上海瑞诺生物科技有限公司

苏州瑞特佰生物科技有限公司

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致力于为生物医药领域

提供高品质的试剂产品

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蛋白重组试剂 产品技术手册 Protein recombination reagent

01 01

T

R

COMPANY

2020

e

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DEDICATED TO THE BIOMEDICAL FIELD

PROVIDE HIGH QUALITY REAGENT PRODUCTS 目录 CONTENTS

01

07

17

25

39

45

49

52

55

58

我们专注于生物医药研发及质量控制相关配套试剂

的研发和生产，拥有专业知识扎实的市场人员，训

练有素的技术支持团队，核心研发团队和管理团队

在生物医药领域有着二十多年的从业经验，熟悉国

内外生物医药行业法规，深刻理解生物医药研发、

评价与分析配套产品的客户需求、运用场景和技术

标准。

公司现有重组C因子内毒素检测试剂盒、蛋白表征

相关糖苷酶和蛋白酶、细胞活性检测试剂等众多

品，旗下“Rhinogen”系列产品已服务数百家生

物医药公司、CRO公司、CDMO公司及高校，是

生物分析领域的专业供应商。

致力于为生物医药领域

提供高品质的试剂产品

内毒素检测

RhinoBio提供内毒素检测试剂:重组C因子内毒素检测试剂盒及其他相关试剂和耗材等。

糖苷酶系列

RhinoBio提供用于N-糖基化分析的 PNGase F、Quick™ PNGase F-Plus和 EndoS等，用于0-糖基化分析用酶如:

0-Glycosidase 和a2-3,6,8,9 Neuraminidase 等，用于岩藻糖化的α1-2 Fucosidase等，以及三款组合装。

蛋白酶系列

RhinoBio提供适用于特异性lgG的蛋白酶:IdeS protease、lgdE protease 和FabCOUPER protease;用于肤图及

蛋白序列分析的重组糜蛋白酶、胰蛋白酶、GIu-C 和 LyS-C，可用于 0-糖基化和 O-糖位点测定的两款O-糖蛋白酶;以及

其他不同功能的蛋白酶如: GyCOUPER protease 等 。

报告基因检查测

RhinoBio 提供报告基因检测细胞株: ADCC Reporter Bioassay, Core Kit 和 PD-1/PD-L1 BlockadeBioassay 等;

以及适用于报告基因检测系统的萤火虫荧光素酶试剂: Bio-GloryTM One-Step 萤火虫荧光素酶分析试剂盒和

Bio-OneTM One-Step 萤火虫荧光素酶分析试剂盒等。

细胞活力检测

RhinoBio提供细胞活力检测试剂:Cell Titer Turbo 2.0 Luminescent Cell ViabilityAssay 和 Cel TiterTurbo 3D

Luminescent Cell Viability Assay;细胞活性检测染料:Resazurin细胞活性检测染料和CCK-8 细胞活性检测染料。

激酶活性检测

RhinoBio提供用于定量来检测激酶活性的 Kinase-TurboTM 激酶活性检测试剂盒。

残留检测

RhinoBio残留检测系列主要包括核酸酶残留检测-NucleCutTM 核酸酶残留ELISA 检测试剂盒和宿主细胞蛋白残留检测

一CHO宿主细胞蛋白检测试剂盒。

支原体检测

RhinoBio提供两款用于支原体测的试剂盒:MycoAlarm“ 支原体检测试剂盒和 Myco-VisalmTM 一步法快速支原体检

测试剂盒。

组织解离酶

RhinoBio提供一系列组织解离酶：胰蛋白酶、重组人透明质酸酶、重组胶原酶 G、重组胶原酶 H和嗜热菌蛋白酶，以及组织

解离试剂盒：大鼠肝脏细胞分离试剂盒、小鼠胰岛细胞分离试剂盒和软骨细胞分离试剂盒等。

重组抗原&Fc受体蛋白

RhinoBio提供重组表达高纯度的抗体药物靶标抗原。适用于抗体药物的功能学分析、质控放行指标中的相对结合活性分析

以及抗体药物临床前和临床阶段的药代分析等。

01 02

T

Rhinogen®

临床输液反应以热原反应危害最大，发生率最高。内毒素（即革兰氏阴性菌细

胞壁的脂多糖分子，lipopolysaccharide，LPS）是研究最透彻也是最常见的

生物热原，注射即使是pg级别的痕量LPS也会导致病人严重的热原反应，引起

人体发热、休克甚至死亡。内毒素普遍存在且不易灭活，对制药和医疗器械行

业是一个挑战。因此，灵敏可靠的内毒素分析技术是非常必须的。

RhinoBio于2018年成功研发重组C因子内毒素检测试剂盒，通过基因重组的方

式表达C因子，相比于传统鲎试剂，可以从根本上排除G因子旁路干扰、批间差

异更易控制，且符合鲎资源保护需求并能解决医药行业日益增长的内毒素检测

需求和有限鲎资源之间的矛盾。

内毒素检测 内毒素检测

Endotoxin Detection

重组C因子

内毒素检测试剂盒

鲎C因子是鲎血细胞中一种对细菌内毒素敏感的

丝氨酸蛋白酶原，在细菌内毒素介导的鲎血凝集

系统反应中，鲎C因子第一个被内毒素激活而启

动整个鲎血细胞中的血凝级联反应。

Rhinogen® 重组C因子是以基因重组的方式表达

的东方鲎（Tachypleus tridentatus）C因子重

组蛋白（Recombinant Factor C, rFC）。通过

结合内毒素被激活的重组C因子能够切割底物获

得游离的荧光基团，荧光基团的释放与内毒素的

浓度呈正比，从而使得内毒素被定量检测。

本试剂盒可替代传统鲎试剂用于人用和动物用注

射药物（如化学药品、放射性药物、抗生素类、

生物制品等）及医疗器械（如透析液、植入式器

械等）的原辅材料、中间产品、放行产品的内毒

素检测。

产品列表

LRW CSE

漩涡震荡

≥15min

1 溶解内毒素工作标准品

5.0EU/ml 0.5EU/ml 0.05EU/ml 0.005EU/ml

2 制备梯度内毒素标准品溶液

3 加入样品

底物 缓冲液 酶溶液

4 配制底物试剂

5 加入底物试剂

6 荧光读数

一步反应 液体试剂 通量高 用时短

无热原水

rFC酶

荧光底物

反应缓冲液

内毒素工作标准品

96孔白板

货号 RAF-01 RAF-02

03 04

T

产品特点

Rhinogen® 重组C因子内毒素检测试剂盒是一种不依赖于动物源性成分，灵敏度高、特异性高、可稳定且持

续提供的替代鲎试剂的内毒素测定试剂，具有如下特性：

图A1：葡聚糖存在时，LAL显色法会受到G因子旁路的干扰，而

rFC法不受干扰。

液体试剂易于使用；

内毒素特异性，无G因子旁路干扰；

不依赖动物源性成分，提供更高的供应安全性。

终点荧光测定，与其他定量LAL方法相当。

图A2：重组C因子内毒素检测法具有更高的检测准确性。

图A3：不同批次产品的标准曲线表明本产品具有优异的重现性。

图A4：重组C因子内毒素检测法灵敏度高检测范围为0.005EU-

/ml-5EU/ml。

消除了对动物源试剂的依赖，符合3R的替代原则；

重组表达生产，产品批间一致性良好。

灵敏度范围从0.005到5EU/ml。

方法对比

Rhinogen® 重组C因子内毒素检测正在引领内毒素检测的发展。

表1. 重组C因子内毒素检测与传统鲎试剂检测法的对比：

传统鲎试剂

对比内容 显色法 重组C因子内毒素检测法

凝胶法

终点浊度法 动态浊度法 基质显色法 动态显色法

浊度法

性质

需要仪器设备

检测结果

检测灵敏度

试剂来源

反应原理

定量 定量 定量 定量 定量

级联反应（三种丝氨酸蛋白酶原参与，存在G因子旁路干扰） 单C因子反应，准确性、精确性远高于鲎试

剂法

鲎血变形细胞裂解物 重组表达鲎C因子，消除了对动物源试剂的

依赖，符合3R的替代原则

0.01 100EU/ml 0.1 1EU/ml 0.005 50EU/ml 0.005 5EU/ml

0.03、0.06、0.125

和0.25EU/ml

可自动化，能保存电子数据 人工读数和记录

（具有主观性）

可进行荧光检测（波长设置为380/440nm）

的酶标仪

定性，半定量

37℃水浴 酶标仪，浊度仪 温控酶标仪 温控酶标仪，

浊度仪

分光光度计，

酶标仪

重组C因子内毒素检测方法是传统鲎试剂内毒素检测方法的进化，目前已被多家全球监管机构所接受，是未

来内毒素检测方法的发展方向。

2018年09月，FDA已批准rFC用于Eli Lilly的偏头痛药品Galcanezumab的最终产品的细菌内毒素检测及

产品放行；

2020年06月，2020版中国药典《9251细菌内毒素检查法应用指导原则》提出，可使用重组C因子法进行

内毒素检查；

2021年01月01日，欧洲药典EP 2.6.32 正式实施；

2023年初，USP提议通则<86>使用重组试剂进行细菌内毒素测试，其征求意见期从2023年08月22日到

2024年01月31日。

与经典的鲎试剂内毒素检测方法相比，重组C因子内毒素检测法是单C因子的酶促反应，根本上消除了G因子旁

路干扰，具有更高的特异性，更好的专属性、精密度、准确度、线性范围及定量限。且由于单C因子是重组表

达，消除了对动物源试剂的依赖，符合3R原则，是目前鲎试剂内毒素检测方法的改良方法。

相关法规

05 06

T

仪器兼容性 相关配套试剂

无热源耗材

广泛适用性

通常来说，能用传统鲎试剂进行内毒素检测的样品，均能用重组C因子内毒素检测法进行检测，传统鲎试剂

不能检测的样品如含葡聚糖，也能用重组C因子内毒素检测法进行检测。下述为Rhinogen® 重组C因子内毒素

检测试剂盒成功适用的部分案例。

除了不受葡聚糖引起的G因子旁路干扰，重组C因子内毒素检测与经典的鲎试剂内毒素检测方法一样都会受到

检测基质中高盐、强酸强碱、血浆、天然荧光物质等成分的干扰。由于检测的干扰始终是产品特异性的，因

此每种产品均应按照药典要求进行正常的干扰验证研究。

● 细胞发酵种子液

● 细胞培养基础培养基

● PBS缓冲液

培养基或缓冲液

● 氨基酸

● 康莱特

● 还原型谷胱甘肽

● 泮托拉唑

● 奥沙利铂

● 环磷酰胺

注射剂

● 双黄连注射液

中药注射剂

● RSV疫苗/流感疫苗原液/制剂缓冲液

疫苗

● 长效人红细胞生长刺激素收液上清及原液

● 重组人卵泡刺激素-CTP融合蛋白注射液

● 单抗样品

● 重组蛋白酶等

蛋白样品

● 改性淀粉止血材料

医疗器械

● NK细胞

● 病毒

细胞治疗相关样品

各不同来源水产品养殖用水

注射用水

Rhinogen®重组C因子内毒素检测试剂盒与多个厂家的

多款荧光酶标仪兼容，常规带荧光模块，能将激发/

发射波长设置为380/440nm的酶标仪均能用于此试剂

的使用。下述几个品牌的多个型号的酶标仪均已通过

Rhinogen®重组C因子内毒素检测试剂盒进行的验证。

如果未列出您的酶标仪，请联系我们的技术支持团

队，以了解兼容性。

Molecular Devices XPS

Molecular Devices

SpectraMax iD3

Molecular Devices

SpectraMax i3/i3x

Molecular Devices

M2e/M3/M4/M5/M5e

细菌内毒素

工作标准品 RAF-01A-20

Rhinogen® 细菌内毒素工作标准品系自大肠杆菌（ ）提取精制得

到的内毒素，其效价以细菌内毒素国家标准品标定。适用于内毒素检测过

程中各种阳性对照，和定量检测时标准曲线的制备等。

注意事项：本品不得用于人体；稀释后的内毒素标准品溶液在2-8℃能稳

定8小时，8小时后请弃用。

产品名称 货号 产品信息

50-100EU/瓶

20瓶/盒

无热原水 RAF-01-06 Rhinogen® 无热原水内毒素含量＜0.005EU/ml，适用于各种内毒素检测

试验，可用于内毒素工作标准品和检测样品的稀释。

30ml/瓶

6瓶/盒

规格

●

●

●

10mM氯化镁

溶液 RAF-01G-06

Rhinogen® 10mM氯化镁溶液是一种细菌内毒素检测辅助剂，当尝试克服/

抑制螯合作用时，可用于调节检测样品中二价阳离子的浓度。

注意事项：本品内毒素含量＜0.005EU/ml。

30ml/瓶

6瓶/盒

●

●

●

Tris缓冲液 RAF-01A-06

Rhinogen® Tris缓冲液（50mM Tris-HCl溶液，pH= 8.0）是一种细菌内

毒素检测辅助剂，可替代水用于高酸性或高碱性样品的稀释，使样品的

pH控制在适合内毒素检测的范围（pH 6-8）内。

注意事项：本品内毒素含量＜0.005EU/ml。

30ml/瓶

6瓶/盒

●

96孔平底微孔板

（白底透明盖） RA-HC01

材质：PS（聚苯乙烯）；

工作容积范围：50 至 250 μl/孔；

1）可用于化学发光检测，如萤火虫荧光素酶报告基因检测；2）

结合Rhinogen ® 重组C因子内毒素检测试剂盒（货号：

RAF-01/RAF-02），用于内毒素的高通量检测；3）其它基于细胞

进行的检测等。

96孔平底微孔板 50pcs/箱

（白底透明盖） RA-HC01 50pcs/箱

产品名称 货号 规格 产品信息

96孔平底可拆卸微孔板

（白底透明盖） RA-HC02

材质：PS（聚苯乙烯）；

工作容积范围：50 至 250 μl/孔；

结合Rhinogen ® 重组C因子内毒素检测试剂盒（货号：

RAF-01/RAF-02），用于内毒素的高通量检测。

50pcs/箱

96孔平底可拆卸微孔板

（白底透明盖） RA-HC02

材质：PS（聚苯乙烯）；

工作容积范围：50 至 250 μl/孔；

结合Rhinogen ® 重组C因子内毒素检测试剂盒（货号：

RAF-01/RAF-02），用于内毒素的高通量检测。

50pcs/箱

材质：PS（聚苯乙烯）；

工作容积范围：50 至 250 μl/孔；

1）可用于化学发光检测，如萤火虫荧光素酶报告基因检测；2）结合

Rhinogen® 重组C因子内毒素检测试剂盒（货号：RAF-01/RAF-02），

用于内毒素的高通量检测；3）其它基于细胞进行的检测等。

●

●

●

●

●

●

O-glycans N-glycans

β(1,3)

