中稳定性，为消费者选择金鱼饲料

时提供一些指导性和参考性的建议。

1 材料与方法

1.1 材料选择与样品处理

选取当地市场上常见的不同品牌金鱼饲料（浮性

饲料）共 11 种，产地为全国不同厂家。在试验期间，

饲料处于阴凉通风干燥处且密封完整，保证所有饲料

都在保质期内。

在采购的饲料原始样品中，取20 g样品，粉碎后过

40目筛，将过筛后的样品装入密封袋内放置阴凉处保存。

用于测定水中稳定性的样品不做任何处理，在阴

凉通风干燥处保存。

1.2 测定方法

采用GB 6435—2014直接干燥法测定水分含量，采

用 GB 6432—2018 凯氏定氮法测定粗蛋白含量，采

用 GB 6433—2006索氏抽提法测定粗脂肪含量，采用

GB 6438—2007 高温灼烧法测定粗灰分含量，采用

GB 6364—2006酸碱法测定粗纤维含量，采用GB 6436—

2002高锰酸钾法测定钙含量，采用GB 6437—2002分光

光度法测定磷含量。采用干燥称重法测定水中稳定性。

干燥称重法测定金鱼饲料水中稳定性，其主要操作过程

为：准确称取5 g金鱼饲料，将其置于25 ℃左右淡水中浸

泡2 h，期间进行均匀振动，模仿自然水体环境，后将其取

出，置于105 ℃烘干箱中烘干至恒重。另取未浸泡的饲

料测定其水分含量，最后进行计算。主要分析仪器为电

热恒温鼓风干燥箱，全自动凯氏定氮仪，马弗炉，紫外分

光光度计，分析天平，电热恒温水浴锅，索氏脂肪提取器。

1.3 数据统计

每个样品的各指标的试验测定均设两个重复，以

其两个重复的算术平均数作为最终结果。试验数据

采用 SPSS 19.0 软件进行统计分析，结果以“平均值±

标准误”表示。

2 试验结果与分析

由表 1可知。当前市场常见饲料的含水量<9%、

粗蛋白>25%、粗灰分<16%、粗脂肪<15%、粗纤维<

12%、钙<4%、磷<3%。

表1 市场常见金鱼饲料成分含量测定结果(DM,%)

阶段

稚鱼

幼鱼

全阶段

水分

5.29±0.15

5.14±0.05

6.42±0.24

5.93±0.03

4.75±0.07

5.88±0.04

5.65±0.01

8.41±0.04

5.57±0.03

6.01±0.05

3.72±0.08

粗蛋白

51.82±0.16

44.16±0.06

30.53±0.05

25.54±0.15

29.46±0.12

27.56±0.19

26.38±0.16

27.78±0.03

28.31±0.04

25.49±0.14

42.64±0.18

粗纤维

10.24±0.09

8.45±0.01

2.02±0.07

8.59±0.08

3.52±0.07

11.82±0.07

5.39±0.14

7.38±0.04

6.68±0.03

8.47±0.11

5.78±0.12

粗灰分

12.78±0.11

8.39±0.04

15.07±0.17

8.26±0.02

9.38±0.05

9.94±0.03

15.91±0.01

10.57±0.03

9.21±0.02

8.42±0.03

9.78±0.05

粗脂肪

13.32±0.01

11.93±0.06

3.32±0.08

3.55±0.02

5.46±0.17

4.95±0.03

3.78±0.06

5.23±0.20

3.61±0.04

4.30±0.10

14.77±0.16

钙

2.05±0.02

2.97±0.03

1.54±0.26

2.51±0.05

2.13±0.09

2.29±0.04

3.55±0.13

2.07±0.06

2.85±0.16

2.14±0.02

3.44±0.37

磷

1.74±0.03

2.53±0.04

1.52±0.01

1.98±0.23

1.53±0.36

2.16±0.16

2.57±0.03

1.95±0.04

2.74±0.16

2.01±0.02

1.88±0.05

按照适宜金鱼不同成长阶段将其各个营养成分

进行显著性分析，结果见表2。

由表2可知，在3种不同规格的金鱼饲料中，其中

稚鱼饲料中的蛋白质含量显著高于其他生长阶段金

鱼饲料蛋白质含量（P<0.05），而其他营养成分含量差

异不显著（P>0.05）。

市场中常见饲料散失率结果见表3。市面上常见

鱼饲料水中稳定性要求为鱼饲料浸泡30 min，水中散

失率<20%。由表 3 可知，市面上常售的 11 种饲料均

基本符合该要求。

3 讨论

3.1 水分含量

水分是影响饲料品质的重要原因，其贯穿于饲料

销售、贮藏以及整个加工过程中，其中保证最终饲料

98

SILIAO GONGYE 2023年第44卷第20期 总第689期

表2 不同阶段金鱼饲料各营养成分比较（DM，%）

阶段

稚鱼

幼鱼

全阶段

水分

5.22±0.11

5.75±0.71

5.87±1.67

粗蛋白

47.99±5.42a

28.27±2.20b

30.12±7.09b

粗纤维

9.35±1.27

6.49±4.53

6.74±1.24

粗灰分

10.59±3.10

10.66±3.02

10.78±2.97

粗脂肪

12.63±0.98

4.32±1.05

6.34±4.76

钙

2.52±0.65

2.12±0.42

2.81±0.70

磷

2.14±0.56

1.80±0.32

2.23±0.40

注：同列数据肩标不含有相同字母表示差异显著（P<0.05），含有相同字母或无字母表示差异不显著（P>0.05）。

产品质量的关键之一是有效合理的控制各个工序的

饲料含水率[2]

。当饲料水分含量超过规定标准时，会

让饲料中的营养成分占比相对减少，并且会影响饲料

的加工、销售与储存，饲料含水率过高易使饲料产品

在贮存过程中发生霉变，金鱼采食霉变饲料，会使机

体发生霉菌中毒，更甚者会导致死亡。饲料含水量过

高，金鱼在采食的同时，饮水量也会上升，采食量会下

降，影响金鱼的生长性能。然而当饲料产品的水分含

量过低时，又会使企业的经济效益下降，水分含量不

均易造成产品质量的不稳定。大多数情况下动物饲

料中水分含量越多，则越有利于微生物的生长繁殖，

而微生物越多时，饲料的安全性就会越差[3]

。

表3 市场常见金鱼饲料水中散失率测定结果（DM，%）

稚鱼

18.53±0.09

13.17±0.03

幼鱼

8.74±0.07

21.61±0.08

18.57±0.09

21.04±0.01

全阶段

20.13±0.19

16.97±0.07

23.45±0.39

21.04±0.01

13.17±0.03

在饲料生产过程中，有许多工序点需要测量水含

量，以方便生产过程的自动控制。例如，制粒机前原

料粉的含水量测定对制粒加水的控制具有重要的参

考作用。制粒后，进料颗粒需要烘干。干燥过程中含

量的在线测量是干燥过程自动控制的重要环节。当

成品被生产出后，成品包装的质量检测也需要通过水

分检测，以达到其最佳含水量点，提高经济效益。所

以，饲料产品质量和饲料水分含量之间关系紧密，其

水分含量往往决定其产品质量和品牌口碑。市面上

常使用的关于一般加工后水产颗粒饲料含水率的标

准 是 低 于 12.5%，微 粒 饲 料 的 水 分 含 量 应 不 高 于

8%[4]

。由此结论对比表 1试验结果可知，该批市场上

常见饲料含水量在标准值范围内。

3.2 粗蛋白含量

在金鱼生长过程中必不可少的营养物质是蛋白

质，它不仅是影响金鱼发育的核心元素也是其关键因

素。它提供了金鱼在生长发育中合成蛋白质所必需

的氨基酸，还提供了生长代谢过程中所需能量，而且

其他任何一种营养成分都不能代替蛋白质在生物生

长发育过程中的重要作用。蛋白质在动物整个生命周

期中不可或缺，但其含量应控制在合理范围内。含量

过低，无法满足正常生命活动需求，会导致生长缓慢以

至于暂停发育；反之含量过高时，脱氨基会将未利用的

蛋白质排出，进入养殖环境，会造成养殖环境被污染，

在一定程度上也浪费了饲料，降低了经济效益。

金鱼作为杂食性观赏鱼，需要的蛋白质含量偏

低，一般在 35% 左右即可。张璐[5]

研究证明，金鱼在

仔稚鱼时期所需蛋白质比其他生长时期所需蛋白质

水平更高。Fiogbé等[6]

