中国猪业 2023年6期

发布时间:2024-1-04 | 杂志分类:其他
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中国猪业 2023年6期

China Swine Industry2023 年 第 6 期过对母猪诱导分娩的方式实现。这样做不仅有利于提高仔猪的体重均匀度和发育整齐度,还可以方便后续的精准营养管理,同时减少母猪个体间的繁殖差异[3]。在妊娠 114 d 对母猪注射前列腺素,分 2 次注射,间隔 6 h。于 20~24 h 后注射缩宫素可有效加强子宫收缩,增加同期分娩效果[14]。研究表明,80%的母猪在注射前列腺素 24 h 后可启动分娩,而未启动分娩的母猪在注射缩宫素后都能在 6 h 内启动分娩[23]。4 小结近年来,养殖行业竞争激烈。受非洲猪瘟和新冠肺炎疫情的双重影响,养殖企业纷纷选择降低成本,提高效益,种猪场实施母猪批次化生产管理技术就显得尤为重要。其工作效率更高,生产运营成本更低,猪群管理更加精准,还能根据市场状况调整产能,减少亏损的风险[24]。此外,在非洲猪瘟及其他传染性疫病的威胁下,我国养殖行业结构发生了巨大变化,大量的生猪养殖散户和小户纷纷退出,规模化猪场相继出现,而规模化、集约化养猪的关键环节是批次化生产,批次化生产是一种高效的管理模式,符合国内猪场的生物安全。猪场流程化批次生产体系是将前一... [收起]
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中国猪业 2023年6期
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China Swine Industry

2023 年 第 6 期

过对母猪诱导分娩的方式实现。这样做不仅有利于提高

仔猪的体重均匀度和发育整齐度,还可以方便后续的精

准营养管理,同时减少母猪个体间的繁殖差异[3]。在妊

娠 114 d 对母猪注射前列腺素,分 2 次注射,间隔 6 h。

于 20~24 h 后注射缩宫素可有效加强子宫收缩,增加

同期分娩效果[14]。研究表明,80%的母猪在注射前列腺

素 24 h 后可启动分娩,而未启动分娩的母猪在注射缩宫

素后都能在 6 h 内启动分娩[23]。

4 小结

近年来,养殖行业竞争激烈。受非洲猪瘟和新冠肺

炎疫情的双重影响,养殖企业纷纷选择降低成本,提高

效益,种猪场实施母猪批次化生产管理技术就显得尤为

重要。其工作效率更高,生产运营成本更低,猪群管理

更加精准,还能根据市场状况调整产能,减少亏损的风

险[24]。此外,在非洲猪瘟及其他传染性疫病的威胁下,

我国养殖行业结构发生了巨大变化,大量的生猪养殖散

户和小户纷纷退出,规模化猪场相继出现,而规模化、

集约化养猪的关键环节是批次化生产,批次化生产是一

种高效的管理模式,符合国内猪场的生物安全。猪场流

程化批次生产体系是将前一批次猪只全部清空,不同日

龄猪分别在隔离的空间饲养,最大限度地降低了疫病的

传播风险,提高了猪场的周转效率,因而得到较快推广

应用。

参考文献

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Genetic Breeding 品种繁育

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China Swine Industry

2023 年 第 6 期

DOI:10.16174/j.issn.1673-4645.2023.06.008

收稿日期:2023-06-09

作者简介:李玉莲 (1987-),女,安徽铜陵人,硕士,畜牧师,主要从事猪遗传育种工作

植物甾醇饲喂育肥猪效果研究

及经济效益分析

李玉莲 1 何炯斌 2 谭 红 1 刘 伟 1 李朝晖 1 董杏林 3

1湘潭市家畜育种站袁 湖南湘潭 411104曰

2湖南禾益元生物科技有限公司袁 湖南湘潭 411300曰

3湘潭县农业农村局袁 湖

南湘潭 411200冤

摘 要院 为研究植物甾醇对育肥猪育肥性能尧 胴体性能尧 肌肉品质及养殖经济效益的影响袁 试验选择 60 kg 左右的 野杜伊

长伊大冶 去势育肥猪 162 头袁 按随机区组设计法分为 2 个处理袁 即对照组和试验组袁 每个处理 3 个重复袁 每个重复 27 头

猪袁 在相同的营养水平及饲养管理条件下袁 对照组饲喂基础日粮袁 试验组在基础日粮中添加 400 mg/kg 的植物甾醇遥 育肥

试验全期53 d袁 育肥试验结束后袁 2 组持续饲喂各组日粮至试验猪体重约 140 kg 时结束袁 每组选择 4头体重 140 kg 左右

的育肥猪进行屠宰测定遥 结果表明袁 在育肥猪 60耀100 kg 育肥阶段的日粮中添加 400 mg/kg 的植物甾醇袁 具有提高育肥

猪育肥性能和胴体性能的趋势曰 能显著提高育肥猪肌肉品质中宰后 1 h 肉色红度值 渊 约0.05冤袁 显著降低肌肉失水率 渊 约

0.05冤曰 每头育肥猪平均多收益84.57 元遥 综上袁 在育肥猪日粮中添加 400 mg/kg的植物甾醇袁 可有效改善生产性能袁 提

高养殖经济效益遥

关键词院 植物甾醇曰 育肥猪曰 育肥性能曰 胴体性能曰 肌肉品质曰 经济效益

中图分类号院 S828 文献标识码院 A 文章编号院 1673-4645(2023)06-0046-05

开放科学渊资源服务冤标识码渊OSID冤袁扫一扫袁了解文章更多内容

植物甾醇是一类存在于植物细胞膜与哺乳动物胆固醇

类似的天然活性化合物,广泛存在于植物的根、茎、叶、

果实和种子中,是植物细胞膜的关键组分和多种激素的前

体物质,其主要存在形式为甾醇酯。多项研究表明[1-3],植

物甾醇具有降低胆固醇、降血脂、抗炎、抗氧化、调节免

疫等作用,已广泛应用于医药、食品、化妆品等行业,对

促进人体健康有积极意义。2008 年,植物甾醇被我国批

准为一种新型的功能性畜禽饲料添加剂。近年来,随着对

植物甾醇作为畜禽饲料添加剂的研究不断深入,发现植物

甾醇具有提高畜禽生产性能、调节脂质代谢、改善畜禽产

品品质、降低养殖成本等作用。本试验在前期研究的基础

上,选择适宜添加水平的植物甾醇饲喂“杜×长×大”育

肥猪,旨在研究植物甾醇对“杜×长×大”育肥猪的育肥

性能、胴体性能及肌肉品质的影响,分析养殖经济效益,

以期为植物甾醇在养猪生产中的应用提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

本试验所用的植物甾醇,由湖南禾益元生物科技有

限公司研制生产。

1.2 试验设计

试验采用单因子试验设计,在湖南某公司养殖场选

饲养饲料 Husbandry and Forage

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China Swine Industry

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择体重 60 kg 左右、健康的“杜×长×大”去势育肥猪

162 头,按随机区组设计法分为 2 个处理组,即对照组

和试验组,每个处理组 3 个重复,每个重复 27 头猪。在

相同的营养水平及饲养管理条件下,对照组饲喂基础日

粮,试验组在基础日粮中添加 400 mg/kg 的植物甾醇。

1.3 试验时间与地点

整个试验分为 2 部分完成,即育肥试验和屠宰试

验。育肥试验从试验猪体重 60 kg 开始至 100 kg 结束,

于 2022 年 4 月 23 日至 2022 年 6 月 15 日在湖南某公司

养殖场进行,试验全期 53 d,预试期 3 d,试验期 50 d。

育肥试验结束后,对照组继续饲喂基础日粮,试验组继

续饲喂添加 400 mg/kg 植物甾醇的基础日粮,至试验猪

体重约 140 kg 结束,屠宰试验于 2022 年 7 月在湖南长

盛科技开发有限公司屠宰场进行,时间为 1 d。

1.4 试验日粮

试验日粮由湖南某公司养殖场提供,要求消化能≥

13.68 MJ/kg,粗蛋白≥15%。

1.5 饲养管理

育肥试验分预试期和试验期。预试期内,对育肥猪

进行调教适应环境、饲料过渡等前期工作。预试期结束,

早晨空腹逐头称重,组间差异不显著,进入试验期,猪

体重达 100 kg 左右时饲养试验结束。试验期间,猪只

由专人负责饲养管理,每日上午 9:00 时、下午 16:00 时

各饲喂 1 次,饲粮为干粉料,以吃饱不剩为原则,自由

饮水,以组 (栏) 为单位详细记录耗料量。试验期间保

持圈舍清洁卫生,做好日常工作记录和饲养猪群的健康

状况记录。试验结束时,对所有试验猪只称重。

1.6 测定指标及方法

1.6.1 育肥性能

试验人员每日记录育肥猪的采食量,在试验开始与结

束时对猪只进行空腹称重,计算试验期间 (60~100 kg

育肥期间) 各组猪的平均日增重、平均日采食量及耗料

增重比。

1.6.2 胴体性能

每组随机选择健康、体重为 140 kg 左右的试验猪 4

头,宰前称重,按 《瘦肉型猪胴体性状测定技术规范》

(NY/T825-2004) 进行胴体性能测定。胴体指标包括屠

宰率、胴体长度、背膘厚、眼肌面积、后腿比以及胴体

组成等常规指标。宰前活重:称量猪宰前空腹 24 h 的重

量;胴体重:称量猪在放血、煺毛后,去掉头、蹄、尾

和内脏 (保留板油和肾脏) 的两边胴体重,根据宰前活

重计算;屠宰率:记录宰前活重和胴体重,计算屠宰率;

胴体直长:用皮尺测量耻骨联合前缘至第一颈椎前缘的

长度;胴体斜长:用皮尺测量耻骨联合前缘至第一肋骨

与胸骨结合处的长度;3 点平均膘厚:将右边胴体倒挂,

用游标卡尺测量胴体背中线肩部最厚处、最后肋、腰荐

结合处 3 点脂肪的厚度,计算平均值;3 点平均皮厚:

将右边胴体倒挂,用游标卡尺测量胴体背中线肩部最厚

处、最后肋、腰荐结合处 3 点皮肤的厚度,计算平均

值;后腿比:称量沿倒数第一腰椎与倒数第二腰椎之间

垂直切下的左边腿臀重量,根据左边胴体重计算;眼肌

面积:在左边胴体最后肋处垂直切断背最长肌,用硫酸纸

覆盖于横截面上,用深色笔沿眼肌边缘描出轮廓,用求积

仪计算面积;胴体组成:将左边胴体瘦肉、肥肉、皮、骨

剥离并分别称重,计算瘦肉率、肥肉率、皮率和骨率。

1.6.3 肌肉品质

取背最长肌样品,按照 《猪肉品质测定技术规程》

(NY/T821-2019) 进行肌肉品质测定。分别测定肉色

(亮度 L

*、红度 a

*、黄度 b

*)、大理石纹、肌肉 pH 值、

失水率、贮存损失、熟肉率、嫩度等指标。肉色评分和

大理石纹评分:宰后 1 h 内,对照肉色评分和大理石纹

评分板,对背最长肌横断面的肉色和大理石纹进行评

分;肌肉 pH 值:取左边胴体背最长肌,用 pH 计分别

在宰后 1 h 和 24 h 测定 pH 值,记为 pH1 h 值和 pH24 h

值;肉色 (亮度 L

*、红度 a

*、黄度 b

*):取左边胴体背

最长肌,用肉色测定仪分别在宰后 1 h 和 24 h 测定肉色

值,记为 L1、a1、b1 和 L24、a24、b24;失水率:取背最长

肌厚 1 cm 的肉块,用直径 25 mm 的取样器取样,称

重,样品上下各垫 1 层纱布、8 层滤纸,在压缩仪上 35

kg 重力下保持 5 min,撤除压力后立即称重,计算失水

率;贮存损失:取背最长肌修成边长 2 cm 的正方体,

称重,沿肌纤维走向放入测定管,冷藏 48 h 后,称重、

计算贮存损失;熟肉率:宰后 1 h 内,取腰大肌中段约

100 g 肉样,置于铝锅蒸屉上用沸水蒸 30 min,取出吊

Husbandry and Forage 饲养饲料

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挂于阴凉处 15 min 后称重。

1.7 统计分析

利用 Excel 2007 对数据进行整理,并用 SPSS 21.0

软件进行 T 检验,结果用“平均值±标准差”表示。

<0.01 表示差异极显著, <0.05 表示差异显著, >

0.05 表示差异不显著。

2 结果与分析

2.1 饲喂植物甾醇对猪育肥性能的影响

由表 1 可知,育肥试验全期内,试验组初重、末

重、平均日采食量、平均日增重、耗料增重比与对照组

相比,差异不显著。试验组与对照组相比,平均日采食

量比对照组降低了 136.27 g (5.29%);平均日增重比对

照组高 60.04 g (7.73%);耗料增重比较对照组降低了

0.37 (11.53%)。结果表明,在“杜×长×大”育肥猪

60~100 kg 育肥期间,在基础日粮中添加 400 mg/kg

的植物甾醇,具有提高育肥猪平均日增重、降低平均日

采食量和耗料增重比的趋势。

2.2 饲喂植物甾醇对育肥猪胴体性能的影响

由表 2 可知,胴体性能测定的 12 项指标中,试验

组与对照组相比,差异均不显著。但试验组与对照组相

比,胴体直长、胴体斜长、后腿比、眼肌面积和瘦肉率

均高于对照组,分别比对照组提高 3.55%、0.36%、

2.44%、8.87%和 3.31%;试验组 3 点平均膘厚、脂率

和骨 率 均低 于 对 照组,分 别比 对 照组 降 低 5.56%、

9.11%和 5.68%。结果表明,在基础日粮中添加 400

mg/kg 的植物甾醇,具有提高育肥猪胴体性能的趋势。

2.3 饲喂植物甾醇对育肥猪肌肉品质的影响

从表 3 可以看出,肌肉品质所测定的 12 项指标数

值均处于正常范围内,说明在日粮中添加 400 mg/kg 的

植物甾醇对猪肉的品质无不利影响。测定的指标中除了

宰后 1 h 内肉色的红度值 (a1) 和失水率组间差异显著

外,其他指标组间差异均不显著。试验组宰后 1 h 内肉

色的红度值 (a1) 显著高于对照组 ( <0.05),失水率

显著低于对照组 ( <0.05)。结果表明,在基础日粮中

添加 400 mg/kg 的植物甾醇,能显著提高肉色红度,降

表1 育肥性能测定结果

注:同行数据肩标不同大写字母表示差异极显著 ( <0.01),不同

小写字母表示差异显著 ( <0.05),字母相同或无字母表示差异不

显著 ( >0.05),下同。

项目 对照组 试验组

初重/kg 60.57±6.39 60.17±4.57

末重/kg 100.68±8.35 103.39±8.07

平均日采食量/g 2 578.20±226.51 2 441.93±136.23

平均日增重/g 802.31±47.63 864.35±95.38

耗料增重比 3.21±0.21 2.84±0.18

表 2 胴体性能测定结果

项目 对照组 试验组

宰前活重/kg 139.33±7.02 140.33±3.79

屠宰率/% 78.58±0.97 78.99±1.11

胴体直长/cm 103.33±1.15 107.00±3.00

胴体斜长/cm 90.50±0.87 90.83±1.04

3 点平均膘厚/mm 34.20±5.03 32.30±3.50

3 点平均皮厚/mm 3.01±0.24 3.21±0.63

后腿比/% 32.37±0.45 33.16±1.39

眼肌面积/cm2

57.51±2.31 62.61±8.80

瘦肉率/% 61.42±0.81 63.45±2.03

脂率/% 20.42±2.02 18.56±1.80

骨率/% 10.57±0.67 9.97±0.71

胴体组成

皮率/% 7.59±1.01 8.02±0.65

表 3 肌肉品质测定结果

项目 对照组 试验组

肉色评分 3.00±0.50 3.00±0.00

大理石纹评分 2.00±0.00 2.00±0.00

pH1 h值 6.31±0.21 6.26±0.22

pH24 h值 5.77±0.16 5.72±0.19

L1 45.07±1.71 43.95±0.58

a1 3.64±0.81a

5.36±4.41b

b1 3.02±0.20 2.78±0.58

L24 48.58±1.13 50.83±1.96

a24 5.54±0.90 4.53±1.36

b24 5.02±0.71 4.97±0.63

失水率/% 15.62±2.18a

12.77±3.31b

熟肉率/% 72.25±4.96 74.21±7.51

饲养饲料 Husbandry and Forage

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渊下转第 52页冤

低猪肉失水率,对提高猪肉品质有一定作用。

2.4 经济效益分析

根据本次试验组和对照组的试验数据,假设按照生

猪出栏价格 20 元 /kg、饲料价格 4 元 /kg、植物甾醇价

格 0.1 元 /g 计算,本试验中,在育肥猪 60~100 kg 育

肥期间,在饲料中添加 400 mg/kg 的植物甾醇,每头育

肥猪平均多收益 84.57 元。具体计算情况见下表 4。

3 讨论

3.1 饲喂植物甾醇对育肥猪育肥性能尧 胴体性能

及肌肉品质的影响

目前在生长育肥猪日粮中添加植物甾醇的研究较

多,何昭友[4]在育肥猪 50~90 kg 育肥阶段的日粮中分

别添加 50、100、150、200 mg/kg 植物甾醇,结果显

示,添加 150、200 mg/kg 植物甾醇能显著提高育肥猪

的平均日采食量和平均日增重;添加 100、150、200

mg/kg 植物甾醇能显著降低料重比;添加植物甾醇对育肥

猪胴体性能及肌肉品质无显著性影响,但有提高胴体性能

和肌肉品质的趋势。程业飞等[5]在育肥猪 60~110 kg 育肥

阶段的日粮中添加 30 mg/kg 植物甾醇,对其育肥性能

无显著性影响。许栋等[6]在 90 kg 育肥猪日粮中分别添

加 100、200、300 g/t 植物甾醇,结果表明,所有添加

了植物甾醇的试验组育肥猪末重均显著高于对照组

( <0.05),平均日增重、平均日采食量均极显著高于对

照组 ( <0.01),但料重比显著低于对照组 ( <0.05),

眼肌面积随着植物甾醇添加量的提高而极显著升高

( <0.01)。周萌等[7]在 130~190 日龄育肥猪阶段的日

粮中分别添加 60、120、180 mg/kg 的植物甾醇,结果

显示,添加 120 mg/kg 和 180 mg/kg 植物甾醇能极显著

提高平均日增重,显著提高平均日采食量,极显著降低

背膘厚,分别显著和极显著提高了眼肌面积,极显著提

高肉色评分和大理石花纹评分。本试验中,在育肥猪

60~100 kg 阶段日粮中添加 400 mg/kg 植物甾醇对其

育肥性能无显著性影响,但有提高末重、平均日增重,

降低平均日采食量和耗料增重比的趋势;对其胴体性能

无显著性影响,但有提高胴体直长、胴体斜长、后腿比、

眼肌面积、瘦肉率和降低 3 点平均膘厚、脂率的趋势;

能显著提高猪肉宰后 1 h 的红度值,显著降低失水率。

综上所述,在育肥猪日粮中添加植物甾醇,对育肥猪的

育肥性能、胴体性能及肌肉品质均有积极作用,但具体

效果可能受添加阶段、添加剂量、添加持续时间等多种

因素影响,会有所不同。

3.2 饲喂植物甾醇对育肥猪经济效益的影响

经济效益指标是生猪养殖主体最关注的核心指标,

养殖必须尽可能地降低成本、提高效率,才能实现经济

效益的最大化[8]。本试验根据育肥性能测定结果,初步

分析了在育肥猪 60~100 kg 阶段的饲料中添加 400

mg/kg 的植物甾醇,其育肥猪平均多收益 84.57 元 / 头,

如果是规模猪场,则经济效益可观。

4 结论

综上所述,在“杜×长×大”育肥猪日粮中添加

400 mg/kg 的植物甾醇,具有提高育肥猪的育肥性能和

胴体性能、改善肌肉品质和提高经济效益的趋势。

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[4] 何昭友. 植物甾醇对肥育猪生长性能、血清指标及猪肉品质

表 3 不同剂量的益生菌制剂对仔猪血清免疫指标的影响 表 4 经济效益初步分析

组别 饲料成本/(元/头) 植物甾醇成本/(元/头) 养殖收入/(元/头) 利润/(元/头)