β(1,3)

β(1,6) β(1,4)

β(1,4) β(1,4)

β(1,4) β(1,4)α(2,3) α(2,8)α(2,3) α(2,3)

α(1,6) α(1,3)

α(1,6) α(1,3)

α(2,6)

S/T

S/T N

N

PNGase F

（肽N-糖苷酶F）

15,000U

30μl

5×15,000U

30μl

产品名称 规格

N-糖基化分析

选购指南

PNGase F是一款重组生产的糖苷内切酶，可以在 N-连糖肽或糖蛋

白的高甘露糖、杂合和复杂寡糖部分最内侧的N-乙酰葡萄糖胺

（GlcNAc）和天冬酰氨残基（Asn）之间进行切割，并释放出完整

的寡糖链；

能完整地将绝大多数N-糖链释放下来（除含α-1,3连接的核心岩藻

糖，常见于植物及昆虫糖蛋白）。

●

●

Quick™ PNGase F-Plus

（快切肽 N-糖苷酶 F）

30T

5×30T

可以在数分钟内完成抗体和融合蛋白的完全快速去糖基化，并与下

游 HPLC 或 MS 兼容;

既保留了 PNGase F 的特性，同时又能将所有 N-聚糖快速无偏好

释放，且在非还原条件下酶切时还能同时保留抗体的二硫键，获得

完整的去糖基化多聚体蛋白 (抗体)。

●

●

Immobilized

PNGase F，

Microspin

（固定化肽N-糖苷酶F）

1支

5支

10支

Immobilized PNGase F，Microspin是由PNGase F和琼脂糖珠共价

偶联的结合；

通过离心很容易将产物和PNGase F分离，简化了后续的提纯工艺。

●

●

Endo F1

（糖苷内切酶F1）

0.33U/20μl

1U/60μl

3.3U/200μl

Endo F1可在肽和蛋白质中切割天冬酰胺连接的高甘露糖（低聚甘露

糖）和一些杂合寡糖，杂合结构的核心岩藻糖基化会使Endo F1的酶

切速率降低超过50倍；

在天然或非变性的去糖基化条件下使用。

●

●

EndoS

endoglycosidase

（糖苷内切酶EndoS）

1000U

5×15,000U

30μl

EndoS endoglycosidase是IgG特异性糖苷内切酶，可以水解IgG

Fc端N-聚糖的两个N-乙酰葡糖胺（GlcNAc）中间的β-1,4糖苷

键，释放糖链，从而在Asn残基上留下含有或不含核心岩藻糖的

GlcNAc，对所有类型的N-糖链都能有效酶切；

只对天然和完全折叠的IgG具有活性，适用于人 IgG 各亚型，及小

鼠、大鼠、猴、山羊、绵羊、牛、马的 IgG 抗体糖基。

●

●

Endo F3

（糖苷内切酶F3） 240U

QPF-001-A

QPF-001-B

货号

QPF-019-A

QPF-019-B

QPF-101-A

QPF-101-B

QPF-101-C

QPF-016-A

QPF-016-B

QPF-016-C

QPF-011-A

QPF-011-B

QPF-017

Endo F3 切割游离的或天冬酰胺连接的三触角或 α-(1-6) 岩藻糖

基化的双触角寡糖（非岩藻糖基化的双触角聚糖也会被切割，但速

度会降低40倍），以及三氨糖基壳二糖核心结构；

α1-3 岩藻糖基化会抑制Endo F3活性，且对寡甘露糖和杂合分子没

有活性；

在寡糖的二乙酰壳二糖核心中的两个N-乙酰氨基葡糖残基之间裂

解，产生一个截短的糖分子，其中一个 N-乙酰氨基葡糖残基留在天

冬酰胺上，而PNGase F可完整去除寡糖。

●

●

●

产品详情

07 08

糖苷酶

Glycosidases

RhinoBio重组糖苷酶系列包括了用于N-糖基化分析的PNGase F、

Endo F1等；多种组合用于---糖基化分析的---Glycosidase、α

2-3,6,8,9 Neuraminidase等；适用于岩藻糖分析的几款酶：α1-2 Fucosidase、α1-2,4,6 Fucosidase和α1-3,4 Fucosidase；以及三款组

合装。

09 10

应用案例

Rhinogen® PNGase F与某进口主流品牌的 PNGase F对比

用于西妥昔单抗的N-糖基化分析，二者具有相同的酶切效

果。酶切位点

T

堵头，使用时

折断并反转

填料

顶盖

撑板

图A1. Rhinogen® Immobilized PNGase F，Microspin试剂盒。

本产品以琼脂糖基架，提供了预填充固定化的PNGase F的柱子，

可在柱内直接酶切，酶切产物可用离心的方法收集。

图A2. 对天然糖蛋白去糖基化时，通过等量糖蛋白变性后作为对

照，以确定非变性条件下去糖基化反应程度。

200μg 糖蛋白

50μl Rhinogen® ImmImmobilized PNGase

F

200μg 糖蛋白

50μl Rhinogen® lmmobilized PNGase F

37°C，650rpm，16h

37°C，650rpm，1h

产品对比

Quick™ PNGase F-Plus相

对进口品牌同款产品，具有更

好的酶切效果，相同的处理后

进行电泳分析,我们的酶切的更

彻底。

进口品牌

Rhinogen®

未处理

116.0

66.2

45.0

35.0

25.0

18.4

14.4

M

kDa Marker

116.0

66.2

25.0

14.4

35.0

18.4

45.0

Rhinozyme

QPF-003

NEB

P0711S

KJ003

未处理

样品

kDa Marker

116.0

66.2

25.0

14.4

35.0

18.4

45.0

Rhinozyme

QPF-003

NEB

P0711S

KJ003

未处理

样品

kDa Marker

116.0

66.2

25.0

14.4

35.0

18.4

45.0

Rhinozyme

QPF-003

NEB

P0711S

KJ003

未处理

样品

KDa 1 2 3

使用Rhinogen® 内切糖苷酶 F3（Endo

F3）和进口品牌的同款产品的对比研究，

二者具有相近的酶切效果。

250

150

100

70

50

40

30

20

kDa M 1 2 3

进口品牌

Rhinogen®

未处理

Rhinogen®

相同条件下使用Rhinogen® 内切糖苷酶 F3

（Endo F3）和进口品牌同款产品对比用于

核糖核酸酶 B的分析，Rhinogen® 内切糖

苷酶 F3（Endo F3）实际酶切效果优于进口

品牌。

Rhinogen®

11 12

T

O-糖基化分析

α2-3,6,8,9

Neuraminidase

（α2-3,6,8,9唾液酸酶）

QPF-005-A

QPF-005-B

0.6U/30μl

5×0.6U/30μl

α2-3,6,8,9 Neuraminidase是一款重组糖苷外切酶，能够释放

糖链末端α(2,3)-, α(2,6)-,α(2,8)-,α(2,9)-唾液酸残基；

不同唾液酸残基的释放速率大致为α(2,6)-＞α(2,3)- ＞α

(2,8)-＞α(2,9)-，通过加入足够的酶，释放的速率差异并不影

响它在实际应用中的完全非特异性去除唾液酸残基的性质。

●

●

β1-4 Galactosidase

（β1-4半乳糖苷酶）

QPF-006-A

QPF-006-B

0.06U/30μl

5×0.06U/30μl

β1-4 Galactosidase是一款高度特异性的糖苷外切酶，能够催化

寡糖或者糖蛋白非还原末端的β1-4连接的半乳糖残基的水解；

该特异性仅在酶浓度<100mU/ml时才是明显的。在较高酶浓度存在

时，会发生β1-3连接的半乳糖的水解。

●

●

β-NAcetylhexosaminidase

（β-N-乙酰基氨基己糖酶）

QPF-007-A

QPF-007-B

1.5U/30μl

5×1.5U/30μl

β-N-Acetylhexosaminidase是一款稳定性较高的糖苷外切酶，

能够催化释放寡糖非还原末端β(1-3,4,6)-连接的N-乙酰葡糖胺

(GlcNAc）和β(1-4)-连接的N-乙酰半乳糖胺(GalNAc)残基。

●

α-NAcetylgalactosaminidas

（α-N-乙酰半乳糖苷酶）

QPF-018-A 2000U

α-N-Acetylgalactosaminidas是一款糖苷外切酶，可有效水解

与糖蛋白中丝氨酸或苏氨酸残基连接的α-N-乙酰半乳糖胺

（GalNAc）（Tn抗原）。

●

-Glycosidase

（ -糖苷酶）

QPF-004-A

-Glycosidase是一款重组糖苷内切酶；能够将糖蛋白中Ser或

Thr残基的羟基连接的Core 1（Gal-β(1-3)-GalNAc-）及Core 3

（GlcNAc-β(1-3)-GalNAc-） -连双糖释放下来；

核心结构的任何修饰都可以阻断 -Glycosidase 的作用，核心结

构以外的单糖必须通过一系列外切糖苷酶依次切割，直到仅保留

Core 1或Core 3二糖核心。

QPF-004-B

1,200,000U/30μl

5×1,200,000U/

30μl

产品名称 货号 规格 产品信息

●

●

酶切位点

一、Rhinogen® α2-3,6,8,9 Neuraminidase与某进口主流品牌同款产品对比用于抗体融

合蛋白样品的去唾液酸研究。

结果显示，二者同款产品在相同用量下释放唾液酸残基后获得的各组峰面积相同，将Rhinogen®产品用量减半也可获得相同的酶切效果。

唾液酸酶来源

反应体系

Group4

Group5

序号 酶切条件1 酶切条件2 酶切条件3 酶切条件4

Group6

Group7

Rhinogen® Rhinogen® Rhinogen®

0.625U/mg

5.4

29.8

25.9

39.0

1.25U/mg

4.8

28.9

24.3

42.0

1.6U/mg

5.5

29.3

25.36

40.0

某主流品牌P

1.25U/mg

4.9

30.3

25.2

39.6

应用案例

13 14

T

酶切位点

二、客户使用本公司α2-3,6,8,9 Neuraminidase与进口产品进行对比检测，表明两种酶使用

效果一致。

峰1% 峰2% 峰3% 峰4%

18.18 22.08 28.67 31.06

RT/min ＜25.4

02

序号

26.7 28.7 ＞30.7

DAMAS

品牌

01 18.07 21.32 28.72 31.89 安捷伦

应用案例

三、β-N-Acetylhexosaminidase比进

口品牌的同款产品的酶活也要高很多，

相同的酶使用量及在相同的反应条件

下，反应25min后，我们400nm波长条

件下的OD值为0.799，而进口品牌的只

有0.305。（相同的酶使用量，相同的酶

切体系及条件下，我们的实际使用效果

更好。）另外，从这个电泳图上可以看

出，β-N-Acetylhexosaminidase产品

的纯度更高，而进口品牌产品中有相当

多杂条带，因此我们产品的纯度更高。

蛋白浓度

（μg/ml）

OD400

100

0.799

约200

0.305

0

0.007

样品名称 RhinogenTM 进口品牌 阴性对照

岩藻糖分析

α1-2 Fucosidase

（α1-2岩藻糖苷酶） QPF-013-A α1-2 Fucosidase可催化水解糖蛋白或游离寡糖上α1-2 连接的

岩藻糖。

● 1000U

产品名称 货号 规格 产品信息

α1-2,4,6 Fucosidase

（α1-2,4,6 岩藻糖苷酶） QPF-014-A 100U

α1-2,4,6 Fucosidase可催化寡糖中α1-2、α1-4和α1-6末端

岩藻糖残基的水解；

与其他键相比，可以更有效地切割α1-6岩藻糖残基。

●

α1-3,4 Fucosidase

（α1-3,4 岩藻糖苷酶） QPF-015-A 50μl

α1-3,4 Fucosidase可有效识别 α1-3,4 岩藻糖基化聚糖（例如

Lewis X/A 表位，包括它们的唾液酸化对应物）并水解这些底物

中的末端 α1-3和 α1-4岩藻糖基键，而无需去除唾液酸部分；

●

15 16

T

酶切位点

Protein Deglycosylation

Kit Ⅰ

(for -linked Glycans)

QPF-008

用于唾液酸化的 -糖链的酶

切释放。 1kit

产品名称 货号 规格 组成 产品信息

-Glycosidase

α2-3,6,8,9 Neuraminidase

●

●

Protein Deglycosylation

Kit Ⅱ

(for N-Linked & Simple

-Linked Glycans)

QPF-009

PNGase　F（Glycerol-free）

-Glycosidase

α2-3,6,8,9 Neuraminidase

用于唾液酸化的糖蛋白的N糖链及 -糖链的酶切释放。 1kit

●

●

●

Protein Deglycosylation

Kit Ⅲ

(for N-linked & Complex

-linked Glycans)

QPF-010 用于常见的所有N-糖链及部

分复杂 -糖链的酶切释放。 1kit

PNGase　F（Glycerol-free）

-Glycosidase

α2-3,6,8,9 Neuraminidase

β1-4 Galactosidase

β-N-acetylhexosaminidase

●

●

●

●

●

注意：（１）以上三款组合装均为单只组合，可灵活使用； （２）所有酶及试剂均与下游HPLC及MS兼容。

糖苷酶组合装

有文献报道，PNGase F在37℃下条件下，在2.5M尿素溶液中可以稳定24h，在5M尿素溶液中可以保留40％的活性。因此反应

体系中存在较低浓度的尿素可能不影响Rhinogen® PNGase F(Glycerol-free)去糖基化的活性。

Q1：PNGase F（货号：QPF-001）在含有尿素的反应体系中是否可以正常使用?