研究了金鱼稚鱼对必需氨基酸

的需求量，发现它远高于罗非鱼幼鱼的需求量，这证

明了金鱼在仔稚鱼时期其消化系统可能缺少消化大

分子蛋白的酶。本试验发现，稚鱼时期对蛋白质的需

求高于成鱼时期，其也反映了不同规格的金鱼对饲料

中蛋白质水平需求不同，如果要进一步探究金鱼所需

蛋白质水平时，应从不同规格的鱼类进行试验，以达

到养殖过程中的最佳经济效益。

3.3 粗纤维含量

粗纤维有较良好的营养填充吸收功能，其纤维体

积密度大，吸湿性较强，动物在食入食物后因受一定机

械的冲击而会立即产生一种较强的饱腹感。纤维素虽

然无法被消化和吸收，但也对促进胃肠肌肉的正常运动

功能有着很重要的帮助，尤其是杂食性鱼类及某些偏素

食性鱼类，对增加纤维素物质的有效含量更显重要。由

于粗纤维难以分解，且众多鱼类体内缺乏相应的生物酶

来将其消化利用，含量超标将会阻碍其余必要元素的吸

收。从碳水化合物的吸收程度上而言，暖水性鱼类比冷

水性鱼类更有优势。草食性鱼类中大部分群体消化饲

料中的碳水化合物时利用的是其后肠的微生物群[7]

。

Pannevis[8]

报道，金鱼对碳水化合物的消化率为70%，而

月光丽鱼对碳水化合物的消化率仅为50%。

由于鱼类消化系统简单，并且其中缺乏纤维素分

解酶，所以对碳水化合物中纤维素有很低的利用率，

几乎是没有利用。但是粗纤维对于动物而言不可缺

少，有助于肠胃蠕动，促进酶的产生，进而对食物的消

化有良好促进作用；除此以外，饲料因其营养丰富，大

量食用会导致一定的消化问题，粗纤维可起到稀释作

用，加快吸收。许多鱼饲料的黏结剂就用粗纤维制

成，可提高饲料在水中的稳定性等。所以为了不影响

饲料营养及吸收，一定要严格把控粗纤维的用量。通

99

特 种 养 殖 2023年第44卷第20期 总第689期

常粗纤维在各类鱼饲料中的含量:草食性鱼类 12%~

20%，杂食性鱼类 8%~12%,肉食性鱼类 2%~9%。金

鱼属于杂食性鱼类，由本试验结果可知，市面上所售

饲料粗纤维含量均小于20%，但是一些含粗纤维含量

少的产品，可能用于饲喂仔稚鱼。

3.4 粗灰分含量

饲料粗灰分主要是无机盐或氧化物等矿物元素，

还包括一些与饲料混合的泥浆。这些矿物质有些营

养丰富，但有些有毒。因此，必须严格控制饲料粗灰

分含量，以达到最佳饲喂效果。与陆地饲养的家畜相

比，水生动物的饲养方式和饲养水体更为复杂，因此

二者具有很大区别。但在饲料生产过程中，技术人员

针对各种情况做好粗灰分的管理，不仅要严格控制有

毒污染物，而且要合理地保障必要的矿物质供应,使

动物饲养获得了最佳的经济效益。

在鱼类的生长中，高灰分饲料对其生长极其不

利，经过相关试验表明，灰分含量高的鱼粉，不仅会导

致机体对磷元素的利用率较低，还会影响鱼类机体对

锌元素和镁元素的利用[9]

。

3.5 粗脂肪含量

鱼类所需的能量和脂肪酸可以由饲料中的脂肪

供给，而且饲料脂肪携带脂溶性维生素和固醇，其对

鱼类的生长发育来说是必不可少的。当饲料中的脂

肪含量过高时，就会导致未被吸收的脂肪在体内堆

积，从而会引发脂肪肝等一系列营养性疾病[5]

。NRC

指出，鱼的蛋白质摄入量会因饲料高水平能量而减

少，并且在一定程度上会影响鱼类生长，因此在制定

鱼饲料配方时，技术人员应注意蛋白质和能量的平

衡[10]

。Kruger等[11]

报道，当饲料中蛋白质含量为45%，

脂肪含量为 6% 时，剑尾鱼的特定生长率和饲料转化

率最高。Lochmann等[12]

报道，饲料中添加磷脂并不能

提高金鱼幼鱼的成活率.观赏鱼饲料中应含有充足的

n-3、n-6 高不饱和脂肪酸，通常可储存在皮下脂肪

中，使体表光泽更细腻。梁友光[13]

的研究结果表明，

当饲粮脂肪含量为 14%~18% 时，长吻鱼对饲料的利

用率高并且其长势较好，而当饲粮脂肪含量低于11%

时，长吻鱼的生长发育缓慢。一般认为鲑科鱼类饲料

中脂肪的适宜含量为 15%~18%。目前国内外对观赏

鱼所需脂肪含量还没有具体的研究文献，国内一般对

鲤科食用鱼的脂肪推荐量为5%~6%[14]

。

3.6 钙和磷含量

在无机盐需求方面，鱼类主要需要钙和磷。鱼类

用鳃和口腔上皮细胞从水中吸收钙和磷。由于水中有

充足的钙源,鱼通常没有因为钙缺乏而出现骨骼畸形

的情况。但是，由于淡水和海水中磷源对鱼类来说供

应不足,很难满足鱼类对磷的需求, 所以非常需要从鱼

饲料中获得磷元素。从水体吸收的钙质主要贮存于骨

组织、鳞片和皮肤中。但和陆生动物不同,鱼最主要的

钙质调节部位并不是在骨内，而是在鳃、鳍和口腔上皮

细胞中。而来自饲料源或水环境源的磷会储存在心

脏、肝脏、肾脏、肌肉、血液等软组织中，也会储存在骨

骼中。鱼体内磷含量占体质量的 0.4%~0.5%，而钙和

磷的含量比为0.7~1.6。刘修英[15]

的研究结果表明，鱼

类中草鱼对饲料中钙的需要量为 0.49%，团头纺对饲

料中钙的需要量为 0.5%~1.0%；当饲料中磷固定在

0.68% 时，鲤鱼对饲料中乳酸钙、磷酸钙、碳酸钙的利

用率分别为 58%、37%和 27%。一般认为鱼饲料中钙

磷比范围在1 ：1~1 ：2是适合鱼类生长所需的。

在构成鱼所必需脂肪酸的各种天然矿物元素组成

中，磷无疑是其中最为主要组成的矿物元素，由于磷直

接对幼鱼身体的正常生长和发育、骨骼肌肉的正常矿

化、脂肪代谢和体内碳水化合物等的正常代谢等均是起

到十分重要的作用，同时也因为在天然水环境条件中游

离磷离子的相对浓度都很偏低，所以才需要考虑在鱼饲

料配方中加入磷。而过量的有机磷农药释放残留在养

殖水体土壤中，会进一步造成养殖水体的严重化学污染

化和富营养化。所以，应要格外地重视提高饲料配方中

钙磷元素的合理添加量。试验证明，孔雀鱼的生长和饲

料中添加钙含量并没有很大关系，但是当孔雀鱼没有获

得足够生长所需的磷含量时，会使其发生一系列微量元

素缺乏引起的营养代谢疾病[16]

。本试验得出的钙磷含

量比大多数符合市面上对于鱼饲料标准含量的规定，即

为1 ：1~1 ：2。该比例对于鱼类生长有较大益处。

3.7 水中稳定性

金鱼饲料水中稳定性是指金鱼配合饲料在水中浸

泡一段时间后(一般为30 min)，能够保持其成分不被溶

解散失的性能。其主要概括了水产饲料在水环境中的

保形性，可溶性，可摄取性，不溃散性。该项指标是水产

饲料和畜禽饲料最显著的区别。影响金鱼水中稳定性

的两个主要因素：一是水产饲料本身的质量，二是投放

饲料的水体环境，前者为内在因素，后者为外在因素。

一般研究金鱼饲料的水中稳定性有 4种方法，分

别为感官法、化学耗氧量（COD）法、光度法和干燥称

重法[17]

。感官法虽然从水色、外形、粉化和镊取4个方

面来判断饲料水中稳定性，但是具有很大的局限性，

每位技术人员判断经验不同，导致试验结果主观性较

大。化学耗氧量法在很大程度上只考虑了水产饲料

在水中其有机物质的散失，没有综合考虑无机物质消

散和颗粒形态的变化，且测试方法复杂，有待进一步

探讨。光度法需要专门仪器进行，由于实验室条件有

100

SILIAO GONGYE 2023年第44卷第20期 总第689期

限，故不考虑这种方法。此次试验，我们选取了干燥

称重法，试验结果如表 2。但是由于试验过程中种种

因素受限，该方法也有其自身缺点。第一，试验时间

长，效率较低；第二，试验条件难控制，实验室不易模

拟养殖水体环境，导致试验结果有较大偏差；第三，此

种试验方法得出的结论只能代表饲料物理性能的改

变，没有办法得到其有机营养物质在水中的改变。同

时水溶性维生素会大量流失，使其营养失衡，而这种方

法是检测不出的。一般认为饲料浸泡30 min而其散失

率小于20%为合格。本次试验结果表明，市面常售金

鱼饲料大部分是符合标准的。水中稳定性是判断饲料

质量水平的重要指标。据不完全统计，全国每年产对

虾配合饲料 100 万吨，产值 30 亿元计，假如水产饲料

水中稳定性下降1%，我国每年就要增加直接经济损失

1万吨，折合3 000万元，而由此造成的环境污染、水质

败坏、养殖失败等间接经济损失更无法估量[17]