对照组 515.64 0 802.20 286.56

试验组 488.39 4.88 864.40 371.13

Husbandry and Forage 饲养饲料

49

第56页

China Swine Industry

2023 年 第 6 期

DOI:10.16174/j.issn.1673-4645.2023.06.009

收稿日期:2023-01-16

作者简介:殷林 (1970-),女,土族,青海海东人,兽医师,研究方向为畜牧兽医

复合益生菌对仔猪生长性能的影响

殷 林

渊青海省海东市互助县畜牧兽医站袁 青海海东 810500冤

摘 要院 仔猪在早期断奶阶段袁 其胃肠道功能及免疫系统功能发育不完全袁 断奶应激会导致仔猪机体免疫力下降袁 引起胃肠

道损伤袁 发生营养性腹泻袁 从而抑制仔猪生长遥 通过添加益生菌制剂可以有效改善断奶应激遥 试验旨在研究不同剂量的复合

益生菌制剂对断奶仔猪生长性能的影响袁 并确定复合益生菌制剂在仔猪生产中的最适添加水平遥 试验选择健康的 21 日龄断

奶仔猪 100 头袁 随机分成 5 组袁 每组 5 个重复遥 各组断奶仔猪分别饲喂含有 0 渊对照组冤尧 0.1% 渊试验 1 组冤尧 0.2% 渊试

验 2 组冤尧 0.3% 渊试验 3 组冤尧 0.4% 渊试验 4 组冤 复合益生菌制剂的试验饲料遥 试验周期为 5 周袁 包括 1 周的预试期和 4

周的正式试验期袁 检测各组断奶仔猪的生长性能遥 结果表明袁 试验 2 组和试验 3 组断奶仔猪的试验末重比对照组分别提高

了 5.74%尧 6.25% 渊 约0.05冤曰 平均日增重分别比对照组显著提高了 11.90%尧 12.48% 渊 约0.05冤曰 试验 2尧 3 组仔猪的

料重比均比对照组均显著降低了8.72% 渊 约0.05冤曰 4个试验组仔猪的腹泻率分别比对照组显著降低了 20.96%尧 41.19%尧

45.45%尧 35.06% 渊 约0.05冤遥 研究表明袁 在断奶仔猪日粮中添加 0.2%和 0.3%的复合益生菌制剂对仔猪的生长性能及肠

道健康具有显著的改善作用袁 其中添加 0.3%的复合益生菌效果更佳遥

关键词院 断奶仔猪曰 复合益生菌制剂曰 平均日增重曰 料重比

中图分类号院 S828.5 文献标识码院 A 文章编号院 1673-4645(2023)06-0050-03

开放科学渊资源服务冤标识码渊OSID冤袁扫一扫袁了解文章更多内容

益生菌是一种活性微生物,对宿主肠道健康有益,

在动物体内可以抑制病原微生物的生长繁殖,提高机体

非特异性免疫功能[1],刺激消化酶的分泌,促进机体吸

收养分[2],进而改善机体健康和生产性能[3,4]。益生菌制

剂与抗生素相比,具有安全、无耐药性、畜产品无残留

等优点,是一种比较高效、安全的可替代抗生素的饲料

添加剂[5,6]。目前,益生菌制剂在畜禽及水产养殖生产中

的应用研究成果较多,并取得非常可观的生产效益和经

济效益。柳成东等[7]研究了在断奶仔猪日粮中添加由枯

草芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌组成的复合益生菌制剂,发

现添加复合益生菌制剂组日粮显著降低了断奶仔猪的腹

泻率及料重比,并降低了仔猪盲肠中大肠杆菌的数量,

提高了乳酸菌的数量。尹珺伊等[8]研究表明,在断奶仔

猪饲料和饮水中添加复合益生菌制剂,显著提高了仔猪

的平均日增重,降低了腹泻率和料重比,且复合益生菌

制剂对仔猪腹泻率的治疗有效率达 70%以上,与抗生素

的治疗效果相当。本研究探讨不同剂量的由酵母菌和枯

草芽孢杆菌组成的复合益生菌制剂对断奶仔猪生长性能

的影响,并确定了最适的添加水平,为复合益生菌制剂

高效、安全地应用于仔猪养殖中提供数据支撑。

1 试验材料与方法

1.1 复合益生菌制剂

本试验中的复合益生菌由北京某科技有限公司生

产,由酿酒酵母菌和枯草芽孢杆菌组成,二者的有效活

饲养饲料 Husbandry and Forage

50

第57页

China Swine Industry

2023 年 第 6 期

菌数均大于 2×1010 CFU/g。

1.2 试验设计

试验选择健康的 21 日龄断奶仔猪 100 头,随机分成

5 组,每组 5 个重复。各组断奶仔猪分别饲喂基础饲料

(对照组)、基础饲料+0.1%复合益生菌制剂 (试验 1 组)、

基础饲料+0.2%复合益生菌制剂 (试验 2 组)、基础饲

料+0.3%复合益生菌制剂 (试验 3 组)、基础饲料+0.4%

复合益生菌制剂 (试验 4 组)。试验周期为 5 周,包括 1

周的预试期和 4 周的正式试验期,在第 35 d 试验期结束

后,根据数据分析各组断奶仔猪的生长性能。试验断奶仔

猪的基础饲料组成和营养成分含量如表 1 所示。

1.3 断奶仔猪养殖管理

预试验开始前 1 周对猪舍进行彻底清扫,并使用“卫

可”消毒剂消毒。预试期间所有仔猪饲喂基础饲料,正式

试验期各组分别饲喂相应的试验饲料。仔猪自由采食,不

间断供水。驱虫与免疫按照常规养殖程序进行。每日观察

仔猪的健康状态,记录发生腹泻仔猪的头数及天数。

1.4 生长性能的测定

试验开始和结束时,在仔猪晨饲前,称量空腹体重,

记为初重和末重,统计养殖期间各组仔猪的饲料采食

量,准确记录每日的饲料添加量和剩余饲料量。统计各

组腹泻仔猪的头数及腹泻天数,分别计算仔猪的平均日

增重、料重比、腹泻率等。

2 试验结果与分析

由表 2 可知,试验 2 组和试验 3 组断奶仔猪的试

验数据优于对照组、试验 1 组和试验 4 组。其中,试验

2 组和试验 3 组仔猪的试验末重与对照组相比分别显著

提高了 5.74%、6.25% ( <0.05);平均日增重分别比

对照组显著提高了 11.90%、12.48% ( <0.05);料重

比均比对照组显著降低了 8.72% ( <0.05)。4 个试验

组仔猪的腹泻率分别显著降低了 20.96%、41.19%、

45.45%、35.06% ( <0.05)。综合以上数据发现,在

断奶仔猪日粮中添加 0.2%和 0.3%的复合益生菌可以更

好地提高仔猪的平均日增重,降低料重比和腹泻率。

3 讨论

仔猪在早期断奶阶段,其胃肠道及机体的免疫系统

表1 试验断奶仔猪的基础饲料组成和营养成分含量

日粮组成 含量/% 营养含量② 含量

玉米 61.6 消化能/(MJ/kg) 13.89

膨化玉米 5 粗蛋白/% 18.13

豆粕 16 钙/% 0.84

脱脂奶粉 5 有效磷/% 0.41

鱼粉 3 赖氨酸/% 0.864

麸皮 5 苏氨酸/% 0.61

豆油 1 蛋氨酸+半胱氨酸/% 0.59

食盐 0.2

磷酸氢钙 1.2

预混料①

2.00

合计 100.00

注:①预混料为每千克饲料提供:维生素 A 14 000 IU,维生素 D3

3 800 IU,维生素 E 28 IU,维生素 K3 5.5 mg,生物素 0.37 mg,

叶酸 0.56 mg,烟酸 (尼克酸) 40 mg;铜 40 mg,铁 120 mg,

锰 40 mg,锌 100 mg,碘 0.18 mg,硒 0.32 mg;②营养含量中

消化能和有效磷为计算值,其他均为实测值。

表表2 3不同剂量的复合益生菌制剂对断奶仔猪生长性能的影响 不同剂量的益生菌制剂对仔猪血清免疫指标的影响

项目 对照组 试验 1 组 试验 2 组 试验 3 组 试验 4 组 总标准误 P 值

初重/kg 7.04 7.08 7.02 7.05 7.04 0.31 0.831

末重/kg 13.93b

14.28ab 14.73

a

14.80

a

14.35

ab

1.27 0.044

平均日增重/(g/d) 246.07

b

257.14

ab

275.36

a

276.79

a

261.07

ab

12.73 0.041

平均日采食量/(g/d) 480.50 482.65 490.20 493.45 484.62 12.43 0.917

料重比 1.95

b

1.87

ab

1.78

b

1.78

b

1.87

ab

0.12 0.023

腹泻率/% 5.39

a

4.26

b

3.17

c

2.94

c

3.50

c

0.28 0.011

注:同行数据肩标字母不同表示差异显著 ( <0.05),肩标字母相同或无字母表示差异不显著 ( >0.05)。

Husbandry and Forage 饲养饲料

51

第58页

China Swine Industry

2023 年 第 6 期

渊上接第49 页冤

的影响研究[D]. 南宁: 广西大学, 2012.

[5] 程业飞, 胡琴, 王春梅, 等. 普通和乳化植物甾醇对育肥猪生

长性能、血清生化指标和养分消化率的影响[J]. 中国粮油学报,

2017, 32(4):98-102.

[6] 许栋, 李景军, 林丽秀, 等. 植物甾醇对猪生产性能、免疫指

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能、屠宰性能及养殖经济效益的影响[J]. 饲料研究, 2022, 45(18):

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[8] 李文丰, 谢铿铮, 张海峰, 等. 我国生猪生产成本及国际竞争

力比较分析[J]. 中国猪业, 2022, 17(6):13-16.

尚未发育完全,断奶应激会导致仔猪机体免疫力下降,

并引起胃肠道损伤,发生营养性腹泻,从而抑制仔猪生

长。在过去的养殖生产中,通常通过添加氧化锌或抗生

素来预防和治疗仔猪的断奶应激,促进仔猪生长并降低

腹泻率,但随着限抗、禁抗以及无抗养殖方案的推行,

寻找抗生素的替代品尤为重要。本试验中通过添加复合

益生菌制剂帮助仔猪改善肠道健康,结果表明在饲料中

添加适量的复合益生菌制剂可以提高仔猪的生长性能,

增强其肠道健康。崔玉革等[9]研究发现,在断奶仔猪饲

料中添加 0.3%的复合益生菌可以显著提高仔猪的试验

末体重和平均日增重,降低仔猪料重比和腹泻率,并提

高仔猪机体的免疫力及抗氧化性能。此外,秦胜容[10]、

陈亚强等[11]研究发现复合益生菌除了可以提高仔猪生长

性能外,还可以改善血液的生化指标;而王小建等[12]、

李永峰等[13]研究表明,复合益生菌制剂可以有效改善断

奶仔猪的生长性能、肠道健康和对营养物质的消化吸收

情况。益生菌改善仔猪生长性能及肠道健康与其可以抑

制肠道中有害菌群的生长繁殖有关,益生菌制剂通过提

高动物肠道中的有益菌数量,改善肠道健康,促进机体

对养分的消化与吸收,进而改善仔猪生长性能[14,15]。

4 结论

本试验结果表明,在断奶仔猪饲料中添加适量的复

合益生菌制剂可以有效提高仔猪的平均日增重,显著降

低料重比及仔猪腹泻率,综合各项指标数据结果,断奶

仔猪生产中应用 0.2%和 0.3%的复合益生菌效果较好,

其中添加 0.3%的复合益生菌效果更佳。

参考文献

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生化指标及免疫器官指数的影响[J]. 饲料研究, 2022, 45(24):37-41.

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[9] 崔玉革, 李玉青. 复合益生菌与黄芪多糖对断奶仔猪生长性

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[10] 秦胜容. 复合益生菌对仔猪生长性能、血清生化指标及经济

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[11] 陈亚强, 彭津津. 复合益生菌剂对仔猪生长性能、血清免疫

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[13] 李永峰, 李锋. 复合益生菌对断奶仔猪生长性能、血清生化

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饲养饲料 Husbandry and Forage

52

第59页

China Swine Industry

2023 年 第 6 期

DOI:10.16174/j.issn.1673-4645.2023.06.010

收稿日期:2023-06-15

作者简介:宋凤香 (1973-),女,汉族,硕士,正高级兽医师,研究方向为动物疫病检测与预防

* 通信作者:吕延飞 (1983-),男,汉族,高级畜牧师,研究方向为健康养殖技术研究与推广

一种包衣丁酸钠的制备及对断奶仔猪

生产性能的影响

宋凤香 1 吕延飞 1* 宋开山 2 刘 洋 1 张 敏 1 肖建森 3

1德州市畜牧兽医事业发展中心袁 山东德州 253109曰

2陵城区农业农村局袁 山东德州 253052曰

3山东德州神牛药业有限

公司袁 山东德州 253035冤

摘 要院 为探索不同类型丁酸钠对仔猪生产性能的影响袁 本试验对丁酸钠进行包衣工艺处理袁 选用 90 头 28 日龄的仔猪袁

随机分成3 组袁 A 组饲喂基础日粮 渊对照组冤袁 B 组饲喂 野0.2%普通丁酸钠垣基础日粮冶袁 C组饲喂 野0.25%包衣丁酸钠垣基础

日粮冶遥 试验周期为 21 d袁 测定各试验组仔猪的日采食量尧 日增重及腹泻情况遥 试验结果显示袁 与 A 组相比袁 B 组和 C 组的

平均日采食量尧 平均日增重都显著提高 渊 约0.05冤袁 腹泻率及腹泻指数显著降低 渊 约0.05冤曰 添加包衣丁酸钠的C 组与添加

普通丁酸钠的 B组之间相比袁 平均日采食量尧 平均日增重都显著提高 渊 约0.05冤袁 腹泻率及腹泻指数显著降低 渊 约0.05冤遥

结果表明袁 对丁酸钠进行包衣处理能显著提高断奶仔猪生产性能尧 促进生长尧 减少仔猪腹泻的发生遥

关键词院 断奶仔猪曰 包衣丁酸钠曰 生产性能

中图分类号院 S828.2 文献标识码院 A 文章编号院 1673-4645(2023)06-0053-04

开放科学渊资源服务冤标识码渊OSID冤袁扫一扫袁了解文章更多内容

Preparation of a Coated Sodium Butyrate and Its Effect on Production Performance

of Weaned Piglets

SONG Fengxiang1

, LV Yanfei1*

, SONG Kaishan2

, LIU Yang1

, ZHANG Min1

, XIAO Jiansen3

(

1Dezhou Animal Husbandry and Veterinary Affairs Development Center, Dezhou 253015, China; 2Lingcheng District Agriculture and Rural Bureau, Dezhou 253052, China; 3Shandong Dezhou Shenniu Pharmaceutical Co., Ltd, Dezhou 253035, China)

Abstract: In order to explore the effects of different types of sodium butyrate on the production performance of piglets, this experiment

was conducted to treat sodium butyrate with coating process, 90 piglets of 28 d were selected and randomly divided into 3 groups,

Group A was fed with basal diet (control group), Group B was fed with \"0.2% normal sodium butyrate+basal diet\", and Group C was fed

with \"0.25% coated sodium butyrate+basal diet\". The test period was 21 d. The daily feed intake, daily weight gain and occurrence of

diarrhea of piglets in each test group were determined. The results showed that compared with Group A, the average daily feed intake,

Husbandry and Forage 饲养饲料

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第60页

China Swine Industry

2023 年 第 6 期

近年来,我国养猪产业正面临着饲料成本不断上

涨,疫病防控难度增大,环保政策日趋严格,猪周期异

常波动等诸多严峻问题,在养殖环节如何更好地降本增

效成为当前养殖企业面临的现实难题[1]。仔猪早期断奶

作为提高母猪繁殖效率、降低生产成本的关键技术在规

模化猪场被广泛推广。仔猪早期断奶一般在 21~25 日

龄,由于仔猪各器官发育尚不成熟,机体机能不完善,

还无法完全适应外部环境,对饲料的消化吸收能力有

限,加上环境不确定性和病原微生物等诸多因素影响,

极易引起仔猪产生以腹泻为主要特征的应激反应,如果

不给予有效治疗,会给养猪企业带来巨大损失[2]。为防

治仔猪腹泻,早期通常会在饲料中添加抗生素,虽然能

够减少断奶仔猪的死亡率,但是容易产生耐药菌株、药

物残留、资源浪费和环境污染等负面效应。随着我国全

面禁止在饲料中添加抗生素政策的实行,虽然在饲料中

添加高剂量氧化铜和氧化锌对断奶仔猪腹泻防治有较好

的疗效,但也存在慢性中毒、营养元素缺乏、阻碍仔猪

生长发育、污染环境等问题[3,4]。因此,研发替抗产品已

成为当前饲料业的重点领域。丁酸、丙酸等短链脂肪酸

及其钠盐可调节畜禽肠道微生态环境,促进益生菌群增

殖和肠道细胞生长,提高肠道抗菌、抗病毒的屏障功

能,减少腹泻发生,提高畜禽生产性能。丁酸钠,又名

正 丁 酸 钠 盐 (sodium butyrate, NaB), 分 子 式 为

C4H7O2Na,分子质量为 110.09,产品呈白色至类白色,

为可吸湿性的粉末,似绒毛状,水溶液 pH 值呈碱性,

是一种绿色、安全的新型饲料添加剂,被列入国家 《添

加剂品种目录》,其能够改善肠道机能,起到替代或部

分替代抗生素治疗仔猪腹泻的作用[5,6]。但普通丁酸钠具

有特殊的奶酪酸臭味,同时容易吸湿潮解或结块,储存

运输便利性差;此外,普通丁酸钠入口之后,由于胃酸

的分解作用,绝大部分被胃酸中和吸收,难以抵达盲肠

和结肠。因此,探索制备一种新型包衣丁酸钠,成为提

高治疗效果的一种有效手段。本研究在制备包衣丁酸钠

基础上,进行仔猪饲喂对比试验,以期为开发新型饲料

添加剂治疗仔猪腹泻提供思路。

1 包衣丁酸钠的制备

1.1 试验材料

丁酸钠:含量 99%以上 (济南安姆生物技术有限公

司);极度硬化油:含量 99%以上 (青岛盛盈创新材料

有限公司);聚丙烯酸树脂、柠檬酸三乙酯、滑石粉均购

买自安徽山河药用辅料股份有限公司。

1.2 制备方法

1.2.1 丸芯制备

将极度硬化油和丁酸钠按照 7∶3 的比例加罐内加热,

搅拌分散均匀,控温不超过 95℃,选用直径为 0.8 mm 的

离心喷雾冷凝制丸机制得微丸,备用。

1.2.2 聚丙烯酸树脂乳胶液配制

取适量纯净水,加入 1∶1 滑石粉,搅拌分散均匀

后,再加入适量柠檬酸三乙酯,边搅拌边倒入乳胶液水

分散体中,过 100 目尼龙网,备用。

1.2.3 包衣丸芯

设置流化床进风温度为 35~40℃,引风频率为

30~40 Hz,将新配制的乳胶液通过底喷方式包衣于丸

芯上,包衣过程中,严控丸芯温度不高于 40℃,制得样

品。

average daily weight gain, diarrhea rate and diarrhea index of Group B and Group C were significantly higher ( <0.05) , and the average daily feed intake, average daily weight gain, diarrhea rate and diarrhea index of Group C, and the average daily feed intake, average daily weight gain, diarrhea rate and diarrhea index of Group C supplemented with sodium coated butyrate and Group B supplemented with sodium butyrate were significantly higher ( <0.05) , supplemented with sodium coated butyrate and Group B supplemented

with sodium butyrate were significantly higher ( <0.05) , and diarrhea rate and diarrhea index of Group C and Group B supplemented

with sodium butyrate were significantly lower ( <0.05) . The results showed that the coating treatment of sodium butyrate could significantly improve the production performance of weaned piglets, promote growth, and reduce the occurrence of piglet diarrhea.

Key words: weaned piglets; coated sodium butyrate; production performance

饲养饲料 Husbandry and Forage

54

第61页

China Swine Industry

2023 年 第 6 期

2 仔猪饲喂试验

2.1 试验材料

包衣丁酸钠,普通丁酸钠。

2.2 试验动物

28 日龄断奶仔猪 90 头,按照窝别和体重相近的原

则随机分为 A 组、B 组、C 组,每组设 3 个重复,每个

重复 10 头。A 组为空白对照组,饲喂基础日粮;B 组饲

喂添加普通丁酸钠 (0.2%) 的基础日粮;C 组饲喂添加

包衣丁酸钠 (0.25%) 的基础日粮。试验期为 21 d。

2.3 饲喂管理

试验日粮采用玉米-豆粕型基础日粮,基础日粮成

分:玉米 43.5%、高粱 10%、麦麸 5.3%、豆粕 20.5%、

鱼粉 7.2%、乳清粉 10%、酵母粉 1.5%、食盐 0.4%、

赖氨酸盐 0.1%、碳酸钙 0.2%、预混料 1.3%。其营养水

平:消化能 34.5 MJ/kg、粗蛋白 22%、粗纤维 2.5%、

钙 0.79%、有 效 磷 0.62%、赖 氨 酸 1.34%、蛋 氨 酸

0.7%。试验在同一栋保育舍内进行,试验前全面消毒清

洗,试验期间保持良好的通风、适宜的温度和湿度,猪

只自由采食饮水,免疫程序按照场内规定进行。

2.4 生产性能测定

试验开始时测定空腹初重,试验结束时测定空腹末

重,记录试验期间每天饲料消耗量,计算每组仔猪平均

日增重、料重比。

2.5 腹泻评估

每天定时观察仔猪腹泻情况,准确记录每个重复中

仔猪腹泻头数及天数。根据粪便评分法,统计腹泻指

数,计算腹泻率。粪便评价采用 5 分法:条形、粒状硬

粪 (1 分);均匀黏性成形粪便 (2 分);软、半成形粪

便 (3 分);半液状、糨糊状粪便 (4 分);水样粪便

(5 分)。其中粪便得分 4~5 分者视为腹泻。

腹泻指数=粪便评分之和÷供试猪总头数 (该指数

越高,表示腹泻越严重)

腹泻率 (%) =总腹泻次数÷ (总头数×试验天数)

