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益生菌，又称微生态调节剂，是指一类能够在生物

体内存活，对宿主生命健康有益的微生物。益生菌的本

质是细菌微生物，是一种新型、无公害、绿色、非营养

性饲料添加剂[1]。益生菌一词最早源于希腊[2]，1907 年，

Elie Metchnikoff 博士发现一些细菌能在动物体内发挥积

极作用，可通过某些方法使益生菌替代有害菌，进而改

善动物机体内的菌群结构。直至 1965 年，Lilley 等[3]提

出了“Pobiotics”概念。1974 年，蒙哈德通过在仔猪日

粮中添加乳酸菌，证实了乳酸菌能够促进仔猪生长。美

国最早从 20 世纪 70 年代开始将益生菌应用于畜禽养殖，

1989 年，美国食品与药物管理局和美国饲料控制官员协

会公布了确认安全的、可直接饲喂的 42 种微生物菌种。

20 世纪 80 年代中期，益生菌在全世界，特别是欧洲、亚

洲等区域内的发达国家中得到大力推广和广泛研究。

近年来，益生菌在我国畜禽养殖过程中的使用越来

越多，尤其是在减抗限抗和环保政策的实施以及市场行

情波动等巨大压力下，益生菌作为具有潜在的替抗功

能、改善养殖环境[4]、防病保健、提高生产性能等用途

的产品，越来越受行业青睐。益生菌在畜禽养殖过程中

的应用形式也表现出明显的多样化，如发酵床菌制剂、

益生菌发酵饲料、益生菌发酵中药、环境改良剂、除臭

剂等。因此，面对功能如此多样的益生菌产品，让广大

养殖户正确认识、选择和合理使用益生菌是十分必要的。

饲用益生菌大致可分为乳酸菌、芽孢杆菌、酵母菌

和光合菌 4 大类[5]。比较经典的微生态制剂产品是由日

本琉球大学教授比嘉照夫研制的 EM 菌制剂，它是由光

合菌、酵母菌和乳酸菌等 10 属 80 余种微生物复合培养

而成，具有增强免疫力、促进动物生长发育、改善养殖

环境、无毒副作用、无残留等优点，在世界各地被广泛

应用。

1 益生菌作用机制

益生菌主要是在动物肠道内与机体正常菌群相互作

用、共同生存，其竞争、拮抗、协同等作用机制复杂，

目前研究认为其作用机理主要有以下 6 点。

1.1 补充体内优势菌群

在动物肠道微生物系统内，优势菌群控制着动物体

内菌群的平衡，一旦优势菌群平衡被破坏，肠道机能就

会出现紊乱。如肠道内的优势菌群 99%以上是厌氧菌，

如乳酸杆菌、双歧杆菌等，需氧菌及兼性厌氧菌只有

1%。这些肠道优势菌群在维持动物消化道菌群微环境平

衡中起着非常重要的作用，一旦这些菌群失衡或减少，

很大程度上会引起机体功能紊乱。研究发现，腹泻时厌

氧菌数量显著降低，需氧菌数量增加。

1.2 生物夺氧作用

厌氧菌是畜禽肠道中的主要微生物，动物肠道菌群

平衡被破坏时，肠道内氧气含量增加，补充需氧型或兼

性厌氧型的益生菌制剂可使肠道内的含氧量降低。这些

菌群通过生物夺氧的方式使动物机体消化道恢复正常的

厌氧环境，从而帮助机体恢复到原来的优势菌群结构和

肠道环境。

1.3 参与生物化学防御屏障

益生菌进入畜禽肠道后，与肠黏膜上皮细胞作用而

紧密结合，和肠道其他厌氧菌共同形成一道生物化学防

护屏障，有效增强肠道上皮细胞的防御机能，不仅可以

抑制和清除一些肠上皮细胞粘附的有害物质和致病菌，

促进其排出体外，还能刺激机体免疫系统，增强免疫屏

障和机体抵抗力。

1.4 产生有益代谢产物

一些益生菌进入机体后，在其生长繁殖过程中可产

生一系列代谢产物，如酶类、有机酸、维生素和肽类物

质等，产生的消化酶能够有效地促进机体对营养物质消

化吸收；产生有机酸，如乳酸、醋酸、丁酸等可降低肠

道 pH 值，抑制有害菌生长，激活胃蛋白酶原转化为胃

蛋白酶，加强肠道蠕动和消化吸收。

1.5 免疫作用

益生菌也可作为动物机体的非特异性免疫调节因

子，通过益生菌自身或其细胞壁结构成分等激活宿主的

免疫细胞，产生促分裂因子，增强吞噬细胞的活性或发

挥佐剂功能，此外，益生菌还可以在动物机体内发挥特

异性免疫功能，激活 B 细胞产生抗体。研究证明，肠道

菌群的平衡有助于机体免疫器官发育成熟，肠道菌群紊

Husbandry and Forage 饲养饲料

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乱时能够引起免疫器官发育受阻，机体免疫力降低[6]。

1.6 改善畜禽肠道微环境袁 降低有害气体浓度

益生菌中的某些菌属可以利用消化道内的氨、胺及

吲哚等有害物质，同时抑制大肠杆菌和沙门氏菌活性，

减少蛋白质成分向胺及氨的转化，使肠内的粪便和血液