。

我们在市面上常见到的金鱼配合饲料多为上浮

鱼饲料，该种饲料在测定水中稳定性时还需测定其上

浮率。目前，浮性配合饲料在水中稳定性的主要物理

性能指标是测定其漂浮率和漂浮时间，但是没有统一

的国家标准测定方法。现在主要有动水法和静水法

两种试验方法[18]

。我们使用前一种方法，在不同温度

（20、25 ℃）和不同重量下对挤压颗粒料进行试验，观

察温度和重量对漂浮率和漂浮时间的影响。按照

GB/T 14699.1 要求进行采样，按照四分法选取至少

200 颗完整饲料样品，分别置于 20 ℃和 25 ℃左右水

中浸泡 30 min（因为我们测试的为金鱼饲料，所以设

置淡水环境进行试验），搅拌数下，等到静止之后计数

漂浮颗粒数。每个样品至少平行测定两次，以他们的

算数平均值作为最终结果。测定漂浮时间时，将以上

试验样品测定完漂浮率之后不捞出并计时，继续观察

其在水中的漂浮情况，待饲料全部下沉后停止计时并

进行记录。试验证明，观赏鱼饲料的水中稳定性和温

度没有关系。它不取决于颗粒重量或含水量，而是取

决于颗粒密度。对该实验中 11个样品测试结果的漂

浮率为97%~100%，漂浮时间均在6 h以内。

金鱼饲料水中稳定性是一个综合性的指标，更应

该从以上参考指标中进行多方面的考量和表达。比

如，可以用感官法观察饲料在水中稳定性的物理性

能，用干燥称重法计算金鱼饲料的溃散程度，光度法

评价其营养物质在水中的散失情况，综合全面地去分

析，这样能更准确地去描述金鱼饲料的水中稳定性。

4 结论

经过对市面上常售金鱼饲料的研究，我们可以得

出以下几点结论：

① 本地市面上常见金鱼饲料的含水量<9%，粗

灰分含量<16%，粗脂肪含量<15%，粗蛋白含量>25%，

粗纤维含量<12%，钙含量<4%，磷含量<3%。

② 金鱼作为杂食性观赏鱼，需要的蛋白质含量

偏低，一般在35%左右即可。金鱼仔稚鱼需要蛋白质

含量高于其他规格金鱼。

③ 一般认为鱼饲料中钙磷比范围在 1 ：1~1 ：2

之间。

④ 市面常见金鱼饲料在水中的漂浮率在 97%~

100%，漂浮时间均在6 h以内，符合一般标准。

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（编辑：沈桂宇，guiyush@126.com）

101

饲 料 安 全 2023年第44卷第20期 总第689期

不 同 养 殖 地 区 乌 苏 里 貉 肉 骨 粉 安 全 性 能 评 价

■ 谭展清 李光玉 刘可园 赵海平 邢宝瑞 孙朝阳 胡 肖 崔 凯*

(青岛农业大学动物科技学院，山东青岛 266109)

摘 要：研究旨在分析评价乌苏里貉屠体加工肉骨粉的安全性能，样品来自全国17个貉主要养

殖地区，探讨貉屠体制作肉骨粉的可行性，为貉屠宰后的副产物有效利用提供理论依据，为丰富我国

动物性蛋白饲料来源提供数据支撑。分别从17个地区貉养殖场中随机选取取皮期健康的乌苏里貉

各 3只，共 51只。每只体重 9 kg左右，取皮后的貉屠体作为试验样品（含内脏和趾爪），经过绞碎、高

压水解、脱脂、烘干、粉碎等工艺制作貉肉骨粉，对其进行营养价值分析和安全性评价。结果表明，貉

肉骨粉中粗蛋白、粗灰分、水分、钙、总磷含量满足国标对肉骨粉的要求，其中衡水、潍坊、青岛的貉肉

骨粉中的粗蛋白含量分别高达 67.29%、66.14%、73.5% 符合 GB/T 20193—2006《饲料用骨粉及肉骨

粉》中的一级指标。铅、砷、汞、镉、铬重金属元素含量符合国标对肉骨粉卫生安全标准的要求，磺胺

二甲嘧啶、磺胺甲噁唑、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺嘧啶、青霉素、土霉素、庆大霉素符合食品中对兽药最

大残留限量的标准要求。貉屠宰取皮后的屠体，按照肉骨粉加工工艺制作成肉骨粉，其营养价值丰

富，卫生和安全指标满足蛋白质饲料原料标准，可作为备选的优质蛋白质饲料原料。

关键词：乌苏里貉；屠体；肉骨粉；安全评价；营养价值

doi:10.13302/j.cnki.fi.2023.20.017

中图分类号：S816.48 文献标识码：A 文章编号：1001-991X（2023）20-0102-06

Safety Performance Evaluation of Ussuri Raccoon Dogs Meat and Bone Meal in Different

Breeding Areas

TAN Zhanqing LI Guangyu LIU Keyuan ZHAO Haiping XING Baorui SUN Zhaoyang

HU Xiao CUI Kai*

(College of Animal Science and Technology, Qingdao Agricultural University, Shandong Qingdao

266109, China)

Abstract：The aim of this study was to analyze and evaluate the safety performance of processing meat

and bone meal from Ussuri raccoon dogs carcasses. Samples were obtained from 17 major raccoon dog

breeding areas in China to explore the feasibility of processing meat and bone meal from raccoon car⁃

casses, to provide a theoretical basis for the effective utilization of raccoon dog by-products after slaugh⁃

ter, and to provide data support for the enrichment of animal protein feed sources in China. A total of

51 healthy Ursuline raccoon dogs were randomly selected from 17 raccoon farms in each region. Each rac⁃

coon dog carcass weighing about 9 kg was taken as a test sample (including internal organs and toe

claws), and raccoon dog meat and bone meal was made by grinding, high-pressure hydrolysis, degreasing,

drying and crushing, and its nutritive value analysis safety evaluation was made. The results showed that

the crude protein, crude ash, moisture, calcium

and total phosphorus contents of raccoon dogs

meat and bone meal met the requirements of the

national standard for meat and bone meal, and the

crude protein contents of raccoon dogs meat and

bone meal from Hengshui, Weifang and Qingdao

were as high as 67.29%, 66.14% and 73.5%, re⁃

spectively, which met the first level index of Bone

Meal, Meat and Bone Meal for Feedstuffs. The con⁃

作者简介：谭展清，硕士，研究方向为特种经济动物饲养

与繁殖。

*通讯作者：崔凯，博士，副教授，硕士生导师。

收稿日期：2023-06-12

基金项目：青岛农业大学高层次人才引进项目[1121009]；

山东省现代农业产业技术体系[SDAIT-21-01]；改良型蓝狐综合

培育技术的开发[2419022/660]

102

SILIAO GONGYE 2023年第44卷第20期 总第689期

tent of lead, arsenic, mercury, cadmium and chromium heavy metal elements meet the requirements of the

national standard for meat and bone meal health and safety standards. Sulfadimethoxine, sulfamethoxa⁃

zole, sulfamonomethoxine, sulfadiazine, penicillin, oxytetracycline and gentamicin meet the requirements

of the standard for maximum residue limits of veterinary drugs in food. The carcass of raccoon dogs after

slaughtering and skin removal is made into meat and bone meal according to the meat and bone meal pro⁃

cessing procedure, which is rich in nutritional value, and the health and safety indexes meet the standard

of protein feed materials, and can be used as an alternative high-quality protein feed material.

Key words：Ussuri raccoon dog; carcass; meat and bone meal; safety evaluation; nutritive value

貉是我国重要的经济动物之一，其皮毛具有很高

的经济价值。每年在貉取皮期会产生大量的屠体，其

作为貉养殖的副产品并没有被充分利用，如果将貉屠

体加工生产为肉骨粉，不但可以避免严重的资源浪费

和环境污染，而且可以缓解我国动物源性蛋白质饲料

紧缺的问题[1]

。肉骨粉是指用畜禽屠宰后所剩的不宜

人类食用的家畜躯体、骨、内脏等做原料，经加热、脱

脂、干燥、粉碎制得的产品[2]

，产品粗蛋白含量为50%~

60%，且氨基酸组分较为平衡，价格较鱼粉便宜[3]

。张

亚飞[4]

研究发现，将貂狐貉屠体按 1∶2∶7 比例混合

后，经上述高温高压工艺流程生产出的新鲜狐貉貂混

合屠体肉骨粉粗蛋白含量为 45.0%，粗脂肪含量为

11.2%，钙含量为 12.2%，总磷含量为 6.0%，水分含量

为 8.5%，其营养成分含量符合《饲料用骨粉及肉骨

粉》（GB/T 20193—2006）中的一级指标。本研究中的

貉屠体肉骨粉与传统肉骨粉区别在于将貉完整屠体进

行加工，除去正常生产过程中无法避免的少量杂质外，

还混有少量毛、角、爪、粪便等物质。加工后的肉骨粉成

品呈金黄色或黄褐色粉状，有肉香味，无腐败气味。肉

骨粉是动物性蛋白饲料中一种重要原料，营养成分丰

富，但由于原料和生产工艺差异较大，其营养成分也不

尽相同[5]