×100%

2.6 数据统计分析

用 SPSS 15 统计软件进行单因子方差分析和 Duncan's 法多重比较,结果以“平均值±标准差”表示,

<0.05 表示差异显著。

3 结果与分析

3.1 包衣丁酸钠对仔猪生长指标的影响

从表 1 可知,在平均日采食量、平均日增重指标

上,添加普通丁酸钠的 B 组和添加包衣丁酸钠的 C 组显

著高于 A 组 ( <0.05),并且 C 组与 B 组差异显著

( <0.05)。料重比指标上,A 组、B 组、C 组差异不显

著,但呈逐渐降低趋势。

3.2 包衣丁酸钠对仔猪腹泻指标的影响

从表 2 可知,与饲喂基础日粮的对照组相比,添加

普通丁酸钠的 B 组和包衣丁酸钠的 C 组腹泻率和腹泻指

数显著低于对照组 ( <0.05),并且 C 组显著低于 B 组

( <0.05)。

4 讨论

仔猪早期断奶技术目前已成为提高母猪生产性能的

重要手段,断奶时间一般在仔猪 3 周左右,正是仔猪消

化系统和免疫系统发育比较脆弱的阶段,容易引起仔猪

表 1 试验仔猪生产性能

组别 平均日采食量/g 平均日增重/g 料重比

A 组 543.86a±5.15 378.23a±3.81 1.44±0.02

B 组 556.42b±6.79 389.56b±4.23 1.42±0.03

C 组 578.73c±7.38 413.52c±4.97 1.39±0.05

注:同列数据肩标不同字母表示差异显著 ( <0.05),肩标字母相

同或无字母表示差异不显著 ( >0.05),下同。

表 2 断奶仔猪腹泻情况

组别 腹泻率/% 腹泻指数

A 组 5.28a±0.21 2.11a±0.14

B 组 2.67b±0.19 1.52b±0.17

C 组 2.31c±0.23 1.35c±0.22

Husbandry and Forage 饲养饲料

55

第62页

China Swine Industry

2023 年 第 6 期

较强的应激反应,对饲料消化率低,肠道免疫力差,易

引起腹泻频发、食欲不振、饲料报酬低、发育迟缓等症

状[7]。传统诊治方法以抗生素治疗为主,但随着国家对

养殖用抗生素的要求越来越严格,饲料无抗、养殖减抗

已成为必然,需要研发新型替抗产品治疗仔猪腹泻。

丁酸钠在机体内可分解为丁酸根 (C4H7O2

-) 和钠离

子 (Na+),其有效成分之一是丁酸,一种挥发性短链脂

肪酸[8]。有研究表明,在断奶仔猪日粮中添加丁酸、丙

酸和醋酸,结果显示,肠道中丁酸先于丙酸和醋酸被消

耗,通过在肠腔内氧化吸收可快速为肠道上皮细胞提供

能量来源[9];通过饲喂仔猪添加丁酸钠的奶粉,仔猪在

日增重及血浆胰多肽和胆囊收缩素浓度上显著高于使用

不加丁酸钠奶粉饲喂的仔猪[10]。在断奶仔猪日粮中添加

0.1%的丁酸钠可显著提高仔猪的平均日采食量、平均日

增重及末重,并促进免疫器官发育[11]。通过在饲料中添

加 1 000 g/t 和 1 500 g/t 包被丁酸钠,可显著提高断奶仔

猪末重和平均日增重,并显著降低断奶仔猪料重比[12,13]。

本研究表明,与饲喂基础日粮的 A 组相比,添加普通丁

酸钠及包衣丁酸钠的 B 组及 C 组仔猪在平均日增重上均

显著高于 A 组,且料肉比依次降低。丁酸钠可以改善胃

肠道酸环境,增强肠道内微生物菌群优势,促进诸如粪

链球菌、乳酸菌等益生菌群的快速增殖,改善有益菌群

生长环境,进而抑制大肠杆菌、产气荚膜梭菌、沙门氏

菌等有害菌的增殖,从而降低断奶仔猪的腹泻率。丁酸

钠的添加能促进仔猪生长性能并降低腹泻率,本试验中,

添加不同类型的丁酸钠对降低断奶仔猪腹泻率及腹泻指

数均有显著效果,这与 Leeson 等[14]研究结果一致,说明

丁酸钠在提高仔猪生产性能、降低腹泻率方面效果明显。

5 结论

综上所述,对断奶仔猪饲喂添加丁酸钠的饲料,能显

著提高仔猪平均日产采食量和平均日增重,降低腹泻率及

腹泻指数,将丁酸钠进行包衣处理较普通丁酸钠能显著提

高断奶仔猪生产性能,促进仔猪生长,减少腹泻的发生。

参考文献

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饲养饲料 Husbandry and Forage

56

第63页

China Swine Industry

2023 年 第 6 期

DOI:10.16174/j.issn.1673-4645.2023.06.011

收稿日期:2023-03-03

作者简介:刘嫄 (1986-),女,本科,中级畜牧兽医师,研究方向为畜牧兽医

木聚糖酶对育肥猪养分表观消化率的影响

刘 嫄 1 朱在明 1 刘繁华 2 葛玉双 1 郑 鹏 1 张治斌 1

1江苏省淮安市淮安区苏嘴畜牧兽医服务站袁 江苏淮安 223235曰

2江苏省淮安市淮安区动物卫生监督所袁 江苏淮安 223200冤

摘 要院 本试验旨在研究不同水平的木聚糖酶对生长育肥猪养分表观消化率的影响袁 探讨木聚糖酶在生长育肥猪生产中的最

适添加水平遥 试验选择 200 头体重约 50 kg 的健康 野杜伊长伊大冶 杂交育肥猪袁 按照单因素试验设计袁 均分为 4 个处理组袁

每组 5 个重复袁 每个重复 10 头生长育肥猪遥 各组生长育肥猪分别饲喂含有 0 渊对照组冤尧 0.025% 渊A 组冤尧 0.05% 渊B 组冤

和 0.1% 渊C组冤 木聚糖酶的试验日粮遥 饲喂 60 d 后袁 测定各组生长育肥猪机体对日粮中养分的消化率遥 结果表明袁 与对照

组相比袁 B 组和 C 组生长育肥猪的粗脂肪表观消化率分别显著提高了 5.08%尧 6.41% 渊 约0.05冤曰 钙的表观消化率分别显

著提高了7.15%尧 7.35% 渊 约0.05冤曰 磷的表观消化率分别显著提高了 17.25%尧 19.84% 渊 约0.05冤曰 粗纤维的表观消化

率分别显著提高了 19.36%尧 24.82% 渊 约0.05冤曰 总能的表观消化率分别显著提高了 6.07%尧 5.49% 渊 约0.05冤遥 因此袁

在生长育肥猪生产中使用 0.05%和0.1%的木聚糖酶可以提高饲料中养分的表观消化率遥

关键词院 育肥猪曰 木聚糖酶曰 养分曰 表观消化率

中图分类号院 S828 文献标识码院 A 文章编号院 1673-4645(2023)06-0057-03

开放科学渊资源服务冤标识码渊OSID冤袁扫一扫袁了解文章更多内容

玉米一直以来是饲料中主要能量原料之一,营养价

值较高,但玉米中含有大量的非淀粉多糖 (纤维素、木

聚糖、茁- 葡聚糖等),动物采食后会导致消化道内食糜

黏度提高,进而影响动物机体对其他营养物质的消化吸

收,也使玉米的使用价值受到一些限制[1-4]。因此,如何

降低玉米中非淀粉多糖含量,对提高玉米的利用价值具

有重要意义。相关研究发现,木聚糖酶可以水解木聚糖

的 茁-1,4- 糖苷键结构,进而提高机体对饲料中养分的

利用率,从而改善动物的生长性能及营养物质表观消化

率等指标[5-7]。周力等[8]研究发现,在羔羊生产中使用

0.2%的木聚糖酶可以改善肉品质,提高瘤胃内菌群丰富

度,但对羔羊的生长性能影响较小。孟翠红等[9]研究表

明,在肉鸡养殖中使用 0.3 g/kg 的木聚糖酶可以提高肠

道中乳酸菌数量,降低大肠杆菌数量,改善肠道健康,

促进肉鸡的生长,提高屠宰性能。韩林[10]在荷斯坦公牛

生产中使用木聚糖酶,发现可以改善牛的生长性能及瘤

胃发酵功能[10]。但目前,木聚糖酶在育肥猪生产中的应

用研究结果比较少见,尤其是在养分表观消化率方面的

研究更少。因此,本试验以“杜×长×大”三元杂交育

肥猪为研究对象,探究不同水平的木聚糖酶对机体养分

表观消化率的影响,为木聚糖酶在生长育肥猪生产中的

应用提供数据支撑。

1 试验材料与方法

1.1 木聚糖酶

本试验中使用的木聚糖酶为黑曲霉木聚糖酶,其有

效酶活为 4 800 IU/g,购买于济南百斯杰生物工程有限

Husbandry and Forage 饲养饲料

57

第64页

China Swine Industry

2023 年 第 6 期

公司。

1.2 试验设计

试验选择 200 头体重约为 50 kg 的健康“杜×长×

大”杂交育肥猪,按照单因素试验设计,均分为 4 个处

理组,每组 5 个重复,每个重复 10 头育肥猪。各组生

长育肥猪分别饲喂基础日粮 (对照组)、基础日粮+

0.025%木聚糖酶 (A 组)、基础日粮+0.05%木聚糖酶

(B 组) 和基础日粮+0.1%木聚糖酶 (C 组)。饲喂 60 d

后,测定各组生长育肥猪机体对日粮中养分的消化率。

生长育肥猪的基础日粮配方及营养成分见表 1。

1.3 生长育肥猪的日常养殖管理

试验开始前,对猪舍和养殖设备清洗、消毒。生长

育肥猪统一驱虫处理,各组生长育肥猪分别饲喂对应的

试验日粮,猪只自由采食、饮水。免疫程序按照养殖场

日常管理进行。试验生长育肥猪由专人饲养管理,每日

仔细观察猪只的健康状态。

1.4 养分表观消化率的测定

试验结束前 3 d,每日从每个重复中采集粪便约

120 g,使用 10%的硫酸固氮,参照 《饲料分析及饲料

质量检测技术》 [11]测定干物质 (DM)、总能 (GE)、粗

蛋白质 (CP)、粗脂肪 (EE)、粗灰分 (Ash)、粗纤维

(CF)、总钙 (Ca)、总磷 (P) 的养分表观消化率,计算

公式如下:

Dd=100%-[(Id×Af)/(If×Ad)]×100%

式中:Id 为饲料中铬含量 (%);If 为粪中铬含量

(%);Ad 为饲料中该养分含量 (%);Af 为粪中该养分含

量 (%)。

1.5 数据分析

各组生长育肥猪的养分表观消化率数据采用 SPSS

26.0 进行显著性分析, <0.05 表示数据具有显著性差

异,结果用“平均值±标准误”呈现。

2 试验结果与分析

不同水平的木聚糖酶对生长育肥猪养分表观消化率

的影响见表 2。由表 2 可知,与对照组相比,B 组和 C

组生长育肥猪的粗脂肪表观消化率分别显著提高了

表1 生长育肥猪的基础日粮组成及营养成分表

原料组成 含量/% 营养成分② 含量/%

玉米 62.75 消化能/(MJ/kg) 13.76

豆粕 20 粗蛋白/% 18.05

DDGS 4.5 钙/% 0.73

麸皮 8 总磷/% 0.68

石粉 0.77 有效磷/% 0.39

磷酸氢钙 1.23

赖氨酸 0.32

色氨酸 0.08

食盐 0.35

预混料①

2

合计 100

注:①预混料为每千克全价饲料提供:维生素 A 13 000 IU,维生素

B1 4.5 mg,维生素 B2 10 mg,维生素 B6 5 mg,维生素 B12 0.08 mg,

维生素 D3 3 200 IU,维生素 E 30 IU,维生素 K3 6 mg,D- 生物素

0.3 mg,叶酸 3 mg,D- 泛酸 28 mg,烟酰胺 60 mg,铁 75 mg,

铜 8 mg,锌 80 mg,锰 3 mg,碘 0.2 mg,硒 0.3 mg;②营养成

分含量为计算值。

表3 不同剂量的益生菌制剂对仔猪血清免疫指标的影响 表 2 不同水平的木聚糖酶对生长育肥猪养分表观消化率的影响

组别 干物质 粗蛋白 粗脂肪 粗灰分 钙 磷 总能 粗纤维

对照组 80.45 78.54 75.65 68.96 81.65 47.53 80.54 40.65

A 组 81.53 79.52 77.52 69.43 84.31 50.42 81.88 43.77

B 组 82.07 80.66 79.49*

70.05 87.49*

55.73*

85.43*

48.52*

C 组 81.88 80.64 80.50*

70.32 87.65*

56.96*

84.96*

50.74*

总标准误 3.08 4.17 3.08 4.12 5.30 2.07 5.08 1.07

P 值 0.751 0.649 0.038 0.697 0.034 0.027 0.044 0.031

注:同列数据被标注“*”表示与对照组相比差异显著 ( <0.05),无标注表示差异不显著 ( >0.05)。

饲养饲料 Husbandry and Forage

渊%冤

58

第65页

China Swine Industry

2023 年 第 6 期

5.08%、6.41% ( <0.05);钙的表观消化率分别显著

提高了 7.15%、7.35% ( <0.05);磷的表观消化率分

别显著提高了 17.25%、19.84% ( <0.05);粗纤维的

表观消化率分别显著提高了 19.36%、24.82% ( <

0.05);总能 的表观消化 率分别显 著提高了 6.07%、

5.49% ( <0.05)。

3 讨论

金俊奇等[12]在育肥猪生产中使用 0.04%的木聚糖酶,

发现可以有效提高猪只机体对钙、粗脂肪、磷及总能的

表观消化率。黄志毅等[13]研究发现,在小麦型日粮中添

加 4 U/g 的木聚糖酶可以提高肉鸡对粗蛋白的消化率。

姜文联等[14]研究表明,在肉鸡日粮中添加植酸酶和木聚

糖酶可以提高 15 种氨基酸的回肠表观消化率。本试验

得出适量的木聚糖酶可以提高生长育肥猪机体对钙、

磷、粗脂肪等营养物质的消化吸收率,主要是由于木聚

糖酶可以将饲料原料玉米中的木聚糖降解为小分子寡

糖,通过降低肠道中食糜的黏度,改善消化酶与养分的

接触面积,进而促进机体对饲料中养分的消化与吸收。

4 结论

综上所述,在生长育肥猪生产中使用 0.05%和

0.1%的木聚糖酶可以显著提高机体对饲料中粗脂肪、

钙、磷、粗纤维及总能的消化率。

参考文献

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Husbandry and Forage 饲养饲料

59

第66页

China Swine Industry

2023 年 第 6 期

DOI:10.16174/j.issn.1673-4645.2023.06.012

收稿日期:2022-12-16

作者简介:张俊艳 (1982-),女,汉族,本科,中级兽医师,研究方向为动物饲料

酌-氨基丁酸对断奶仔猪机体

抗氧化功能的影响

张俊艳

渊临沂经济技术开发区智能制造产业服务中心办公室袁 山东临沂 276000冤

摘 要院 本研究旨在探讨在饲粮中添加不同剂量的 酌-氨基丁酸对断奶仔猪机体抗氧化性能的影响袁 并确定 酌-氨基丁酸在断

奶仔猪生产中的最适添加水平遥 试验选择60 头28日龄尧 体重约为 7.2 kg的断奶仔猪袁 按照单因素试验设计袁 随机分成 4

组袁 每组仔猪 15 头遥 各组仔猪分别饲喂含有 0 渊对照组冤尧 25尧 50尧 75 mg/kg 的 酌-氨基丁酸的试验饲料袁 试验期 30 d遥

试验结束时袁 采集各组断奶仔猪血液袁 检测血清抗氧化指标遥 结果表明袁 与对照组相比袁 在断奶仔猪饲料中添加 50 mg/kg

和 75 mg/kg 的 酌-氨基丁酸可以使血清中总抗氧化能力分别提高 40.3%尧 43.28% 渊 约0.05冤曰 使血清中的谷胱甘肽过

氧化物酶活性分别提高 12.89%尧 15.48% 渊 约0.05冤曰 使血清中的超氧化物歧化酶活性分别提高了 6.46%尧 10.08%

渊 约0.05冤遥 研究表明袁 在断奶仔猪生产中使用 50 mg/kg 和 75 mg/kg 的 酌-氨基丁酸可以显著提高仔猪血清抗氧化功能袁

改善机体健康状态遥

关键词院 断奶仔猪曰 酌-氨基丁酸曰 抗氧化

中图分类号院 S828 文献标识码院 A 文章编号院 1673-4645(2023)06-0060-03

开放科学渊资源服务冤标识码渊OSID冤袁扫一扫袁了解文章更多内容

仔猪在断奶阶段产生的断奶应激不仅会导致仔猪的

生长受阻、成活率下降、健康状态降低,甚至会导致仔

猪死亡,严重影响养殖场的经济效益。仔猪断奶产生的

应激包括免疫应激、氧化应激等[1]。如何改善断奶导致

的应激是目前仔猪养殖阶段面临的主要问题。缓解仔猪

断奶应激要从养殖管理、遗传、营养等方面入手,其中从

营养方面调节断奶应激是一种比较可行、常用的办法[2]。

目前,已有研究在仔猪养殖生产中添加益生菌、维生

素、氨基酸、中草药等添加剂来缓解断奶应激[3-6]。酌氨基丁酸是一种非蛋白氨基酸类型的神经递质,主要作

用包括止痛、镇静、抗焦虑、降血压等[7,8]。研究发现,

酌- 氨基丁酸可以提高猪的平均日采食量、增加体重、改

善肉品质、缓解热应激,同时还可以提高母猪的繁殖性

能[9]。温静等[10]在产生热应激的雏鸡中使用适量的 酌- 氨

基丁酸,缓解了热应激对雏鸡胰腺的损伤,提高了机体

的抗氧化性能,增强了胰腺中消化酶的活性。彭思博

等[11]在乌鳢养殖中添加 88.54~102.73 mg/kg 的 酌- 氨

基丁酸,发现可以有效提高乌鳢的抗氧化性能及消化酶

活性,进而提高乌鳢的生长性能。目前,酌- 氨基丁酸在

仔猪养殖生产中的应用研究比较少见,尤其是在抗氧化

方面的研究。因此,本研究探讨在饲粮中添加不同剂量

的 酌- 氨基丁酸对仔猪机体抗氧化功能的影响,确定 酌氨基丁酸在仔猪生产中的最适添加量,为 γ- 氨基丁酸

在仔猪生产中的高效利用提供理论数据参考。

饲养饲料 Husbandry and Forage

60

第67页

China Swine Industry

2023 年 第 6 期

1 试验材料和试验方法

1.1 试验动物

本研究选择 28 日龄断奶的健康仔猪 60 头,体重约

7.2 kg,购自当地养殖场。

1.2 试验设计

60 头断奶仔猪,按照单因素试验设计,分成 4 个

组,每组 15 头仔猪。各组仔猪分别饲喂基础饲料 (对

照组)、基础饲料+25 mg/kg 酌- 氨基丁酸 (25 mg/kg

组)、基础饲料+50 mg/kg 酌- 氨基丁酸 (50 mg/kg

组)、基础饲料+75 mg/kg 酌- 氨基丁酸 (75 mg/kg 组)