中的氨浓度下降，减少动物体产生的氨气。肠道内大量

的活性益生菌也可以利用氨，如枯草芽孢杆菌在畜禽肠

道产生氨基氧化酶、氨基转移酶和分解硫化物酶，可将

臭源吲哚化合物氧化，产生的分解硫化物酶可将硫化物

氧化成无臭、无毒害的物质，有效降低畜禽血液及粪尿

中有害气体浓度，改善畜禽舍的养殖环境。

2 益生菌在畜禽养殖中的应用

肠道是动物体内最大的微生物聚集区，存活着

1013～1014 个微生物，构成一个复杂的生态系统。肠道微

生物附着于肠黏膜和其他相关黏膜层以及肠腔内流动食

糜中，在促进机体对营养物质的消化吸收、免疫系统发

育成熟、抗有害菌定植和维护肠道健康等环节中起着重

要作用。

2.1 益生菌在猪营养中的应用

2.1.1 在仔猪方面的应用

肠道微生物是肠道防御屏障的重要组成部分，对于

新生仔猪，肠道微生物在宿主发育过程中发挥着重要作

用[7]。给仔猪补充益生菌可以调节仔猪胃肠道微生物群

平衡和增强免疫系统功能，还可以调节肠道发育和营养

物质消化吸收。小肠绒毛高度 / 隐窝深度是衡量猪消化

吸收能力的重要标准，其比值下降表明黏膜损伤，消化

吸收能力降低[8]，Yu 等[9]发现仔猪日粮中添加乳酸杆菌

可以显著增加断奶仔猪回肠绒毛高度 / 隐窝深度值。唐

伟等[10]给仔猪口服益生菌后，发现对仔猪黄白痢有很好

的预防效果，陈丽仙等[11]在仔猪日粮中添加益生菌，结果

发现显著降低了仔猪腹泻率，提高了仔猪的生长速度。

2.1.2 在母猪方面的应用

研究表明，母猪日粮中添加益生菌对母猪免疫力和

繁殖能力具有显著改善。研究发现，初产母猪日粮中添

加枯草芽孢杆菌能够缓解霉菌毒素造成的氧化损伤和细

胞凋亡。任红立[12]在妊娠母猪后期日粮中添加乳酸菌和

酵母菌，发现可以促进母猪妊娠后期胎儿生长，显著提

高母猪生产性能，增强母猪血浆脂质代谢、抗氧化能力、

机体免疫力、改善母乳的营养水平等。吴桂心[13]发现在

母猪日粮中添加 4%的酵母培养物，可显著提高哺乳母

猪泌乳量和乳品质，有效提高哺乳仔猪的生长性能，同

时改善妊娠后期母猪肠道的微生物多样性，缓解母猪便

秘，提高母猪生产性能。杨刚等[14]发现益生菌对改善泌

乳母猪便秘，提高采食量，减少背膘损失和提高生产性

能方面具有显著作用。

2.1.3 在育肥猪方面的应用

益生菌被广泛用于提高育肥猪的采食量和肠道保健

等。临床应用后发现，可以有效维护猪群消化道菌群平

衡，提高育肥阶段饲料利用率和猪群生长速度，增强机

体免疫力，改善猪肉品质。猪肉品质一般通过猪肉颜色、

pH 值、嫩度、多汁性、风味和营养价值等指标进行评

定。Meng 等[15]在猪日粮中添加枯草芽孢杆菌和丁酸梭

菌，结果发现，能够提高育肥猪肉品质，极显著提高肉

色评分、大理石花纹评分和肉的红度。邬理洋[16]采用复

合益生菌饲喂育肥猪，结果发现，提高了猪肉眼肌面积

和熟肉率，猪肉滴水损失显著改善，肌内脂肪含量显著

增加，肌肉中必需氨基酸、风味氨基酸和总氨基酸含量

显著提高。

2.2 益生菌在家禽养殖中的应用

2.2.1 在蛋鸡方面的应用

益生菌能够改善蛋鸡肠道健康及生产性能，提高产

蛋率、蛋重、蛋壳厚度、蛋料比和饲料利用率等。杨亚

军等[17]发现益生菌可提高蛋鸡生产性能和蛋品质，降低

料蛋比和死淘率，提高产蛋率和蛋壳厚度。高晗[18]在绿

壳蛋鸡日粮中添加丁酸梭菌，发现对绿壳蛋鸡初产蛋的蛋

品质有提升作用，同时可增强机体对沙门氏菌的抵抗力。

2.2.2 在肉鸡方面的应用

益生菌可改善肉鸡生长性能，提高饲料利用率，增

强免疫力，改善舍内环境。李卫芳等[19]在饲喂 1 日龄肉

鸡饲料中添加枯草芽孢杆菌后，发现肉鸡盲肠和空肠中

大肠杆菌的数量显著减少，乳酸菌数量显著增加。冷寒

冰等[20]研究发现在 3 日龄的 AA 肉鸡饲粮中添加益生菌，

可使肉鸡生长速率加快，饲料利用率提高，料肉比下降，

饲养饲料 Husbandry and Forage

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渊下转第 51页冤

出栏平均重增加，出栏日期提前，鸡群整齐度明显改善。

王佰魁等[21]采用植物乳杆菌等提高肉鸡巨噬细胞吞噬能

力，改善肉鸡肠道菌群结构，抑制产气夹膜梭菌的生长

和毒力基因表达，降低产气夹膜梭菌感染引起的不良反

应。鞠孜敬[22]在肉鸡日粮中添加丁酸梭菌，结果发现，

丁酸梭菌可降低肉鸡料肉比，可减少肉鸡感染肠炎沙门

氏菌。王学静[23]等采用益生菌喷洒鸡舍，发现鸡舍内氨

气浓度平均降低 50%。

2.3 益生菌在反刍动物方面的应用