离子及非离子型表面活性剂在0.5-1.0%浓度范围时，大多数糖苷酶都不受或受到较小影响。但PNGase F、O-Glycosidase及

β1-4 Galactosidase这3种酶会受SDS的抑制，必须加入1%终浓度的NP-40到反应混合物中才能解除抑制。

Q2：表面活性剂是否会抑制外切糖苷酶/糖苷内切酶活性？

Rhinogen® Protein Deglycosylation Kit I&Ⅱ&Ⅲ 所有的酶及其储存缓冲液均与下游HPLC及MS应用兼容。由于糖蛋白变

性缓冲液（含SDS）与质谱不能兼容，且难以从反应体系中除去，因此如果使用质谱进行寡糖链或蛋白分析，建议在非变性条

件下进行去糖基化反应。或使用其它的变性条件（如尿素、盐酸胍等），酶切后可以采用微透析或微量过滤制备MS分析的样

品。

Q6：Rhinogen®三款试剂盒（货号：QPF-008、QPF-009、QPF-010）与下游HPLC及MS兼容吗？

在天然条件下，β1-4连接的半乳糖残基可能难以从完整IgG中去除，且去除效率根据IgG的亚型而变化很大。 通常需要延长

孵育时间和增加酶的使用量。 建议根据特定的样品进行适度优化。

Q5：β1-4 Galactosidase（货号：QPF-006）从完整IgG中去除β1-4连接的半乳糖残基需要

的条件？

可以。PNGase F及O-Glycosidase采用相同的缓冲液及反应条件，而α2-3,6,8,9 Neuraminidase具有非常宽pH适用范围

（pH 4.5-8.5），在PNGase F及O-Glycosidase反应体系中具有较好的活性，三者可以同时使用。

蛋白质的糖基化修饰有N-糖基化及O-糖基化修饰，O-Glycosidase适用于释放附着于Ser/Thr的Core 1和Core 3 O-连接的二

糖核心。如果底物中确定含有O-糖链，请确保同时使用Neuraminidase，以释放末端的唾液酸修饰基团。同时由于空间位阻

效应（蛋白质的二级结构和三级结构）可以阻碍内切糖苷酶到达其底物作用位点，在去糖基化之前进行变性，同时按实验操

作加入NP-40溶液有助于O-连聚糖有效的释放。如果不想变性处理，则考虑添加更多的酶或延长孵育时间。

糖苷酶系列常见问题与解决方案

Q4：是否可以同时使用PNGase F（货号：QPF-001）、 -Glycosidase（货号：QPF-004）

及α2-3,6,8,9 Neuraminidase（货号：QPF-005）？

Q3：使用 -Glycosidase（货号：QPF-004）处理糖蛋白后没有看到糖链的去除，可能是什

么原因？

17 18

T

蛋白酶 蛋白酶 Protease

Rhinogen®

位点区别 流程展示

IgG特异性蛋白酶

fi反应时间ffffl

fi反应时间ffifl

fi过夜

IdeS protease

QIP-001-A 5000U

QIP-001-B 5*5000U

QIP-001-C 1000U

产品名称 货号 规格

IdeS protease仅在铰链区下方的一个特定位点裂解IgG 以产生F(ab')2

和Fc片段；

可适用的底物更广，除可酶切人IgG1~4、猴、绵羊、兔IgG外，还对小

鼠IgG2a、IgG3具有特异性切割活性。

●

●

Immobilized IdeS，

Microspin

QIP-101-A 1支

QIP-101-B 5支

QIP-101-C 10支

Immobilized IdeS，Microspin是IdeS protease和琼脂糖珠的共价偶联；

消化完成后的溶液内，可得到F(ab')2和Fc片段，而不含IdeS酶。

●

●

QIP-102-A 1支

QIP-102-B 5支

QIP-102-C 10支

Immobolized IdeS

Cut-Pure Kit，

Microspin

Immobolized IdeS Cut-Pure Kit，Microspin包含用于抗体消化的

Immobilized IdeS，Microspin和用于F(ab')2片段以及Fc片段分离的

Protein A纯化柱。

●

IgdE protease QIP-007-C 1000U

IgdE protease仅在人IgG1铰链区上方的一个特定位点裂解以产生Fab和

完整Fc片段；

能有效地切割人hIgG1，不能切割人其他IgG 亚型和其他物种的IgG。

●

FabCOUPER

protease QIP-009 1000U

FabCOUPER protease可在铰链区上方单个位点特异性消化人IgG1，生成

完整的Fab和Fc片段；

如果去除 N-聚糖，则Fc上可能会出现第二个消化位点；

在天然条件下具有活性并且需要钙离子的存在，但被Zn2+抑制，同时被

丝氨酸蛋白酶抑制剂及EDTA抑制；

该酶对具有突变铰链区的抗体（例如 LALA 突变）具有活性。

●

●

●

产品详情

图1. Rhinogen® Immobolized IdeS，Microspin试剂盒操作简介。本产品以琼脂糖基架，

提供了预填充固定化的IdeS的柱子，可在柱内

直接酶切，酶切产物可用离心的方法收集。

30min

60min

图1. Rhinogen® Immobolized

IdeS Cut-Pure Kit，Microspin

试剂盒操作简介。

本试剂盒中有两个离心柱，可分

别用于酶切和纯化F(ab')2和

Fc/2。

RhinoBio蛋白酶系列产品包括重组特异性IgG蛋白酶：IdeS protease、IgdE

protease和FabCOUPER protease；用于肽图及蛋白序列分析的重组糜蛋白

酶、胰蛋白酶和Glu-C；可用于O-糖基化和O-糖位点测定的两款O-糖蛋白酶；

以及其他蛋白酶如：GlyCOUPER protease等。

19 20

T

注意：1）对于不同的蛋白样品，需要实验摸索最适的酶浓度及反应时间； 2）本产品仅供研究使用，不适用于人或动的物诊断及治疗用途。

Chymotrypsin(Sequencing Grade)

（重组糜蛋白酶）

产品名称 货号 规格 最适pH范围

1：50

QIP-002-A

QIP-002-A

25μg

4×25μg

利用重组毕赤酵母系统重组表达

（25kDa） pH7.0-9.0

来源(分子量大小) 酶切位点 最适pH范围 其他信息

产品选购指南

最适温度是30℃，超过37℃酶会自切。

选择性水解芳香族氨基酸如：酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸的羧基端

形成的肽键；

也可以较慢的速率缓慢水解由亮氨酸和蛋氨酸形成的肽键；

还可作用于敏感氨基酸形成的酯。

Endoproteinase Lys-C

（重组赖氨酰蛋白酶） 1：20到1：1000

QIP-004-A

QIP-004-B

15μg

5×15μg

利用重组大肠杆菌系统重组表达

（31±3.1kDa） pH7.0-9.5

酶切温度应避免超过 37℃，以防发生酶的自降解；

酶切体系中应避免 TLCK、盐酸胍等酶抑制剂；

在反应体系中含 0.2%SDS、1.0%Triton、6mol/L 尿

素、0.5mol/L NaCl、20%乙腈时，Lys-C 具有酶活。

特异性针对赖氨酰肽键酶切，包括含 DK、PK 序列的完全特异酶切。

Trypsin (Sequencing Grade)

（重组胰蛋白酶） 1：20到1：100

QIP-003-A

QIP-003-B

20μg

5×20μg

利用重组大肠杆菌系统重组表达

（25kDa） pH7.0-8.0

最适温度是37℃，稳定不自切；

至少孵育1h。 特异性切割多肽链中精氨酸和赖氨酸残基中的羧基形成的肽键。

Glu-C (Sequencing Grade)

（重组谷氨酸蛋白酶） 1：20到1：100

QIP-005-A

QIP-005-B

10μg

5×10μg

利用重组大肠杆菌系统重组表达

（24kDa） pH8.0-8.5 特异性切割多肽链中谷氨酸或天冬氨酸残基羧基端肽键。 在温度为25℃或37℃条件下酶切 。

Quick™ Trypsin

（Sequencing Grade） QIP-012-A 20μg 利用重组大肠杆菌系统重组表达

（25kDa） pH7.0-8.0 特异性切割多肽链中精氨酸和赖氨酸残基中的羧基形成的肽键。 1：20到1：100 最适温度是37℃，稳定不自切；

最短孵育时间为10min。

●

●

●

●

●

●

●

●

●

用于肽图及蛋白序列分析的蛋白酶

从下图中可以看出使用本公司Trypsin酶与进口品牌同类型产品同时进行肽图分析，肽图图谱基本一致，表

明两种酶酶切效率没有明显差异。

酶切位点 应用案例

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OUR SERVICES

是非成败转头空，青山依旧

在，惯看秋月春风。一壶浊

酒喜相逢，古今多少事，滚

滚长江东逝水，浪花淘尽英

雄。 几度夕阳红。白发渔樵

江渚上，都付笑谈中。滚滚

长江东逝水，浪花淘尽英雄

。是非成败转头空，青山依

旧在，几度夕阳红。

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T

O-糖位点分析

O-糖蛋白酶是一组种类不断增加的高度特异性的内切蛋白酶，可识别并切割糖肽/糖蛋白上，与O-糖基化丝

氨酸或苏氨酸相邻的位置。对O-糖蛋白酶酶切产生的糖肽进行MS分析，可提供有关蛋白序列中O-糖基化位点

和每个糖基化位点上连接的O-糖链结构的重要信息。

Rhinogen® O-Glycoprotease对唾液酸化的核心1 O-聚糖活性最高，对核心3 O-糖基化和α-2,3唾液酸化核

心1的糖蛋白活性较差，与Tn抗原、核心2以及α-2,6唾液酸化核心1的 -聚糖位点无活性。仅仅只有N-聚糖

修饰时，此酶不酶切。该酶对带有或不带有唾液酸的O-聚糖蛋白均有活性，在去唾液酸的 -聚糖蛋白上活性

更高。此酶在pH 5.5-7.5之间均能保持较高活性，能耐1M NaCl，但对EDTA高度敏感（0.5mM EDTA），并且

被Zn2+部分抑制。

O-GlyCORTAR protease

-Glycoprotease

图1. Rhinogen® -Glycoprotease酶切位点图

图2. Rhinogen® O-GlyCORTAR protease酶切位点图

产品名称 O-Glycoprotease O-GlyCORTAR protease

货号 QIP-008 QIP-013

规格 2000U 2000U

来源 Akkermansia muciniphila Pseudomonas aeruginosa

分子量 42kDa 97kDa

酶活特性 更高的O-聚糖位点覆盖率，但需要去除唾液酸以提

高酶活性。

对不同的O-聚糖结构表现出更广泛的活性，包括唾

液酸化底物，然而对具有两个相邻O-糖基化

Ser/Thr残基位点的活性有限。

总结

如需了解糖蛋白底物中O-聚糖位点的完整信息（包含多个具有两个相邻O-糖基化Ser/Thr残基的位点），

O-Glycoprotease更加适用；而想要保留糖蛋白底物唾液酸化的信息，推荐使用O-GlyCOUPE protease。

O-GlyCOUPER protease和O-Glycoprotease两款产品可互补提供有关聚糖组成和O-聚糖位点的完整信息。

可覆盖O-聚糖

结构

多种O-聚糖结构，包括唾液酸化的核心1和核心3，

但酶切程度降低。

多种O-聚糖结构，包括唾液酸化的核心1和核心2及

Tn抗原。

两款O-糖蛋白酶特点对比

Rhinogen® -GlyCORTAR protease是一种 -聚糖依赖性蛋白酶，可消化携带粘蛋白型 -聚糖的蛋白质，包

括唾液酸化底物、糖基化Ser和Thr残基的N末端。该酶不会消化未修饰的丝氨酸或苏氨酸残基，也不会消化

糖蛋白的 N-糖基化位点；并且可接受多种 -聚糖结构，包括唾液酸化的糖基化核心1和核心2结构以及Tn抗

原。此酶在pH7.6时活性最高，对EDTA敏感，在＞1mM EDTA条件下，会被完全抑制。

Carboxypeptidase B

羧肽酶B又称为肽酰-L-赖氨酸（L-精氨酸）水解酶，属于金属羧肽酶A和羧肽酶B(CPA/CPB)家族，每分子含

有一个Zn原子，可选择性水解蛋白或多肽羧基端的精氨酸和赖氨酸。活性受精氨酸、赖氨酸的竞争性抑制，

金属离子螯合剂如EDTA等抑制酶活。

Rhinogen® Carboxypeptidase B与大鼠胰腺羧肽酶B氨基酸序列完全一致，经过大肠杆菌系统重组表达生产

并经过层析纯化得到的重组羧肽酶B。分子量为33.8kD，等电点为6.0，最适pH为7.5~9.0。在25℃~37℃范

围下具有较好的酶切活性，在低温下适当延长反应时间也可以进行消化。

其他蛋白酶

23 24

T

蛋白酶系列常见问题与解决方案

酶切位点 产品列表

GlyCOUPER protease

柔性链接（Flexible linker）在融合蛋白中起着重要的作用。融合蛋白是由不同蛋白质结构域（functional domain）通过柔性链接区域连接在一起的蛋白质。柔性链接区域通常包含了一段较长、高度可变的氨基