。大部分对毛皮动物胴体的处理是作为蛋白质

饲料原料生产肉骨粉和宠物罐头（猫、狗粮）[6]

。国内对

毛皮动物胴体利用较少，2021年水貂、狐、貉取皮后的屠

体约17.18万吨[7]

，一些养殖户将毛皮动物屠体当作蛋

白补充饲料使用，多采用高温水煮，绞碎，工艺简单、难

以完全灭菌，质量无法保证。本研究以貉屠体为原料，

采用湿法水解生产貉源肉骨粉，分析其营养价值，对其

安全性进行评价，将毛皮动物屠体变废为宝的同时也为

养殖户降低养殖成本，增加额外收入，减少对环境的污

染，为貉源肉骨粉的生产和应用提供理论参考依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

材料：分别以潍坊、烟台、威海、菏泽、青岛、临沂、秦

皇岛、唐山、沧州、衡水、吉林、松原、锦州、大连、哈尔滨、

大庆、鸡西17个具有代表性的地市级的貉养殖地作为

采样地区，随机从采样地区选取6月龄9 kg左右的貉各

3只，共51只，取皮后的貉屠体作为试验样品，屠体冷

冻保存无变质，于青岛农业大学单胃动物科学研究室利

用烘箱、小型粉碎机等设备加工制成肉骨粉。

1.2 试验试剂及仪器

磺胺二甲基嘧啶（SMZ）、磺胺甲噁唑、磺胺间甲氧

嘧啶（SMM）、磺胺嘧啶、青霉素（Penicillin）、庆大霉素

（Gen）、土霉素（Oxytetracycline）ELISA试剂盒，以上所

有试剂均购自江苏晶美生物技术有限公司；犬细小阳性

血清（本实验室分离保存），Taq DNA 聚合酶、DL1000

Marker 为 TaKaRa 产品；Agarosele le 琼脂糖、Gelstaim

10000×核酸染料均为Tran产品；DNA/RNA共提试剂盒

为TianGEN产品。

药品：浓硫酸、浓盐酸、浓硝酸、商品硫酸铜、甲醇。

仪器：全自动凯氏定氮仪（K1160型，济南海能仪

器股份有限公司），玻璃索氏抽提装置、紫外可见分

光光度计（上海元析仪器有限公司），荧光和可见光

凝 胶（以 色 列 DNR 成 像 系 统 有 限 公 司），PCR 仪

（PCRtouch、杭州晶格科学仪器有限公司），SCI小型高

速离心机（SCILOGEX 赛洛捷克，上海科雅生物科技

有限公司），DYY-6D型电泳仪（北京市六一仪器厂），

连续波长酶标仪（Infinite M Nano型，帝肯上海贸易有

限公司），可调式旋涡混合器（上海嘉鹏科技有限公

司），商用高压锅（佛山市川粤智能商厨有限公司），生

化培养箱（天津市莱玻特瑞仪器仪器设备有限公司）。

1.3 试验方法

1.3.1 样品处理

貉屠体肉骨粉制备：将貉屠体放入绞肉机中将其

混匀绞碎 2次，将绞碎好的肉骨泥用纱布包好放入高

压锅中 100 ℃高压 2 h，拿出纱布包放入螺旋榨油器

103

饲 料 安 全 2023年第44卷第20期 总第689期

过滤水分和油脂，将肉骨泥摊匀在的托盘上，放入

65 ℃的烘箱中 8 h 拿出，冷却 2 h 自然回温，粉碎处

理，装入自封袋做好标签，放入-16 ℃冰箱保存。

1.3.2 17个地区貉源肉骨粉常规营养成分分析

水分含量测定参照 GB/T 6435—2014；粗蛋白

（CP）含量测定参照GB/T 6432—2018；粗脂肪（EE）含

量测定参照 GB/T 6433—2006；粗灰分含量测定参照

GB/T 6438—2007；钙（Ca）含量测定参照GB/T 6436—

2018；总磷（P）含量测定参照GB/T 6437—2018。

1.3.3 17个地区貉源肉骨粉重金属测定

重金属的检测由中国农业科学院特产研究所质量

标准与检测技术研究中心完成，铅、总砷、汞、镉、铬的

测定采用 ICP-MS 法，铅、总砷、镉、铬测定参照 GB/T

5009.268—2016，汞的测定参照GB/T 5009.17—2021。

1.3.4 17个地区貉源肉骨粉药物残留测定

磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲噁唑、磺胺嘧啶、青霉

素、庆大霉素、土霉素含量的测定方法按照江苏晶美

生物科技有限公司所提供的试剂盒说明书方法进行。

1.3.5 17个地区貉源肉骨粉犬细小病毒检测

犬细小病毒检测采用 RT-PCR 扩增技术，按照

DNA/RNA共提试剂盒说明书方法从17个地区貉源肉骨

泥中提取犬细小病毒 DNA，引物合成参照 GeneID:

28715659，应用Primer Premier 5.0计算机软件设计并合

成1对特异性扩增引物，目的片段大小为286bp（CPV）。

CPV1:5'-AGAGCATTGGGCTTACCACCATTTC-3'

CPV2:5'-ATCTTGGATCACCATCTGCTGCTTG-3'

反应体系（20 μL）：Taq DNA聚合酶10 μL，上下游

引物各1 μL，cpv灭活病毒模板2 μL，加水至20 μL。

PCR反应程序：98 ℃ 3 min，98 ℃ 30 s，55 ℃ 30 s，

72 ℃ 30 s，40 个循环；最后72 ℃，7 min，4 ℃保存。

1.4 数据统计与分析

试验数据 Excel 2019进行初步处理后，应用 Spss

26版统计软件对试验数据进行单因素方差分析，Dun⁃

can’s多重比较分析差异显著性。P<0.01为差异极显

著，P<0.05差异显著。试验结果以“平均值±标准差”