大量研究发现，益生菌饲喂反刍动物可提高其采食

量、改善“过料”现象、提高生产性能、增强机体免疫

力等。董晓丽等[24]给犊牛饲粮中添加益生菌，发现能够

增加其日增重，改善犊牛腹泻情况。Castro 等[25]研究发

现，益生菌能够调节犊牛胃肠道微生物区系，提高其免

疫力。

2.4 益生菌在水产方面的应用

益生菌应用于水产养殖，一方面可作为饲料添加

剂，用于改善水产动物体内菌群平衡，刺激免疫系统发

育成熟，促进生长发育，预防病害；另一方面可作为水

质改良剂，分解养殖水体中富含的有机物、含硫化合

物、氨氮等，发挥改良水体和调控水质的作用。20 世纪

60 年代，日本学者小林正泰发现了光合菌，可有效净化

有机废水，开始了采用光合菌处理污水的模式。随着光

合菌规模培养生产工艺的发展，光合菌逐渐实现了大规

模生产和广泛应用[26]。林东年等[27]在罗非鱼养殖过程中

添加光合菌，发现其可以有效抑制水体异养菌生长，降

低水体化学需氧量、氨氮含量、改善养殖水体溶氧量、

酸碱度、透明度、氮含量等指标，提高养殖水体水质。

3 小结

目前，益生菌是畜禽养殖中常用的安全、绿色、环

保、无毒害的饲料添加剂，是潜力巨大的替抗产品之

一。益生菌能够有效降低畜禽使用抗生素的频率，具有

提高饲料利用率，改善动物生长性能，增强动物免疫

力，减少疾病的发生等特点。但是，市场上益生菌产品

存在质量参差不齐、效果不显著、用量不明确、稳定性

差等问题。因此，如何有效控制益生菌产品质量稳定性，

提高临床应用效果的可靠性是行业发展中亟待解决的问题。

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Husbandry and Forage 饲养饲料

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2023 年 第 5 期

DOI：10.16174/j.issn.1673-4645.2023.05.010

收稿日期：2022-12-15

作者简介：梁耿 （1974-），男，广西来宾人，本科，中级兽医师，主要从事畜牧兽医技术工作

发酵桑叶对育肥猪生长性能的影响

梁 耿 谭德强

渊广西来宾市象州县畜牧站袁 广西来宾 545800冤

摘 要院 本试验旨在研究不同添加水平的发酵桑叶对育肥猪生长性能的影响袁 并确定发酵桑叶在育肥猪饲料中最适的添加水

平遥 试验选择 32 头体重约为 75 kg 的 野杜伊长伊大冶 三元杂交育肥猪袁 随机分成 4 个处理组袁 每组 8 头育肥猪遥 各组育肥

猪分别饲喂含有 0%尧 4%尧 8%及 12%发酵桑叶的试验饲料袁 饲喂期 60 d遥 试验结束袁 检测各组育肥猪的生长性能遥 结果表

明袁 育肥猪饲料中添加 4%和 8%的发酵桑叶对其试验末体重尧 平均日增重尧 平均日采食量及料重比未产生显著影响 渊 跃

0.05冤曰 而育肥猪饲料中添加 12%的发酵桑叶后袁 试验末体重比对照组显著降低 渊 约0.05冤袁 平均日增重也显著减少 渊 约

0.05冤袁 料重比则显著升高 渊 约0.05冤遥 研究表明袁 饲料中添加低于 8%的发酵桑叶未对育肥猪的生长性能产生不利影响遥

关键词院 发酵桑叶曰 生长性能曰 育肥猪曰 生猪

中图分类号院 S828曰S816.4 文献标识码院 A 文章编号院 1673-4645(2023)05-0048-04

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The Effect of Fermented Mulberry Leaves on the Growth Performance of Fattening

Pigs

LIANG Geng, TAN Deqiang

(Animal Husbandry Station in Xiangzhou County, Laibin City, Guangxi 545800, China)

Abstract: The aim of this experiment was to investigate the effects of different levels of fermented mulberry leaves on the growth performance of fattening pigs, and to determine the optimal level of added fermented mulberry leaves in the feed for fattening pigs. Thirty-two