酸序列。柔性链接在融合蛋白中起到桥梁和调节作用，使不同结构域的蛋白质能够协同工作，并具备更多功

能多样性和适应性。作为融合蛋白重组不可或缺的组成部分，Linke在构建稳定、具有生物活性的融合蛋白

中发挥着重要的作用。在重组蛋白药物的设计和开发中，柔性链接区域的选择和优化是一个重要的策略，可

以帮助实现药物的最佳效果。通过合理设计柔性链接区域，可以改善重组蛋白药物的效力、稳定性和药理特

性，为疾病治疗提供更好的选择。

Rhinogen® GlyCOUPER protease是一种独特的酶，用于消化甘氨酸或甘氨酸和丝氨酸残基重复序列组成的由

柔性连接体连接的融合蛋白。该酶在天然反应条件下具有活性，可以分离多功能融合蛋白的各个结构域，从

而促进对这些分子的表征和了解。能够对复杂的融合蛋白进行中级表征，既能降低样品的整体复杂性，又能

对特定结构域进行鉴定，并对翻译后修饰进行监测。

酶切原理 产品列表

产品名称 货号

GlyCOUPER protease QIP-010-A 2000U

规格

Carboxypeptidase B

QIP-006-A

QIP-006-B

产品名称 货号

1mg

5*1mg

规格

可以，IdeS protease可以切割Fc融合蛋白。例如，Enbrel（依那西普）被IdeS protease有效地切割成Fc和TNFR。

Enbrel是由hIgG1的Fc结构域和p75肿瘤坏死因子受体（TNFR）组成的融合蛋白。

Q1：Fc融合蛋白可以用IdeS protease（货号：QIP-001）来进行消化吗？

IdeS protease识别底物不仅与抗体铰链区下方的序列有关，还与抗体CH2区域的结构有关系。所以并不是序列相同，酶

活就一定一样。

Q2：IdeS protease（货号：QIP-001）对具有不同铰链区结构但是铰链区序列相同的蛋白，

----酶活是是否一样？

Q3：IdeS protease（货号：QIP-001）对于不同变性剂的耐受程度如何，比如尿素、盐

酸胍、乙腈等？

可以，对于人IgG1分子，两种酶可以组合使用以产生特定的铰链肽。IgdE的孵育时间明显更长，建议首先加入IgdE消化底

物，然后在最后30分钟内添加IdeS。

Q6：IgdE（货号：QIP-007）和IdeS（QIP-001）能用于相同的反应吗？

Q7：O-Glycoprotease（货号：QIP-008）对不同的底物是否有偏好？

若酶切体系含有8M尿素，按照37℃的反应条件，会对Lys-C酶活造成60%左右的损失。因此当反应体系中含有高浓度尿素时，

需考虑酶活损失的部分，增加酶的使用量。但由于酶对不同底物的酶切效果有差异，因此具体增量，需通过摸索试验确认。

在天然条件下，β1-4连接的半乳糖残基可能难以从完整IgG中去除，且去除效率

根据IgG的亚型而变化很大。 通常需要延长孵育时间和增加酶的使用量。 建议根

据特定的样品进行适度优化。

Q5：Glu-C (Sequencing Grade)（货号:QIP-005）对于不

0000同变性剂的耐受程度如何？ 0 100

2M 94.73

5M 12.26

8M 0

0.1% 90.15

0.5% 78.63

1% 49.87

对照（不添加变性剂

尿素

SDS

变性剂 货号 规格

蛋IdeS protease不能很好地耐受变性剂，建议不要在有变性剂体系下使用IdeS protease进行实验。

Q4：Endoproteinase Lys-C（货号：QIP-004）是否能耐受8M尿素？

O-糖蛋白酶对唾液酸化的核心1 O-聚糖活性最高，对核心3 O-糖基化和α 2,3唾液酸化核心1的糖蛋白活性较差，与Tn抗原、

核心2和α2,6唾液酸化核心1的 O-聚糖位点无活性。仅仅只有N-聚糖修饰时，此酶不酶切。该酶对带有或不带有唾液酸的 O聚糖蛋白均有活性，在去唾液酸的 O-聚糖蛋白上活性更高。

Q8：O-GlyCORTAR protease（货号：QIP-013）是否在所有O-糖基化位点酶切？

对不同的O-聚糖结构具有广泛的活性；然而该酶对具有两个相邻--糖基化丝氨酸/苏糖基残基的位点的活性有限。有关糖蛋白

底物中含有多个位点和两个相邻O-糖基化丝氨酸/苏基残基的O-聚糖位点的完整信息，O-Glycoprotease（货号：QIP-008）

可能是更好的选择。

25 26

T

Rhinogen®

报告基因检测 报告基因检测 报告基因检测细胞

报告基因检测试剂

报告基因检测

报告基因检测是基因表达调节研究的重要手段，目前已被广泛应用于分子生物

学及细胞生物学研究领域。报告基因检测法是一种将转录调控和报告基因（如

荧光素酶）偶联表达，通过报告基因表达产物（如荧光素酶）活性的测定判断

细胞刺激物（如小分子化合物、重组蛋白）生物学活性的方法，《中国药典》

2015年版已将报告基因检测方法列为干扰素活性测定法第二法（通则3523）。

目前在生物制品PD1/PD-L1、IL6/IL6R等相关单抗药物的生物学活性检测和Fc

效应功能研究中，报告基因检测法已经起到了至关重要的作用。

RhinoBio提供报告基因检测细胞株：ADCC Reporter Bioassay, Core Kit和

PD-1/PD-L1 Blockade Bioassay等；以及适用于报告基因检测系统的萤火虫

荧光素酶试剂：Bio-GloryTM-One-Step萤火虫荧光素酶分析试剂盒和

Bio-OneTM One-Step萤火虫荧光素酶分析试剂盒等。

Reporter Bioassay Detectior

Bio-BrightTM One-Step 萤火虫荧光素酶分析试剂盒 RA-GL07 50ml

产品名称 货号 规格

Bio-GloryTM One-Step 萤火虫荧光素酶分析试剂盒

Bio-OneTM One-Step 萤火虫荧光素酶分析试剂盒

Bio-SteadyTM One-Step 萤火虫荧光素酶分析试剂盒 RA-GL06

RA-GL05 50ml

VEGF Reporter Bioassay

PD-1/PD-L1 Blockade Bioassay

Rhinogen® FcγRs expressing HEK293T cells

TSHR Reporter Bioassay

GLP-1R Reporter Bioassay

ADCC Reporter Bioassay, Complete Kit (A431)

ADCC Reporter Bioassay, Complete Kit (BT474)

产品名称 货号 规格

ADCC Reporter Bioassay, Core Kit

ADCC Reporter Bioassay, Complete Kit (Raji)

ADCC Reporter Bioassay, Complete Kit (WIL2-S)

ADCC Reporter Bioassay

抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用（Antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity, ADCC）是免疫

系统对抗病毒感染及肿瘤疾病的一种重要免疫防御机制。抗体通过与靶细胞表面抗原特异性结合，招募如自

然杀伤（Natural killer, NK）细胞等效应细胞杀死靶细胞。NK细胞表面表达FcγRIIIa蛋白受体，能识别

并结合抗体的Fc端，从而使NK细胞结合到靶细胞周围。一旦Fc受体与抗体的Fc区域结合，NK细胞就会释放细

胞因子和细胞毒性颗粒，进入靶细胞触发细胞凋亡。

RA-GL04

50ml

50ml

27 28

T

Rhinogen® ADCC Reporter Bioassay是一种生物发光报告基因检测方法，用于检测抗体的ADCC生物学活

性。其作用机理基于NFAT（Nuclear factor of activated T-cells）反应通路。本系统采用基因工程改造

的Jurkat细胞作为效应细胞，该细胞稳定表达FcγRIIIa受体（V158高亲和力突变体）和由NFAT应答元件驱

动表达的萤火虫荧光素酶。抗体通过与效应细胞表面FcγRIIIa的结合，激发细胞内NFAT反应元件，NFAT反

应元件则驱动萤火虫荧光素酶的表达。荧光素酶活性通过生物发光进行定量。

传统的ADCC检测方法是利用外周血单核细胞（Peripheral blood mononuclear cells, PBMCs）或者从其中

分离得到NK细胞作为效应细胞进行检测，该方法的效应细胞较难获取，且方法变异性大、操作繁琐。相较于

传统的ADCC检测法，报告基因法具有操作简单、灵敏、准确性高等优点。目前报告基因检测方法已被纳入

2015版中国药典通则3523，是单克隆抗体活性研究及质量控制的重要手段，适用于重组单克隆抗体的功能学

研究，表达细胞筛选评价以及质控放行标准方法建立。

传统ADCC检测法

PBMC 变异性大，不适合作为批放行检测

方法

对糖修饰敏感度低；准确性和精密

度不如工程改造Jurkat

和PBMC法一样，可导致细胞裂解，

以此评估抗体ADCC活性

确认抗体ADCC活性的金标准

96孔平底可拆卸微孔板

（白底透明盖） 工程改造Jurkat

方法 效应细胞 优点 缺点

工程改造NK-92

报告基因法检测，灵敏、准确性高、

精密度高，适合作为生产批签发指标

（报告基因检测方法已被纳入2015

版中国药典通则3523）

不能真实反映体内的作用效果

表1. 传统ADCC检测与报告基因方法的对比：

简单易操作 无固有变异性 用时短

立即检测光信号

25μ l抗体

25μ l靶细胞

25μ l效应细胞 +Light

荧光素酶检测试剂（RA-GL04）

Bio

Glory

孵育6-24hr@37℃，5%CO2

冷却96孔板≥15min@室温

Target Cell Effector cell NFAT Luciferase

NFAT Pathway

Light

Antigen FcγRIIIa 检测原理

操作流程

产品特点

Rhinogen® ADCC报告基因检测系统提供的ADCC

生物学活性检测方法具有操作简便、变异性低、

灵敏度高等特点，可用于针对不同靶细胞的抗体

效应功能检测。

将尼妥珠单抗用PNGase F酶切，部分及完全去

除糖链后，ADCC活性发生变化，Rhino -

gen@ 0ADCC Reporter Bioassay系统可灵敏

检测。

10 -4 10 -3 10 -2 10 -1 10 0 10 1 10 2

0

2

4

6

8

10

12 尼妥珠单抗(未酶切)

FI

尼妥珠单抗(含糖50%)

尼妥珠单抗(含糖0%)

Log[尼妥珠单抗] , μg/ml

灵敏度高：可灵敏的检测到抗体糖型的改变。

ADCC效应与抗体样品的岩藻糖含量呈反比。不同表达系统获得的尼妥珠单抗含岩藻糖结构的比例不同。

Rhinogen® ADCC Reporter Bioassay可以灵敏辨别抗体之间的差异，适用于抗体ADCC活性筛选。

29 30

T

Rhinogen® ADCC效应细胞株具有良好的代次稳定性。我们以MDA-MB-175 VII为靶细胞，以Her2靶点抗体进行

了30代以上的稳定性评估，第31代的细胞仍能稳定用于ADCC活性检测。这意味着细胞可以在体外传代至少90

天，并且还能有效用于ADCC活性测定。

稳定性好：传代30次仍可稳定灵敏检测，数据重复性好。

ADCC增强型抗体 0.198 0.147

ADCC增强型抗体-V1 0.104 0.075

ADCC增强型抗体-V2 0.078 0.075

11代 31代

EC50

Sample

Log[HER2单 抗],μg/ml

第31代

10 -2 10 -1 10 0 10 1 10 2 10 3

0

2

4

6

8

10

12

14 ADCC增强型抗体

FI

ADCC增强型抗体-V1

ADCC增强型抗体-V2

Log[HER2单 抗],μg/ml

10 -2 10 -1 10 0 10 1 10 2 10 3

0

2

4

6

8

10

12

14

16

18 ADCC增强型抗体

FI

ADCC增强型抗体-V1

ADCC增强型抗体-V2

第11代

Rhinogen® ADCC Reporter Bioassay 相关产品：

产品名称 货号 组成 规格 体积

ADCC Reporter Bioassay, Core Kit RA-CK01 ADCC Bioassay效应细胞 5×106

cells/ml 1ml

G418 RA-AD02 \\ 1ml 1ml

Rhinogen®RPMI 1640 培养基，无酚红 RA-BM11 \\ 500ml 500ml

Rhinogen® ADCC Bioassay细胞稳定剂 RA-AD01 ADCC Bioassay效应细胞 0.5ml 0.5ml

图例：

图例：

10 -3 10 -2 10 -1 10 0 10 1 10 2 10 -4

0

3

6

9

12

15 尼妥珠单抗(CHO)

FI

尼妥珠单抗(NSO)

Log[尼妥珠单抗], μg/ml

67.77% 87.88% 含岩藻糖型结构

的比例

抗体 尼妥珠单抗(CHO) 尼妥珠单抗(NS0)