的试验饲料,试验期 30 d。试验结束,采集各组仔猪血

液,检测血清中的抗氧化指标。试验仔猪的基础饲料配

方见表 1。

1.3 仔猪日常养殖管理

试验开始前,对养殖猪舍进行清洗、消毒。养殖过

程中,保持养殖舍的温度、湿度、通风等条件适宜。试

验期间仔猪自由采食,不间断供水。试验开始前,仔猪

统一驱虫,试验期间的免疫程序按照日常养殖管理进

行。养殖人员每日仔细观察仔猪的健康状态,发现问题

及时处理。

1.4 仔猪血清抗氧化指标的检测

试验最后 1 d 晨饲前,采集各组仔猪的血液样品

8~10 mL,使用离心机离心,收集上层血清于 EP 管中,

-20℃保存。主要检测血清中的总抗氧化能力、超氧化

物歧化酶、丙二醛等抗氧化指标。参考试剂盒说明书进

行操作,试剂盒由北京百奥莱博科技有限公司提供。

2 试验结果与分析

由表 2 可知,与对照组比较,仔猪饲料中添加 50

mg/kg 和 75 mg/kg 的 酌- 氨基丁酸可以使血清中总抗氧

化能力分别提高 40.30%、43.28% ( <0.05);使血清

中 的 谷 胱 甘 肽 过 氧 化 物 酶 活 性 分 别 提 高 12.89% 、

15.48% ( <0.05);使血清中的超氧化物歧化酶活性分

别提高了 6.46%、10.08% ( <0.05)。而饲粮中添加

酌- 氨基丁酸对仔猪血清中丙二醛含量及过氧化氢酶活性

未产生显著影响。研究表明,在仔猪生产中添加 50

表 1 试验仔猪基础饲料组成及营养成分含量

注:①预混料为每千克日粮提供:维生素 A 8 700 IU,维生素 D3

3 200 IU,维生素 E 27 IU,维生素 K3 4.8 mg;铜 36 mg,铁 90 mg,

锰 28 mg,锌 95 mg,碘 0.16 mg,硒 0.28 mg;②营养成分含量

为计算值。

日粮组成 含量/% 营养成分② 含量

玉米 68.12 消化能/(MJ/kg) 14.31

豆粕 18.00 粗蛋白/% 18.13

鱼粉 2.00 钙/% 0.81

麸皮 6.50 总磷/% 0.68

豆油 1.30

食盐 0.28

DL-蛋氨酸 0.25

L-赖氨酸 0.32

磷酸氢钙 1.28

石粉 0.75

预混料①

1.20

合计 100.00

表表2 3不同剂量的 不同剂量的益生菌制剂对仔猪血清免疫指标的影响 酌-氨基丁酸对仔猪血清抗氧化指标的影响

指标 对照组 25 mg/kg 组 50 mg/kg 组 75 mg/kg 组 总标准误 P 值

丙二醛/(nmol/mL) 3.21 3.17 3.12 3.03 0.21 0.519

总抗氧化能力/(U/mL) 1.34 1.50 1.88*

1.92*

0.12 0.039

谷胱甘肽过氧化物酶/(U/mL) 410.32 442.10 463.19*

473.83*

13.04 0.031

过氧化氢酶/(U/mL) 3.14 3.32 3.50 3.63 0.19 0.107

超氧化物歧化酶/(U/mL) 86.80 89.42 92.41*

95.55*

4.86 0.028

注:同行数据肩标“*”表示与对照组相比差异显著 ( <0.05),无标注表示差异不显著 ( >0.05)。

Husbandry and Forage 饲养饲料

61

第68页

China Swine Industry

2023 年 第 6 期

mg/kg 和 75 mg/kg 的 酌- 氨基丁酸可以提高机体的抗氧

化性能。

3 讨论

酌- 氨基丁酸可以调节动物机体的内分泌、缓解应

激、提高采食量、调节机体生理机能等[12-14]。本试验中,

在断奶仔猪饲料中添加 50 mg/kg 和 75 mg/kg 的 酌- 氨

基丁酸可以显著提高血清中总抗氧化能力、谷胱甘肽过

氧化物酶和超氧化物歧化酶活性,表明适量的 酌- 氨基

丁酸可有效提高仔猪机体的抗氧化性能。胡家澄等[15]研

究发现,在生长育肥猪饲料中添加 10、20 和 40 mg/kg

的 酌- 氨基丁酸可以显著提高育肥猪的生长性能,10

mg/kg 的 酌- 氨基丁酸可以提高育肥猪机体的抗氧化能

力。杨兵等[16]研究表明,在断奶仔猪养殖中使用 60

mg/kg 的 酌- 氨基丁酸,可以有效提高断奶仔猪的养分

表观消化率,增强机体的免疫力及抗氧化能力。仔猪断

奶阶段产生氧化应激、免疫应激,导致机体免疫力下

降,影响仔猪的生长性能及机体健康,而 酌- 氨基丁酸

具有缓解应激的作用,动物采食适量的 酌- 氨基丁酸可

以调节机体的生理代谢、免疫力、抗氧化能力,增强机

体的抗应激能力,进而改善机体健康状态。

4 结论

本研究中,在仔猪饲料中添加 50 mg/kg 和 75

mg/kg 的 酌- 氨基丁酸可以有效增强仔猪血清中总抗氧

化能力、谷胱甘肽过氧化物酶及超氧化物歧化酶活性,

提高了仔猪机体的抗氧化能力。

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饲养饲料 Husbandry and Forage

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2023 年 第 6 期

DOI:10.16174/j.issn.1673-4645.2023.06.013

杂交山猪饲料中添加甜菜碱和半胱胺

分别对背膘厚和血清生化指标的影响

蔡东森 徐伟风 陈海军 周小钰 李开军 伍冠锁

渊南京市畜牧家禽科学研究所袁 江苏南京 210036冤

摘 要院 本试验选取体重相近的杂交育肥山猪45头袁 随机分成3 个处理组袁 每组3 个重复袁 每个重复5头猪袁 试验期45 d遥

对照组山猪饲喂基础饲料袁 甜菜碱组饲喂 野基础饲料垣1 250 mg/kg 甜菜碱盐酸盐冶袁 半胱胺组饲喂 野基础饲料垣200 mg/kg

半胱胺盐酸盐冶袁 旨在研究饲料中分别添加甜菜碱和半胱胺对杂交山猪背膘厚和血清生化指标的影响遥 结果表明袁 添加甜

菜碱和半胱胺后袁 试验组育肥猪背膘厚与对照组相比显著降低 渊 约0.05冤曰 试验各组育肥猪之间的血清总蛋白尧 总胆固醇尧

高密度脂蛋白胆固醇含量和脂肪酶活性均无显著差异 渊 跃0.05冤曰 甜菜碱组尿素氮含量显著高于对照组和半胱胺组

渊 约0.05冤曰 甜菜碱组育肥猪的白蛋白含量显著高于半胱胺组 渊 约0.05冤曰 甜菜碱组和半胱胺组甘油三酯含量显著低于对照

组 渊 约0.05冤遥 综上所述袁 饲料中添加甜菜碱及半胱胺改善了猪的背膘厚和血清生化指标袁 有助于提高杂交山猪的蛋白质与

脂肪代谢遥

关键词院 杂交山猪曰 甜菜碱曰 半胱胺曰 背膘曰 血清生化指标

中图分类号院 S828曰S816.4 文献标识码院 A 文章编号院 1673-4645(2023)06-0063-04

开放科学渊资源服务冤标识码渊OSID冤袁扫一扫袁了解文章更多内容

甜菜碱和半胱胺在动植物体内广泛存在,已有研究

发现两者均参与蛋白质及脂肪代谢,可促进蛋白质的合

成和脂肪分解,减少脂肪沉积[1-4]。近年来,随着人们生

活水平的日益提高,对于生猪健康养殖的要求也越来越

高,因此,相关饲料添加剂在生猪养殖中的应用研究就

有了重要意义。

山猪是淮猪中较具特色的优良猪种之一,也是南京

市唯一的地方猪种。此前涉及甜菜碱和半胱胺对杂交育

肥山猪的试验鲜见报道,因而,本次研究通过在饲料中

添加甜菜碱及半胱胺,研究其对杂交山猪背膘厚和血清

生化指标的影响,探索甜菜碱和半胱胺对杂交山猪营养

物质代谢的作用,以期为更好地开展杂交山猪的利用推

广提供理论依据,也为甜菜碱和半胱胺在生猪养殖中的

应用提供参考。

1 试验材料与方法

1.1 试验材料及设计

甜菜碱盐酸盐及半胱胺盐酸盐购自河南卓纽生物科

技有限公司,纯度 98%。

1.2 试验猪及饲养管理

选择初始体重接近、体况正常的杂交育肥山猪 45

头,统一进行标号,随机分成 3 个试验组,试验组各设

收稿日期:2023-04-24

作者简介:蔡东森 (1990-),男,江苏大丰人,硕士,研究方向为畜禽健康养殖与饲料营养

Husbandry and Forage 饲养饲料

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2023 年 第 6 期

置 3 个重复,每个重复含 5 头猪。其中,对照组山猪饲

喂基础饲料 (基础日粮配方及营养成分见表 1),甜菜碱

组饲喂“基础饲料+1 250 mg/kg 甜菜碱盐酸盐”,半胱

胺组饲喂“基础饲料+200 mg/kg 半胱胺盐酸盐”,试验

期 45 d。试验各组猪饲养环境条件与日常生产管理保持

相同,期间实行自由饮水与采食,确保试验栏舍清洁卫

生。试验猪只均按照猪场免疫程序进行,按需实施消毒

等工作。

1.3 样品制作与储备

试验期满,将各组猪只禁食 12 h,前腔静脉采集血

液样 本,3 000 rpm 离 心 10 min,制 得血 清,置于

-20℃冰箱中保存、待测。

1.4 试验指标与测定方法

1.4.1 背膘厚度

采用背膘测定设备 (RENCO corporation, Leanmeter),按照使用要求,测定试验猪只背部 B 点处 (距

中线 4~6 cm 处最后 1 根肋骨) 背膘厚。依据不同猪只

背部测定位置的被毛情况进行修剪,配合使用相关耦合

剂,便于准确测定读数即可。

1.4.2 血清生化指标

血清总蛋白、尿素氮、白蛋白、甘油三酯、总胆固

醇、高密度脂蛋白胆固醇和脂肪酶含量或活性的测定均

使用南京建成生物工程研究所生产的相关试剂盒。

1.5 数据统计及分析

试验数据用 Excel 2016 作初步处理后,使用 SPSS

Statistics 23.0 软件进行 One-Way ANOVA 单因素方差

分析,并采用 Duncan's 多重比较法分析其差异显著性,

结果用“平均值±标准误”表示, <0.05 表示差异

显著。

2 结果与分析

2.1 甜菜碱及半胱胺对杂交育肥山猪背膘厚的影响

由表 2 结果可知,试验前各组育肥猪的背膘厚均无

显著差异 ( >0.05);说明饲料中添加甜菜碱和半胱胺

对育肥猪背膘厚的影响趋势不明显,且差异不显著

( >0.05);但对比试验前后背膘厚变化量,甜菜碱组和

半胱胺组均显著低于对照组 ( <0.05),其中半胱胺组

变化量略低于甜菜碱组,但差异不显著 ( >0.05)。

2.2 甜菜碱及半胱胺对杂交育肥山猪血清生化指

标的影响

由表 3 结果可知,试验各组育肥猪的血清总蛋白、

总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇含量和脂肪酶活性均无

显著差异 ( >0.05),其中甜菜碱组总蛋白和总胆固醇

含量略高于其他各组;脂肪酶活性依次由对照组、甜菜

碱组、半胱胺组观察,呈上升趋势,但差异均不显著

( >0.05);而甜菜碱组尿素氮含量显著高于对照组和

半胱胺组 ( <0.05),半胱胺组与对照组间尿素氮相比

无显著差异 ( >0.05);半胱胺组白蛋白含量显著低于

甜菜碱组 ( <0.05),其余各试验组白蛋白含量差异均

不显著 ( >0.05);甜菜碱组和半胱胺组甘油三酯含量

显著低于对照组 ( <0.05),其中甜菜碱组和半胱胺组

表 1 基础日粮配方及营养成分表

日粮配方 含量/% 营养成分② 含量/%

玉米 64.0 能量(MJ/kg) 14

豆粕 24.0 粗蛋白 19

鱼粉 3.0 粗灰分 9

磷酸钙 1.0 氨基酸 1.6

氨基酸等 7.0 磷 0.6

预混料①

1.0 钙 0.7

合计 100

注:①每千克预混料中含有维生素和矿物质的量:VA 8 005 IU、

VB1 9.7 mg、VB2 2.6 mg、VB6 10.4 mg、VB12 0.09 mg、VD3 121

IU、VE 16 IU、VK3 2.9 mg、烟酸 15.2 mg、叶酸 0.66 mg、生物

素 0.32 mg、铁 84 mg、锌 103 mg、铜 32 mg、锰 34 mg、硒

0.19 mg、碘 0.7 mg;②营养成分中能量是计算值,其余是实测值。

表 2 甜菜碱及半胱胺对杂交山猪背膘厚的影响 渊cm冤

组别

项目

对照组 甜菜碱组 半胱胺组

试验前 20.50±0.50 19.67±1.76 22.00±1.03

试验后 30.33±1.86 30.00±1.73 32.02±1.53

变化量 15.50±1.50a

11.02±1.09b

10.07±1.01b

注:同行数据肩标小写字母相同及无字母表示差异不显著 ( >

0.05),小写字母不同表示差异显著 ( <0.05),下同。

饲养饲料 Husbandry and Forage

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第71页

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2023 年 第 6 期

间无显著差异 ( >0.05)。

3 讨论

3.1 甜菜碱和半胱胺对杂交山猪背膘厚的影响

背膘厚是反映生猪背部脂肪沉积状况的关键依据,

是评价生猪养殖的重要指标之一。背膘过厚,说明机体

所吸收的营养物质更多的被转化为脂肪,而瘦肉和可食

用肉的含量相对降低,不利于生产经济效益[5]。冯杰[6]和

怀明燕[7]研究发现,饲料中添加甜菜碱可以降低育肥猪

的背膘厚。Miller 等[8]、陈丛亮等[9]、陈安国等[10]、周杰

等[11]研究发现在饲料中添加半胱胺显著降低了猪的脂肪

沉积和背膘厚度。本试验结果表明添加甜菜碱和半胱胺

后,试验前后杂交山猪的背膘厚变化与对照组相比显著

下降 ( <0.05),说明甜菜碱和半胱胺明显抑制了体脂

沉积,降低了背膘的增长,这与之前的研究结果相一

致。

3.2 甜菜碱和半胱胺对杂交山猪血清生化指标的

影响

血清中甘油三酯、总胆固醇含量和脂肪酶活性等是

体现动物体内脂肪代谢的重要指标,其中脂肪酶是脂肪

组织中甘油三酯分解的关键酶与限速酶。申超超[12]、张

冬梅等[13]发现,甜菜碱能够降低血清中甘油三酯含量,

提高总胆固醇等含量。张建斌等[14]、Mccarty 等[15]发现

半胱胺也有降低动物体内血清甘油三酯含量的作用。王

敏奇等[16]、汪以真等[17]、王耀东等[18]发现甜菜碱还可提

高育肥猪血清脂肪酶含量。本试验结果表明添加甜菜碱

和半胱胺后,甜菜碱组和半胱胺组育肥猪的甘油三酯含

量显著低于对照组 ( <0.05);试验各组猪血清中总胆

固醇、高密度脂蛋白含量和脂肪酶活性均无显著差异

( >0.05);在对照组、甜菜碱组和半胱胺组中,脂肪酶

活性呈上升趋势,但差异均不显著 ( >0.05)。这与之

前的研究结果基本一致。甘油三酯含量的降低表明甜菜

碱和半胱胺具有一定的护肝功能,原因可能是因其降低

了相关脂肪合成酶的活性,促进了载脂蛋白合成,从而

减少游离甘油三酯的含量[19]。血清中脂肪酶含量提高说

明脂肪在体内的动员能力和脂肪酸的转运能力得到加

强,进而提高脂肪的相关代谢反应[18]。本试验中添加甜

菜碱及半胱胺显著降低了血清中甘油三酯含量,同时也

表现其有提高总胆固醇含量的趋势,说明两者具有调节

体内脂蛋白比例,促进血液输送胆固醇,抑制甘油三酯

合成,并加速其分解的作用[12]。

血清中总蛋白、尿素氮和白蛋白含量等可以体现动

物体内蛋白质的代谢情况。尿素氮是衡量机体蛋白质分

解代谢的指标。总蛋白含量高,说明体内蛋白质合成增

加,沉积的蛋白质水平高。Hassan 等[20]、李伟等[21]发

现,甜菜碱能促进蛋白质合成,加速机体蛋白质积累。

陈安国等[10]研究表明,饲料中添加半胱胺能够提高猪血

清中总蛋白含量,降低尿素氮含量,促进蛋白沉积。本

试验结果表明添加甜菜碱和半胱胺后,试验各组育肥猪

的血清总蛋白含量无显著差异 ( >0.05);甜菜碱组尿

素氮含量显著高于对照组和半胱胺组 ( <0.05);甜菜

碱组白蛋白含量显著高于半胱胺组 ( <0.05)。添加甜

菜碱后,相较于对照组,血清总蛋白和白蛋白含量均有

上升趋势,蛋白质合成代谢表现出一定的增强,说明甜

菜碱有改善机体蛋白代谢平衡的作用[20]。然而甜菜碱组

尿素氮含量较对照组和半胱胺组显著升高,与之前的多

表3 甜菜碱及半胱胺对山猪杂交猪血清生化指标的影响

组别

项目

对照组 甜菜碱组 半胱胺组

总蛋白/(g/L) 71.83±1.74 76.10±2.14 71.50±1.35

尿素氮/(mmol/L) 6.41±0.03a

7.54±0.07b

6.81±0.32a

白蛋白/(g/L) 41.30±0.21ab 42.27±1.16b

39.50±0.46a

甘油三酯/(mmol/L) 0.43±0.03a

0.31±0.02b

0.29±0.03b

总胆固醇/(mmol/L) 3.31±0.10 3.56±0.08 3.44±0.20

高密度脂蛋白胆固醇/(mmol/L) 1.68±0.07 1.68±0.14 1.61±0.10

脂肪酶/(U/mL) 6.53±0.21 7.64±0.56 7.96±0.61

Husbandry and Forage 饲养饲料

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China Swine Industry

2023 年 第 6 期

数研究结果不同,表明机体对蛋白质的利用程度下降,

这可能与试验猪的品种、阶段和饲养管理等因素有关,

也可能与试验饲料的蛋白质水平有关。

4 小结

本试验结果表明,添加甜菜碱或半胱胺可以降低杂

交育肥山猪脂肪沉积,促进体脂代谢,同时调节机体蛋

白质代谢。因与多种影响因素有关,两者在动物生产中

的使用效果不尽相同,对于其适宜添加量和方式等还需

进一步研究探索。综上所述,饲料中添加甜菜碱或半胱

胺改善了相关指标含量,有助于山猪杂交猪的蛋白质与

脂肪代谢。

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饲养饲料 Husbandry and Forage

66

第73页

China Swine Industry

2023 年 第 6 期

DOI:10.16174/j.issn.1673-4645.2023.06.014

收稿日期:2023-02-22

作者简介:陈坚修 (1969-),男,广东肇庆人,本科,高级畜牧师,研究方向为畜牧业生产发展和动物疫病预防控制

发酵豆粕对仔猪生长性能的影响

陈坚修 1 冼理权 2

1广东省肇庆市动物疫病预防控制中心袁 广东肇庆 526040曰

2广东省肇庆市高要区新桥镇农林水综合服务站袁 广东肇庆 523116冤

摘 要院 豆粕作为植物性蛋白原料被广泛用于生猪养殖中袁 但由于其含有抗营养因子及致敏因子袁 限制了豆粕在仔猪养殖中

的应用遥 豆粕经发酵处理后可以有效减少抗营养因子袁 改善豆粕营养价值遥 试验探究不同水平的发酵豆粕对断奶仔猪生长性

能的影响袁 并讨论发酵豆粕替代饲料配方中的豆粕的最适添加水平遥 研究选择体重相近的 21 日龄的断奶仔猪 120 头袁 随机

分为 4 个处理组袁 每组6 个重复袁 每个重复 5 头断奶仔猪遥 对照组断奶仔猪饲喂基础饲料袁 试验组仔猪分别饲喂5% 渊试验

1 组冤尧 10% 渊试验 2 组冤 和 15% 渊试验 3 组冤 的发酵豆粕等量替代豆粕的试验饲料袁 试验周期为 4 周遥 结果表明袁 与对照

组比较袁 试验中使用 10%和 15%的发酵豆粕等量替代豆粕使断奶仔猪的试验末重显著提高了 6.95%尧 8.06% 渊 约0.05冤曰

平均日增重显著提高了 14.27%尧 16.79% 渊 约0.05冤曰 料重比显著降低了 9.52%尧 10.48% 渊 约0.05冤遥 所有发酵豆粕组

仔猪的腹泻率均较对照组显著降低 渊 约0.05冤遥 研究表明袁 在断奶仔猪生产中使用适量的发酵豆粕替代基础饲料中的豆粕可

以显著改善断奶仔猪的生长性能袁 并有效降低了腹泻率袁 发酵豆粕的最适添加水平为 10%遥

关键词院 仔猪曰 发酵豆粕曰 平均日增重曰 料重比曰 腹泻率

中图分类号院 S828曰S816.6 文献标识码院 A 文章编号院 1673-4645(2023)06-0067-03

开放科学渊资源服务冤标识码渊OSID冤袁扫一扫袁了解文章更多内容

豆粕是生猪养殖生产中一种重要的植物性蛋白原

料,豆粕中含有多种营养物质,蛋白质含量较高,且氨

基酸比例较均衡[1]。但豆粕中含有胰蛋白酶抑制因子、

植物血凝素、非淀粉多糖及致敏因子等,在幼龄动物生

产中使用易引起营养性腹泻,阻碍机体对其他营养成分

的消化与利用,限制了豆粕在幼龄动物生产中的使用[2-4]。

仔猪在断奶阶段,由于饲料、养殖环境的改变,导致机

体易发生断奶应激,且此时机体的胃肠道功能及免疫功

能尚未完全建立,使仔猪腹泻、生长受阻,甚至死亡[5,6]。

断奶阶段,由于仔猪自身特点及豆粕的抗营养性,限制

了豆粕在其养殖生产中的应用。因此,降低豆粕中的抗

营养因子及致敏因子对断奶仔猪的养殖效益至关重要。

而豆粕经过发酵处理后可使抗营养因子减少,提高豆粕

中的粗蛋白含量,并提高有益菌及一些未知的生长因子

含量,改善豆粕的营养价值[7-9]。目前,发酵豆粕在生猪

养殖生产中已有一些应用研究结果。熊云霞等[10]研究表

明,在断奶仔猪生产中使用 9%的发酵豆粕等量替代豆

粕,可以提高断奶仔猪肠道菌群丰富度,提高肠道消化

吸收功能,进而改善生长性能。党文庆等[11]研究发现,

在断奶仔猪饲料中使用 10%的发酵豆粕等量替代豆粕,

可以降低断奶仔猪肠道内沙门氏菌和大肠杆菌数量,提

高机体对饲料中养分的消化吸收利用率,降低料重比,

改善生长性能。

1 试验材料与方法

1.1 发酵豆粕的制备

本研究中使用枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌及蛋白酶

Husbandry and Forage 饲养饲料

67

第74页

China Swine Industry

2023 年 第 6 期

制备发酵豆粕,其中菌种由中国科学院微生物研究所提

供,蛋白酶由北京博仕奥生物技术有限公司提供。发酵

豆粕的制备方法参考刘栩州等[12]的研究方法。

1.2 试验设计

研究选择体重相近的 21 日龄的断奶仔猪 120 头,

按照单因素设计原则,随机分为 4 个处理组,每个处理

组 6 个重复,每个重复 5 头断奶仔猪。对照组断奶仔猪

饲喂基础饲料,试验组仔猪分别饲喂使用 5% (试验 1

组)、10% (试验 2 组) 和 15% (试验 3 组) 的发酵豆

粕替代豆粕的试验饲料。试验周期为 4 周。试验断奶仔

猪的基础饲料组成和营养成分含量见表 1。

1.3 断奶仔猪的养殖管理

在试验开始前 1 周,对猪舍进行消毒处理,仔猪统

一驱虫。试验过程中,断奶仔猪自由饮水和采食,免疫

程序按照猪场日常养殖规范进行。每日仔细观察仔猪的

健康状态,记录腹泻仔猪头数及腹泻天数。

1.4 生长性能的检测

试验第 1 d 和最后 1 d,在仔猪晨饲前,禁食 12 h

之后称量体重。记为试验初重和试验末重,统计试验阶

段的各组断奶仔猪的饲料消耗量及各组仔猪腹泻头数及

天数。用以上数据统计分析平均日增重、料重比及腹泻

率等数据。

2 试验结果与分析

不同水平的发酵豆粕对断奶仔猪生长性能及腹泻率

的影响见表 2,与对照组比较,试验中使用 10%和 15%

的发酵豆粕等量替代豆粕使断奶仔猪的试验末重显著提

高了 6.95%、8.06% ( <0.05);平均日增重显著提高

了 14.27%、16.79% ( <0.05);料重比显著降低了

9.52%、10.48% ( <0.05)。所有发酵豆粕组仔猪的腹

泻率均比对照组显著降低 ( <0.05)。

3 讨论

仔猪断奶后应从提高机体免疫力和促进肠道发育 2

方面改善机体健康,此时饲料原料的选择至关重要。本

研究中,使用一定的发酵豆粕等量替代豆粕,发现 10%

和 15%的发酵豆粕替代组的断奶仔猪生长性能较佳,显

注:①预混料为每千克饲料提供:维生素 A 13 000 IU;维生素 D

2 800IU;维生素 E 28 IU;维生素 K3 3.2 mg;维生素 B12 0.03 mg;

尼克酸 30 mg;泛酸 18 mg;锌 82 mg;锰 35 mg;铁 88 mg;