\"Duroc×Landrace×large\" ternary hybrid fattening pigs with a body weight of 75 kg were randomly divided into 4 treatment groups with

8 fattening pigs in each group. Each group of fattening pigs were fed experimental feed containing 0%, 4%, 8%, and 12% fermented

mulberry leaves for 60 days. At the end of the experiment, the growth performance of each group of finishing pigs was tested. The results showed that the addition of 4% and 8% fermented mulberry leaves to the feed for fattening pigs did not have a significant impact

on their final body weight, average daily gain, average daily feed intake, and feed to weight ratio ( ＞0.05); After adding 12% fermented

mulberry leaves to the feed for fattening pigs, the body weight at the end of the experiment significantly decreased compared to the

control group ( ＜0.05), and the average daily weight gain also significantly decreased ( ＜0.05), while the feed to weight ratio significantly increased ( ＜0.05). The research had shown that adding less than 8% fermented mulberry leaves to feed has no adverse effect

on the growth performance of fattening pigs.

Key words: fermented mulberry leaves; growth performance; fattening pig; pigs

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随着我国养殖业的规模化程度逐渐扩大，部分饲料

原料出现紧缺现象，尤其是蛋白饲料原料的紧缺日益严

重，豆粕等饲料严重依赖进口，因此，开发利用非常规

饲料资源尤为重要[1,2]。我国桑叶资源丰富，桑叶中富含

多种营养物质，如氨基酸、维生素、微量元素等，其中

粗蛋白含量可达 35%左右，对于养殖业是一种重要的非

常规蛋白饲料原料[3,4]。桑叶中不仅含有营养物质，也富

含大量的活性物质，如多糖、生物碱、多酚等。桑叶中

的生物活性成分具有降脂、抗氧化、抗应激、调节免疫

等作用[5,6]。大量研究结果表明，桑叶在动物养殖生产中

使用，可以提高机体的抗应激能力、免疫力及抗氧化能

力，进而改善动物的生产性能[7-9]。但桑叶中含有的单宁

使动物机体对饲料中养分的消化吸收受到抑制，使得桑

叶在动物生产中的添加量不高。为解决上述问题，可以

将桑叶进行发酵处理，不仅可以降低桑叶中抗营养因子

单宁的含量，也可以提高桑叶中粗蛋白含量，进而提高

桑叶在动物饲料中的添加水平[10]。目前，发酵桑叶在育

肥猪生产中的应用研究比较少见。因此，本试验以

“杜×长×大”三元杂交育肥猪为研究对象，探讨不同

水平的发酵桑叶对育肥猪生长性能的影响，为发酵桑叶

可以高效地在育肥猪生产中进行推广与利用提供参考。

1 试验材料与方法

1.1 发酵桑叶

将鲜桑叶切短至约 2 cm，与麸皮按照 6∶4 的比例

混匀，水分约为 65%，使用地衣芽孢杆菌发酵。经测定

发 酵 桑 叶 的 粗 蛋 白 含 量 为 35.5% ，粗 脂 肪 含 量 为

3.18%，粗纤维含量为 13.80%，钙含量为 2.83%，磷含

量为 0.68%。

1.2 试验设计

试验选择 32 头体重约为 75 kg 的“杜×长×大”