原理明确：基于抗体结合细胞对效应细胞FcγRIIIa受体信号通路的激活；

操作简便：检测过程简单，检测试剂易用。

Rhinogen® ADCC效应细胞株具有广泛的适用性，可用于多种ADCC活性的抗体生物学活性检测。

Log[CD20单 抗] , μg/ml

10-1 100 101 102 103

0

5

10

15 利妥昔单抗

FI

ADCC增强型CD20抗体

某厂家Biosimilar抗体

T: WIL2-S

Log[HER2单 抗] , μg/ml

T: BT-474

10-4 10-3 10-2 10-1 100 101 102 103

0

2

4

6

8

10 曲妥珠单抗

帕妥珠单抗

ADCC增强型抗体

FI

T: MDA-MB-175VII

10-4 10-3 10-2 10-1 100 101 102 103

0

2

4

6

8 曲妥珠单抗

FI

帕妥珠单抗

ADCC增强型抗体

Log[HER2单 抗] , μg/ml

T: A431

10-4 10-3 10-2 10-1 100 101 102

0

2

4

6

8

10

12

14

16

EGFR单抗(CHO)

FI

EGFR单抗(NSO)

帕尼单抗

Log[EGFR单 抗] , μg/ml

应用广泛：治疗性抗体药物的Fc功能学研究和产品质控、ADCC作用机制研究；

适用性广：该系统已完成针对悬浮或贴壁的多种靶细胞的适用性验证，效果良好。

31 32

T

31 32

T

ADCP Reporter Bioassay

抗体依赖的细胞介导的细胞吞噬作用（Antibody-dependent cell-mediated phagocytosis, ADCP）是治疗

性抗体对抗病毒感染或者肿瘤疾病的一种重要作用机制。在体内，ADCP作用由单核细胞、巨噬细胞、中性粒

细胞以及树突细胞通过其细胞表面表达的FcγRIIa、FcγRI、FcγRIIIa介导，其中FcγRIIa被认为是ADCP

作用过程中最主要的Fcγ受体。ADCP作用过程为抗体与靶细胞表面的抗原特异性结合，随后抗体Fc片段与效

应细胞（如巨噬细胞）表面Fcγ受体结合，诱导巨噬细胞吞噬靶细胞。

Rhinogen® ADCP Reporter Bioassay是一种生物发光报告基因检测方法，用于检测抗体的ADCP生物学活

性。其作用机理基于 NFA（Nuclear factor of activated T-cells）反应通路。本系统采用基因工程改造

的Jurkat细胞作为效应细胞，该细胞稳定表达FcγRIIa受体（H131高亲和力突变体）和由NFAT应答元件驱

动表达的萤火虫荧光素酶。抗体在识别靶细胞后，通过与效应细胞表面FcγRIIa的结合，激发细胞内NFAT反

应元件，NFAT反应元件则驱动萤火虫荧光素酶的表达。荧光素酶活性通过生物发光进行定量。

Target Cell Effector cell NFAT Luciferase

NFAT Pathway

Antigen FcγRIIa

+Light

传统ADCP检测方法非常复杂，需要从外周血中分离单核细胞，并经过多日培养分化得到巨噬细胞作为效应细

胞。检测时需要对效应细胞及靶细胞进行免疫标记，通过流式细胞仪等手段探测效应细胞对靶细胞的吞噬作

用。该方法变异性大、耗费人力、耗时长，不适合作为质量控制方法。相较于传统的ADCP检测法，报告基因

法具有操作简单、灵敏、准确性高、精密度高等优点。目前报告基因检测方法已被纳入2015版中国药典通则

3523，适用于重组单克隆抗体的功能学研究，表达筛选评价以及质控放行标准方法建立。

表1. 传统ADCP检测法与报告基因检测方法的对比：

传统ADCP检测法

方法 效应细胞 操作 优点 缺点

巨噬细胞

从外周血分离原代细胞（通常为单核细

胞），并经过多日培养分化得到巨噬细

胞，检测时需要对效应细胞及靶细胞进

行免疫标记，通过流式细胞仪等手段探

测效应细胞对靶细胞的吞噬作用。

确认抗体ADCP活性的经典方法

操作复杂，变异性大，

耗时耗力，不适合作为

质量控制方法

报告基因检测方法 工程改造

Jurkat

基因工程改造Jurkat细胞作为效应细

胞，该细胞稳定表达FcγRIIa受体

（H131高亲和力突变体）和由NFAT应

答元件驱动表达的萤火虫荧光素酶。

操作简单、灵敏、准确性高、

精密度高，适合作为生产批签

发指标（报告基因检测方法已

被纳入2015版中国药典通则

3523）

不能真实反映体内的作

用效果

Rhinogen® ADCP报告基因检测系统提供的ADCP生物学活性检测方法具有操作简便、变异性低、灵敏度高等

特点，可用于针对不同靶细胞的抗体效应功能检测。

Rhinogen® ADCP报告基因检测系统具有很高的特异性，只有当抗体与对应的抗原表达靶细胞结合以后才能获

得效应细胞表面受体的应答，而当抗体不能与靶细胞结合时不获得应答。

Log[抗体], μg/ml

10-4 10-3 10-2 10-1 100 101 102

0

5000

10000

15000

20000

25000

抗CD20单抗+Wil2-s

RLU

Trastuzumab+Wil2-s

10-4 10-3 10-2 10-1 100 101 102

0

10

20

30

40

50

60

70

抗CD20单抗+Wil2-s

FI

Trastuzumab+Wil2-s

Log[抗体], μg/ml

原理明确：基于抗体结合细胞对效应细胞FcγRIIa受体信号通路的激活；

操作简便：检测过程简单，检测试剂易用；

图2. Rhinogen® ADCP Reporter Bioassay检测流程图。

简单易操作 无固有变异性 用时短

25μ l抗体 立即检测光信号

25μ l靶细胞

25μ l效应细胞

+Light

荧光素酶检测试剂（RA-GL04）

Bio

Glory

孵育6-24hr@37℃，5%CO2

冷却96孔板≥15min@室温

检测原理

产品特点

33 34

T

Log[抗体], μg/ml

10-4 10-3 10-2 10-1 100 101 102 103 104

0

2000

4000

6000

8000

10000

RLU

Trastuzumab+BT474

抗CD20单 抗+ BT474

-1 100 101 102 103 104

04

Log[抗体], μg/ml

10-4 10-3 10-2 10

0

3

6

9

12 Trastuzumab+BT474

FI

抗CD20单 抗+ BT474

Rhinogen® ADCP报告基因检测系统具有很好的可重复性，同一个人在4天时间里对同一个样品，分别在4块96

孔板中进行操作，结果可重现。

10-4 10-3 10-2 10-1 100 101 102

0

3000

6000

9000

12000

15000 Repeat 1

RLU

Repeat 2

Repeat 3

Repeat 4

Log[抗CD20单抗], μg/ml

10 -4 10 -3 10 -2 10 -1 10 0 10 1 10 2

0

15

30

45

60

75 Repeat 1

FI

Repeat 2

Repeat 3

Repeat 4

Log[抗CD20单抗], μg/ml

抗CD20抗体μg/ml 0.047 0.047 0.051

0.039

EC50

Sample

Repeat 1 Repeat 2 Repeat 3

Repeat 4

Rhinogen® ADCP Reporter Bioassay 相关产品：

产品名称

ADCP Reporter Bioassay, Core Kit RA-CK09 ADCP Bioassay效应细胞 5×106

cells/ml

货号 组成 规格 体积

1ml

应用广泛：治疗性抗体药物的Fc功能学研究和产品质控、ADCP作用机制研究；

适用性广：该系统已完成对悬浮或贴壁的多种靶细胞的适用性验证，效果良好。

图

PD-1（Programmed cell death protein 1）是一种在激活的T细胞和B细胞中表达的免疫抑制分子。肿瘤微环

境会诱导浸润的T细胞高表达PD-1分子，肿瘤细胞上的PD-L1与T细胞上的PD-1结合，抑制T细胞增殖和活化，

使T细胞处于失活状态，最终诱导免疫逃逸。抗PD-1或抗PD-L1生物制剂能阻断PD-1与PD-L1的结合。

Rhinogen® PD-1/PD-L1 Blockade Bioassay是一种生物发光报告基因检测方法，本系统由工程化改造的双细

胞系统组成。共培养两种细胞系，通过T细胞受体（TCR）激活剂/TCR复合物的交联诱导Jurkat NFAT途径的活

化。靶细胞上的PD-L1与效应细胞上的PD-1结合后，效应细胞中的PD-1信号传导抑制T细胞功能，并导致NFAT

途径抑制。抗PD-1或抗PD-L1生物制剂阻断PD-1与PD-L1的结合，以剂量依赖性方式重新激活NFAT途径，进而

以剂量依赖性方式表达荧光素酶。

表1. 传统方法与报告基因法（双细胞系统）的对比：

抗PD-1/抗PD-L1生物制剂体外生物学活性的传统检测方法是使用原代人T细胞作为效应细胞，测量原代人T细

胞的细胞增殖、细胞表面标志物的表达、细胞因子如IFNγ或IL-2的产生以及靶细胞的死亡。该方法操作复

杂，变异性大（依赖于供体原代细胞，不同个体差异大），耗时耗力（4-5天），不适合作为质量控制的方

法。

效应细胞：Jurkat-PD-1-NFAT/luc2

靶细胞 ：PD-L1 aAPC/CHO-K1 Cells

TCR与TCR Activator结合激活NFAT信

号通路;

PD-1与PD-L1结合抑制NFAT信号通路

的激活;

抗PD-1或抗PD-L1阻断PD-1与PD-L1的

结合，以剂量依赖性方式重新激活NFAT途径，进

而以剂量依赖性方式表达荧光素酶。 图1. Rhinogen® PD-1/PD-L1 Blockade Bioassay原理图。

+Light

RE Luciferase

方法 效应细胞 操作 优点 缺点

传统方法 原代人T细胞

测量原代人T细胞的细胞增殖、细胞

表面标志物的表达、细胞因子如IFN

γ或IL-2的产生以及靶细胞的死亡。

检测机理真实体现抗

PD-1或抗PD-L1生物制

剂的作用效果。

操作复杂，变异性大

（依赖于供体原代细

胞，不同个体差异

大），耗时耗力（4-5

天），不适合作为质

量控制的方法。

报告基因法

（双细胞系统）

当两种细胞株共孵育时，PD-1/PD-L1的结

合能够抑制TCR活性，继而抑制NFAT介导

的荧光素酶的表达，反应体系无法检测到

荧光信号。当在反应体系中加入

PD-1/PD-L1抗体时，抗体与PD-1/PD-L1结

合可以剂量依赖性方式重新激活NFAT途

径，进而检测荧光信号。

操作简单、灵敏、准确

性高、精密度高，适合

作为生产批签发指标

（中检院已成功开发了

检测抗PD-1/抗PD-L1的

报告基因检测法）

不能真实反映体内的

作用效果

PD-1效应细胞：

工程改造

Jurkat；

PD-L1靶细胞：

PD-L1 aAPC/

CHO-K1 Cells

EVENT 1：

EVENT 2：

EVENT 3：

PD-1/PD-L1 Blockade Bioassay

35 36

T

图3. 高适用性。

Opdivo

Keytruda

Anti-PD-1

Negative Control

图4. 高特异性。

Anti-VEGF

Anti-PD-1

Anti-Her2

原理明确：基于阻断PD-1 / PD-L1相互作用

的生物制剂的作用机制（MOA）；

操作简单：检测过程简单，耗时短，检测试

剂易用；

特异性高：仅对抗PD-1或抗PD-L1生物阻断

剂有响应；

方法稳定：灵敏、准确性高、精密度高，适

合作为生产批签发指标。 图5. 良好的线性范围。

Rhinogen® PD-1/PD-L1 Blockade Bioassay相关产品：

PD-1/PD-L1 Blockade Bioassay

PD-1 Effector Cells（1×107cells/ml）

PD-L1 a APC/CHO-K1 Cells（1×107cells/ml）

产品名称

RA-CK16

货号 规格 体积

1ml

1ml

简单易操作 无固有变异性 用时短

加入抗体

100μ l/孔PD-L1

aAPC/CHO-K1 Cells

加入效应细胞

+Light

荧光素酶检测试剂（RA-GL04）

Bio

Glory

37℃，5% CO2孵育6h室温

平衡96孔板5-10min

孵育96孔板2-5min@室温

萤火虫荧光素酶（Firefly Luciferase）是一种分子量为61kDa的蛋白，因其在宿主细胞中无背景萤光，同时

无需翻译后修饰，是报告基因的理想选择。

萤火虫荧光素酶分析试剂盒系列产品是针对萤火虫荧光素酶开发的一款快速、稳定的一步法检测试剂盒，以D荧光素（D-luciferin）为底物，在ATP、镁离子和氧气存在的条件下，可以被萤火虫荧光素酶催化进行氧化