表示。

2 结果与分析

2.1 貉源肉骨粉常规营养成分分析

貉源肉骨粉常规营养成分分析结果见表1。由表

1 可知，17 个地区貉源肉骨粉粗蛋白、粗灰分、总磷、

钙、水分含量满足《饲料用骨粉及肉骨粉》（GB/T

20193—2006）对肉骨粉的要求，其中粗蛋白含量和粗

灰分含量符合饲料用肉骨粉一等级肉骨粉的要求，除

潍坊貉源肉骨粉外，其余 16 个地区貉源肉骨粉的粗

脂肪含量均高于国标，其中菏泽貉源肉骨粉粗脂肪含

量高达22.99%。

表1 各地区貉源肉骨粉中常规营养指标分析结果（%）

样品来源

潍坊

烟台

威海

菏泽

青岛

临沂

秦皇岛

唐山

沧州

衡水

吉林

松原

锦州

大连

哈尔滨

大庆

鸡西

粗蛋白

67.29±0.66ABb

61.75±7.00Bbc

61.85±5.82Bbc

62.18±1.38Bbc

73.51±2.16Aab

63.89±2.34Bbc

63.23±4.83Bbc

61.52±2.97Bbc

62.30±3.33Bbc

66.14±1.60Bbc

60.59±1.02Bc

63.99±1.84Bbc

61.41±0.97Bbc

65.97±0.66Bbc

60.58±2.27Bc

60.37±1.12Bc

62.67±1.14Bbc

粗脂肪

12.00±0.01Dd

17.84±3.28BCb

17.13±4.70BCbc

22.99±0.85Aa

15.44±0.96BCDbc

17.11±1.66BbCc

15.98±0.29BCDbc

16.65±2.93BCbc

17.62±1.32BCb

15.63±0.94BCDbc

17.72±1.16BCb

16.05±0.54BCDbc

17.74±0.39BCb

13.88±0.96BCDcd

18.73±0.37Bb

16.41±0.46BCDbc

17.18±0.94BCbc

粗灰分

12.39±0.1.42ABCabc

8.60±0.62Cde

11.04±1.54ABCbcde

8.00±0.80Ce

10.92±2.75ABCbcde

13.55±2.50ABabc

12.67±1.52ABCabc

11.64±1.54ABCbcd

11.23±1.77ABCbcde

10.06±1.26BCcde

11.45±2.33ABCbcde

12.52±0.35ABCabc

10.73±1.22BCbcde

8.47±1.79Cde

14.08±0.89ABab

15.08±3.54Aa

10.05±1.36BCcde

钙

3.37±0.01ABbc

3.19±0.04Bbc

3.22±0.06Bbc

3.52±0.18ABabc

3.39±0.12ABbc

3.54±0.23ABabc

3.53±0.17ABabc

4.06±1.10Aa

3.49±0.15ABabc

3.57±0.16ABabc

3.64±0.06ABabc

3.55±0.18ABabc

3.80±0.32ABab

3.39±0.17ABbc

3.29±0.13ABbc

3.35±0.01ABbc

3.11±0.04Bc

磷

2.06±0.23ABCbcde

1.72±0.09BCde

1.98±0.32ABCcde

1.85±0.13BCcde

2.40±0.87ABCabcd

2.90±0.82Aa

2.26±0.24ABCabcde

2.73±0.36ABab

1.95±0.45ABCcde

1.88±0.24BCcde

2.14±0.48ABCbcde

2.26±0.05ABCabcde

1.95±0.20ABCcde

1.53±0.34Ce

2.54±0.18ABCabc

2.28±0.04ABCabcde

1.75±0.00BCde

水分

7.27±0.13

7.66±0.59

7.84±0.52

7.13±0.57

7.32±0.30

7.11±0.65

7.45±0.47

7.14±0.42

7.97±0.07

8.03±0.26

7.21±0.48

7.75±0.22

7.96±0.77

7.92±0.27

7.51±0.71

7.47±0.29

7.33±0.47

注：同列数据肩标不含有相同小写字母表示差异显著（P<0.05），不含有相同大写字母表示差异极显著（P<0.01），含有相

同字母或无字母表示差异不显著（P>0.05）。

2.2 貉源肉骨粉药物残留检测

由表 3可见，本试检测貉源肉骨粉中磺胺二甲嘧

啶、磺胺甲噁唑、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺嘧啶、青霉素、

土霉素、庆大霉素含量均低于表4《食品中兽药最大残

留限量》（GB/T 31650—2019）所规定的含量。

2.3 貉源肉骨粉重金属检测

貉源肉骨粉药物残留检测结果见表 5，由表 5 可

知，本试验测得貉源肉骨粉中重金属元素含量，铅、

104

SILIAO GONGYE 2023年第44卷第20期 总第689期

镉、总砷、铬和汞均低于《饲料卫生标准》（GB/T 13078—

2017）规定的限量值（见表6），如果将貉源肉骨粉应用

到饲料中，不会引起铅、砷、汞、镉、铬等重金属元素的

安全问题。

表2 饲料用肉骨粉质量指标（%）

项目

含量

粗蛋白

≥50.0

粗脂肪

≤12.0

粗灰分

≤33.0

水分

≤10.0

钙

总磷含量的180%~220%

注：参考《饲料用骨粉及肉骨粉》（GB/T 20193—2006）。

表3 各地区貉源肉骨粉中药物残留指标分析结果（ng/kg）

样品来源

潍坊

烟台

威海

菏泽

青岛

临沂

秦皇岛

唐山

沧州

衡水

吉林

松原

锦州

大连

哈尔滨

大庆

鸡西

磺胺二甲嘧啶

176.00±1.27

178.50±0.84

193.50±2.26

188.45±2.05

189.35±0.49

190.45±1.06

189.50±0.56

184.70±2.12

188.75±0.49

186.25±2.47

189.70±1.55

178.05±10.25

189.85±4.59

168.95±2.61

188.90±0.84

190.05±8.27

192.00±1.69

磺胺甲噁唑

196.85±0.49

151.50±0.28

208.55±2.76

162.60±0.14

281.80±3.82

144.75±0.35

192.90±1.56

243.85±1.63

157.90±0.42

340.70±2.40

192.45±0.78

144.60±0.42

147.10±0.85

236.35±0.78

170.05±0.21

203.25±1.63

192.45±0.78

磺胺间甲氧嘧啶

166.20±1.70

312.05±4.03

235.60±0.57

217.80±0.85

228.00±1.98

293.35±3.61

137.75±0.78

167.55±1.77

167.50±0.00

179.05±1.91

142.70±1.41

163.70±0.28

172.85±1.91

306.10±4.1

202.05±2.62

189.40±0.57

164.90±1.98

磺胺嘧啶

147.95±1.20

281.25±0.78

224.25±2.90

200.30±0.71

297.10±3.39

158.30±0.28

246.90±2.69

153.40±0.28

229.45±0.35

202.60±0.14

236.40±3.25

239.50±2.83

211.00±2.12

161.65±0.78

308.05±2.76

288.70±3.96

194.20±0.71

青霉素

145.40±0.14

184.15±0.35

173.60±1.70

231.30±2.40

222.30±2.55

309.95±1.91

159.70±1.56

175.55±0.21

307.60±2.12

227.80±0.28

337.35±4.88

245.15±0.64

162.40±1.13

227.05±0.07

309.65±4.74

223.95±2.90

297.30±0.42

庆大霉素

197.05±1.63

279.05±2.76

369.80±5.37

171.70±0.57

279.10±2.26

188.00±1.84

281.10±3.68

291.75±0.49

170.90±0.99

264.55±3.75

250.00±2.12

206.75±2.05

408.10±2.69

192.10±1.13

177.50±1.56

350.90±4.38

323.00±9.90

土霉素

207.45±1.48

297.70±1.98

207.50±1.41

190.15±0.07

270.40±1.84

179.75±0.64

265.30±4.10

290.80±4.95

236.40±1.84

213.00±1.13

202.45±1.77

336.15±4.74

327.05±0.07

181.90±2.40

146.95±0.07

166.30±1.98

148.05±0.49

表4 食品中兽药最大残留限量（ng/kg）

项目

残留限量

磺胺二甲嘧啶

<100 000

磺胺甲噁唑

<100 000

磺胺间甲氧嘧啶

<100 000

磺胺嘧啶

<100 000

青霉素

<50 000

土霉素

<200 000

庆大霉素

<100 000

注：参考《食品中兽药残留最大限量》（GB/T 31650—2019）。

表5 各地区貉样品中重金属残留量（μg/kg）

样品来源

潍坊

烟台

威海

菏泽

青岛

临沂

秦皇岛

唐山

沧州

衡水

吉林

松原

锦州

大连

哈尔滨

大庆

鸡西

铅

73.20±0.65

221.04±0.06

122.13±4.69

257.66±9.07

140.4±3.09

288.04±8.50

1 231.40±12.16

156.97±7.52

91.45±10.71

59.31±2.12

125.32±9.55

71.70±6.01

119.50±5.85

56.43±1.30

64.59±1.09

58.44±4.08

60.88±1.19

镉

64.17±1.95

45.53±0.60

221.97±9.67

44.70±0.52

271.63±3.87

199.59±5.18

104.38±0.28

66.63±1.60

63.90±0.84

52.68±0.52

81.87±2.23

44.21±0.17

56.92±1.02

42.62±2.42

93.67±2.88

57.48±0.26

54.54±0.35

砷

11.61±0.39

6.40±0.49

14.35±1.77

6.60±0.14

3.61±0.26

18.97±0.73

13.89±1.40

10.93±0.02

5.02±0.14

6.70±0.37

11.83±0.73

9.96±0.68

7.23±0.26

3.93±0.22

3.95±0.01

5.17±0.54

5.40±0.13

铬

551.92±34.39

783.91±8.01

795.15±74.9

834.60±21.7

1177.75±9.4

701.88±57.76

1 026.95±35.85

569.84±24.83

793.38±3.48

649.62±16.14

508.79±39.5

723.43±0.76

651.12±9.37

565.43±46.00

842.84±13.76

653.36±51.25

407.99±204.81

汞

82.24±2.78

23.48±2.24

55.61±0.45

13.01±0.22

95.61±1.32

31.44±7.76

22.79±1.91

10.62±0.14

14.33±0.06

11.81±0.16

30.08±0.23

8.74±0.25

20.38±2.10

12.53±0.07

98.1±1.36

50.41±5.04

64.8±0.61

表6 貉源肉骨粉重金属限量值（μg/kg）

项目

限量

铅

≤10 000

镉

≤2 000

砷

≤10 000

铬

≤5 000

汞

≤100

注：参考《饲料卫生标准》（GB/T 13078—2017）。

2.4 貉源肉骨泥犬细小病毒检测

PCR扩增结果阳性对照组在 1.0%的琼脂糖凝胶

电泳，在凝胶成像仪下可观察到大小约为286 bp貉细

小病毒VP2基因的部分片段的片段，其余17个地区貉

源肉骨泥均没有扩增出任何片段，说明这 17 个貉源

肉骨泥中并无犬细小病毒。

105

饲 料 安 全 2023年第44卷第20期 总第689期

M 阳性 6 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 14 38

500 bp

200 bp

50 bp

注：M：DNA Marker LD500；6：潍坊；15：松原；16：衡水；17：青岛；18：吉林；19：秦皇岛；20：大庆；21：沧州；22：鸡西；23：威

海；24：临沂；25：唐山；26：潍坊；27：锦州；28：哈尔滨；14：菏泽；38.烟台。

图1 PCR凝胶成像图

3 讨论

3.1 貉源肉骨粉的营养价值

由表 1 的各地区貉源肉骨粉中常规营养指标分

析结果中得知，17个地区的貉源肉骨粉粗蛋白含量均

满足《饲料用骨粉及肉骨粉》（GB/T 20193—2006）对

肉骨粉的要求，貉源肉骨粉的粗脂肪含量除了潍坊地

区，其余地区均高于 12%，分析原因可能是貉屠体的

脂肪约占活体的 19.96%[8]