三元杂交育肥猪，随机分成 4 个处理组，每组 8 头育肥

猪。各组育肥猪分别饲喂含有 0%、4%、8%及 12%发

酵桑叶的试验饲料，饲喂期 60 d。试验结束，检测各组

育肥猪的生长性能。试验各组育肥猪饲料按照 NRC

（2012） 猪营养需要标准配制，各组饲料配方见表 1。

1.3 饲养管理

试验开始前使用“卫可”对养殖猪舍消毒处理，7 d

后进行养殖试验。养殖期间，育肥猪自由采食，供水不

间断。育肥猪日常驱虫与免疫按照养殖场日常管理规定

进行。

1.4 生长性能的测定

试验第 1 d 和第 60 d，晨饲前，称量所有育肥猪空

腹体重。统计试验期间各组育肥猪的采食量，用于计算

分析平均日采食量、平均日增重及料重比。

2 试验结果

不同水平的发酵桑叶对育肥猪生长性能的影响见表

2，育肥猪饲料中添加 12%的发酵桑叶后，试验末体重

和平均日增重较对照组显著降低 （ ＜0.05），而料重比

则显著升高 （ ＜0.05），表明饲料中添加 12%的发酵桑

叶显著降低了育肥猪的生长性能。

3 讨论

桑叶中不仅含有丰富的营养物质，而且含有有效的

活性成分，既可以为动物机体提供营养物质，也可以提

高动物机体的代谢功能。本试验中，育肥猪饲料中添加

4%和 8%的发酵桑叶对育肥猪的体重、采食量及料重比

均未产生显著性影响；而添加 12%的发酵桑叶则降低了

育肥猪的试验末体重、平均日增重，提高了料重比，对

生长性能产生显著的不利影响。肖建中[11]等发现在黑山

羊的饲粮中添加 15%～20%的桑叶可以提高黑山羊的生

长性能、肉品质，增强机体的抗氧化性能，并调节机体

的营养代谢。吕金凤等[12]研究发现，在育肥猪生产中添

加 10%和 15%的桑叶粉，可以改善育肥猪的肉品质，添

加 10%的桑叶粉对其生长性能未产生显著的不利影响。

崔艺燕等[13]研究表明，在育肥猪生产中使用 10%的发酵

桑叶对其生长性能未产生负面影响，且提高了机体的抗

氧化性能及免疫力，并改善了血液代谢功能[14]。以上研

究均表明，在动物生产中可以使用适量的桑叶或发酵桑

叶替代常规饲料原料，这样不仅可以降低养殖成本，缓

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解饲料资源紧缺，而且一定的添加量可以提高育肥猪的

生产性能。本研究建议在育肥猪生产中根据实际养殖阶

段可以适量添加发酵桑叶，缓解饲料原料紧缺问题[15,16]。

4 结论

本研究中，在育肥猪饲料中添加 4%和 8%的发酵桑

叶对育肥猪的体重、采食量及料重比均未产生显著性影

响；而添加 12%的发酵桑叶则降低了育肥猪的试验末体

重、平均日增重，提高了料重比，对生长性能产生显著

的不利影响，因此，建议在育肥猪养殖生产中发酵桑叶

的添加量不宜超过 8%。

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生猪高效养殖中的应用策略[J]. 中国猪业, 2022, 17(2):17-23.

表 3 不同剂量的益生菌制剂对仔猪血清免疫指标的影响 表 1 各组育肥猪饲料的营养组成

原料 对照组/% 4%发酵桑叶组/% 8%发酵桑叶组/% 12%发酵桑叶组/%

玉米 68.82 66.77 65.7 65.61

豆粕 16 15 14 12

麸皮 10 9 7 5

发酵桑叶 0 4 8 12

豆油 2 2 2 2

磷酸氢钙 0.83 0.83 0.83 0.83

石粉 0.65 0.65 0.65 0.65

食盐 0.32 0.32 0.32 0.32

赖氨酸 0.32 0.34 0.37 0.4

蛋氨酸 0.06 0.09 0.13 0.19

预混料①

1 1 1 1

合计 100 100 100 100

营养水平②

消化能/（MJ/kg） 14.50 14.48 14.45 14.43

粗蛋白/% 16.84 16.8 16.76 16.70

粗脂肪/% 4.21 4.19 4.17 4.16

钙/% 0.63 0.64 0.64 0.65

磷/% 0.63 0.64 0.66 0.67

注：①预混料为每千克日粮提供：维生素 A 6 300 IU，维生素 D 1 800 IU，维生素 E 100 mg，维生素 B1 2 mg，维生素 B2 5 mg，维生素 B12

0.04 mg，烟酸 55 mg，泛酸 10 mg，生物素 0.5 mg，铁 75 mg，铜 12 mg，锰 40 mg，锌 78 mg，锰 35 mg，硒 0.3 mg，碘 0.35 mg；