脱羧反应，产生激活态的氧化荧光素（Oxyluciferin），并产生生物萤光（Bioluminescence）。生物萤光与

荧光素酶的启动子活性成比例，间接反映了细胞刺激物的生物学活性。

Firefly Luciferase

D-luciferin

室温孵育25min后，

检测光信号

25μ l ADCC/

ADCP待测体系

加入75μ l

底物

底物试剂

产品名称 半衰期 灵敏度 规格

Bio-BrightTM One-Step

萤火虫荧光素酶

分析试剂盒

货号 规格

Bio-GloryTM One-Step

萤火虫荧光素酶

分析试剂盒

Bio-OneTM One-Step

萤火虫荧光素酶

分析试剂盒

Bio-SteadyTM One-Step

萤火虫荧光素酶

分析试剂盒

50ml

RA-GL04

50ml

50ml

30min 超高

60min 超高

60min 高

＞5h 中

用于ADCC或ADCP活性检测体系以及对灵敏度有特殊要

求的其他检测项目。

●

适用于高通量和超高通量（96/384/1536孔）的检测哺

乳动物细胞中萤火虫荧光素酶报告基因的表达。

●

适用于需要超高光输出信号的萤火虫荧光素酶报告基

因系统。

●

适用于高通量和超高通量（96/384/1536孔）的检测哺

乳动物细胞中萤火虫荧光素酶报告基因的表达；

可用于小分子化合物、重组蛋白药物活性的常规检测。

●

●

检测原理

产品特点

产品列表

操作流程

操作流程

RA-GL05

RA-GL06

RA-GL07

50ml

37 38

T

报告基因检测常见问题与解决方案

以利妥昔单抗ADCC Bioassay 模型考察Bio-GloryTM One-Step萤火虫荧光素酶分析试剂盒的冻融稳定性，经过

11次反复冻融后，试剂检测性能，包括荧光值（图B1）及半衰期（图B2）无明显降低趋势。

图B1 荧光值对比 图B2 半衰期对比

以利妥昔单抗ADCC Bioassay 模型对比检测Bio-GloryTM One-Step萤火虫荧光素酶分析试剂盒与进口品牌同

款产品，荧光值（图A1）稍高于进口品牌同款产品；半衰期（图A2）与进口品牌同款产品相当。

图A1 荧光值对比 图A2 半衰期对比

发光值衰减对比

读数时间，min

Bio-OneTM One-Step

Bio-BrightTM One-Step

Bio-SteadyTM One-Step

图C 三款试剂盒型性能对比

目前我们的ADCC检测系统没有384孔板的应用案例，我们的数据都是在96孔板中进行检测得到的。但就从原理上来说，我

们的ADCC系统是可以用于384孔板的。但对于384孔板，由于孔的容积小，可能需要着重优化单孔细胞数量以及细胞的种

板密度（包括靶细胞及效应细胞）。

Q1：ADCC系统（货号：RA-CK01）是否适用于384孔板？

细胞培养时可以使用有酚红的培养基，后续检测时由于酚红的颜色会对检测本底值有影响，所以建议换成无酚红培养基

进行。

Q2：细胞培养是否需要加抗性？

相较于传统的ADCC检测方法，报告基因检测法采用的是可扩增的效应细胞系，以及结合了生物发光检测技术，通过测量

信号通路的变化来定量检测抗体Fc端的功能。荧光的检测可以放大信号，误差小，重复性好，灵敏度高，更稳定，适用

于从前期细胞株筛选到批签发质控的抗体ADCC功能检测。是单克隆抗体活性研究及质量控制的重要手段，可作为常规放

行方法，报告基因检测法已被纳入了2015版中国药典。

Q3：相比于传统的ADCC检测方法，报告基因法的优势是什么？是不是可以更准确的模拟体

-- 内的药效？

是的，我们完全按照药典的要求对ADCC测活细胞株进行质量控制，包括无菌检查（无菌），支原体检测（支原体阴性）

及对细胞进行功能性鉴定，检定的COA 文件会和细胞同时提供。

Q4：是否按照2015版《中国药典》规定的，对于检测用细胞株进行全面检定的COA文件？

性能对比

产品特点

39 40

T

细胞活力检测 细胞活力检测

检测原理操作流程

产品列表

单克隆抗体药物的体外生物学活性检测是对抗体类药物有效成分以及效价进行

测定，是单抗药物质量控制中非常重要的一环，生物学活性检测贯穿蛋白药物

整个生命周期，从早期靶点的发现，抗体的筛选，再过渡至CMC阶段进行生

产、临床应用，到最后上市，都会涉及生物活性的分析。因此，选择高效、快

速、准确的生物活性测定方式极为重要。

RhinoBio提供细胞活力检测试剂：Cell Titer Turbo 2.0 Luminescent Cell

Viability Assay和Cell Titer Turbo 3D Luminescent Cell Viability Assay；

细胞活性检测染料：Resazurin细胞活性检测染料和CCK-8细胞活性检测染

料，助力您的药物研发。

03

三磷酸腺苷（Adenosine Tri-Phosphate, ATP）是自然界中各种生命活动中共用的能量载体，是能量储存

和转移的最小单位。ATP参与生物体内多种酶促反应，维持正常的生命活动，是活细胞新陈代谢的一个指

标。ATP是细胞内最重要的能量分子，可以用来衡量细胞新陈代谢水平，并与活细胞数目具有良好的线性关

系，因此，可通过ATP含量反应活细胞的数目。通过监测ATP含量改变，可以评价多种药物、生物制剂或

生物活性物质引起的细胞杀伤、细胞抑制和细胞增殖作用。ATP含量的增高也常作为微生物繁殖引起食品、

药品污染的一个重要指标。

Rhinogen® Cell Titer Turbo 2.0 Luminescent Cell Viability Assay借助ATP依赖的荧光素酶催化的

荧光素发光反应，通过化学发光信号测定细胞内ATP含量，从而检测细胞活力或定量检测活细胞数目。

CELL TITER TURBO 2.0 LUMINESCENT CELL

VIABILITY ASSAY

Luciferase

Lyse Cell

Cell Titer Turbo 2.0 Luminescent Cell Viability Assay

Cell Titer Turbo 3D Luminescent Cell Viability Assay

2*50ml

产品名称 规格

2*50ml

RA-GL11-A

货号

RA-GL12-A

ff

fl







加入试剂

检测光信号

Cell viability assay

Rhinogen®

41 42

T

产品特点 细胞活性检测染料检测原理

2μM ATP条件下，加入等体积的Cell Titer Turbo 2.0(以下简称“CTT 2.0”)及其它公司竞品，震荡

2min，静置10min后持续检测，荧光值随时间变化的情况，结果如图C和图D所示。不管是初始荧光值还是半

衰期，CTT 2.0均明显优于竞品。

图C. 荧光值随时间衰减情况对比 图D. 最大荧光值与半衰期对比

图A. 灵敏度测试 图B. 线性度测试

图1. Rhinogen® Resazurin细胞活性检测的原理。

靛青蓝色 粉红色荧光

终产物

HO O O

O

NADH/H+ NAD+

/H2

O

N

+ +

刃天青

Viable cell +

-

HO O O

O

N

试卤灵

图1. Rhinogen® CCK-8细胞活性检测的原理。

substrates electron mediator

reduced form colorless

orange color

electron mediator cell

NAD Rhiongen®CCK-8

Rhiongen®CCK-8

formazan

NADH

dehydrogenases

产品名称 Resazurin细胞活性检测染料 CCK-8细胞活性检测染料

货号 QDY-002-C

规格 25ml/1250-2500孔

QDY-002-D

100ml/5000-10000孔

检测原理

QDY-003-C

25ml/2500孔

QDY-003-D

100ml/10000孔

细胞内 NADPH/ NADP、FADH/FAD、FMNH/FMN 和

NADH/NAD 的比值升高，处于还原环境，摄入细胞内的

刃天青（Resazurin）被这些代谢中间体及细胞色素类

还原成试卤灵后释放到细胞外并溶于培养基中，使培养

基从无荧光的靛青蓝变成有荧光的粉红色。

试剂含有WST-8【化学名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)

-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠

盐）】，它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪硫酸二甲

酯（1-Methoxy PMS）的作用下被细胞线粒体中的脱氢

酶还原为具有高度水溶性的黄色甲臜产物

（Formazan）。

活性判断 检测到的吸光度和荧光强度与活性细胞数成正比 生成的甲臜物的数量与活细胞的数量成正比

涉及仪器 普通分光光度计或荧光光度计 酶联免疫检测仪

43 44

T

细胞活力检测常见问题与解决方案

产品特点

可以，向各孔中加入培养基体积10%的CCK-8溶液，如果加入的CCK-8体积太少，可以先将

CCK-8溶液稀释1倍，然后加入培养基体积20%的量。

Q1：CCK-8细胞活性检测染料（货号：QDY-003）能否用384孔板进行试验？

不会，培养基中酚红的吸光度可以在计算时，通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去，因此

不会对检测造成影响。

Q2：使用CCK-8细胞活性检测染料（货号：QDY-003）检测时，会被酚红影响吗？

当有还原性物质存在时会影响CCK8的测定，例如含有维生素C的Glucose等 （一般培养基中

的量不多，酚红或血清不影响测定）。在有酚红存在的情况下，会增加空白吸收，但不影响

测定，扣除空白吸收即可。

Q3：哪些物质会影响CCK-8细胞活性检测染料（货号：QDY-003）的测定？

可以在加样前用培养基稀释CCK-8试剂并混匀后加样，或者采用一次性低吸附枪头。

Q4：如何减少由于CCK-8试剂在枪头上或孔壁上的残留所带来的误差？

Rhinogen® CCK-8试剂与某进口主流品牌

同款产品用于EPO的体外生物学活性检

测，随着EPO的浓度增高，活细胞的数量

也逐渐增高，450nm波长处测定其光吸收

值，吸光度值与活细胞的数量呈正比。

结果显示：在相同条件下，两者具有相

同的使用效果（如图B1）。

Rhinogen® CCK-8试剂用于帕妥珠单抗的体

外生物学活性检测时：在一定范围内，不

同浓度的帕妥珠单抗对HER2高表达细胞株

的体外生长抑制作用具有量效关系（如图

B2）。

10-2 10-1 100 101 102

0.0

0.6

1.2

1.8

2.4

3.0 Perjeta

O

D450/630

KJ008-帕妥 珠单抗

Log[帕妥 珠单抗], ng/ml

B2

Rhinogen® Resazurin细胞活性检测染料

试剂和某进口主流品牌同款产品用于西

妥昔单抗的体外生物学活性检测，西妥

昔单抗与EGFR的胞外结合域结合，会抑

制二聚体的形成从而抑制受体介导的信

号转导通路，在一定范围内，不同浓度

的西妥昔单抗对EGFR高表达细胞株的体

外生长抑制作用具有量效关系。结果显

示：相同条件下二者具有相同的使用效

果（如图A）。

10-2 10-1 100 101

3000

4000

5000

6000

7000

8000

9000 Invitrogen

Fluorescence intensity

Rhinogen

Log[活性样品], μg/ml

A 进口品牌

10-2 10-1 100 101 102

0.0

0.5

1.0

1.5

2.0

2.5

3.0

3.5 DOJINDO

O

D450/630

Rhinogen

Log[EPO], ng/ml

B1 进口品牌 进口品牌

45 46

T

激酶活性检测试剂盒

操作流程

Rhinogen®

蛋白激酶在多种细胞事件的调节中起着至关重要的作用，细胞中激酶缺乏受控活

性被认为是造成所有主要人类病理状况的原因，例如癌症、心血管疾病、神经退

行性疾病和代谢紊乱，因此它已在广泛研究中被用作肿瘤治疗的靶点。

RhinoBio推出Rhinogen® Kinase-TurboTM 激酶活性检测试剂盒，助力您的药

物研发。

蛋白激酶在多种细胞事件的调节中起着至关重要的作用，已知至少有1200种蛋白激酶参与细胞功能的调

节。

激酶通过磷酸化其各自的下游特定底物蛋白来发挥其作用，它们催化ATP或GTP的γ-磷酸转运到底物蛋白中

丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸的羟基或脂质中的糖基部分，并启动一系列激活控制事件，包括细胞的生长、分