，由于貉源肉骨粉的制作过

程是将整貉屠体进行加工，在处理过程中只是对屠体

表面的脂肪进行简单地剔除，其次由于实验室条件有

限，后续对高压水解后的肉骨泥处理采用螺旋榨油

器，人工进行去油脂，实验室加工肉骨粉少了工业上

高速离心，甩出油脂的步骤。本研究中菏泽貉源肉骨

粉的粗脂肪含量最高，远高于国标，除了生产工艺问

题，各貉养殖地区间也存在由于饲喂条件不同，菏泽

貉子屠体相对肥胖的原因。张锐[9]

在河北昌黎县随机

选取当地水貂、狐、貉胴体按 2∶7∶1 混合加工肉骨

粉检测其常规营养成分，其粗蛋白、粗脂肪、钙、磷含

量分别 40.0%、15.2%、12.2%、6.0%，其中造成脂肪含

量超标的关键原因是在实验室条件下生产肉骨粉，生

产工艺问题导致脂肪含量高于肉骨粉国标之外，其余

指标均符合饲料用肉骨粉国家质量标准。张亚飞[4]

采

用高温高压水解、固液分离等工厂化生产狐貉貂混合

屠体加工成的肉骨粉中主要营养成分：粗蛋白含量为

45.0%、粗脂肪含量为11.2%、钙含量为12.2%、总磷含

量为6.0%、水分为8.5%，生产出的肉骨粉粗脂肪含量

符合饲料用骨粉及肉骨粉国标要求说明在工厂化生

产的条件下，通过脱脂工艺可解决粗脂肪含量超标问

题，其余粗灰分、水分、钙、总磷含量均符合国标要求，

毛皮动物加工成的混合肉骨粉从营养成分指标上是

合格的。张锐[9]

研究发现貉的平均屠宰率为 61.99%，

貉胴体的净肉率为 59.79%，且貉胴体中蛋白质、油

脂、钙磷含量较高，含有大量微量元素，是非常优质的

动物源产品，也进一步说明了貉源肉骨粉屠体加工成

肉骨粉可作为备选的优质蛋白质饲料原料。我国饲

用蛋白资源严重匮乏以及大宗非粮蛋白资源利用率

极低，制约了我国畜牧业现代化进程[10]

。如能将貉源

肉骨粉合理使用，大力发展蛋白饲料替代饲料中豆粕

用量，可促进我国饲料和养殖业可持续发展。

3.2 貉源肉骨粉药物残留的评价

目前在貉养殖生产中使用可产生残留的药物添

加剂主要有：β-内酰胺类、四环素类、大环内酰类、氨

基糖苷类、磺胺类、微量元素等[11]

。这些药物残留会

对貉产生变态反应和毒性反应，还会使细菌产生耐药

性，还可以产生致病菌交叉感染等[12]

。养殖户在貉养

殖过程中可能存在不规范使用药物的情况，造成畜产

品中残留超标，从而危害畜体健康，通过粪、尿可直接

进入土壤和水体，导致土壤中微生物对抗生素的抗性

水平增加。研究发现抗菌药物能从饲料向畜禽粪便

迁移，在猪、鸡的饲料中添加药物后，在畜禽的粪便中

发现了药物的残留；对粪便进行堆肥发酵成为有机肥

后，部分药物被降解，但仍有一些药物继续残留[13]

。

说明部分药物会通过由畜禽粪便堆肥制作有机肥的

过程进入环境土壤的残留迁移途径，可能会导致药物

残留恶性循环。目前针对饲料兽药残留量在猪肉、禽

类身上的研究相对较多，但对于貉源肉骨粉的兽药残

106

SILIAO GONGYE 2023年第44卷第20期 总第689期

留量较少，本文选取在貉养殖过程中最常用的几种药

物进行兽药残留检测，17个地区貉源肉骨粉药物残留

量检测结果含量均远远低于《食品中兽药最大残留限

量》（GB/T 31650—2019）所规定的含量，为促进貉源

肉骨粉的开发和安全使用提供理论依据。

3.3 貉源肉骨粉重金属残留量的评价

饲料污染问题中所说的重金属元素实际上主要

指汞（Hg）、镉（Cd）、铅（Pb）以及砷（As）等生物毒性显

著的元素[14]

。随着对动物所需微量元素的重视，动物

所必需的元素（如铜、锌等）可能存在在饲料中被超量

添加的情况，使得这些元素变成饲料中重金属污染

源。重金属污染物不同于有机污染物，它们不易分

解，可以在饲料和环境中长期残留，当其随饲料进入

动物体内后一般不会被分解，而是蓄积在动物机体的

某些器官（如肝脏和肾脏等）中，进入畜禽机体会导致

受害畜禽生长发育缓慢，生长性能下降，患病甚至中

毒死亡。同时，貉是食肉动物，当选择价格较低的饲

料时，其重金属含量可能超标，会造成粪便中重金属

含量增加，从而对土壤、作物、水体甚至人类生存构成

威胁[15]

。研究发现国产饲料级肉粉存在重金属污染

问题，饲料是重金属进入动物体内的主要途径之一，

国产饲料级肉粉重金属污染严重，可能是因为肉粉中

动物内脏和皮毛重金属含量高，有效控制貉子养殖过

程中含重金属类产品的使用量，是貉源肉骨粉生产和

使用的前提条件，因此，对貉源肉骨粉的重金属检测

是必要的。本文测得貉源肉骨粉中重金属元素含量

表 5 所示，貉源肉骨粉中的总砷、铅和铬汞和镉均低

于限量值，不会引起重金属饲料安全问题。

3.4 貉源肉骨泥中犬细小病毒

貉细小病毒引起貉的细小病毒性肠炎是一种急

性、烈性、高度接触性病毒性传染病，以病貉呕吐、剧

烈腹泻、高发病率和高死亡率为主要特征，是危害貉

养殖业发展的重要传染病之一[16]

。貉细小病毒性肠

炎常由犬细小病毒、水貂细小病毒或者狐狸细小病毒

引起，最常见为犬细小病毒，犬细小病毒病的病原为

细小病毒科细小病毒属的犬细小病毒，该病毒无囊

膜，犬细小病毒对外界环境抵抗能力极强，病毒在pH

3~11 时稳定，能耐受 65 ℃加热 30 min 仍保持感染活

性，低温长期存放对犬细小病毒的感染活性无明显影

响[17]

。本试验中对貉源肉骨泥犬细小病毒的检测结

果均无犬细小病毒的存在，后续肉骨泥的加工过程中

100 ℃高压2 h，进一步确保貉源肉骨粉的安全性。

4 结论

貉源肉骨粉符合动物饲料原料要求，且营养丰富。

貉肉骨粉安全性符合要求，貉源肉骨粉中的几种常见

药物的残留和重金属残留均符合国标要求同时也不

含犬细小病毒。

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（编辑：王博瑶，wangboyaowby@qq.com）

107

生 物 技 术 2023年第44卷第20期 总第689期

不 同 廉 价 培 养 基 对 青 贮 玉 米 秸 秆 微 生 物 的 影 响

■ 杨仕钰1，2 张兰兰2 燕志宏1* 吴光松3 李 平4 龚 涔1 曹莉丽1 邱雪松2

（1.贵州大学动物科学学院，贵州贵阳 550025；2.贵州煜宏生物科技有限公司，贵州贵阳 550604；

3.开阳县畜禽品种改良站，贵州贵阳 550300；4.贵州省种畜禽种质测定中心，贵州贵阳 550024）

作者简介：杨仕钰，硕士，研究方向为环境资源微生物挖

掘及利用。

*通讯作者：燕志宏，教授，硕士生导师。

收稿时间：2023-05-18

基金项目：贵州山区发酵床养猪技术研究[黔财农[2021]

157 号]；基于生猪粪污降解地方微生物资源的研究[黔科合

[2023]一般474号]

摘 要：为研究青贮廉价培养基对青贮微生物的影响情况，从贵州优质青贮全株玉米秸秆发酵

饲料中采集样本，进行 16S rRNA 测序，通过对青贮微生物的分离培养，将复合青贮微生物菌剂分别

接种到MRS肉汤培养基、乳清粉培养基、番茄汁培养基、玉米面培养基中37 ℃厌氧培养48 h，测定其

pH变化、生长曲线、活菌数、菌剂产量等。研究表明：青贮玉米秸秆发酵微生物中魏斯氏菌属（Weis⁃

sella）丰度值为 51.2%，假单胞菌属（Pseudomonas）丰度值为 34.25%，片球菌（Pediococcus）丰度值为

12.75%；MRS肉汤培养基活菌数、吸光值（OD）、pH显著优于其他试验组（P≤0.05），乳清粉培养基发酵

青贮微生物的OD值显著高于玉米面培养基组、番茄汁培养基组（P≤0.05）。综上所述，乳清粉培养基

可替代MRS肉汤培养基作为更低成本的廉价培养基，进而推动青贮微生物添加剂的高效发展。

关键词：青贮玉米秸秆微生物；廉价培养基；青贮微生物添加剂；玉米秸秆；发酵饲料

doi:10.13302/j.cnki.fi.2023.20.018

中图分类号：S816.3 文献标识码：A 文章编号：1001-991X（2023）20-0108-05

Effects of Different Cheap Medium on Microorganisms of Silage Corn Stalk

YANG Shiyu1,2

ZHANG Lanlan2

YAN Zhihong1*

WU Guangsong3

LI Ping4

GONG Ceng1

CAO Lili1

QIU Xuesong2

(1. College of Animal Science, Guizhou University, Guizhou Guiyang 550025, China; 2. Guizhou Yuhong