②营养成分含量为计算值。

表 32 不同剂量的益生菌制剂对仔猪血清免疫指标的影响 不同添加水平的发酵桑叶对育肥猪生长性能的影响

指标 对照组 4%发酵桑叶组 8%发酵桑叶组 12%发酵桑叶组 总标准误 P 值

试验初重/kg 75.12 75.20 75.10 75.16 3.19 0.839

试验末重/kg 120.39 119.50 118.96 117.3*

5.27 0.043

平均日增重/kg 0.75 0.74 0.73 0.7*

0.09 0.039

平均日采食量/kg 2.48 2.49 2.51 2.52 0.19 0.518

料重比 3.31 3.36 3.44 3.6*

0.25 0.038

注：数据被标注“*”表示与对照组相比，具有显著性差异 （ ＜0.05）。

饲养饲料 Husbandry and Forage

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Husbandry and Forage 饲养饲料

51

China Swine Industry

2023 年 第 5 期

DOI：10.16174/j.issn.1673-4645.2023.05.011

不同添加量的复合有机酸

对仔猪养分表观消化率的影响

宋鑫伟

渊缙云县畜牧兽医发展中心袁 浙江丽水 323000冤

摘 要院 本试验旨在研究不同剂量的复合有机酸对仔猪养分表观消化率的影响袁 并确定复合有机酸在仔猪生产中的最适添加

水平遥 试验选择 35 日龄尧 体重相近尧 健康的三元杂交仔猪 200 头袁 随机分成 4组袁 每组 50 头遥 各组仔猪依次分别饲喂含

有 0 渊对照组冤尧 0.15% 渊0.15%组冤尧 0.3% 渊0.3%组冤 及 0.45% 渊0.45%组冤 复合有机酸的日粮袁 饲养期 30 d遥 试验结

束前 3 d 采集粪样检测各组仔猪的养分表观消化率遥 结果表明袁 与饲喂未添加复合有机酸的仔猪相比袁 饲喂 0.3%和 0.45%

的复合有机酸可以显著提高仔猪机体对干物质尧 粗脂肪及粗纤维的表观消化率 渊 约0.05冤曰 饲喂 0.15%尧 0.3%尧 0.45%的

复合有机酸可以显著提高仔猪机体对粗蛋白的消化率 渊 约0.05冤袁 且饲喂 0.45%复合有机酸的仔猪对粗蛋白的消化率显著

高于0.15%和 0.3%的复合有机酸组 渊 约0.05冤遥 研究表明袁 在仔猪养殖中饲喂适量的复合有机酸可以有效提高机体对饲料

中养分的消化吸收利用率袁 考虑养殖成本袁 复合有机酸的最适添加水平为 0.3%遥

关键词院 仔猪曰 生长性能曰 复合有机酸曰 表观消化率

中图分类号院 S828曰S855.2 文献标识码院 A 文章编号院 1673-4645(2023)05-0052-03

开放科学渊资源服务冤标识码渊OSID冤袁扫一扫袁了解文章更多内容

抗生素的过量使用和滥用导致动物机体耐药性及食

品安全问题日益严重[1,2]。近年来，有机酸作为一种安全、

高效、天然绿色的饲料添加剂在替代抗生素方面有着广

阔的应用前景[3-5]。有机酸结构中含有羧基，主要由饱和

脂肪酸和含有羟基或不饱和化学键的脂肪酸组成，单一

有机酸的生物学功能及作用效果有限，且不同类型的有

机酸效果不同[6]。有机酸的功能较多，目前已经发现的

有保护动物脏器、提高动物食欲、增强消化、改善肠道

微生物菌群、抗炎、抗肿瘤等功能[7]。此外，有机酸作

为饲料添加剂不仅可以调节饲料的系酸力，改善饲料品

质；还能够在被动物采食进入肠道后，降低肠道 pH 值、

刺激消化酶分泌、改善肠道健康，从而提高动物机体的

免疫力、改善动物的生产性能和畜产品的品质[8,9]。在畜

禽养殖生产中，大多饲料配方中均会添加一定量的有机

酸，复合有机酸与单一有机酸相比，其生物学功能和效

果更好，更利于动物机体的消化吸收，生物学效价也更

高[10,11]。一些研究结果表明，复合有机酸可以提高动物

采食量、增强消化水平、改善肠道微生物菌群等，使畜

禽保持良好的生长性能和繁殖性能[12,13]。

当前，复合有机酸在提高畜禽生产性能和产品品质

方面的报道较多，但对仔猪养分表观消化率方面的研究

相对较少。因此，本试验研究不同剂量的复合有机酸对

仔猪养分表观消化率的影响，为复合有机酸科学、合理、

高效地应用于生猪养殖中提供数据参考。

1 试验材料和方法

1.1 复合有机酸

本试验使用的复合有机酸主要由甲酸、乳酸和月桂

酸组成，其中甲酸≥30%、乳酸≥20%、月桂酸≥10%，

收稿日期：2022-11-24

作者简介：宋鑫伟 （1988-)，男，汉族，浙江缙云人，本科，助理畜牧师，研究方向为畜禽养殖技术在基层的推广应用

饲养饲料 Husbandry and Forage

52

China Swine Industry

2023 年 第 5 期

其余为二氧化硅。

1.2 试验设计

试验选择 35 日龄、体重相近、健康的三元杂交仔

猪 200 头，随机分成 4 组，每组 50 头仔猪。各组仔猪

依次分别饲喂含有 0 （对照组）、0.15% （0.15%组）、