化、分裂和肿瘤促进。

Rhinogen® Kinase-TurboTM 激酶活性检测试剂盒是一种通过化学发光法测定激酶反应后溶液中ATP的剩余

量，从而进行定量来检测激酶活性的试剂盒。激酶在反应过程中会催化ATP上的磷酸基团转移到底物的羟基

上，从而使ATP转变为ADP，以此根据ATP的减少量来定量激酶的活性。本试剂盒借助ATP依赖的荧光素酶催化

的荧光素发光反应，通过化学发光信号测定激酶反应体系内的ATP含量（如图A1）。这样就可以通过设置ATP

的标准曲线，来定量激酶反应体系中的ATP量，从而计算ATP的减少量，最终计算出激酶的活性。激酶的活性

与ATP剩余量成反比，即ATP剩余量越少，发光值越低，激酶活性就越高；若ATP剩余量越多，发光值就越

高，激酶活性则越低。

A

Kinase-TurboTM

激酶活性检测试剂盒

加入试剂

振荡混匀

激酶活性检测 激酶活性检测

Kinase activity assay

47 48

T

产品特点

产品应用

产品列表

Rhinogen® Kinase-TurboTM 激酶

活性检测试剂盒可以适用最高浓度

为10μM的ATP，且在0-10μM范围内

线性呈现良好（如图B1）；Rhinogen® Kinase-TurboTM Plus激酶活

性检测试剂盒可以适用最高浓度为

100μM的ATP，并在0 -100μM范围

内线性呈现良好（如图B2）；

Rhinogen® Kinase-TurboTM Max激

酶活性检测试剂盒可以适用最高浓

度为500μM的ATP，在0-500μM范

围内线性呈现良好（如图B3）。

B1

B2

B3

可用于检测蛋白质、脂质和糖等物质的激酶活性，适用多种激酶和激酶底物组合检测。

可使用较高的ATP浓度：线性响应高达500μM ATP；

可以检测多种激酶和激酶底物组合，包括肽、蛋白质、脂质和糖底物；

可检测已知激酶抑制剂，且能区分ATP竞争性和ATP非竞争性激酶抑制剂；

可在不处理底物的情况下直接进行分析；

进行批量处理，高度稳定的发光信号，3小时左右仍能保持50%以上的信号；

用这种快速、均匀、无放射性的检测方法筛选大量文库化合物。

●

●

●

●

●

●

Kinase-TurboTM 激酶活性检测试剂盒

10ml

产品名称 规格

RA-GL13-A

RA-GL13-B 10*10ml

货号

Kinase-TurboTM Plus激酶活性检测试剂盒

RA-GL14-A 10ml

RA-GL14-B 10*10ml

Kinase-TurboTM Max激酶活性检测试剂盒

RA-GL15-A 10ml

RA-GL15-B 10*10ml

49 50

T

CHO宿主细胞蛋白测试剂盒

检测列表

操作流程

RhinoBio残留检测系列主要包括核酸酶残留检测—NucleCutTM 核酸酶残留

ELISA检测试剂盒和宿主细胞蛋白残留检测—CHO宿主细胞蛋白检测试剂盒。

Rhinogen®

残留检测 残留检测

Residue detection

大多数生物药物都是通过DNA重组技术，使用宿主细胞表达目标蛋白。CHO细胞使生物制药行业最常用的生产用哺乳动物宿主细胞

系。在实际使用中，宿主细胞本身会大量表达蛋白质，因此目标蛋白会受到来源于宿主细胞的蛋白杂质污染，这些宿主细胞蛋白

的存在不仅会降低药物疗效，而且有导致患者发生不良免疫原性反应的重大风险。因此，检测蛋白样品中HCP残留含量，并优化

工艺降低HCP至可接受水平，是保证药物安全性和获得监管机构认证的关键。

各国相关法规对HCP的残留检测都有相应的要求。ELISA法是各国药典推荐方法，美国FDA建议含量＜100ppm，中国药典重组疫苗

各论建议CHO细胞HCP＜0.05％。

本试剂盒中HCP抗体为免抗，并经过特殊工艺纯化获得，2D/WB抗体覆盖度约为80％。且为通用试剂盒，可用于大多数CHO细胞表

达系统的工艺开发喝质量控制。

通过ELISA方法和辣根过氧化物酶催化TMB底物产生颜

色反应，酶标仪450nm波长读取数值。利用CHO标准蛋

白标准曲线来定量分析待测样品中HCP的含量。

TMB

Substrate

reaction

HRP

Streptavidin

Biotin

HCP

18-25℃，约20min

1.试剂盒室温平衡

6.将Biotion-HCP抗体按照100μL/

孔加入酶标板中，盖上96孔板盖，

室温静置孵育约45min

300μL/孔,重复6次

5.使用洗板液(1X)洗板

300μL/孔,重复6次

7.使用洗板液(1X)洗板

波长为450nm

12.20min内使用酶标仪读数

标准曲线的浓度范围

为1-200ng/mL

13.四参数拟合数据

100μL/孔，盖上96孔板盖

8.加入Streptavidin-HRP室温静置孵30min

100μL/孔，盖上96孔板盖

10.加入TMB显色液室温避光静置孵育10min

标准品、待测样品和质控

样品100μL/孔，每个样

品两复孔或三复孔,盖上

96孔板盖

4.加样，室温静置孵育90min

加样

待测样品稀释至3~10mg/mL,首次测

定时建议通过梯度稀释确定最小稀

释倍数,使得HCP<200ng/mL

2.待测样品制备

待测样品 稀释样品

3.质控样品制备(可选)

300μL/孔,重复6次

9.使用洗板液(1X)洗板

100μL/孔

11.加入终止液

51 52

T

产品特点

产品列表

灵敏度高，线性良好：灵敏≤ 1ng/ml，标准曲

线的R2＞0.98；

专属性好，准星度高，抗干扰能力强；

●

●

表1.Rhinogen® CHO宿主细胞蛋白检测试剂盒的检测标准

曲线在1-200ng/ml的范围内，线性良好（R2=0.998）；

灵敏度可达到1ng/ml：

1

3

10

30

100

200

0.83

3.32

11.7

28.5

101.1

199.8

83%

109%

117%

95%

101%

100%

2.9

1.3

0.6

7.5

2.3

1.4

标准品浓度

（ng/mL）

回算浓度

（ng/mL） 回收率 CV%

表2.单抗A的浓度范围为1-50mg/ml，与10ng/ml的HCP

进行等体积混合后检测，HCP的回收率在88%-99%范围

内，CV%在0.2%-5.2%范围内，单抗A的最小稀释倍数

（MRD）为1倍：

80%

89%

100%

86%

78%

86%

加标

回收率

5.9

3.5

1.5

5.5

0.9

2.8

CV%

137%

119%

2.5

1.4

107% 0.5

单抗

单抗A

单抗B

单抗C

2.4

8.9

29.9

2.8

7.8

28.2

HCP实测值

（ng/ml）

4.2

11.9

32.1

3

3

3

3

3

3

蛋白浓度

（mg/mL）

3

3

3

3

10

30

3

10

30

HCP加标

终浓度

（ng/mL）

3

10

30

表3.将3种单抗A、B和HCP标准品等体积加标，抗体终浓度

为3mg/ml，HCP浓度分别为3、10和30ng/ml，检测HCP 的

回收率在78%-137%范围内，CV%在0.4%-5.9%范围内：

CHO宿主细胞蛋白检测试剂盒 RA-IP01

产品名称 货号

96 Tests

规格

图A. 标准曲线示例

92%

88%

98%

103%

98%

92%

加标

回收率

5.2

1.8

2.7

1.2

3.5

0.2

CV%

108%

99%

0.9

1.4

50

25

10

8

6

4

单抗A浓度

（mg/mL）

2

1

10

10

10

10

10

10

HCP加标

终浓度

（ng/mL）

10

10

9.18

8.77

9.81

10.3

9.75

9.19

HCP实测值

（ng/ml）

10.8

9.93

支原体（Mycoplasma）是对支原体科，无胆甾原体科和螺原体科的原核生物

总称，是已知可以自由生活的最小生物，没有细胞壁，形状多样可变，直径一

般是0.1～0.3μm，基因组A-T含量高，对常见的抗生素不敏感，对热敏感。细

胞如果受到支原体污染，细胞生长速度变慢，细胞产生病变或形态改变。连续

培养细胞污染的概率大约15~35%，人员操作、污染的细胞、原辅料（血清、胰

酶、培养基）、实验环境污染（生物安全柜、细胞间、培养箱）、实验仪器

（水浴锅、液氮罐）、实验耗材（培养皿、方瓶、细胞工厂）都可能是污染

源。污染了的细胞一方面对生产带来巨大影响，另外如果细胞产品、蛋白产

品、病毒类产品受到支原体污染，最终会给患者带来潜在的健康风险。

RhinoBio推出MycoAlarm™ 支原体检测试剂盒和Myco-Visal™ 一步法快速支

原体检测试剂盒助力您的微生物检测。

Rhinogen®

支原体检测 支原体检测

Detection of mycoplasma

53 54

T

产品特点 产品列表

常见问题

MycoAlarm™ 支原体检测试剂盒 Myco-VisalTM 一步法快速支原体检测试剂盒

Rhinogen® MycoAlarmTM 支原体检测试剂盒采用生化方法进行支原体检测。利用支原体特有的ATP合成相关

酶，在底物存在的情况下可以转化ADP为ATP。存活的支原体溶解后，释放大量的酶和底物反应，促进ADP转

化为ATP，提供一种快速、灵敏的样品检测方法。通过对比加入底物后样品ATP含量的变化检测，即可通过

前后含量变化比例来确定有无支原体。其反应如下：

图A1

Rhinogen产品有更强的发光值，可以

兼容更低灵敏度的发光设备。

图A2

Rhinogen产品具备与竞品相同检出

限值的灵敏度。

A1

A2

Rhinogen® Myco-VisalTM 一步法快速支原体检测试剂

盒是针对细胞培养物支原体污染快速检测的试剂，使用

简单便捷，只需吸取1μl细胞培养液上清加入反应体系

中，65℃孵育1小时，肉眼观察即可判定结果。

65℃反应60min后，立刻取出反应管，在光线良好的环

境中观察（建议以白纸或白色背景），通过反应管溶液

颜色的变化，即可判断检测结果。如果溶液为天蓝色，

则说明有支原体污染（阳性）。如果为紫色，则说明没

有支原体污染（阴性）。如图B所示：

25T

产品名称 规格

RA-MT01-25T

MycoAlarm™ 支原体检测试剂盒 RA-MT01-50T 50T

RA-MT01-100T 100T

货号

Myco-Visal™ 一步法快速支原体检测试剂盒

RA-MT03-20T 20T

RA-MT03-50T 50T

可能是实验操作污染。皮肤表面有大量的ATP存在，可能会导致污染和高读值。出现这种情况建议实验人员戴手套操作。

Q1：MycoAlarm™ 支原体检测试剂盒检测背景值高的原因有哪些？

因为支原体是普遍存在的，所以在实验过程中环境中的支原体也可能污染样品，其次酶的反应可能也会有干扰。因此检

测结果在1.0-1.2的区间时，建议再培养24小时后再进行检测。

Q2：MycoAlarm™ 支原体检测试剂盒检测结果临界比值（~1）该如何判断是否有污染？

反应体系中加入样品量为1μl，体量较小，如果样品颜色不是很深，一般情况下不会影响结果。

Q3：使用Myco-Visal™ 一步法快速支原体检测试剂盒时，如果样品本身有颜色是否会影响最

--- 终结果的变色反应吗？

B

OH

ATP

COO S N

N S

+ O2 +

OH

AMP PPi CO2

O S N

N S

+ + +

Luciferin (荧光素） Oxyluciferin (氧化荧光素）

荧光素酶（Luciferase)