Biotechnology Co., Ltd., Guizhou Guiyang 550604, China; 3. Kaiyang Animal Breed Improvement Station,

Guizhou Guiyang 550300, China; 4. Guizhou Center for Germplasm Determination of Livestock and

Poultry, Guizhou Guiyang 550024, China)

Abstract：To study the effect of cheap silage medium on silage microorganisms. In this study, samples

were collected from Guizhou high quality whole silage corn straw fermented feed for 16S rRNA sequenc⁃

ing. Through the isolation and culture of silage microorganisms, the complex silage microbial microbial

agent was inoculated into MRS broth medium, whey powder medium, tomato juice medium and corn flour

medium were incubated anaerobically at 37 ℃ for 48 h, and pH change, growth curve, viable bacteria

count, microbial yield and so on were measured. The results showed that the abundance of microorganisms

in silage corn straw fermentation was mainly composed of Weissella (51.2%), Pseudomonas (34.25%) and

Pediococcus (12.75%). The viable bacteria number, light absorption value (OD) and pH of MRS broth medi⁃

um were significantly better than those of other groups (P≤0.05), and OD of silage microorganisms ferment⁃

ed on whey powder medium was significantly higher than that in corn flour medium group and tomato juice

medium group (P≤0.05). In conclusion, whey powder medium can replace MRS broth medium as a lowcost medium with lower cost, thus promoting the ef⁃

ficient development of silage microbial additives.

Key words：silage corn stalk microorganism;

cheap medium; microbial additives for silage；corn

stalk; fermented feed

我国是牛羊养殖大国，也是草牧业种植大国，对青

贮饲料需求极高，青贮饲料主要由牧草、农业和食品加

108

SILIAO GONGYE 2023年第44卷第20期 总第689期

工副产物青贮发酵而成，玉米秸秆是青贮最丰富的原料

之一，也是反刍动物的主要饲粮，具有营养价值高、饲喂

成本低、易保存等特点[1-2]

。青贮发酵主要原理是饲草

表面的微生物在厌氧条件下利用饲草中可溶性碳水化

合物发酵产生乳酸等有机酸，形成酸性环境[3]

，从而抑制

好氧性细菌、霉菌和梭菌的生长[4]

。青贮添加剂能显著

提升青贮品质[5]

，廉价培养基的筛选对开发青贮玉米秸

秆微生物作为青贮添加剂尤为重要。青贮饲料发酵是

一个复杂的微生物菌落演替过程[6]

，青贮微生物的组成

受青贮原料、环境气候、加工工艺、厌氧程度等因素影

响[7-10]

。不同环境下的青贮微生物组成各不相同，保安

安[11]

研究结果表明青藏高原青贮微生物菌群主要由肠

球菌属（Enterococcus）、乳杆菌属（Lactobacillus）、片球菌

属（Pediococcus）、明串珠属（Leuconostoc）、魏斯氏菌属

（Weissella）组成；Li等[12]

研究热带青贮微生物菌群表明，

菌群主要为魏斯氏菌属、肠杆菌属和泛菌属（Pantoea）

等；梁幸等[13]

研究表明广西青贮微生物主要由乳杆菌

属、葡萄球菌属（Staphylococcus）、鞘氨醇单胞菌属

（Pphingomonas）、甲基杆菌属（Methylobacterium）、根瘤

菌属（Rhizobium）为主，后期以乳杆菌属为主；杨佳等[14]

研究不同添加剂对青贮品质提升效果不同，辛亚芬等[5]

研究表明青贮添加剂的组成成分不同也会对青贮品质

产生影响，添加微生物菌剂能提升青贮品质[15-17]

。

廉价培养基是对适用培养基进行原料替换和微

量元素的控制进而达到降低培养菌群成本的低成本

培 养 基[18]