铜 12 mg;碘 0.33 mg;硒 0.28 mg;②营养成分含量是理论计算值。

表1 断奶仔猪的基础饲料组成和营养成分含量

原料 含量/% 营养成分② 含量/%

玉米 66.14 消化能/(MJ/kg) 14.63

豆粕 22.00 粗蛋白/% 18.29

鱼粉 3.00 钙/% 0.8

乳清粉 5.00 磷/% 0.67

石粉 0.75 赖氨酸/% 1.02

磷酸氢钙 0.83 蛋氨酸/% 0.37

食盐 0.30 色氨酸/% 0.21

苏氨酸 0.08 苏氨酸/% 0.6

赖氨酸 0.25

氯化胆碱 0.15

预混料①

1.50

合计 100

表 2表 3不同水平的发酵豆粕对断奶仔猪生长性能及腹泻率的影响 不同剂量的益生菌制剂对仔猪血清免疫指标的影响

项目 对照组 试验 1 组 试验 2 组 试验 3 组 总标准误 P 值

初重/kg 6.80 6.75 6.78 6.76 0.42 0.769

末重/kg 13.53b

13.89ab 14.47a

14.62a

1.02 0.045

平均日增重/(g/d) 240.35b

255.00ab 274.64a

280.71a

15.07 0.042

平均日采食量/(g/d) 504.30 510.54 520.65 528.13 12.43 0.128

料重比 2.10b

2.00ab 1.90b

1.88b

0.10 0.033

腹泻率/% 4.76a

3.16b

2.35c

1.85c

0.37 0.010

注:同行数据肩标字母不同表示差异显著 ( <0.05),肩标字母相同表示差异不显著 ( >0.05)。

饲养饲料 Husbandry and Forage

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第75页

China Swine Industry

2023 年 第 6 期

著优于对照组,且所有发酵豆粕组的断奶仔猪腹泻率均

比对照组显著降低,表明生产中使用 10%的发酵豆粕替

代豆粕对仔猪生长性能的促进效果较优。王园等[13]研究

表明,使用 6%的发酵豆粕饲喂仔猪 20 d,可以显著提

高仔猪肠道中淀粉酶和胰蛋白酶的活性,改善肠道形

态,进而提高了生长性能。王曼等[14]研究表明,在生长

猪的低蛋白日粮中使用植酸酶和发酵豆粕 (替代 10%的

普通豆粕),可以显著提高生长猪的生长性能,减少氮

磷的排放。薛云等[15]在生长育肥猪生产中使用发酵豆粕

替代基础日粮中 60%的普通豆粕,可以有效提高生长育

肥猪的生长性能及屠宰性能,且改善了猪肉品质。豆粕

经发酵后,降解为小肽、游离氨基酸等营养物质,大豆

球蛋白等抗营养因子含量降低,提高了豆粕的消化吸收

利用率;且发酵豆粕中还含有一定量的有益微生物,可

以调节肠道菌群结构,使有益菌快速繁殖帮助宿主建立

健康的肠道内环境,促进消化酶的分泌,进而提高机体

对养分的消化吸收,改善动物的生长性能。

4 结论

本试验结果表明,在断奶仔猪生产中使用适量的发

酵豆粕替代基础饲料的普通豆粕可以显著提高断奶仔猪

的平均日增重,显著降低料重比,改善断奶仔猪的生长

性能,并有效降低了腹泻率,促进了猪的肠道健康。并

发现发酵豆粕的最适添加水平为 10%。

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第76页

China Swine Industry

2023 年 第 6 期

DOI:10.16174/j.issn.1673-4645.2023.06.015

收稿日期:2023-02-14

作者简介:高艳霞(1981-),甘肃陇南人,汉族,本科,畜牧师,研究方向为畜牧兽医

苍术提取物对仔猪生长性能的影响

高艳霞

渊甘肃省陇南市文县畜牧兽医站袁 甘肃陇南 746400冤

摘 要院 为了探究在仔猪的基础日粮中添加不同比例的苍术提取物对 野杜伊长伊大冶 三元断奶仔猪生长性能的影响遥 本试验

采用单因素随机设计试验袁 选择日龄相同尧 健康尧 体重相近的 野杜伊长伊大冶 三元断奶仔猪 100 头袁 根据试验设计随机分成

4 组袁 每组 25 个重复袁 每头断奶仔猪为1 个重复袁 组别分别为院 对照组 渊基础饲料冤尧 1 组 渊基础饲料垣0.2%苍术提取物冤尧

2 组 渊基础饲料垣0.4%苍术提取物冤尧 3 组 渊基础饲料垣0.6%苍术提取物冤袁 预试期 10 d袁 试验期 56 d遥野杜伊长伊大冶 三元

断奶仔猪的饲养试验结束后测定仔猪的生产性能遥 结果显示袁 添加 0.2%尧 0.4%尧 0.6%苍术提取物添加组的 野杜伊长伊大冶

三元断奶仔猪的采食量均高于对照组 渊 跃0.05冤袁 2尧 3 组的三元断奶仔猪的平均日增重显著高于对照组 渊 约0.05冤袁 其料

肉比和腹泻率显著低于对照组 渊 约0.05冤遥 综上所述袁 添加 0.4%尧 0.6%苍术提取物可以有效提高仔猪的生长性能袁 以

0.4%苍术提取物添加量为宜袁 为其在临床中进行推广应用提供参考遥

关键词院 仔猪曰 生长性能曰 苍术曰 提取物

中图分类号院 S828曰S816.7 文献标识码院 A 文章编号院 1673-4645(2023)06-0070-03

开放科学渊资源服务冤标识码渊OSID冤袁扫一扫袁了解文章更多内容

随着抗菌药物及含有抗菌药物的添加剂在生猪养殖

过程中的使用,临床中猪常见的病原菌 (大肠杆菌、沙

门氏菌、奇异变形杆菌、副猪嗜血杆菌、猪传染性胸膜

肺炎放线菌及链球菌等) 的耐药性问题日益严重,许多

病原菌对临床中常用的药物产生严重的多重耐药性,临

床中耐药性的产生及多重耐药性不仅给疾病的治疗带来

一定的困难,同时还导致猪肉等畜产品中存在药物残

留,人们食用含有药物残留的猪肉后,通过食源性感染

方式,使猪肉中相关病原菌的耐药性转移到人体中,严

重危害身体健康[1-3]。目前,临床中的中药和中药提取

物、益生菌及抗菌肽等作为替抗性添加剂在动物养殖过

程中被广泛应用[4,5]。相关研究表明,我国中药资源丰富,

且中药的种类繁多,在临床中黄芪、穿心莲、丹参、黄

连、苍术等多种中药被广泛应用,临床中的中药及中药

提取物通过测定相关成分,发现含有多种生物活性物质

(生物碱、多糖、皂苷、黄酮、有机酸类) 和营养物质

(氨基酸、矿物质及多种维生素等)。中药及中药提取物

中所含的生物活性物质和营养物质具有提高动物生长性

能,改善动物产品品质,激活动物机体的免疫系统,维

持肠道菌群平衡等多种药理作用,从而被广泛应用于动

物养殖中[5-6]。苍术在我国多个地区种植,该药物具有多

种药效功能,在临床中被广泛应用,苍术最早被记载在

东汉时期的 《神农本草经》 中,主要以根及根茎结构作

为主要的药用部位。根据药理学性质,苍术具有健脾燥

湿、祛风散寒及明目的功效[7,8]。研究表明,苍术中含有

苍术酮,具有促进胃排空、调节胃肠蠕动、抗腹泻以及

促进消化吸收功能等作用,且对动物机体几乎无毒副作

用,在人和动物的临床中广泛应用[9,10]。目前,国内关于

苍术提取物在猪养殖过程中应用报道较少。本试验以

“杜×长×大”三元断奶仔猪为研究对象,通过添加不同

饲养饲料 Husbandry and Forage

70

第77页

China Swine Industry

2023 年 第 6 期

比例的苍术提取物进行饲养试验,研究其对仔猪生长性

能的影响。为苍术提取物在猪养殖过程中进行应用推广

提供基础数据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

苍术提取物,购自北京同仁堂制药有限公司,其中

苍术酮含量≥54%,为颗粒制剂。

1.2 试验设计

在陇南市的“杜×长×大”三元猪养殖合作社进行

饲养试验,试验采用单因素随机设计试验,选择日龄相

同、健康、体重相近的 (7.50±0.15) kg“杜×长×大”

三元断奶仔猪 100 头,根据试验设计进行随机分成 4

组,每组 25 个重复,每头断奶仔猪为 1 个重复,组别

分别为对照组 (基础饲料)、1 组 (基础饲料+0.2%苍术

提取物)、2 组 (基础饲料+0.4%苍术提取物)、3 组 (基

础饲料+0.6%苍术提取物),预试期 10 d,试验期 56 d。

饲养试验中参照“杜×长×大”三元猪养殖合作社的饲养

与管理制度进行饲养、饮水、驱虫、疫苗免疫及消毒。

断奶仔猪的基础饲粮组成成分及营养水平[10]见表 1。

1.3 生产性能测定

在饲养试验过程中,测定每个试验组的“杜×长×

大”断奶仔猪平均日增重、平均日采食量、料肉比及腹泻

率等生产性能指标。试验仔猪的生产性能指标计算如下。

平均日采食量=每头断奶仔猪试验期内采食量÷试

验天数

平均日增重= (试验仔猪的末重-试验仔猪的初

重) ÷试验天数

料重比=试验仔猪的平均日采食量÷试验仔猪的平

均日增重

腹泻率=试验期断奶仔猪腹泻头数×次数÷ (试验

天数×试验猪头数)

1.4 数据处理与分析

每个试验组“杜×长×大”断奶仔猪测定数据以

“平均值±标准差”表示,试验数据用 SPSS 18.0 软件进

行处理和单因素多重比较,用 <0.05 表示差异显著性。

2 结果与分析

由表 2 可知,0.2%、0.4%、0.6%苍术提取物添加

组的“杜×长×大”断奶仔猪的采食量均高于对照组

( >0.05);0.2%苍术提取物添加组的“杜×长×大”

断奶仔猪的平均日增重均高于对照组 ( >0.05),料肉

比和腹泻率低于对照组 ( >0.05),0.4%、0.6%苍术提

取物添加组的“杜×长×大”断奶仔猪的平均日增重显

著高于对照组 ( <0.05),其料肉比和腹泻率均低显著

低于对照组 ( <0.05);0.2%、0.4%、0.6%苍术提取

物添加组之间相比差异性不显著 ( >0.05)。

3 讨论

研究表明,苍术及苍术提取物具有调节动物机体的

免疫力、抗氧化、止痛、调节血糖、调节血压、促进动

物生长、调节动物肠道菌群 (益生菌与致病菌之间) 等

多种药理功能作用,苍术及苍术提取物主要应用于消化

系统中[11-14]。本试验表明,添加 0.4%、0.6%苍术提取物

表1 断奶仔猪日粮组成成分与营养水平

组成 含量/% 营养水平② 含量

玉米 41.30 消化能/(MJ/kg) 13.28

膨化玉米 18.00 粗蛋白质/% 17.79

豆粕 21.80 钙/% 0.84

花生粕 10.00 总磷/% 0.59

鱼粉 5.00 赖氨酸/% 0.88

磷酸氢钙 1.30 蛋氨酸/% 0.57

石粉 0.50

食盐 0.23

蛋氨酸 0.51

赖氨酸 0.36

预混料①

1.00

合计 100.0

注:①预混料为每千克日粮提供:维生素 A 8 000 IU,维生素 D3

3 000 IU,维生素 B1 14 mg,维生素 B2 3.6 mg,维生素 E 20 IU,胆

碱 0.5 g,叶酸 0.5 mg,泛酸 10 mg,铜 10 mg,铁 80 mg,锌

80mg,镁 30mg,硫 0.3mg,硒 0.3mg;②营养水平含量为计算值。

Husbandry and Forage 饲养饲料

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第78页

China Swine Industry

2023 年 第 6 期

可以有效提高“杜×长×大”仔猪的生长性能,降低其

腹泻率。Li 等[16]研究表明,在断奶仔猪基础日粮中分别

添加 3、6 和 9 g/kg 苍术多糖,可显著提高早期断奶仔

猪的生长性能。Xu 等[17]研究表明,苍术多糖可以有效提

高仔猪抗病能力,降低腹泻率。本研究与上述报道一

致,说明苍术提取物可以有效提高仔猪生长性能。可能

由于苍术提取物在断奶仔猪的肠道中,通过多种途径有

效调节仔猪肠道蠕动与消化能力,促进饲料中的营养物

质在仔猪肠道内消化与吸收,提高其营养物质的代谢与

利用率,有效提高仔猪平均日增重与采食量,降低其料

重比和腹泻率,进而提高生长性能。本试验结果表明,

饲料中添加 0.4%苍术提取物的效果较好。

4 结论

综上所述,添加不同比例的苍术提取物可以有效提

高仔猪的生长性能,以 0.4%苍术提取物添加为适宜,可

以在临床中进行推广应用。

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Animal and Feed Sciences, 2012, 21(2):302-312.

表23 苍术提取物对断奶仔猪生长性能的检测结果 不同剂量的益生菌制剂对仔猪血清免疫指标的影响 渊X依S冤

组别 平均日增重/(kg/d) 平均日采食量/kg 料重比 腹泻率/%

对照组 0.42±0.04ab 0.74±0.05 1.76±0.22ab 7.81±0.42a

1组 0.46±0.05a

0.75±0.03 1.63±0.26b

5.76±0.22ab

2组 0.48±0.02a

0.77±0.04 1.60±0.28b

4.78±0.12b

3组 0.49±0.22b

0.79±0.07 1.61±0.36a

4.82±0.42b

注:同列数据肩标字母相同或无字母表示差异不显著 ( >0.05),字母不同表示差异显著 ( <0.05)

饲养饲料 Husbandry and Forage

72

第79页

China Swine Industry

2023 年 第 6 期

DOI:10.16174/j.issn.1673-4645.2023.06.016

收稿日期:2023-06-07

基金项目:叙州区人民政府 - 西南医科大学合作项目 (2021XZXNYD10)

作者简介:金贵兵 (1973-),男,兽医师,主要从事动物疫病预防控制方面的推广工作;杨丁 (1964-),男,高级兽医师,主要从事动

物疫病预防控制方面的宣传推广工作;# 为同等贡献作者

* 通信作者:杨倩,女,博士,研究方向为基础兽医学

非洲猪瘟疫苗研究现状

金贵兵 1# 杨 丁 2# 金仕强 3 邹仲航 1 牟燕平 1 古从伟 3 杨 倩 3*

1宜宾市叙州区动物疫病预防控制中心袁 四川宜宾 644600曰

2宜宾市动物疫病预防控制中心袁 四川宜宾 644000曰

3西南

医科大学实验动物中心袁 四川泸州 646000曰冤

摘 要院 非洲猪瘟 渊African swine fever, ASF冤 是一种由非洲猪瘟病毒 渊African swine fever virus, ASFV冤 引

发的急性尧 烈性尧 高度接触性动物传染病袁 主要在家猪和野猪之间传播袁 致死率极高袁 是当今全球养猪业的头号威胁性疫

病遥 2018 年袁 我国首次发生非洲猪瘟疫情袁 导致生猪年产量减少 40%遥 近5 年袁 我国大力推进了 ASF 疫苗的研制工作袁 并

取得了很大突破遥 目前袁 从技术路线看袁 非洲猪瘟病毒基因缺失减毒活疫苗的研发最具有合理性遥 本文现对非洲猪瘟疫苗研

究现状进行概述袁 以期为国内非洲猪瘟的预防和控制提供参考遥

关键词院 生猪曰 非洲猪瘟病毒曰 疫苗曰 细胞免疫曰 基因型曰 毒株

中图分类号院 S828曰S858.28 文献标识码院 A 文章编号院 1673-4645(2023)06-0073-09

开放科学渊资源服务冤标识码渊OSID冤袁扫一扫袁了解文章更多内容

Vaccine Research Status of African Swine Fever

JIN Guibing1#, YANG Ding2#, JIN Shiqiang3

, ZOU Zhonghang1

, MOU Yanping1

, GU Congwei3

, YANG Qian3*

(

1Animal Disease Prevention and Control Center of Xuzhou District, Yibin 644600, China; 2Animal Disease Prevention and Control Center

of Yibin city, Yibin 644000, China; 3Experimental Animal Center of Southwest Medical University, Luzhou 646000, China)

Abstract: African swine fever (ASF) was an acute, severe and highly contagious animal infectious disease, caused by African swine fever

virus (ASFV). It mainly spreaded between domestic pigs and wild pigs, with a high mortality rate, It was the major threat disease of the

global pig industry. In 2018, China had firstly occurred ASF, which resulted in a 40% reduction in annual hog production. In the past five

years, the development of ASF vaccine had been vigorously promoted in China and had made significant progress. At present, from a

technical perspective, the development of ASF attenuated live vaccine with gene deletion was the most reasonable. This paper provided

an overview of the research status on ASF vaccines, with the aim of providing reference for the prevention and control of ASF in China.

Key words: pigs; African swine fever virus; vaccine; cellular immunity; genotype; virus strain

猪病防控 Swine Disease

Prevention and Control

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China Swine Industry

2023 年 第 6 期

1921 年,非洲猪瘟病毒 (ASFV) 首次在肯尼亚被

报道,随后经西欧、东欧传入东亚。2018 年,非洲猪瘟

病毒蔓延到我国,给我国生猪养殖业造成了不可估量的

损失[1]。从发现至今,非洲猪瘟已有上百年的流行历史,

为了根除该病毒,人们采用了诸如生物防控、扑杀、隔

离等策略,虽然取得了阶段性的成功,但在缺乏非洲猪

瘟病毒商业化疫苗的情况下,还是难以控制其蔓延和反

复发生[2]。疫苗接种一直被认为是控制传染性疾病最有

效的方法,通过疫苗接种得到彻底根除的传染病有天

花、牛瘟等[3]。20 世纪我国研制的脊髓灰质炎“糖丸”

口服减毒活疫苗,就成功控制和消灭了脊髓灰质炎在我

国的流行[4,5]。

自 20 世纪 60 年代以来,全世界范围就开始了非洲

猪瘟病毒疫苗的开发与研究,但研究成果一般都处于实

验室阶段,距离实际应用还有一定差距。导致非洲猪瘟

病毒疫苗开发滞后的主要因素在于非洲猪瘟病毒复杂的

基因组结构和多变的基因型。非洲猪瘟病毒基因组是一

个线性且共价封闭的双链 DNA 分子,长度在 170~190

kbp 之间,可编码大量的蛋白质参与逃避宿主的防御系

统[6]。而且非洲猪瘟病毒基因组结构也不够稳定,常因

病毒间的基因重组和基因突变发生遗传改变[7],这无疑

加大了非洲猪瘟病毒疫苗的研究难度。截至目前,根据

B646L (p72) 基因末端的核苷酸差异,已鉴定出 24 种

非洲猪瘟病毒的基因型[8]。这 24 种基因型在非洲均有流

行报道,且主要分布在东非和南非。目前大多数试验阶

段研究的非洲猪瘟病毒疫苗主要针对基因Ⅰ型 (欧洲)

和基因Ⅱ型 (亚洲) 流行毒株。从部分研究结果来看,

多种疫苗仅对同源毒株感染具有保护作用,因此,不太

可能针对其他系统发育差异较大的毒株提供交叉保护,

这也阻碍了疫苗的进一步开发与利用。此外,疫苗开发

通常还受到接种策略、抗原免疫原性、毒株类型、免疫

剂量、攻毒剂量、接种动物个体差异、接种途径等多种

因素影响。因此,非洲猪瘟病毒疫苗的开发还需要大量

的研究来解决以上各种问题。

虽然现在的研究已证实多种类型的疫苗可以对感染

非洲猪瘟病毒后提供强保护,但对其保护性免疫的了解

和定义还十分有限。本文对现有不同类型的非洲猪瘟病

毒疫苗研究现状进行初步的概述,以期更好地了解该病

毒,为非洲猪瘟的预防、控制和根除提供参考。

1 非洲猪瘟病毒灭活疫苗

一直以来,灭活疫苗都是一种较为安全、廉价且成

熟的疫苗。因为在灭活过程中,各类物理或化学作用有

效消除了病毒向毒性表型的逆转,使病毒不再具备潜在

传染能力。虽然灭活疫苗具有较高的安全性,但过去的

研究表示,针对非洲猪瘟病毒的灭活疫苗无法提供很好

的免疫保护,即使联合了刺激细胞免疫的佐剂[9]。非洲

猪瘟病毒灭活疫苗虽然在某些情况下能够诱导体液免疫反

应,但产生的抗体在感染中很难实现有效的病毒中和[10],

而且非洲猪瘟病毒灭活疫苗通常不会引发完整的细胞免

疫反应。因此,灭活疫苗可能不是开发有效非洲猪瘟病

毒疫苗的可行策略。

2 非洲猪瘟病毒亚单位疫苗

亚单位疫苗是一类不含有核酸的重组蛋白或合成肽

疫苗,这些蛋白和肽类通常是能够诱导保护性免疫反应

的特定病毒表位。此类疫苗的关键是筛选能够诱导产生

中和抗体的抗原或抗原表位[10],旨在诱导中和血清学反

应。非洲猪瘟病毒编码多达 170 多种蛋白质,其中包括

结构蛋白和宿主免疫调节蛋白,因此,在筛选免疫性较

好的抗原蛋白上存在一定难度。目前已经评估了几种非

洲猪瘟病毒抗原的保护潜力,包括结构蛋白 p54、p30、

p72 和血凝素 CD2v 等。第一个被证明对非洲猪瘟病毒

攻击具有保护作用的重组病毒蛋白是杆状病毒表达的非

洲猪瘟病毒血凝素 (HA) 蛋白———CD2v,其产生的中

和抗体能抑制病毒对宿主血细胞的吸附和单核细胞的侵

染,可部分抵御同源毒株的感染[11,12]。p54、p30 和 p72

是非洲猪瘟病毒的结构蛋白,均能够诱导机体产生中和

抗体,其中针对 p72 和 p54 的抗体可以阻断非洲猪瘟病

毒的吸附,针对 p30 的抗体可以阻断病毒的内化[13]。杆

状病毒中表达的重组 p54 和 p30 蛋白单独使用时,不能

保护免疫猪免受非洲猪瘟病毒的攻击,然而二者同时使

用能让 50%的免疫猪抵御非洲猪瘟病毒强毒株 E75 的致

死性攻击,而且病毒血症症状出现的时间延迟,症状也

有所减轻[14]。此外,用杆状病毒表达的 p54/p30 融合蛋

白进行免疫,也减轻了非洲猪瘟病毒血症症状,并保护

猪病防控 Swine Disease

Prevention and Control

74

第81页

China Swine Industry

2023 年 第 6 期

接受免疫的猪免受 E75 的攻击[15]。

Neilan 等[16]采用杆状病毒表达的 p54、p30、p72 和

p22 蛋白组合免疫猪时,尽管检测到高滴度的 ASFV 特

异性中和抗体,但却不能抵御毒株 Pretoriuskop/96/4

(Pr4) 的攻击,说明在非洲猪瘟病毒感染中,抗体介导

的免疫反应似乎不能提供足够的免疫保护。Oura 等[17]的

研究证明细胞毒性 T 淋巴细胞 (CTL) 介导的细胞免疫

反应在抵御非洲猪瘟病毒感染方面发挥着至关重要的作

用,表明除了中和抗体外,还需要能够刺激 CTL 的疫苗

来抵御非洲猪瘟病毒的感染。

3 非洲猪瘟病毒核酸疫苗

核酸疫苗免疫主要是将 DNA 或信使 RNA (mRNA)