0.3% （0.3%组） 及 0.45% （0.45%组） 复合有机酸的日

粮，饲养期 30 d。试验结束前 3 d 采集粪样检测各组仔

猪的养分表观消化率。试验设计见表 1，仔猪的基础饲

料组成和营养成分见表 2。

1.3 仔猪的饲养方案

试验开始前，对养殖场地及设备进行清扫和消毒。

试验期间保证仔猪自由采食和自由饮水。仔猪的驱虫和免

疫按照养殖场日常管理规范进行。由专人对试验仔猪进行

饲养管理，每天仔细观察仔猪的健康状态及腹泻情况。

1.4 养分表观消化率的检测

试验结束前 3 d 进行消化试验，每天收集仔猪粪便

约 200 g/ 头，加入 10%硫酸固氮，65℃烘干，粉碎备

用。断奶仔猪对饲料养分的消化率采用内源指示剂酸不

溶性灰分法测定[14]，根据张丽英[15]的研究方法检测饲料

中的钙、磷、粗蛋白、粗脂肪等营养物质的含量，计算

公式为：某营养物质表观消化率 （%） ＝100－ （粪中该

营养物质含量×饲粮中盐酸不溶灰分含量） ÷ （饲粮中

该营养物质含量×粪中盐酸不溶灰分含量） ×100%。

1.5 数据分析

仔猪养分表观消化率的数据使用 SPSS 20.0 统计分析

差异显著性， ＜0.05 为显著性差异，结果以平均值表示。

2 结果与分析

由表 3 可知，与对照组相比，添加 0.3%和 0.45%

复合有机酸组仔猪对干物质、粗蛋白、粗脂肪及粗纤维

的表观消化率较对照组有显著提高 （ ＜0.05），0.45%

组仔猪的粗蛋白表观消化率与对照组相比差异极显著

（ ＜0.01），其中干物质的表观消化率分别提高了 4.83

个百分点和 5.84 个百分点，粗蛋白的表观消化率分别提

高了 4.42 个百分点和 5.51 个百分点，粗脂肪的表观消

化率分别提高了 7.36 个百分点和 8.95 个百分点，粗纤

维的表观消化率分别提高了 3.11 个百分点和 5.31 个百

分点；添加 0.3%组和添加 0.45%组仔猪之间在干物质、

粗脂肪、粗纤维、粗灰分、钙、磷等的表观消化率均差

异不显著 （ ＞0.05）。饲喂 0.15%组仔猪对干物质、粗

蛋白、粗脂肪、粗纤维等的表观消化率较对照组差异不

显 著 （ ＞0.05）。此 外，添 加 0.15%组 、0.3% 组 、

0.45%组复合有机酸的仔猪与对照组仔猪相比，其粗灰

分、钙、磷的表观消化率均表现差异不显著 （ ＞0.05）。

3 讨论

养分表观消化率可以反映动物机体对饲料中养分的

消化吸收情况，也是反映动物机体健康及生长性能的重

要指标。本试验中，与未添加复合有机酸相比，仔猪饲

料中添加 0.3%和 0.45%的复合有机酸可以显著提高机

体对干物质、粗蛋白、粗脂肪及粗纤维的表观消化率；

仔猪饲喂 0.15%、0.3%、0.45%的复合有机酸可以提高

机体对粗蛋白的消化率，且饲喂 0.45%复合有机酸的仔

猪对粗蛋白的消化率显著高于 0.15%和 0.3%的复合有

表1 试验分组及处理

组别 处理

对照组 基础饲料

0.15%组 基础饲料＋0.15%复合有机酸

0.3%组 基础饲料＋0.3%复合有机酸

0.45%组 基础饲料＋0.45%复合有机酸

表2 试验仔猪基础饲料组成和营养成分

日粮组成 含量/% 营养含量 含量/%

玉米 61.65 消化能/（MJ/kg） 13.56

豆粕 18.00 粗蛋白/% 18.05

麸皮 5.00 钙/% 0.84

胚芽粕 8.00 总磷/% 0.66

鱼粉 2.00 有效磷/% 0.42

豆油 1.30

食盐 0.33

DL-蛋氨酸 0.22

L-赖氨酸（98%） 0.33

磷酸氢钙 1.37

石粉 0.30

预混料 1.50

合计 100.00

Husbandry and Forage 饲养饲料

53

China Swine Industry

2023 年 第 5 期

机酸组，表明在仔猪养殖中使用适量的复合有机酸可以

显著改善机体的消化能力，且复合有机酸以 0.3%和

0.45%的添加量效果较好。李泽青等[16]研究发现，在仔

猪养殖中使用 0.3%的复合有机酸有效提高了机体对钙、

磷、粗脂肪及粗蛋白的消化吸收能力。于海霞等[7]研究

表明，在仔猪养殖中添加 0.1%的复合有机酸显著提高

了机体对干物质、粗脂肪、粗纤维及粗蛋白的消化率。

何荣香等[17]研究发现，在仔猪日粮和饮水中添加一定量

的复合有机酸使仔猪对粗蛋白、粗脂肪及粗纤维的消化

率有提高的趋势。以上研究结果与本研究结果类似，均

证明复合有机酸可以改善仔猪机体的消化吸收能力，这

可能是由于复合有机酸可以提高饲料的适口性，且刺激

仔猪肠道分泌各种消化酶，促进机体对饲料养分的消化

和吸收。

4 结论

本试验条件下，在仔猪养殖中添加适量复合有机

酸，可以有效提高仔猪机体对干物质、粗蛋白、粗脂肪

及粗纤维等养分的消化吸收和利用，考虑养殖成本因

素，复合有机酸的最适添加水平为 0.3%。

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表表3 3不同添加量的复合有机酸对仔猪养分表观消化率的影响 不同剂量的益生菌制剂对仔猪血清免疫指标的影响