，乳 酸 杆 菌 琼 脂 培 养 基（De Man Rogosa

Sharpe，MRS）作为青贮微生物常用培养基，其成本较

高，难以作为青贮添加剂主要成分开发利用。在养殖

过程中，养殖户常因添加剂成本较高、制作工艺复杂

等因素没有持续使用，使得青贮添加剂技术难以快速

推广。青贮添加剂进行开发利用的关键技术在于改

良青贮菌剂组成成分和纯化微生物菌种，改良青贮菌

剂组成成分有利于降低青贮添加剂的成本，改善青贮

品质，助推青贮添加剂技术的高速发展。

本试验通过采集贵州青贮玉米秸秆饲料，筛选

3 种常见廉价培养基，对贵州青贮微生物多样性、微

生物组成、微生物生长曲线、活菌数和菌剂产量进行

研究，阐述不同廉价培养基对青贮微生物的影响，筛

选廉价培养基作为青贮添加剂的发酵成分，降低青贮

添加剂成本，推动青贮发酵技术的高效发展。

1 材料与方法

1.1 试验材料

MRS固体培养基（上海博微生物科技有限公司）、

MRS肉汤培养基（杭州百思生物技术有限公司）、4.6%

中蛋白乳清粉（佛山西陇化工有限公司）、葡萄糖（佛

山西陇化工有限公司）、玉米面（市购）、分析纯 NaCl

（成都金山化学试剂有限公司）、番茄（市购）。

1.2 试验设计

选用贵州优质全株玉米秸秆原料不添加微生物菌

剂装入聚乙烯袋中，封口置于平均温度24 ℃室内进行

厌氧发酵，青贮发酵90 d，划开聚乙烯袋后，将青贮料

取出，充分混匀，随机取样并立即放入加有20%的无菌

甘油EP管中，将EP管置于液氮中进行保存，再取样品

100 g与生理盐水按照 1 ：9稀释，加入无菌细菌冻存

液，放入液氮罐保存。取部分样品送往苏州帕诺米克

生物医药科技有限公司进行16S rRNA测序；带回实验

室后使用 MRS固体培养基对青贮微生物进行分离纯

化，按2%的接种量接种到发酵培养基中，发酵培养基

设计4个处理，3个重复，分别为MRS肉汤培养基组、乳

清粉培养基组、玉米面培养基组、番茄汁培养基组。

1.3 测定指标及试验方法

1.3.1 培养基配置

MRS固体培养基由胰酪胨10 g、牛肉膏粉5 g、酵

母粉 4 g、葡萄糖 20 g、乙酸钠 5 g、柠檬酸三胺 2 g、磷

酸氢二钾 2 g、硫酸镁 0.2 g、硫酸锰 0.05 g、琼脂 15 g、

吐温80 1 mL组成；MRS肉汤培养基由蛋白胨10 g、牛

肉粉8 g、酵母粉4 g、葡萄糖20 g、磷酸氢二钾2 g、柠檬

酸氢二铵2 g、乙酸钠5 g、硫酸镁0.2 g、硫酸锰0.04 g、

吐温80 1 mL组成；乳清粉培养基由4.6%中蛋白乳清

粉50 g、葡萄糖10 g组成。玉米面培养基由玉米面与

水按照 1 ：40 的比例在 60 ℃煮 1 h 后用 0.2 mm 过滤

器过滤，过滤后加入1%葡萄糖和0.05%氯化钠制成；

番茄汁培养基用市场的番茄熬煮制成番茄汁，按1 ：5

稀释番茄汁制成。培养基配置完成后用 1% 盐酸将

pH调至6.4，121 ℃灭菌20 min。

1.3.2 青贮微生物分离培养及鉴定

称取10 g青贮玉米饲料加入到250 mL含有研磨

珠的锥形瓶内，加入 90 mL 生理盐水，进行研磨制成

悬浮液，取上清液备用；在超净工作台内用生理盐水按

照1 ：9比例进行梯度稀释，振荡混匀，选择10-4

、10-5

、

10-6

稀释液100 μL，涂布于MRS固体培养基，于37 ℃

倒置厌氧培养48 h，培养结束后将培养皿上所有菌种

刮入冻存管中保藏。

1.3.3 青贮微生物DNA提取及Illumina Miseq测序

使 用 Tiangen DNA kit 提 取 分 离 纯 化 菌 株 总

DNA。送往苏州帕诺米克生物医药科技有限公司进

行 16S rDNA PCR 扩增 V3~V4 区。将测序结果与 Sil⁃

va 数据库（Release132，http://www. arb-silva. de）进行

OTU 序列比对，筛选有效序列。16S rRNA 扩增 V3-

V4 区引物为通用引物，序列为 27F：5'-AGAGTTT⁃

109

生 物 技 术 2023年第44卷第20期 总第689期

GATCATGGCTCA-3'，1492R：5'-TACGGCTACCTT⁃

GTTAC-3'。

1.3.4 发酵培养基筛选

将分离纯化的菌种按 2% 接种量分别接种到

MRS肉汤培养基、玉米面培养基、乳清粉培养基、番茄

汁培养基中进行富集培养，每2 h取一次样，使用赛多

利斯 pH 计测定 pH，使用普析 T6 紫外分光光度计在

600 nm 处测定 OD 值；培养 48 h 取 1 mL 的菌液加入

99 mL的生理盐水梯度稀释，稀释至10-8

、10-9

、10-10三

个梯度浓度，在无菌培养皿中注入1 mL稀释菌液，将

MRS 固体培养基倾注培养皿中，用量约 15 mL，转动

培养皿使菌液与 MRS 固体培养基均匀混合；倒置于

CO2培养箱中 37 ℃培养 72 h。采用菌落计数器进行

观察，参考 GB 4789.35—2016《食品安全国家标准 食

品微生物学检验 乳酸菌检验》计算活菌数。将剩余

菌液在卢湘仪 18M 离心机 12 000 r/min 离心 10 min，

倒掉上清液，称取空管重和菌重，计算菌种产量。

1.5 数据统计与分析

微生物测序数据使用 R 4.2.1 进行 Alpha 多样性

和丰度计算处理；使用SPSS 27进行数据显著性分析，

分别对不同培养基微生物生长曲线、pH、活菌数、产

率进行单因素方差分析，使用 Origin 2018 制图。P≤

0.05表示差异显著，P≤0.01表示差异极显著。

2 结果与分析

2.1 青贮饲料微生物组成分析

通过对青贮饲料进行 16S 测序分析，结果由图 1

可知，青贮饲料中微生物门水平菌群主要由厚壁菌门

（Firmicutes）、变形菌门（Proteobacteria）组成。贵州青

贮饲料微生物属水平菌群主要由魏斯氏菌属（Weissel⁃

la），丰度值为 51.20%；假单胞菌属（Pseudomonas），丰

度值为 34.25%；片球菌属（Pediococcus），丰度值为

12.75%等菌属组成。

2.2 青贮微生物Alpha多样性研究

由表 1 可知，青贮饲料中微生物 Simpson 指数为

0.684 2，Shannon指数为7.445 5，Chao指数为1 887.197，

ACE指数为1 901.210 2。

表1 青贮饲料微生物Alpha多样性指数

样本

青贮微生物

Chao

1 887.197

Simpson

0.684 2

Shannon

7.445 5

ACE

1 901.210 2

2.3 不同培养基对青贮微生物活菌数的影响

由图2可知，其青贮微生物活菌数依次是MRS肉

汤培养基组>乳清粉培养基组>番茄汁培养基组>玉米

面培养基组。结果表明，MRS肉汤培养基组活菌数极

显著高于其余各组（P≤0.01），乳清粉培养基组活菌数

极显著高于玉米面培养基组（P≤0.01），番茄培养基组

活菌数显著高于玉米面培养基组（P≤0.05），乳清粉培

养基组与番茄培养基组差异不显著（P>0.05）。MRS

肉汤培养基组、乳清粉培养基组、玉米面培养基组菌

泥产量差异不显著（P>0.05），玉米面培养基组菌泥产

量极显著高于其他组（P≤0.01）。

2.4 不同培养基对青贮微生物pH、生长曲线的影响

如图 3所示，各组培养基在培养贵州青贮微生物

48 h后，pH：玉米面培养基组>乳清粉培养基组>MRS肉

图1 玉米秸秆青贮微生物组成

（a）贵州青贮饲料微生物门水平

相对丰度(%)

门水平

100

75

50

25

0

排名前10的门

Epsilonbacteraeota

Verrucomicrobia

Cyanobacteria

Fusobacteria

Actinobacteria

Bacteroidetes

Proteobacteria

Firmicutes

（b）贵州青贮饲料微生物属水平

相对丰度(%)

属水平

100

75

50

25

0

排名前20的属

Subdoligranulum

Muribaculaceae

Faecalibaculum

Sphingobacterium

Acinetobacter

Escherichia−Shigella

Faecalibacterium

Pantoea

Ochrobactrum

Methylobacterium

Stenotrophomonas

Lactococcus

Enterobacter

Allorhizobium−Neorhizobium−Pararhizobium−Rhizobium

Lactobacillus

Enterococcus

Bacillus

Pseudomonas

Weissella

Pediococcus

110

SILIAO GONGYE 2023年第44卷第20期 总第689期

汤培养基组>番茄汁培养基组；OD值：MRS肉汤培养基

组>乳清粉培养基组>番茄汁培养基组>玉米面培养基组。

如图4所示，番茄汁培养基组pH显著低于MRS肉汤培养

基组、乳清粉培养基组（P≤0.05），极显著低于玉米面培养

基组（P≤0.01），MRS肉汤培养基组与乳清粉培养基组差

异不显著（P>0.05）；MRS肉汤培养基组的OD值显著高

于乳清粉培养基组（P≤0.05），极显著高于番茄汁培养基

组、玉米面培养基组（P≤0.01），乳清粉培养基组OD值极

显著高于番茄汁培养基组、玉米面培养基组（P≤0.01），番

茄汁培养基组OD值显著高于玉米面培养基组（P≤0.05）。

注：**表示两组培养基间差异极显著（P≤0.01）；*表示两组培养基间差异显著（P≤0.05）；图4同。

图2 不同培养基的青贮微生物活菌数差异菌泥产量(%) 6

5

4

3

2

1

乳清粉

培养基组

番茄汁

培养基组

玉米面

培养基组

MRS肉汤

培养基组

**

** **

（b）不同培养基组青贮菌菌泥产量

活菌数(×1010 CFU/mL)

乳清粉

培养基组

番茄汁

培养基组

玉米面

培养基组

MRS肉汤

培养基组

20

15

10

5

0

** **

**

* **

（a）不同培养基组青贮微生物

pH

0 10 20 50

7.0

6.5

6.0

5.5

5.0

4.5

4.0

3.5

MRS肉汤培养基组

乳清粉培养基组

番茄汁培养基组

玉米面培养基组

30 40

培养时间（h）

（a）

OD

值

0 10 20 50

3.5

3.0

2.5

2.0

1.5

1.0

0.5

0.0

MRS肉汤培养基组

乳清粉培养基组

番茄汁培养基组

玉米面培养基组

30 40

培养时间（h）

（b）

图3 不同培养基组青贮微生物pH及生长曲线变化图 OD

值

乳清粉

培养基组

番茄汁

培养基组

玉米面

培养基组

MRS肉汤

培养基组

3.4

3.2

3.0

2.8

2.6

2.4

2.2

2.0

1.8

1.6

1.4

**

**

**

*

*

**

（b）不同培养基组青贮微生物OD值

pH

乳清粉

培养基组

番茄汁

培养基组

玉米面

培养基组

MRS肉汤

培养基组

5.5

5.0

4.5

4.0

3.5

3.0

*

**

*

*

*

（a）不同培养基组青贮微生物pH

图4 不同培养基组青贮微生物pH和OD值

111

生 物 技 术 2023年第44卷第20期 总第689期

3 讨论

近年来对地方青贮微生物作为青贮添加剂进行开

发利用研究逐渐增加[19]

，青贮添加剂主要有乳酸菌制

剂、化学添加剂、酶制剂、营养性添加剂等[20]

。其中微生

物添加剂改善效果最为显著，很多的微生物青贮添加剂

均已实现商品化，并且制备开发的新型添加剂也在不断

涌现[21]

。本研究探究廉价培养基对青贮微生物的影响，

旨在挖掘低成本的青贮微生物培养基配方，结果表明，

贵州青贮微生物在不同培养基中活菌数依次是MRS肉

汤培养基组>乳清粉培养基组>番茄汁培养基组>玉米面

培养基组，pH 为玉米面培养基组>乳清粉培养基组>

MRS肉汤培养基组>番茄汁培养基组，OD浓度为MRS

肉汤培养基组>乳清粉培养基组>番茄汁培养基组>玉米

面培养基组；MRS肉汤培养基中营养元素全面，能提供

乳酸菌繁殖生长的最佳营养条件[22]

，乳清粉培养基因其

含有较高蛋白质、维生素、微量元素等，常用作酵母菌发

酵增菌培养基[23]

，前人研究表明乳清粉培养基能提供促

进乳酸菌生长的营养物质，提升发酵效果[24]

，番茄培养

基发酵效果优于玉米面培养基，因番茄培养基初始pH

和维生素含量丰富等条件优于玉米面组[25-26]

。本次研

究表明MRS肉汤培养基具有高产、高品质的效果，但其

成本较高，难以作为青贮添加剂培养基进行开发利用，

乳清粉培养基与MRS肉汤培养基同样有着高产、高品

质的特点，并且乳清粉培养基成本低，可作为玉米秸秆

青贮微生物添加剂的廉价培养基。

4 结论

综上，乳清粉培养基与 MRS 肉汤培养基有着高

产、高品质的特点，可作为青贮玉米秸秆微生物添加

剂进行开发利用的廉价培养基。

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（编辑：王博瑶，wangboyaowby@qq.com）

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