序列递送进宿主细胞内生成抗原蛋白,模拟疾病抗原刺

激免疫应答。核酸疫苗可产生具有翻译后修饰天然构象

的内源性蛋白,并通过 MHC Ⅰ类和Ⅱ类复合物进行抗

原递呈,从而激活 CD8+ T 和 CD4+ T 细胞。因此,与基

于抗原蛋白的亚单位疫苗相比,核酸疫苗能够诱导 CTL

免疫反应。

2011 年,Argilaguet 等[18]构建了表达 p54/p30 融合

蛋白的质粒 DNA (pCMV-PQ),pCMV-PQ 不能在猪

体内诱导可检测的免疫反应,但在小鼠体内可以。为了

改善这一状况,他们将编码猪白细胞抗原Ⅱ的特异性抗体

单链可变区与 pCMV-PQ 融合构建 pCMV-APCH1PQ。

然而,pCMV-APCH1PQ 虽然诱导了广泛的免疫应答,

但却对非洲猪瘟病毒的攻击无效,而且还加重免疫猪的

病毒血症症状。2012 年,Argilaguet 等[19]又构建了表达

CD2v/p54/p30 融合蛋白的质粒 DNA (pCMV-sHAPQ),

发现 pCMV-sHAPQ 能够在体内诱导特异性的 B 细胞和

T 细胞反应,但无法提供免疫保护。此后,继续在

pCMV-sHAPQ 质粒的基础上融合泛素蛋白,构建了

pCMV-UbsHAPQ 质粒,用于靶向体内Ⅰ类抗原呈递。

pCMV-UbsHAPQ 诱导了强烈的 CTL 反应,在缺乏特异

性抗体的情况下,为超过 50%的免疫猪提供了保护,文

章作者推测这种保护作用与血液中大量 CD2v 特异性

CD8+T 细胞相关。

为了筛选更多参与 ASFV 保护性免疫的 T 细胞靶点

抗原,2014 年,Lacasta 等[20]基于 ASFV 毒株 Ba71v,

构建了与泛素融合的 DNA 表达文库 (ASFVUblib),

ASFVUblib 激发了大量 ASFV 特异性 CD8 + T 细胞,

CD8+ T 细胞在缺乏特异性抗体的情况下,保护了 60%

的免疫猪免受毒株 E75 的致命攻击。该研究进一步支持

了 CTL 细胞反应在抗非洲猪瘟病毒中的重要性,同时揭

示了多种具有潜在诱导 T 细胞反应能力的非洲猪瘟病毒

抗原的存在。因此,在随后的研究中,该实验室研究者

们继续筛选和鉴定不同基因型非洲猪瘟病毒的 T 细胞靶

点抗原[21,22]。

4 非洲猪瘟病毒重组病毒载体疫苗

除了核酸疫苗,病毒载体疫苗也能诱导体液免疫和

细胞免疫。通过将目标病毒的免疫原基因导入载体病毒

基因组中实现。此外,病毒载体疫苗可以很好地区分感

染动物和接种动物 (DIVA),即病毒载体疫苗自身编码

的免疫原可作为疫苗标记。

2013 年,Argilaguet 等[23]在 BacMam 载体 (一种基

于杆状病毒的载体,具有转染哺乳动物细胞表达靶基因

的能力) 上导入非洲猪瘟病毒的 CD2v/p54/p30 融合基

因 构 建 了 BacMam-sHAPQ 病 毒 载 体 疫 苗 , BacMam-sHAPQ 可保护 2/3 的猪免受同源亚致死性毒株的

攻击,免疫猪的血清中没有检测到特异性抗体,保护作

用可能与病毒特异性 T 细胞反应相关。

通过“鸡尾酒”免疫方式,人们评估了病毒载体递

送的多种非洲猪瘟病毒抗原的免疫原性。其中,腺病毒

载体递送的非洲猪瘟病毒抗原混合物 (p32、p54、

pp62 和 p72 抗 原 , 以 及 A151R、 B119L、 B602L、

EP402RΔPRR、B438L、K205R 和 A104R 抗原),均诱

导了特异性抗体和细胞免疫反应[24,25]。改良安卡拉痘病

毒载体 (MVA) 递送的 p72、CD2v 和 C- 型凝集素抗

原虽然没有诱导特异性抗体产生,但却检测到特异性 T

细胞反应[26]。随后 Lokhandwala 等[27]将上述非洲猪瘟病

毒腺病毒载体疫苗重新组合,测试了其攻毒后的保护效

果。在与佐剂 BioMize 的组合免疫下,不仅没有提高免

疫保 护率 ,还 出现 了疾 病加 重的 现象 。而 与佐 剂

ZTS-01 组合免疫有较好的存活率,但没有很好控制临

床症状。总之,没有一种抗原产生了具有统计学意义的

保护作用。

猪病防控 Swine Disease

Prevention and Control

75

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China Swine Industry

2023 年 第 6 期

为了增强免疫保护效果,研究者们又采用了初次免

疫 和 加 强 免 疫 的 接 种 策 略 。 Goatley 等 [28] 克 隆 了

OURT88/3 毒株的 B602L、p72、p30、p54、E199L、

EP153R、F317L 和 MGF505-5R 基因,导入腺病毒载

体后进行初次免疫,随后又将以上抗原基因导入 MVA

载体进行加强免疫,最后获得 100%的同源攻毒保护。

5 非洲猪瘟病毒减毒活疫苗

减毒活疫苗 (live-attenuated vaccines, LAVs) 大

致可分为天然减毒活疫苗、传统人工减毒活疫苗和人工

基因缺失减毒活疫苗。相比于亚单位疫苗和核酸疫苗只

能提供部分同源保护,非洲猪瘟病毒减毒活疫苗可以提

供完全同源和部分异源感染保护[29]。

5.1 天然减毒活疫苗

天然减毒活疫苗是从自然界中分离到的毒性降低或

无红 细 胞吸 附 (non-HAD) 能 力的 自然 减 毒 毒 株 。

NH/P68 和 OURT88/3 是非洲猪瘟病毒的 2 个天然弱毒

株,由葡萄牙科学家分离得到,属于 non-HAD 基因Ⅰ

型。早期的研究发现,NH/P68 接种猪主要表现为非洲

猪瘟慢性病变或是无症状反应,且这些无症状的免疫猪

能 100%抵抗毒株 L60 和 Arm07 的攻击[30],期间所产生

的免疫保护与 NK 细胞的活性呈正相关[31]。King 等[32]用

OURT88/3 对欧洲家猪进行初次免疫,随后用同基因型

的 OURT88/1 加强免疫,发现 85.7%和 100%的免疫猪

可以免受非洲株 Benin 97/1 和 Uganda 1965 的攻击,

其中分别有超过 78%和 50%的猪,在受到 Benin 97/1

和 Uganda 1965 攻击时,没有表现出任何病毒血症的迹

象。Mulumba 等[33]用 OURT88/3 弱毒株免疫猪后,50%

的免疫猪可以抵御 OURT88/1 (基因型Ⅰ) 的攻击,而

且存活下来的免疫猪还能继续抵御 DRC085/10 (基因型

Ⅰ) 的攻击。随后,又有研究者比较了不同剂量和不同

接种途径接种 OURT88/3 后的保护情况,结果发现鼻内

接种 (100%) 比肌肉注射 (50%~66%) 显示出更高的

保护率[34]。

2017 年,人们在拉脱维亚的野猪身上又分离到 1 株

non-HAD 基 因 Ⅱ 型 ASFV 天 然 弱 毒 株 , 命 名 为

Lv17/WB/Rie1[35]。在对抗强毒株 Arm07 的致死性感染

时,Lv17/WB/Rie1 对野猪的口服免疫保护率达到了

92%[36]。2021 年,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所报

道了国内 non-HAD 低致死率自然变异株,虽然毒力明

显降低,但仍然具有很强的水平传播能力[37]。总的来说,

天然弱毒株不太可能直接作为 LAVs 使用,由于残余毒

力,部分猪在一定剂量下接种弱毒株后会出现副反应。

通过基因重组技术进一步删除弱毒株的相关毒力基因可

能会提高其作为 LAVs 的安全性。

5.2 传统人工减毒活疫苗

传统人工减毒活疫苗是病毒在体外细胞系或通过非

宿主动物连续传代而形成的。20 世纪 60 年代,研究者

们就通过细胞传代的方式进行了 ASF 减毒活疫苗的研

制。早期的这些研究已经证实非洲猪瘟病毒可以在猪骨

髓细胞、Vero 细胞、猪肾细胞 (PK-2a) 等传代细胞系

上繁殖,而且连续传代后的毒株接种猪时,临床症状大

大减轻并能不同程度抵御强毒株的攻击[38]。1960 年,西

班牙和葡萄牙大范围使用非洲猪瘟病毒弱毒活疫苗 (猪骨

髓细胞上连续传代所得) 进行田间试验,结果导致了免疫

失败事件,动物出现肺炎、流产和死亡等不良反应[39]。这

也表明非洲猪瘟病毒细胞传代致弱毒株虽然是疫苗研究

的一个重要方向,但是依然存在很多不确定性,其安全

性和有效性还很难得到保障。

通过一系列研究发现,增加传代次数虽然降低了病

毒毒力,但也容易导致病毒的免疫原性降低,而且受不

同毒株和细胞系的影响,也很难摸索到合适的传代次数

进行后续的动物免疫试验,因而非洲猪瘟病毒细胞传代

致弱毒株的研制具有一定的盲目性和随机性,很难预判

其攻毒后的免疫保护效果。2015 年,Krug 等[40]将非洲

猪瘟病毒格鲁吉亚株 (ASFV-G) 在 Vero 细胞中连续传

代 110 次,发现毒力完全消失,接种家猪后无任何临床

反应,但攻毒后却发现没有任何免疫保护作用。同样,

Balysheva 等[41]将 Stavropol 01/08 强毒株分别在 A4C2

细胞、CV 细胞和猪肾细胞 (PSGK-60) 上连续传代,

结果发现 A4C2 细胞的第 14 代毒和 PSGK-60 细胞的第

20 代毒毒力依然很强,接种猪全部死亡。A4C2 细胞的

第 24/33 代毒和 CV 细胞的第 20 代毒毒力明细减弱,接

种猪全部存活,但接种后的猪无法抵御强毒株的攻击。

比起疫苗研制,细胞传代致弱毒株在基因组功能和

猪病防控 Swine Disease

Prevention and Control

76

第83页

China Swine Industry

2023 年 第 6 期

致病机理研究等方面发挥了更大的作用。Krug 等[40]通过

对 ASFV-G 细胞传代致弱毒株突变基因区域进行分析,

发现 ASFV-G 在 Vero 细胞上连续传 60 代后,其 I177L

基因第 42 位 脯氨 酸变 成丝 氨酸。传 至 110 代 时,

M1249L 基因第 471 位的 Arg 变成 Gln,CP2475L 基因

第 200 位的 Glu 变成 Gly。这不仅能很好地了解突变基

因与病毒毒力和免疫原性的相关性,对基因缺失减毒活

疫苗的研制也更具有指导意义。

5.3 人工基因缺失减毒活疫苗

人工基因缺失减毒活疫苗是通过敲除病毒的某些毒

力基因而形成的。早期研究较多的与非洲猪瘟病毒毒力

和感染宿主范围相关基因有 TK、MGF505、MGF360、

CD2v (EP402R)、9GL (B119L)、NL (DP71L) 等[42]。

在这些基因中,TK 和 9GL 可以通过调控宿主的蛋白去

磷酸化酶 1琢 来阻止宿主细胞蛋白合成的关闭,TK 和

9GL 基因缺失的非洲猪瘟病毒在猪巨噬细胞中无法正常

复制[43,44]。MGF505/360 基因能抑制宿主 I 型 IFN 应答,

该类基因的缺失不仅会降低非洲猪瘟病毒的毒力,还能

抑制其体外复制[45]。敲除这些基因不仅可以降低非洲猪

瘟病毒的致病性,还能诱导针对同源非洲猪瘟病毒感染

的保护性反应[46,48]。

除了诱导同源保护外,非洲猪瘟病毒基因缺失减毒

活疫苗还具有良好的免疫交叉保护。缺失 CD2v 基因的

非洲猪瘟病毒毒株 BA71ΔCD2,不仅对亲本株 BA71 的

致命攻击具有保护作用,而且对异源毒株 E75 (基因Ⅰ

型) 和 Georgia 2007/1 (基因Ⅱ型) 也具有 100%保护

作用,且大部分猪没有表现出非洲猪瘟病毒感染症状,

这也是基因缺失减毒活疫苗抵抗异源非洲猪瘟病毒毒株

的首次报道[49]。在随后的扩展研究中,Lopez 等[50]继续

深入探究了 BA71ΔCD2 的交叉免疫保护,采用 106

PFU 剂 量 的 BA71ΔCD2 免 疫 猪 后 , 用 毒 株

RSA/11/2017 (基因 XIX 型) 和 Ken06.Bus (基因Ⅸ型)

进 行 攻 击 ,分 别 有 83.3%和 33.3%的 免 疫 猪 存 活。

BA71ΔCD2 的加强免疫可以使抗 Ken06.Bus 的保护率

提高至 50%,存活下来的猪有轻微的非洲猪瘟临床症

状。如果用 BA71ΔCD2 进行初次免疫,BA71 进行加强

免疫,则可获得 100%的抗 Ken06.Bus 保护率,所有猪

几乎不表现非洲猪瘟的任何临床症状。该研究结果证

实,交叉保护可能是一种多因素现象,不仅取决于基因

序列相似性。

虽然非洲猪瘟病毒基因缺失减毒活疫苗与其他类型

的疫苗相比具有很好的免疫交叉保护,但非洲猪瘟病毒

的基因修饰结果同样不可预测。首先,不同非洲猪瘟病

毒毒株即使缺失相同的基因,产生的致病性和诱导的免

疫保护效果可能不同。例如,毒株 BA71 缺失 CD2v 基

因后,毒力降低,并诱导了很好的免疫交叉保护。而同

样缺失了 CD2v 基因的 Georgia2010 (基因Ⅱ型) 致死

性却与亲本无异[51]。毒株 E70 缺失 DP71L 基因后毒力明

显下降,所有接种动物均未出现死亡。而毒株 Malawi

Lil-20/1 (Mal) 在缺失 DP71L 基因后,致死率仍高达

100%[52,53]。马拉维毒株和格鲁吉亚毒株在缺失 TK 基因

后均表现出减毒,但只有马拉维毒株诱导了免疫猪的保

护反应[54,55]。其次,某些天然弱毒株在删除特定毒力基

因后,其免疫保护率会明显降低。从 OURT88/3 中删除

DP71L 和 DP96R 基因后,毒力虽然减弱,但是保护效

力降为原来的 66%[56]。同样,从 NH/P68 中删除 A238L

或是 EP153R 基因后,无法再抵抗异源毒株 Arm07 的攻

击[30]。此外,为了提高 LAVs 的安全性,研究者试图通

过多重基因缺失来完全去除非洲猪瘟病毒的毒力。发现

Georgia 2007 毒株除了缺失 9GL 和 UK 基因的 ASFV-G-Δ9GL/ΔUK[48]毒株外,其他缺失多个基因毒株

均不具备诱导保护性反应的能力[57-59]。这些研究证实,

基因缺失诱发的免疫保护在很大程度上受毒株特异性的

影响。

2020 年,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所以我国

第 1 株非洲猪瘟病毒分离株 Pig/HLJ/2018 为骨架,利用

DNA 同源重组技术,通过删除 7 种不同蛋白质的基因片

段构建的非洲猪瘟病毒弱毒活疫苗 HLJ/18-7GD,对家

猪 (包括怀孕母猪) 具有最好的安全性和有效性[60]。该

疫苗可能是目前国内最具备实现产业化应用的疫苗。同

年,Borca 等[61]通过删除非洲猪瘟病毒 Georgia 2007 毒

株的一个未知基因 I177L,构建的 ASFV-G-ΔI177L 可

以 100%保护家猪免受亲本株感染,该疫苗既可以肌肉

注射也可以经口鼻给药[62],同时还开发了能够大规模生

产的衍生株 ASFV-G-ΔI177L/ΔLVR,该衍生株具有同

样的免疫原特性和保护效力[63]。后续的试验还证明 ASFV-G-ΔI177L 能抵抗越南强毒株 TTKN/ASFV/DN/2019

猪病防控 Swine Disease

Prevention and Control

77

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China Swine Industry

2023 年 第 6 期

的致死攻击[64]。于是,2022 年,越南农业和农村发展部

批准了 ASFV-G-ΔI177L 在越南的上市,但其实际应用

效果和安全稳定性还有待长期观察考证。

6 结语

综上所述,疫苗接种是控制非洲猪瘟的一种有效策

略。不同种类的疫苗存在其各自的优势,但也显示出不

足。灭活疫苗虽然具有制作简单、安全性高等特点,但

却无法保护猪免受非洲猪瘟病毒的侵害。亚单位疫苗能

够激发宿主产生体液免疫,诱导产生中和抗体,但针对

非洲猪瘟病毒感染产生的保护性免疫并不理想。多项研

究指证细胞免疫,尤其是细胞毒性 CD8+ T 细胞,才是

宿主抵抗非洲猪瘟病毒感染的关键。核酸疫苗和病毒载

体疫苗的优势在于能够很好地诱导体液免疫反应和细胞

免疫反应,但试验阶段呈现出的免疫保护还有待进一步

提高。从目前的研究来看,非洲猪瘟病毒重组减毒活疫

苗免疫保护效果相对较好,但其也存在病毒返强、疫苗

生物脱落、慢性感染等系列安全性问题。近期已有多个

非洲猪瘟病毒弱毒疫苗获得了专利认证,并进入临床测

试。这给非洲猪瘟商业化疫苗的诞生提供了希望,希望

这些疫苗在经过长期的临床试验和优化改良后能克服一

系列安全和生产问题成功上市。

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2023 年 第 6 期

DOI:10.16174/j.issn.1673-4645.2023.06.017

收稿日期:2023-05-24

基金项目:非洲猪瘟形势下生猪产业链生物安全措施的升级创新及示范应用项目

作者简介:陆田甜 (1996-),女,湖北利川人,硕士,研究方向为动物医学

* 通信作者:余群莲 (1986-),女,四川眉山人,高级畜牧师

浅谈非洲猪瘟病毒研究进展及防控措施

陆田甜 陈华云 余群莲 *

渊重庆农投肉食品有限公司袁 重庆 401120冤

摘 要院 非洲猪瘟是一种高度致病性传染疾病袁 其毒株致死率可达 100%遥 自 2018 年我国辽宁沈阳首次发生非洲猪瘟后袁

该疾病迅速蔓延到全国各地袁 导致猪群严重减少袁 对我国的养猪业及经济造成了巨大的影响和损失遥 目前袁 通过生物安全防

控措施袁 非洲猪瘟疫情得到一定的控制袁 但由于其病毒的复杂性和特殊性袁 尚无有效的疫苗和针对性药物被研发出来袁 全国

各地仍时有非洲猪瘟的发生遥 本文综述了非洲猪瘟研究进展袁 包括诊断方法袁 灭活疫苗尧 减毒活疫苗及亚单位疫苗研究进

展袁 抗病毒药物研究进展袁 并对非洲猪瘟防控措施提出一些见解袁 以期为进一步做好非洲猪瘟防控工作提供借鉴遥

关键词院 生猪曰 非洲猪瘟曰 疫苗曰 研究进展曰 防控措施

中图分类号院 S828曰S852.65 文献标识码院 A 文章编号院 1673-4645(2023)06-0082-05

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Research Progress and Prevention and Control Measures of African Swine Fever

LU Tiantian, CHEN Huayun, YU Qunlian*

(Chongqing Nongtou Meat Food Co., Ltd., Chongqing 401120, China)

Abstract:African swine fever was a highly pathogenic infectious disease, with a lethal rate of up to 100%. Since the first outbreak of

African swine fever in Shenyang, Liaoning Province in 2018, the disease had rapidly spread throughout the country, lead to a serious reduction in pig populations and caused significant impact and losses to China's pig farming and economy. At present, through biosecurity prevention and control measures, African swine fever had been controlled to some extent. However, due to the complexity and specificity of its virus, effective vaccines and targeted drugs had not yet been developed, and African swine fever still occured in various parts

of the country. This article reviewed the research progress of African swine fever, including diagnostic methods, inactivated vaccines,

attenuated live vaccines and subunit vaccines, as well as antiviral drugs. It also provided some insights on African swine fever prevention and control measures, in order to provide reference for further efforts in African swine fever prevention and control.