Mg2+

+Light 反应原理

55 56

T

组织解离酶

组织解离酶 组织解离酶

Tissue dissociating enzyme

组织解离酶能够在实验室条件下将细胞或组织分解为单个细胞，从而使细胞和

组织的结构被打散。组织解离酶主要用于细胞和组织的分离、纯化或研究过程

中。使用适当的组织解离酶，可以有效地释放细胞和组织中的细胞间连接、细

胞外基质和其他细胞附属物。

RhinoBio提供一系列组织解离酶：胰蛋白酶、重组人透明质酸酶、重组胶原酶

G、重组胶原酶H和嗜热菌蛋白酶，以及组织解离试剂盒：大鼠肝脏细胞分离试

剂盒、小鼠胰岛细胞分离试剂盒和软骨细胞分离试剂盒等。

胰蛋白酶

QIP-003-A 20μg 胰蛋白酶是利用重组大肠杆菌系统重组表达并经过多步层析纯化

得到重组胰蛋白酶；

该酶经过甲基化修饰及突变，保证不自切，从而去除了因自切产

QIP-003-B 5×20μg 生的假糜蛋白酶活性。

产品名称 货号 规格 产品详情

重组人透明质酸酶

RA-PH20-A 1500U 重组人透明质酸酶是采用重组DNA技术，使用CHO细胞高表达，经

过高度纯化得到的重组人透明质酸酶；

生产全程不接触动物源性成分，最适pH为6.0-7.5；

适用于组织解离，可将主要包含在基质中的透明质酸降解分解，

从而促进组织细胞之间的分离。 RA-PH20-B 5×1500U

重组胶原酶H

RA-COL04-A 150U

RA-COL04-B 255U

重组胶原酶G

RA-COL03-A 30U

RA-COL03-B 60U

重组胶原酶G来源于溶组织梭菌C. histolyticum，利用E.coli

系统重组表达生产；

可用于不同功能细胞的解离，具有纯度高、稳定性好、批间差异

小及无动物源性等特点。

重组胶原酶G来源于溶组织梭菌C. histolyticum，利用E.coli 系

统重组表达生产；

可用于不同功能细胞的解离，具有纯度高、稳定性好、批间差异

小及无动物源性等特点。

嗜热菌蛋白酶

RA-COL05-A 25mg 重组胶原酶G来源于溶组织梭菌C. histolyticum，利用E.coli 系

统重组表达生产；

可用于不同功能细胞的解离，具有纯度高、稳定性好、批间差异

RA-COL05-B 100mg 小及无动物源性等特点。

●

●

●

●

●

●

●

●

●

●

●

●

Rhinogen®

高纯度：纯度≥95％（如图1、图2）；

低内毒素：对细胞无副作用；

高稳定性：每批产品都经过严格的质量控制，以实现产

品批间稳定性。

可应用于不同功能细胞的解离或消化。

图1. 重组胶原酶G纯度质谱图 图2. 重组胶原酶H纯度质谱图

产品特点

●

● ●

产品应用

57 58

T

组织解离试剂盒

成年大鼠心肌细胞

（150-200gr）

分离试剂盒

RA-COL06

重组胶原酶G

重组胶原酶H

嗜热菌蛋白酶

重组胶原酶G

重组胶原酶H

嗜热菌蛋白酶

210U

1050U

1050μg

将重组胶原酶G溶解在1.5ml无菌水中，均分3份 500μl/份

（每份为溶液A）并储存在-20°C；

将重组胶原酶H溶解在 3ml 无菌水中，均分3份 1ml/份（每份

为溶液B）并储存在-20°C；

将嗜热菌蛋白酶溶解在1.5ml无菌水中，均分3份 500μl/份

（每份为溶液C) 并储存在-20°C；

一份溶液A+溶液B+溶液C用作一只成年大鼠心肌细胞分离。

大鼠肝脏细胞

分离试剂盒 RA-COL07

300U

1350U

将重组胶原酶G溶解在1.5ml无菌水中，均分3份 500μl/份

（每份为溶液A）并储存在-20°C；

将重组胶原酶H溶解在 3ml 无菌水中，均分3份 1ml/份（每份

为溶液B）并储存在-20°C；

将嗜热菌蛋白酶溶解在1.5ml无菌水中，均分3份 500μl/份

（每份为溶液C) 并储存在-20°C；

1.5mg 一份溶液A+溶液B+溶液C用作一只大鼠的肝脏细胞分离。

产品名称 货号 组分 规格 产品详情

重组胶原酶H

嗜热菌蛋白酶

重组胶原酶G

重组胶原酶H

嗜热菌蛋白酶

重组胶原酶H

嗜热菌蛋白酶

210U

1050U

1050μg

将重组胶原酶G溶解在900μl无菌水中，均分3份 300μl/份

（每份为溶液A）并储存在-20°C；

将重组胶原酶H溶解在300μl无菌水中，均分3份 100μl/份

（每份为溶液B）并储存在-20°C；

将嗜热菌蛋白酶溶解在150μl无菌水中，均分3份 50μl/份

（每份为溶液C) 并储存在-20°C；

一份溶液A+溶液B+溶液C用作一只成年小鼠的胰岛细胞分离。

小鼠胰岛细胞

分离试剂盒 RA-COL09

将重组胶原酶H溶解在1.5ml无菌水中，均分3份 500μl/份

（每份为溶液B）并储存在-20°C；

将嗜热菌蛋白酶溶解在300μl无菌水中，均分3份 100μl/份

（每份为溶液C) 并储存在-20°C；

一份溶液A+溶液B用于1g脂肪组织MsCs分离。

脂肪组织的MSCs

分离试剂盒 RA-COL11

900U

300μg

软骨细胞分离试剂盒 RA-COL10

900U 将重组胶原酶H溶解在1.5ml无菌水中，均分3份 500μl /份

（每份为溶液B）并储存在-20°C；

将嗜热菌蛋白酶溶解在300μl无菌水中，均分3份 100μl/份

（每份为溶液C) 并储存在-20°C；

750μg 一份溶液A+溶液B用于1g软骨组织的消化。

重组胶原酶G

重组胶原酶H

嗜热菌蛋白酶

120U

510U

300μg

大鼠胰岛细胞

分离试剂盒 RA-COL08

将重组胶原酶G溶解在 1.8ml无菌水中，均分3份 600μl/份

（每份为溶液A）并储存在-20°C；

将重组胶原酶H溶解在600μl无菌水中，均分3份 200μl /份

（每份为溶液B）并储存在-20°C；

将嗜热菌蛋白酶溶解在300μl无菌水中，均分3份 100μl/份

（每份为溶液C) 并储存在-20°C；

一份溶液A+溶液B+溶液C用作一只成年大鼠的胰岛细胞分离。

●

●

●

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●

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● 重组抗原&其他产品Recombinant antigen&Other products

59 60

T

FC受体

重组抗体

重组抗原

QMA-007

货号

重组抗人IgG（Fc）纳米抗体（Fluorescein标签）

产品名称

QRE-133

货号

重组人FcγR（I His标签）

产品名称

QRE-134

货号

重组人FcγRIIa 131R（His标签）

QRE-135 重组人FcγRIIa 131H（His标签） QRE-136 重组人FcγRIIb（His标签）

QRE-137 重组人FcγRIIIa 158V（His标签） QRE-138 重组人FcγRIIIa 158F（His标签）

QRE-139 重组人FcRn（His标签） QRE-163 重组人CD38（Fc标签）

QRE-164 重组人CD38（His标签） QRE-165 重组小鼠FcRn（His标签）

QRE-166 重组大鼠FcRn（His标签） QRE-167 重组小鼠FcγRIIb（His标签）

QRE-168 重组小鼠FcγRII（I His标签） QRE-169 重组小鼠FcγRIV（His标签）

QRE-180 重组兔FcRn QRE-181 重组猪FcRn

产品名称

重组人Siglec-15蛋白（Camel Fc标签）

QRE-101

货号

重组人EGFR抗原（His标签）

产品名称

QRE-102

货号

重组人VEGF抗原

QRE-103 重组人ErbB2抗原 QRE-104 Trastuzumab特异性抗原

QRE-105 Pertuzumab特异抗原 QRE-106 重组人VG1-Fc蛋白

QRE-108 重组人SIRPα抗原 QRE-109 重组人CD47抗原（mFc标签）

QRE-110 重组人CD47抗原（hFc标签） QRE-111 重组人Siglec-15蛋白（hFc标签）

QRE-112 重组人Siglec-15蛋白（mFc标签） QRE-113

QRE-114 重组人MERTK蛋白（His标签） QRE-115 重组人KIR3DL3蛋白（His标签）

QRE-116 重组人SIRP ECD蛋白（His标签) QRE-117 重组人CD47 ECD蛋白（hFc标签）

QRE-118 重组人FGL1 ECD蛋白（hFc标签） QRE-119 重组人B7H4 ECD蛋白（hFc标签）

QRE-120 重组人CTLA4 ECD蛋白（hFc标签） QRE-121 重组人TIM3 ECD蛋白（hFc标签）

产品名称

QRE-196 重组人/猴/猕猴ROR1 (165-305,

Frizzled domain) 蛋白（His标签） QRE-197 重组人Siglec-3 / CD33蛋白（His标签）

QRE-194 重组人B7-1 / CD80蛋白（His标签） QRE-195 重组人PLAU / uPA蛋白（His标签）

QRE-198 重组人Nectin-2 / CD112蛋白（His标签） QRE-199 重组人B7-H2 / ICOSLG蛋白（His标签）

QRE-200 重组人GUCY2C / Guanylyl cyclase C

蛋白（His标签） QRE-201 重组人促卵泡生成素抗原

QRE-202 重组人绒毛膜促性腺激素抗原 QRE-203 重组人促甲状腺激素抗原

QRE-204 重组人促黄体生成激素抗原 QRE-205 长效人促卵泡刺激素

QRE-206 重组人LIGHT / TNFSF14蛋白（His标签） QRE-207 重组人Siglec-10蛋白（His标签）

货号 产品名称 货号 产品名称

QRE-192 重组生物素化人Mesothelin / MSLN

(296-580) 蛋白（His标签） QRE-193 重组人CEACAM-5 / CD66e蛋白

（His标签）

QRE-128 重组人CD24 ECD蛋白（hFc标签） QRE-160 重组人siglec 7蛋白（hFc标签）

QRE-161 重组人siglec 9蛋白（hFc标签） QRE-162 重组人siglec 11蛋白（hFc标签）

QRE-170 重组人Her2 / ErbB2蛋白（His标签） QRE-171 重组人IL-2蛋白（His标签）

QRE-174 重组人ErbB3 / Her3蛋白（ His标签） QRE-175 重组人PCSK9蛋白（His标签）

QRE-176 重组猴PCSK9蛋白（His标签） QRE-177 重组人B7-2/CD86蛋白（His标签）

QRE-178 重组人OX40 Ligand/TNFSF4蛋白

（His标签） QRE-179 重组人OX40/TNFRSF4/CD134蛋白

（His标签）

QRE-182 重组人TROP-2/TACSTD2蛋白

（His标签） QRE-183 重组人Cathepsin B/CTSB蛋白

（His标签）

QRE-172 重组人Mucin-1/

MUC-1（890-1158）蛋白（His标签） QRE-173 重组人Mucin-1/

MUC-1 (1036-1155) 蛋白（His标签）

QRE-184 重组人IL-2蛋白（Fc标签） QRE-185 重组人Mucin-1 / MUC-1（33-167）

蛋白（Fc标签）

QRE-186 重组人ErbB3 / Her3蛋白（Fc标签） QRE-187 重组人Nectin-4蛋白（ His标签）

QRE-188 重组猴Nectin-4蛋白（ His标签） QRE-189 重组小鼠Nectin-4蛋白（ His标签）

QRE-190 重组人CD4 / LEU3蛋白（His标签） QRE-191 重组人/猴/猕猴ROR1蛋白（His标签）

QRE-122 重组人IL-4Ra ECD蛋白（His标签） QRE-123 重组人TIGIT ECD蛋白（hFc标签）

QRE-124 重组人CD137 ECD蛋白（hFc标签） QRE-125 重组人PD1 ECD蛋白（hFc标签）

QRE-126 重组人siglec15 ECD蛋白（hFc标签） QRE-127 重组人CD3e-CD3d二聚体

61 62

T

其他产品

RA-AD01

常用细胞培养试剂

ADCC Bioassay细胞稳定剂

RA-AD02 G418

RA-AD03 潮霉素B（Hygromycin B）

RA-AD05 博来霉素（Zeocin）

RA-AD06 重组胰蛋白酶细胞消化液

货号 产品名称

CSFBS1500

血清

澳洲无菌胎牛血清

货号 产品名称

RA-BM12

培养基

DMEM/F12培养基，无酚红

RA-BM11 RPMI 1640 培养基，无酚红

货号 产品名称

抗体糖基化重塑是一种改变抗体分子上糖基化模式的技术。它的优势包括增强抗体的稳定性、改善其药

代动力学特性、增强其抗体依赖性细胞毒性（ADCC）活性等。这项技术在药物研发和治疗领域有广泛的应

用，包括治疗癌症、自身免疫病和感染性疾病等。

人IgG糖链重塑和糖基偶联是指对人类免疫球蛋白G（IgG）分子进行结构或性质的改变，或在其特定位

置引入化学团或官能团，以实现特定的功能或应用。这种重塑或偶联的意义在于扩展人IgG的应用领域和功

能，提高其治疗效果或生物活性。通过改变IgG的结构或性质，可以调控药物传递性能、免疫活性、稳定性

等，从而实现更好的治疗效果或应用效果。

定点糖链重塑及叠氮活化试剂盒

Rhinogen® TransCOUPER™ 糖链重塑试剂盒可在几个小时内实现对天然人 IgG特定位点的糖链重塑，通

过酶重塑技术对抗体 Fc端的 N-聚糖进行转糖基化，从而形成携带特定糖型的同源抗体池。如果需要去除核

心岩藻糖，可以选用Rhinogen® TransCOUPER™ 去岩藻糖链重塑试剂盒。试剂盒可用于生成携带G0、G1、G2

或 G2S2 糖型的抗体。

NO.1糖链重塑

新品上线预告—Coming Soon！

图A：Rhinogen® TransCOUPER™ 糖链重塑试剂盒产品原理图

图B：Rhinogen® TransCOUPER™ 去岩藻糖链重塑试剂盒产品原理图

A

B

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T

产品应用

产品列表

应用案例

岩藻糖分析

Rhinogen® TransCOUPER™ 叠氮活化试剂盒可在人 IgG 的 Fc端的 N-糖基化位点上实现高效的特异性

位点连接。使用本试剂盒进行叠氮活化后，抗体可以用任意选择的炔烃反应型点击试剂进行标记，标记度

（DOL）为每个抗体四个标记（DOL = 4）。

NO.2叠氮活化

Rhinogen® TransCOUPER™ 糖链重塑试剂盒可用于人IgG与G0，G1，G2或G2S2糖型的糖链重塑；

Rhinogen® TransCOUPER™ 去岩藻糖链重塑试剂盒可用于重塑人 IgG Fc端的N-聚糖，以获得不含 α1-6

连接核心岩藻糖的同源糖型抗体；

Rhinogen® TransCOUPER™ 叠氮活化试剂盒可用于对人 IgG 进行特定位点的叠氮活化。

图C：Rhinogen® TransCOUPER™ 叠氮活化试剂盒产品原理图

C

TransCOUPER™

糖链重塑试vv剂盒

TransCOUPER™

Reshaping

lmmobilized EndoS2，Microspin

Glycosyltransferase

Protein A纯化柱

Glycoform G0/G1/G2/G2S2

Glycosyltransferase

Protein A纯化柱

Glycoform G0/G1/G2/G2S2

QPF-102 1kit

TransCOUPER™

去岩藻糖链重塑试剂盒

TransCOUPER™

Reshaping FUC

lmmobilized EndoS2&α1-6

Fucosidase，Microspin

QPF-103 1kit

TransCOUPER™

叠氮活化试剂盒

TransCOUPER™

Azoture ACT

lmmobilized EndoS2，Microspin

Glycosyltransferase

Protein A纯化柱

Glycoform Azoture hIgG1&4/ hIgG2

QPF-104 1kit

中文名称 商标名称 货号 试剂盒组分 规格 α1-2 Fucosidase

（α1-2岩藻糖苷酶） QPF-013-A α1-2 Fucosidase可催化水解糖蛋白或游离寡糖上α1-2 连接的

岩藻糖。

● 1000U

产品名称 货号 规格 产品信息

α1-2,4,6 Fucosidase

（α1-2,4,6 岩藻糖苷酶） QPF-014-A 100U

α1-2,4,6 Fucosidase可催化寡糖中α1-2、α1-4和α1-6末端

岩藻糖残基的水解；

与其他键相比，可以更有效地切割α1-6岩藻糖残基。

●

α1-3,4 Fucosidase

（α1-3,4 岩藻糖苷酶） QPF-015-A 50μl

α1-3,4 Fucosidase可有效识别 α1-3,4 岩藻糖基化聚糖（例如

Lewis X/A 表位，包括它们的唾液酸化对应物）并水解这些底物

中的末端 α1-3和 α1-4岩藻糖基键，而无需去除唾液酸部分；

●

蛋白浓度

（μg/ml）

OD400

100

0.799

0

0.007

样品名称 RhinoBio 阴性对照

约200

0.305

进口品牌

β-N-Acetylhexosaminidase比进口品牌的

同款产品的酶活也要高很多，相同的酶使用

量及在相同的反应条件下，反应25min后，

我们400nm波长条件下的OD值为0.799，而进

口品牌的只有0.305。（相同的酶使用量，

相同的酶切体系及条件下，我们的实际使用

效果更好。）另外，从这个电泳图上可以看

出，β-N-Acetylhexosaminidase产品的纯

度更高，而进口品牌产品中有相当多杂条

带，因此我们产品的纯度更高。酶切位点