Key words:swine; African swine fever; vaccines; research progress; prevention and control measures

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Prevention and Control

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2023 年 第 6 期

非洲猪瘟 (ASF) 是由非洲猪瘟病毒 (ASFV) 引起

猪的急性、发热、高度传染性疾病,致死率可达 100%,

被世界卫生组织列为法定报告动物疫病,是我国的一类

动物疫病。由于 ASFV 结构的复杂性,编码蛋白质的多

样性,以及目前对 ASFV 与宿主免疫系统相互作用的了

解不足,阻碍了疫苗的开发。通过构建完善的生物安全

防控体系,做好防控措施是我国目前应对 ASF 的主要手

段。本文综述了非洲猪瘟病毒的研究进展,并对非洲猪

瘟防控措施提出一些见解,以期为进一步做好非洲猪瘟

防控工作提供借鉴。

1 ASFV 的概述

1.1 病原学

ASFV 是一种大型双链 DNA 病毒,总直径为 175~

215 nm,其基因组大小为 170~190 kbp,根据病毒株

的不同,包含 151~167 个开放阅读框 (ORF) [1]。基因

组末端显示反向重复,并由发夹环闭合。基因组编码许多

蛋白质,这些蛋白质参与病毒组装、DNA 复制和修复[2]。

此外,还对参与免疫调节的蛋白质进行了编码,例如抑

制Ⅰ型干扰素和干扰细胞死亡途径[3]。

ASFV 粒子结构非常复杂,呈二十面体对称,其类

核包含双链 DNA 基因组[1]。类核被核壳和内外衣壳包

围,每个衣壳被一层脂膜 (内膜和外膜) 包裹[4],然而,

这种包膜的重要性尚不清楚,因为它不是感染所必需的[5]。

1.2 流行病学

ASFV 于 1921 年在非洲肯尼亚首次被发现,至今已

有 100 多年的历史[2],我国于 2018 年在辽宁省沈阳市沈

北新区发现首例非洲猪瘟[6]。非洲猪瘟在我国东北地区发

生后,随即在河南、江苏、安徽和浙江等省份点状散发,

其传播具有方向性,疫情分布也具有明显的方向性,总体

呈东北向东部、南部方向传播,西南向西北方向传播[7]。

ASFV 的寄主范围非常窄,唯一的脊椎动物宿主是

猪,而节肢动物媒介是鸟形纲软体动物[8]。ASF 没有人畜

共患病的潜力,也没有迹象表明这种情况可能会改变[9]。

流行病学调查显示,我国主要的感染源包括感染的家猪

和野猪,以及受污染的饲料、人员、车辆和猪肉。目前

尚不清楚康复猪可以携带病毒的时长及多久可以排出病

毒。据报道,康复猪在 ASFV 感染后 6 个月仍可排出

ASFV 并感染易感猪[10]。

1.3 临床症状

非洲猪瘟的临床症状差异较大,主要取决于毒株的

毒力及动物的年龄和免疫状况,ASFV 有强毒力、中等

毒力和低毒力 3 种类型毒株。其中,强毒力毒株可引起

急性或亚急性疾病,致死率高达 100%,包括高热、呼

吸和胃肠道症状、发绀、共济失调等非特异性临床症状,

怀孕母猪可因严重的疾病和高烧而流产。中等毒力菌株

导致的临床症状表现为高烧、厌食、疲劳和非特异性呼

吸道和胃肠道症状,这种情况下的死亡率为 30%~

70%。低毒力菌株感染猪只后,无特异性临床症状,死

亡率低,病猪可在 7~10 d 后形成抗体,但这些抗体不

能完全中和病毒,其预后效果也尚未可知[8]。

2 非洲猪瘟病毒的研究进展

2.1 诊断方法

由于非洲猪瘟临床症状与猪瘟极其相似,只能通过

实验室检测进行鉴别诊断。常用的检测技术包括分子生

物学检测技术、血清学检测技术及病原学检测技术。分

子生物学检测技术包括普通 PCR 技术、荧光定量 PCR

技术、数字 PCR 技术、等温扩增技术等;血清学检测技

术包括酶联免疫吸附试验 (ELISA)、交叉免疫试验法

等;病原学检测技术包括血细胞吸附试验 (HAD)、直

接免疫荧光检测非洲猪瘟抗原 (FAT)。

目前,规模化猪场实验室常用的 2 种诊断技术为实

时荧光定量 (qPCR) 及 ELISA。qPCR 检测技术具有操

作简便、快捷、灵敏度高及特异性强的特点,且能有效

解决常规 PCR 污染问题,目前常用于 qPCR 检测的基

因 有 B646L、 CP204L、 E183L、 CP530R、 B602L [11]。

Trinh 等[12]开发了一种靶向 ASFV p54 基因的 qPCR 检测

方法,具有较高的特异性和灵敏度,可用于单独检测血

液、血清、脾脏和肾脏中的 ASFV,也可作为辅助检测

工具。ELISA 检测技术具有快速、灵敏、成本低、特异

性和准确性高的特点,适用于大规模样本检测,国内外

常用 p30/p32、p54、p72、p73 等作为检测 ASFV 抗体

的蛋白,郝丽影等[13]分别用 ASFV 重组蛋白 p30、p72、

pA104R 作为包被原建立间接 ELISA 方法,3 种方法分

别检测梯度稀释的 ASFV 阳性血清、ASFV (CD2v 缺失)

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阳性血清,其中 p72-ELISA 灵敏度最高,其检测下限分

别为 1∶64、1∶128,但 3 种方法间特异性差异不大。

2.2 疫苗研究现状

接种疫苗是控制牲畜病毒性疾病的最佳措施之一,

目前针对猪瘟病毒、猪伪狂犬病病毒、猪传染性腹泻病

毒等养殖场常见病毒类型均有疫苗的研发及临床应用。

虽然目前尚未有针对 ASFV 的疫苗被研制出来,但各个

国家的科研人员一直在探索 ASFV 疫苗的研发。

灭活疫苗主要通过物理、化学或两者相结合的方式

使病原体失活。传统的灭活疫苗无论其采用何种灭活方

法和佐剂,都已经被证明是无效的。尽管它在诱导抗体

产生方面非常有效,有时能够阻断液体中的病毒,但并

不能够诱导特异性细胞毒性 CD8+T 细胞,而 T 细胞对于

消除病毒感染的细胞至关重要[14]。

减毒活疫苗 (LAVs) 一般可分为天然减毒菌株和人

工基因缺失菌株,后者是通过删除某些毒力基因制成

的。与其他类型的 ASF 疫苗相比,LAV 可以提供完全同

源和部分异源保护。Zhang 等[15]通过删除 L11L-L100L

基因制备疫苗,这些减毒菌株对同源攻击提供了 18%的

保护。Bao 等[16]构建了 E184L 缺失菌株以区分感染动物

和接种疫苗的动物,但缺失菌株不能提供完全保护。由

于安全问题,LAV 在大规模疫苗接种期间可能存在毒力

逆转的风险。因此,在广泛推广之前,应进行充分的实

验来验证 LAV 的有效性和安全性。同时,LAV 的交叉保

护能力需要进一步评估。ASFV 在不同基因型甚至同一

基因型的不同菌株的基因组中存在某些序列的突变、重

复和丢失,这可能导致毒力变化。

亚单位疫苗可以增强免疫细胞对抗原的摄取和处

理,诱导机体产生免疫反应,产生高滴度的抗 ASFV 抗

体。已经证实,一些 ASFV 抗原具有一定的保护作用。

p72 和 p54 抗体可阻断 ASFV 的吸附,p30 抗体可阻断

病毒内化[17]。Goatley 等[18]将 B602L、p72、p30、p54、

E199L、EP153R、F317L 和 MGF505-5R 克隆到腺病毒

载体中进行初级免疫,并克隆到 MVA 载体中进行加强

免疫,然后在猪中发现保护功能高达 100%。然而,在

试验结束之前,免疫猪体内的传染性病毒水平仍然很

低。亚单位疫苗一般处于实验室研究阶段,与实际应用还

存在较大差距。ASFV 编码多达 150~200 种蛋白,且大

多蛋白功能未知,所以,筛选有效的保护性抗原有一定的

挑战性。深入鉴定可以诱导强烈免疫应答的保护性抗原以

及中和表位,有利于开发有效的 ASFV 亚单位疫苗[19]。

2.3 抗病毒药物研究现状

在研制出有效的疫苗之前,使用抗病毒药物有助于

在疫情发生后早期控制病毒的传播。部分广谱抗病毒化

合物在细胞水平显示了抗 ASFV 活性,如:吡唑呋喃菌

素、利巴韦林等。某些组蛋白去乙酰化酶抑制剂,如苯

丁酸钠、丙戊酸、曲古抑菌素 A 和伏立诺他在体外能显

著抑制 ASFV 复制,其中苯基丁酸钠能以剂量依赖的方

式干扰病毒晚期基因表达和阻断病毒感染诱导的乙酰化

修饰,并与恩诺沙星具有协同抗 ASFV 的作用。植物次

生代谢成分在抗 ASFV 上展示了良好前景。如黄酮类的

芹菜素、芫花素、杨梅黄酮、杨梅苷;多酚类的白藜芦

醇、氧化白藜芦醇、没食子酸十二酯;多糖类的硫酸多

糖、岩藻多糖、戊聚糖多硫酸酯;植物提取物如紫球藻

和自养小球藻[20]。

3 生物安全防控措施

3.1 人车物防控

3.1.1 人员防控

人员管理是整个防控体系里最重要的因素,一是要

充分发挥人的主观能动性,树立明确的入场隔离、消毒

的意识,加强生物安全防控措施的理论和实践培训,建

立监督检查机制;二是要制定严格的进场流程,所有人

员进场前都需经过“三级”洗消隔离程序,进场人员除

携带手机、眼镜及必需药品外不得携带任何其他行李,

且必须进行紫外线消毒或臭氧熏蒸;三是规范日常管

理,员工每进出生产区时都必须洗头洗澡,进入污区的

人员不能再返回净区,同时禁止各猪舍人员串舍。

3.1.2 车辆防控

为避免因车辆流动造成疫病的发生和蔓延,一是场

内车辆,猪场内部设立中转车辆,由专人负责,每次使

用后必须彻底冲洗、消毒,每周 1~2 次采样检测,车

辆行驶固定路线,不越过关口,非特殊情况禁止驶出场

外;二是场外工作车辆,每次使用后进行清洗消毒,每

周进行一次彻底冲洗消毒,包括车外表面及内部座椅等,

冲洗前采样检测,按指定路线行驶,停放在规定位置。

猪病防控 Swine Disease

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2023 年 第 6 期

3.1.3 物资防控

场内涉及的物资主要包括生活物资、生产工具、饲

料、疫苗及药品等,为降低风险,食材每周集中采购 1

次,其他物资原则上每月集中采购 1 次,所有到猪场的

物资必须经过采样检测为 ASFV 阴性后方可进场,检测

合格后雾化熏蒸消毒 12 h 或高温 70℃消毒 1 h 以上。

3.2 卫生与消毒

3.2.1 消毒剂的选择

ASFV 很容易导致环境污染,包括饲料和饮用水,

并导致在周围猪中传播,因此应合理的选择消毒剂,各

类型消毒剂适用范围见表 1。

3.2.2 消毒程序

一是空栏消毒,先清扫圈舍内外的污物,用高压水

枪冲洗圈舍内的顶棚、墙壁、门窗和地面,易可拆卸的

用具和设备尽量拆卸后冲洗和消毒。猪舍干燥后用消毒

剂从上到下喷雾消毒,密封门窗后热风炮或熏蒸消毒。

二是日常清洁,栏舍内粪便和垃圾每日清理,禁止长期

堆积。发现蛛网随时清理,病死猪及时移出,放置和转

运过程保持尸体完整,禁止剖检,及时清洁、消毒病死

猪所经道路及存放处;三是环境消毒,重点区域内的道

路每月至少消毒 1~2 次,每年 3~8 月份是 ASF 及各类

疾病的高风险时段,每周至少消毒 1 次。

3.3 饲料与饮水

饲料和饮水是 ASF 传播的主要途径之一,在选择饲

料时要弃用高风险原料,每批原料采购前进行检测,所

有饲料运输车使用专业运输车,按照流程洗消、检查、

检测,合格后使用,场内尽量采用独立料槽,如已采用

通槽,则应按照 5~10 头猪 / 槽进行区隔。

在水源的选择方面,应当尽可能选择自来水或用微

生物、理化指标符合饮用水标准的深井水。生猪饲养场

应当控制猪场的饮水系统,定期检测水塔、水线、饮水

器等系统中的水源质量,有条件的生猪饲养场可选择安

装水塔、水线的电子警报器,保证饮水充足的同时对水

质起到监测的作用。在饮水消毒的过程中应当选择正规

厂家生产、有正规批号且未过期的消毒剂,消毒剂应满

足易溶于水、方便储存、无毒副作用、无腐蚀性、无刺

激性、对畜禽生长发育无不良影响的。常见的水体消毒

剂主要包括氯制剂、复合消毒剂、酸化剂等[21]。

3.4 驱虫

蜱虫是 ASFV 重要的传播媒介,可寄生在鼠、猫、

犬、鸟等动物体表,同时苍蝇、蟑螂、蚊子等虫媒生物

也可作为传播媒介,猪场应装好纱窗,防好蚊虫,可在

场内角落处投喂蟑螂药、老鼠药,并做好标识;在饲料

库、猪舍及出风口处可悬挂防鸟网,也可安装超声波驱

鸟器;定期做好检查,每日进行场内巡视,防止外界生

物进入场内。

3.5 病死猪无害化处理

由于 ASFV 可在猪只和环境中存在很长时间,病死

猪的无害化处理是生物安全防控措施中的重要一环,猪

场采用高温及生物无害化处理设备处理病死猪,为应对

表 3 不同剂量的益生菌制剂对仔猪血清免疫指标的影响 表 1 非洲猪瘟消毒剂种类及使用范围

应用范围 推荐种类

生产线道路、疫区及疫点道路 氢氧化钠(火碱)、氢氧化钙(生石灰)

车辆及运输工具 酚类、戊二醛类、季铵盐类、复方含碘类(碘、磷酸、硫酸复合物)

大门口及更衣室消毒池、脚踏垫 氢氧化钠

畜舍建筑物、围栏、木质结构、水泥表面、地面 氢氧化钠、酚类、戊二醛类、二氧化氯类

生产、加工设备及器具 季铵盐类、复方含碘类(碘、磷酸、硫酸复合物)、过硫酸氢钾类

环境及空气消毒 过硫酸氢钾类、二氧化氯类

饮水消毒 季铵盐类、复方含碘类、二氧化氯类、含氯类

人员皮肤消毒 含碘类

衣、帽、鞋等可能被污染的物品 过硫酸氢钾类

疫区范围内办公、饲养人员宿舍、公共食堂等场所 二氧化氯类、过硫酸氢钾类、含氯类

人员进出、衣物、隔离服、胶鞋等 过硫酸氢钾类

猪病防控 Swine Disease

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突发情况,可配置一定容量的冻库。无害化处理人员到

工作场所穿防护服或更换无害化处理区专门的工作服,

更换靴子,戴手套和口罩进行操作。处理完之后,防护

服、鞋套、手套和口罩等焚烧处理,更换衣服、鞋子,对

车辆和人员进行消毒,无害化处理区每周采样检测一次。

4 小结

由于 ASFV 结构的复杂性及其对机体免疫力的高抑

制力,目前尚未研究出可适用于该疾病的疫苗,也无对

应的治疗方案。但是,多年来的经验总结,构建完善的

生物安全体系,做好防控措施可有效避免 ASF 的发生。

各养殖相关人员应自主提高主观能动性,学习、吸纳生

物安全防控知识,了解 ASFV 的研究动态。做好猪群管

理工作,强化猪群健康状态;提高敏感度,一旦发现可

疑病例,及时上报处理,避免疫情扩散。

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猪病防控 Swine Disease

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China Swine Industry

2023 年 第 6 期

DOI:10.16174/j.issn.1673-4645.2023.06.018

收稿日期:2023-08-30

基金项目:2022 年河北省农业科技成果转化项目

作者简介:王幸 (1994-),女,硕士,主要从事兽用疫苗和兽医诊断制品技术研究

三种口蹄疫病毒非结构蛋白 3ABC

抗体 ELISA 检测方法的比较

王 幸 1,2 邱贞娜 1,2 李建丽 2,3 郁宏伟 1,2 赵玉龙 1,2 李卫东 1,2 刘 涛 1,2 裴小琴 1,2

1瑞普 渊保定冤 生物药业有限公司袁 河北保定 071000曰

2河北省兽用生物制品技术创新中心袁 河北保定 071000曰

3河南农业大学动物医学院袁 河南郑州 450046冤

摘 要院 本试验选择 3 种国内外口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC 阻断 ELISA抗体检测试剂盒袁 对牛尧 羊尧 猪等易感动物血清

进行检测袁 比较 3 款检测试剂盒质量袁 以期获得可应用于口蹄疫血清学筛选的有效试剂盒遥 应用瑞普生物尧 某国内厂家尧 某

进口试剂盒 3 种 ELISA 试剂盒同时对 79 份血清样品进行 ELISA 检测袁 结果显示袁 3 种试剂盒的阳性检出率分别为

56.96%尧 56.96%尧 55.7%袁 阳性血清的符合率为 95.6%曰 同时对比瑞普公司 2 批次试剂盒袁 发现2 次结果完全一致遥 对

感染口蹄疫后不同时间的牛血清进行检测袁 结果显示3 种试剂盒均可用于感染10 d 后牛血清样品的检测遥 试验证实 3 种非

结构蛋白3ABC 抗体检测试剂盒检测结果差异不大袁 均可应用于牛尧 羊尧 猪的口蹄疫感染血清学筛选性试验遥

关键词院 猪曰 口蹄疫病毒曰 非结构蛋白曰 ELISA曰 检测方法

中图分类号院 S828曰S852.65 文献标识码院 A 文章编号院 1673-4645(2023)06-0087-03

开放科学渊资源服务冤标识码渊OSID冤袁扫一扫袁了解文章更多内容

口蹄疫 (foot-and-mouth disease, FMD) 是由口

蹄疫病毒 (foot-and-mouth disease virus, FMDV) 感

染引起的偶蹄动物共患的烈性传染病,主要通过空气进

行传播[1],临床症状主要表现为黏膜部位、四肢趾间等

产生水泡、溃烂,成年动物一般死亡率较低,而幼龄动

物的死亡率高达 100%,感染过该病毒的动物可持续带

毒,在体内存在数月或数年[2,3],已经给世界上很多国家

的畜牧业带来了严重的经济损失,我国将其列为一类动

物传染病之首。

动物感染口蹄疫后机体同时产生结构蛋白和非结构

蛋白抗体,而免疫动物在接触不同型病毒后,也可形成

隐性感染而持续带毒[4],如何检测隐性动物感染就成了

该病防控的关键。世界动物卫生组织 (OIE) 规定无口

蹄疫发生和接种疫苗的国家,必须证实疫苗免疫后动物

血清中不产生非结构蛋白抗体[5]。目前研究发现自然感

染口蹄疫病毒的动物血清中 3ABC 抗体,在所有非结构

蛋白抗体中持续时间最长,因而将 3ABC 抗体作为鉴别

口蹄疫病毒感染与免疫的指标可信度最高[6,7]。

现阶段我国主要通过疫苗免疫进行口蹄疫的防控,

且常规灭活疫苗仍是当前防控使用的主要疫苗[8]。通过

疫苗制备过程中去除相关的非结构蛋白,提高疫苗纯

度,使免疫动物体内不产生非结构蛋白抗体,从而对自

然感染与免疫动物进行鉴别诊断,也为口蹄疫防控及感

染评估提供依据[9,10]。当前口蹄疫病毒诊断实验室血清学

检测主要包括病毒中和试验、固相竞争酶联免疫吸附试

验、液相阻断酶联免疫吸附试验和非结构蛋白 ELISA[11]。

猪病防控 Swine Disease

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2023 年 第 6 期

本文通过对比国内外 3 家非结构蛋白抗体阻断

ELISA 试剂盒,同时对瑞普公司试剂盒进行批次间差异

对比,以期获得可用于区分疫苗免疫与自然感染的血清

学方法,获得更高效的 ELISA 检测试剂盒。

1 材料与方法

1.1 试剂盒

口蹄疫病毒 3ABC 阻断 ELISA 抗体检测试剂盒 (试

剂盒 A),由瑞普 (保定) 公司提供;口蹄疫病毒非结构

蛋白 3ABC 阻断 ELISA 抗体检测试剂盒 (试剂盒 B),

购自某国内厂家;口蹄疫非结构蛋白 3ABC 抗体阻断

ELISA 试剂盒 (试剂盒 C),为某进口厂家试剂盒。

1.2 血清

53 份牛血清、12 份羊血清、14 份猪血清和 10 份

感染后不同天数采集的牛血清。部分为质控血清样品

盘、部分由内蒙古必威安泰公司提供。

1.3 仪器设备

Dnm-9606 型酶标仪为北京普朗技术有限公司产

品;MIX-1500 型微孔板振荡器为杭州米欧仪器有限公

司产品;微量移液器为 Eppendorf 公司产品。

1.4 试验方法

试剂盒 A、B、C 使用方法大体一致,按照试剂盒说

明书进行操作。每孔加入 80 滋L 血清稀释液,然后依次

加入 20 滋L 待测血清和阳性、阴性或弱阳性对照血清。

待测样品加 1 孔,阴性、弱阳性、阳性对照血清平行加

2 孔,读取 OD450 nm 值。根据公式计算测试样本阻断率

(PI),PI= (1-测试样本 OD450 nm 值÷阴性对照平均

OD450 nm 值) ×100%。

试验成立条件:阴性对照平均 OD450 nm 值应大于

1.0;弱阳性对照血清阻断率应大于 50%,阳性对照血

清阻断率应大于 70%。

结果判定:PI 值不低于 50%时,判为口蹄疫病毒非

结构蛋白 3ABC 抗体阳性;PI 值小于 50%时,判为口蹄

疫非结构蛋白 3ABC 抗体阴性。

2 结果与分析

2.1 符合率试验结果

不同厂家的 A、B、C 3 种试剂盒检测对比试验,阴

阳性对照均成立,检测的 79 份血清样本中,阳性检出

率分别为 56.96%、56.96%、55.7% (见表 1),3 种试

剂盒检测阳性血清的符合率为 95.6%,同时对比瑞普公

司 2 批次试剂盒,2 批次检测结果完全一致。

2.2 感染后不同天数牛血清抗体水平检测试验结果

分别对感染后 3 d、7 d、10 d、20 d、30 d 采集的

10 份牛血清进行检测 (图 1、图 2、图 3),A、B 厂家

试剂盒在感染 10 d 时牛血清可检测到强阳性,C 厂家试

剂盒检测感染 10 d 时牛血清结果显示弱阳性,敏感性稍

低于 A、B 厂家试剂盒。

3 讨论

当前疫苗免疫仍是我国防控家畜口蹄疫疫病的主要

手段,近年来我国灭活口蹄疫疫苗的产品不断升级,但

是对于抗原的纯净性暂未提出明确的质量要求[12]。世界

动物卫生组织 (OIE) 在口蹄疫检测指南中明确指出,

需要对疫苗中残留的非结构蛋白进行检测,以保证接种

疫苗后机体不会产生非结构蛋白抗体,从而区分感染与

免疫动物[6,13]。检测口蹄疫非结构蛋白抗体的 ELISA 方法

是现阶段鉴别自然感染与免疫的主要方法,同时对于持

续感染动物的检测也较为敏感,因此,在群体净化检疫、

感染状况评估等方面具有重要的应用[14,15],筛选出高质

量、稳定的非结构蛋白抗体 ELISA 试剂盒对于口蹄疫防

表 3 不同剂量的益生菌制剂对仔猪血清免疫指标的影响 表 1 试剂盒A尧 B尧 C的检测结果

试剂盒 A 试剂盒 B 试剂盒 C

样品 份数/份

阳性份数/份 阳性检出率/% 阳性份数/份 阳性检出率/% 阳性份数/份 阳性检出率/%

牛血清 53 28 52.83 28 52.83 27 50.94

羊血清 12 9 75 8 66.67 9 75

猪血清 14 8 57.14 9 64.29 8 57.14

合计 79 45 56.96 45 56.96 44 55.7

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2023 年 第 6 期

图1 试剂盒 A检测结果

控具有重要的作用。

本试验通过使用瑞普生物、某国内厂家和某进口厂

家生产的 3 种同类阻断 ELISA 试剂盒,同时对 79 份血

清样品进行 ELISA 检测。结果 3 种试剂盒的阳性检出率

分别为 56.96%、56.96%、55.7%,3 种试剂盒检测阳性

血清的符合率为 95.6%;同时对比瑞普公司 2 批次试剂

盒,2 次结果完全一致,批间稳定性良好;这 3 种非结

构蛋白 3ABC 抗体检测试剂盒检出率差异不大,均可应

用于口蹄疫鉴别诊断。同时对持续感染动物进行监测,

获得非结构蛋白抗体在动物体内的消长规律,3 种非结

构蛋白 ELISA 试剂盒均适用于感染 10 d 后样本的诊断,

均可检测到抗体阳性。

4 结论

综上所述,对比的 3 种非结构蛋白 3ABC 抗体检测

试剂盒,阳性检出率差异不大,均可应用于口蹄疫的鉴别

诊断;同时 3 种试剂盒均适用于感染 10 d 后血清样本的

诊断。3 种非结构蛋白 3ABC 抗体检测试剂盒均可用于鉴

别口蹄疫感染、疫苗接种以及口蹄疫感染早期的监测。

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图2 试剂盒 B检测结果

图 3 试剂盒C检测结果

猪病防控 Swine Disease

Prevention and Control

89

第96页

China Swine Industry

2023 年 第 6 期

DOI:10.16174/j.issn.1673-4645.2023.06.019

收稿日期:2023-02-22

基金项目:贵州省科技支撑项目 (2020IY037)

作者简介:汪一江 (1986-),男,汉族,贵州瓮安人,本科,主要从事动物医学方面的研究工作

* 通信作者:汪忠荣(1978-),女,汉族,贵州瓮安人,硕士,高级兽医师,主要从事动物疫病防控与净化方面的推广工作

贵州省黔东南州

规模猪场猪伪狂犬病 gE 抗体检测

汪一江 1 田 珂 2 刘荣枝 1 张人俊 4 毛以智 4 吴通奎 3 王 彬 5 汪忠荣 3*

1东北农业大学动物医学学院袁 黑龙江哈尔滨 150006曰

2贵州农业职业学院袁 贵州贵阳 551400曰

3贵州省黔东南州动物

疫病预防控制中心袁 贵州凯里 556000曰

4贵州省动物疫病预防控制中心袁 贵州贵阳 550008曰

5贵州大学动物科学院袁 贵

州贵阳 550025冤

摘 要院 系统了解了贵州省黔东南州规模猪场猪伪狂犬病 gE抗体的阳性率袁 为其净化做准备遥 应用 ELISA 方法对 2022 年

采集全州不同规模猪场的血清样品进行检测遥 发现规模猪场的猪伪狂犬病 gE 抗体阳性率不同季度处于 20.99%耀35.29%之

间尧 不同生长阶段猪群在 7.34%耀46.10%之间尧 不同饲养条件下介于 10.61%耀45.41%内遥 结果表明袁 贵州省黔东南州中

小型规模场 渊合作社冤尧 第三季度和哺乳仔猪伪狂犬病 gE 抗体阳性率最高遥 在以后的防控中袁 应加强种猪伪狂犬病的净化袁

养殖场做好灭鼠和灭蚊等生物安全措施袁 同时建议对猪伪狂犬病gE 抗体阳性的规模猪场进行疫苗免疫接种遥

关键词院 生猪曰 规模猪场曰 猪伪狂犬病曰 gE 抗体曰 抗体检测

中图分类号院 S828曰S855.3 文献标识码院 A 文章编号院 1673-4645(2023)06-0090-04

开放科学渊资源服务冤标识码渊OSID冤袁扫一扫袁了解文章更多内容

猪伪狂犬病病毒 (Pseudorabies virus, PRV) 是一

种可引起多种动物共患的烈性传染病病毒,患病猪是该

病毒的主要储存宿主[1],农业农村部最新发布的动物疫

病病种名录中明确将其列为二类动物疫病,并被列为规

模种猪场必须净化的病种之一。据有关研究资料报道,

从 2011 年起,全国猪场 PRV-gE 抗体阳性率在增加[2]。

在贵州省也有对部分地区猪伪狂犬病野毒感染情况的研

究[3],但针对黔东南州规模猪场比较全面的猪伪狂犬病

gE 抗体阳性率调查方面的研究报道还未见到,因此,本

研究在 2022 年对黔东南州辖区内规模猪场 (含合作社)

的猪群进行伪狂犬病 gE 抗体监测,分析不同季节、不

同生长阶段和不同饲养条件下猪伪狂犬病 gE 抗体阳性

率,为黔东南州猪伪狂犬病的净化、有效预防与控制提

供科学的数据支撑,为生猪健康发展提供一定参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 试验样品

采集贵州省黔东南州 16 个县市不同规模猪场临床

健康猪群的血液,分离血清,弃去溶血样品,-86℃保

存。共收集血清样品 1 388 份。

猪病防控 Swine Disease

Prevention and Control

90

第97页

China Swine Industry

2023 年 第 6 期

1.1.2 试剂来源

猪伪狂犬病病毒 gE 蛋白 ELISA 抗体检测试剂盒

(批号:20220906,武汉科前生物股份有限公司) 由贵

州省动物疫病预防控制中心赠送。

1.1.3 主要仪器

生物安全柜 (BSC-1100ⅡA-2) 生产厂家为济南

鑫贝西生物技术有限公司,酶标仪生产厂家为赛默飞世

尔仪器有限公司,台式离心机生产厂家为江苏金坛双捷

实验仪器厂,-86℃超低温冰箱 (TH-86-500-LA) 生

产厂家为北京天地精仪科技有限公司,生化培养箱购于

上海双捷实验设备有限公司。

1.2 试验方法

1.2.1 检测

试剂室温平衡,稀释血清,加入包被板、温育、洗

板、加入酶标记物、洗板、加入底物液、避光显色后加

入终止液,记录酶标仪上 630 nm 波长的读数。

1.2.2 结果判定

将读取的 OD630 nm 值根据公式计算,若试验成立,

根据读数判定样品的阴阳性。用 Excel 软件对数据进行

统计汇总。

2 结果与分析

2.1 不同季度猪伪狂犬病 gE 抗体

从表 1 可见,2022 年第一季度检测生猪 243 头,

猪 伪 狂 犬 病 gE 抗 体 阳 性 头 数 为 51 头,阳 性 率 为

20.99%,4 个季度中阳性率最低;第二季度的阳性率为

29.34% (93/317); 第 三 季 度 的 阳 性 率 为 35.29%

(144/408),在 4 个季度的检测中阳性率最高;第四季

度的阳性率为 23.33% (98/420)。全年猪伪狂犬病 gE

抗体阳性率为 27.81%。按照季度排序为第三季度>第

二季度>第四季度>第一季度的猪伪狂犬病 gE 抗体阳

性率。

2.2 不同生长阶段猪群伪狂犬病 gE 抗体

从表 2 可看出,生产母猪的猪伪狂犬病 gE 抗体阳

性 率 为 31.99% (167/522),种 公 猪 抗 体 阳 性 率 为

7.34% (8/109), 哺 乳 仔 猪 抗 体 阳 性 率 为 46.10%

(71/154),保育仔猪抗体阳性率为 28.40% (69/243),

育肥猪抗体阳性率为 20.28% (73/360)。由此可知,猪

群中猪伪狂犬病 gE 抗体阳性率由高到低依次为:哺乳

仔猪>生产母猪>保育仔猪>育肥猪>种公猪。

2.3 不同饲养条件猪群伪狂犬病 gE 抗体

从表 3 可知,小型猪场 (合作社) 猪伪狂犬病 gE

抗体阳性率为 45.41% (198/436),高于中型猪场的阳

性 率 (27.08%), 远 高 于 大 型 猪 场 的 抗 体 阳 性 率

(10.61%)。

3 讨论

gE 基因是 PRV 的主要毒力基因[4],该基因编码产生

的蛋白抗体可以应用 ELISA 法区分与 gE 基因缺失疫苗

免疫产生的抗体。据有关研究显示,近年来,我国多地

相继发生了猪伪狂犬病,猪伪狂犬病 gE 抗体阳性率呈

上升趋势,本次调查结果黔东南州规模猪场 PRV-gE 抗

体平均阳性率为 27.81%,高于 2018 年汪忠荣等[5]对黔

东南州部分规模化猪场的调查结果,这与全国猪伪狂犬

表 1 不同季度猪伪狂犬病 gE抗体阳性率

季度 检测数/头 阳性数/头 阳性率/%

第一季度 243 51 20.99

第二季度 317 93 29.34

第三季度 408 144 35.29

第四季度 420 98 23.33

表 2 不同生长猪阶段猪群猪伪狂犬病 gE抗体阳性率

猪群生长阶段 检测数/头 阳性数/头 阳性率/%

生产母猪 522 167 31.99

种公猪 109 8 7.34

哺乳仔猪 154 71 46.10

保育仔猪 243 69 28.40

育肥猪 360 73 20.28

表 3 不同饲养条件猪群猪伪狂犬病gE抗体阳性率

猪场类型 检测数/头 阳性数/头 阳性率/%

大型猪场 424 45 10.61

中型猪场 528 143 27.08

小型猪场(合作社) 436 198 45.41

猪病防控 Swine Disease

Prevention and Control

91

第98页

China Swine Industry

2023 年 第 6 期

渊下转第 96页冤

病野毒感染调查相关研究变化趋势一致[6-8]。在研究调查

中还发现,小型猪场或合作社猪伪狂犬病 gE 抗体阳性

率相对较高,黔东南州小型合作社大多是几户或十几户

村民自发组织成立的,部分小型猪场由原有养殖大户发

展而成,饲养管理粗放,奉行原生态饲养模式,对动物

疫病防控的意识较低。同时,国家将猪伪狂犬病免疫列

入常规强制免疫病种,费用需养殖场自行负担,基于成

本考虑,养殖场主更不愿意接种猪伪狂犬病疫苗。此外,

黔东南州民族节日较多,村民走亲访友较频繁,一旦有

猪伪狂犬病疫情发生,更易造成病毒的传播和扩散,在

一定层面推动了该地区猪伪狂犬病的流行和传播。因

此,政府应加强猪伪狂犬病防控知识的宣传和指导,同

时,加强指导大型规模场对猪伪狂犬病的净化,提升生

物安全管理水平和意识。

黔东南州夏秋多雨,易引发山洪,蚊虫较多,鼠类

活动也较多,增加了疫病防控难度。本次调查结果显

示,第二季度和第三季度猪伪狂犬病 gE 抗体阳性率均

较高,第三季度最高。猪伪狂犬病的主要传染源来自发

病猪、隐性带毒猪和鼠类,但犬猫食用含有病毒的老鼠

或病死猪废弃物,也会将病毒传播和扩散。小型养殖场

(或合作社) 对场内防鼠防鸟设施设备和管理措施不是

很重视,到夏秋季鼠类活动频繁,饲料等常有被鼠类偷

食现象。此外,很多小型养殖场主喜欢在场内饲养几只

猎犬,且几乎采取放养方式,猎犬食物来源复杂[9]。因

此,第二、三季度猪伪狂犬病 gE 抗体阳性率上升可能

与鼠类和犬类活动频繁有关。有研究发现,猪在潮湿、

气温多变的夏季、秋季更容易感染猪伪狂犬病,提示在

夏季,更要注重该病的防控,本次调查与相关研究资料

报道基本一致[10]。

在隐性带毒猪场,随着生产母猪胎次的增加,猪伪

狂犬病 gE 抗体阳性率也会增加,哺乳仔猪猪伪狂犬病

gE 抗体水平高低与母猪乳汁带毒相关,在本次调查中,

生产母猪和哺乳仔猪的伪狂犬病 gE 抗体阳性率都相对

较高,结果与他人研究结果一致[11,12]。因此,应加强猪

场猪伪狂犬病的监测,推行种猪净化,应及时进行淘汰

猪伪狂犬 gE 抗体阳性个体或生产性能不佳的母猪。对

曾为伪狂犬病 gE 抗体阳性猪场,建议采用伪狂犬病基

因缺失疫苗实施免疫接种,并定期采样检测免疫效果,

根据检测情况,建立完善适合本场的免疫程序,以防止

病毒对未感染猪群及仔猪的早期感染。育肥猪群检测到

猪伪狂犬病毒 gE 抗体阳性,提示生猪在育肥猪阶段也

存在感染猪伪狂犬病病毒的风险,有研究表明,生猪在

120 日龄后感染猪伪狂犬病野毒的概率会逐渐增加,建

议对育肥猪在 100 日龄加强 1 次猪伪狂犬病疫苗免疫,

防止野毒感染[13-15]。同时,育肥场也应关注猪群的免疫程

序是否科学合理,加强采样监测等,定期开展风险评估,

降低因感染病毒而对猪群造成的危害,减少经济损失。

4 结论

贵州省黔东南州规模猪场存在猪伪狂犬病 gE 抗体

阳性,且有上升趋势,2022 年的第二季度和第三季度相

对较高,使其感染呈现一定的季节性,比较检测结果还

发现,小型养猪场 (合作社) 猪伪狂犬病毒 gE 抗体阳

性率最高,说明在今后伪狂犬病的防控中,小型养猪场

(合作社) 应作为重点监测对象,并加以关注。

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猪病防控 Swine Disease

Prevention and Control

92

第99页

China Swine Industry

2023 年 第 6 期

DOI:10.16174/j.issn.1673-4645.2023.06.020

收稿日期:2023-02-13

作者简介:霍栓旗 (1972-),男,兽医师,主要从事动物疫病防治技术推广工作

河南省襄县部分猪场

猪伪狂犬病 gE 蛋白抗体 ELISA 检测

霍栓旗

渊襄城县动物疫病预防控制中心袁 河南许昌 461700冤

摘 要院 为了解 2020要2022 年河南省襄县猪场猪伪狂犬病野毒感染情况袁 利用 gE-ELISA 法对采集来自 65 家猪场的

1 085 份血样进行 PRV-gE血清抗体检测遥 结果显示袁 猪场平均阳性率为 53.85%袁 血清样品平均阳性率为 22.30%曰 不同

生产阶段猪群均有野毒感染袁 阳性率为 17.65%耀34.44%袁 其中妊娠母猪最高袁 保育猪最低遥 2020要2022 年血清 PRV-gE

抗体检出阳性率分别为 25.96%尧 22.04%尧 20.09%袁 呈逐年下降趋势遥 本研究为河南襄县猪伪狂犬病净化和 PRV 野毒感

染情况提供了参考遥

关键词院 猪曰 伪狂犬病曰 gE蛋白曰 猪场曰 ELISA

中图分类号院 S828曰S852.65 文献标识码院 A 文章编号院 1673-4645(2023)06-0093-04

开放科学渊资源服务冤标识码渊OSID冤袁扫一扫袁了解文章更多内容

猪伪狂犬病 (Pseudorabies, PR) 是由伪狂犬病病

毒 (Pseudorabies virus, PRV) 引起的高度接触性传染

病[1]。感染猪因不同生长阶段而表现出的临床症状也有

所差别,如仔猪发生呕吐、腹泻、神经症状;种公猪配

种性能下降;母猪表现难产、流产、产木乃伊胎等繁殖

障碍;育肥猪表现为呼吸困难、隐性带毒等。猪是 PRV

的自然宿主和传染源,该病的发病率和病死率均较高,

传染性强,初生仔猪出现神经症状,感染率和死亡率可

达 100%[2],是猪场重点关注的病毒性疫病,猪场一旦存

在 PRV 流行,很难净化和根除,且在全球养猪地区普遍

存在,流行广泛,给养猪业造成严重的经济损失。

gE 基因是 PRV 的毒力基因,由其编码的糖蛋白是

病毒的非必需糖蛋白,gE 基因缺失后,PRV 的抗原性

和复制扩增功能不受影响,但可以降低 PRV 的毒力[3,4]。

gE 基因具有高度的保守性,表达于所有野毒株,并且

gE 糖蛋白抗体产生迅速且持续时间长,因此,被用来作

为 PRV 野毒感染与疫苗免疫鉴别诊断的首选靶点[5]。猪

自然感染 PRV 野毒株后,体内存在糖蛋白 gE 抗原和抗

体,这为利用血清学和分子生物技术鉴别诊断 PRV 野毒

感染和 gE 基因缺失疫苗提供了鉴别机制。目前,疫苗

免疫是预防和控制该病的常用手段,PRV-gE 基因缺失

弱毒疫苗因具有免疫应答好、安全等特点而在我国养猪

场中广泛应用,但也有部分猪场存在免疫失败导致 PRV

发生的情况。加强对 PRV 疫苗免疫抗体和野毒感染抗体

检 测 , 对 于 猪 场 中 的 猪 伪 狂 犬 病 防 控 意 义 重 大 。

PRV-gE 检测方法不受 PRV-gE 疫苗免疫抗体的影响,

能够特异性地检测出猪 PRV 抗体来自 gE 疫苗免疫和野

毒感染[6]。本研究对 2020—2022 年期间采集自河南襄县

65 家猪场的 1 085 份血样,按年份、猪场、猪群生长阶

段进行分组,并利用 gE-ELISA 法分别调查分析猪伪狂

猪病防控 Swine Disease

Prevention and Control

93

第100页

China Swine Industry

2023 年 第 6 期

犬病病毒野毒流行情况,旨在了解 PRV 野毒流行现状,

为今后更好地净化和防控猪伪狂犬病提供临床资料。

1 材料与方法

1.1 血清样品

2020 年 1 月至 2022 年 12 月,对襄县部分猪场

(所有被检测猪群均用 PRV-gE 基因缺失弱毒疫苗免疫

接种) 进行无菌前腔静脉采集全血,2~3 mL/ 头,共

1 085 份,室温静置 2 h,5 000 rpm 离心 5 min,收集

上清液于离心管,-20℃保存。标记每份血样的猪场来

源、生产阶段等信息。

1.2 检测试剂盒

PRV-gE ELISA 抗体检测试剂盒,美国 IDEXX 公司

生产。

1.3 检测方法

血清样品检测步骤按照 PRV-gE ELISA 抗体检测试

剂盒说明书操作,主要包括加样、孵育、洗板、标记抗

PRV-gE 抗体、显色反应和终止反应、吸光度测量等程

序。结果判定标准:血清样品 S/N (样本值 / 阴性值)

≤0.60 为阳性,S/N>0.70 为阴性,若 0.6<S/N≤0.7

时,判定为可疑,需重新检测。

1.4 统计分析

Excel 初步整理试验数据后,利用 SPSS 19.0 统计

软件对组间数据进行 χ2 检验, <0.05 为差异显著。

2 结果与分析

2.1 2020要2022 年河南襄县部分猪场 PRV-gE

抗体检测结果

对 河 南 襄 县 65 家 猪 场 1 085 份 血 清 样 品 进 行

PRV-gE ELISA 抗体检测,结果显示,猪场平均阳性率

为 53.85%,血清样品平均阳性率为 22.30%。从 3 年的

检测数据可见,PRV 野毒感染的猪场阳性率和血清样品

阳性率均表现出逐年下降的趋势。见表 1。

2.2 2020要2022 年河南襄县不同生长阶段猪群

PRV-gE 抗体检测结果

2020—2022 年按照种公猪、后备母猪、妊娠母猪、

哺乳仔猪、保育猪、育肥猪不同生产阶段进行 PRV-gE

抗体检测。结果显示,不同猪群 PRV-gE 抗体阳性率介

于 17.65%~34.44%,妊娠母猪阳性率最高,保育猪最

低。除哺乳仔猪外,其他阶段猪群 PRV-gE 抗体阳性率

呈逐年下降趋势。哺乳仔猪 gE 抗体阳性率为 18.75%,

下降到保育阶段的 17.65%。表明在这个阶段随着时间

延长而母源抗体的降低,成为伪狂犬病野毒再次感染的

高发阶段。经 χ2 检验分析,2020—2022 年不同阶段猪

群间的 PRV-gE 抗体阳性率差异不显著 ( >0.05)。见

表 2。

2.3 2020要2022 年河南襄县部分猪场 PRV 野

毒感染阳性率区间分布

对 65 家猪场按照 0、0~25%、25%~50%、50%

表1表 32020不同剂量的益生菌制剂对仔猪血清免疫指标的影响 要2022年河南襄县部分猪场PRV-gE抗体检测结果

年份 被检猪场/家 阳性猪场/家 猪场阳性率/% 被检血清/份 阳性血清/份 血清阳性率/%

2020 年 17 13 76.47 285 74 25.96

2021 年 22 12 54.55 372 82 22.04

2022 年 26 10 38.46 428 86 20.09

表表2 32020不同剂量的益生菌制剂对仔猪血清免疫指标的影响 要2022年河南襄县不同生长阶段猪群PRV-gE抗体阳性率 渊%冤

年份 种公猪 后备母猪 妊娠母猪 哺乳仔猪 保育猪 育肥猪

2020 年 25.71(9/35) 22.37(17/76) 38.46(15/39) 16.67(12/72) 19.23(10/52) 25.00(11/44)

2021 年 25.53(12/47) 18.96(11/58) 34.78(16/46) 24.68(19/77) 19.15(9/47) 22.39(15/67)

2022 年 22.97(17/74) 16.67(16/96) 31.82(21/66) 15.38(14/91) 13.51(5/37) 21.31(13/61)

猪病防控 Swine Disease

Prevention and Control

94

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