指标 干物质/% 粗蛋白/% 粗脂肪/% 粗纤维/% 粗灰分/% 钙/% 磷/%

对照组 81.33b

79.66c

65.60b

35.52b

47.44 49.41 39.04

0.15%组 83.40ab 82.88bc 67.42ab 36.84b

48.05 49.94 40.13

0.3%组 86.06a

83.08b

72.96a

38.63a

48.18 50.40 41.03

0.45%组 87.17a

84.17a

74.55a

40.83a

18.73 50.83 41.16

总标准误 4.51 4.95 3.05 2.43 2.01 2.84 1.81

注：同列数据肩标字母不同相邻表示差异显著 （ ＜0.05），肩标字母不同相间表示差异极显著 （ ＜0.01），肩标字母相同或无字母表示差

异不显著 （ ＞0.05）。

饲养饲料 Husbandry and Forage

54

China Swine Industry

2023 年 第 5 期

DOI：10.16174/j.issn.1673-4645.2023.05.012

收稿日期：2023-04-12

作者简介：罗波文 （1991-），硕士，主要从事饲料营养研究与应用工作

* 通信作者：吴有林 （1978-)，高级畜牧师，主要从事饲料技术研究与应用工作

乳化剂卵磷脂在猪生产应用中的研究进展

罗波文 1 毛昌发 1 羊井铨 2 张 婷 2 康修田 3 丁能水 1,4 吴有林 1*

渊

1福建傲农生物科技集团股份有限公司/福建省生猪营养与饲料重点实验室袁 福建漳州 363000曰

2辽宁傲农饲料有限公司袁

辽宁沈阳 110000曰

3江西省泰和县农业农村局袁 江西泰和 330045曰

4江西农业大学/猪遗传改良与养殖技术国家重点实

验室袁 江西南昌 330045冤

摘 要院 油脂是动物营养中的一类重要营养物质袁 在畜禽生产中袁 合理利用油脂可提高畜禽的生产性能以及饲料利用率遥 尽

管油脂具有多种营养作用袁 但幼龄动物消化道发育不完善袁 胆汁酸和脂肪酶分泌不足袁 无法彻底消化吸收饲料中的油脂袁 多

余的油脂则被幼龄动物排出体外遥 而成年动物日粮中的油脂添加比例高袁 消化分解油脂所需要的胆汁酸远远超过畜禽机体内

能够分泌的量袁 无法彻底消化吸收油脂遥 乳化剂是一种表面活性剂袁 在饲料中添加乳化剂能够使油脂溶解在水中袁 大大提高

了饲料油脂的消化和吸收遥 卵磷脂是动植物组织及卵黄中的一种含磷脂类物质袁 作为一种优质的乳化剂袁 卵磷脂除了广泛应

用于食品行业外袁 还可以用于畜牧业袁 以显著提高动物的生长性能袁 增加机体对营养物质的吸收利用袁 提高动物生产的经济

效益遥 本文阐述了卵磷脂在猪生产中的应用进展袁 为相关的研究和生产提供理论依据遥

关键词院 油脂曰 卵磷脂曰 猪生产曰 应用效果

中图分类号院 S828曰S816 文献标识码院 A 文章编号院 1673-4645(2023)05-0055-04

开放科学渊资源服务冤标识码渊OSID冤袁扫一扫袁了解文章更多内容

Application of Emulsifier Lecithin in Pig Production

LUO Bowen1

, MAO Changfa1

, YANG Jingquan2

, ZHANG Ting2

, KANG Xiutian3

, DING Nengshui1,4, WU Youlin1*

(

1Fujian Key Laboratory of Swine Nutrition and Feed/Fujian Aonong Biological Technology Group Inc., Zhangzhou 363000, China; 2Liaoning Aonong Feed Co.,Ltd., Shenyang 110000, China; 3Taihe County Agricultural and Rural Bureau of Jiangxi Province, Taihe 343700,

China; 4State Key Laboratory of Pig Genetic Improvement and Production Technology, Jiangxi Agricultural University, Nanchang 330045,

China）

Abstract: Oils and fats were important class of nutrient in animal nutrition. Rational use of oils and fats in livestock and poultry production

could improve the production performance of livestock and poultry and the efficiency of feed utilization. Although oils and fats had many

nutritional functions, the digestive tract of young animals was not well developed, and the secretion of bile acids and lipases was insufficient, so that the oils and fats in the feed could not be completely digested and absorbed, and the excess oils and fats were excluded

Husbandry and Forage 饲养饲料

55

China Swine Industry

2023 年 第 5 期

近年来，随着猪遗传育种的快速发展，需要高能量

日粮来满足其营养需要。油脂是猪日粮中主要的能量来

源，直接在日粮中添加油脂则是最简单的补充日粮能量

的方法。因此，猪对油脂的消化和吸收对于能否达到最

大的生长潜力至关重要。动物小肠内的脂肪酶和胆汁酸

盐可以将日粮中的油脂乳化[1]，许多因素可能会影响动

物对脂质的消化，包括动物的年龄、遗传、脂肪酶活性、

微生物群状况以及饮食构成[2,3]。因此，补充外源性乳化

剂可有助于生猪对高能量饲料的消化吸收。本文阐述了

卵磷脂作为乳化剂在猪生产中的应用进展，为相关的研

究和生产提供理论依据。

1 卵磷脂的概述

1845 年，法国化学家在蛋黄中首次分离提取出卵磷

脂。其通常可以从动物体脏器、骨髓以及油料作物的种

子中获得[2,3]。目前商业化的卵磷脂主要是大豆卵磷脂，

大豆卵磷脂主要由 20%～21%的肌醇磷脂，19%～21%

的磷脂酰胆碱；8%～20%的磷脂酰乙醇胺和 5%～11%

的其他磷脂构成[4]。通过修饰或组合这些磷脂分子，可

以实现乳化的功能[1]。乳化剂可以降低液体表面张力，

增加单甘酯在肠道中的浓度并促进营养物质通过细胞膜

的运输，从而更好地吸收和利用营养物质[5]。此外卵磷脂

还具有抗氧化、强化脑部功能、预防血管疾病等功能[6]。

2 卵磷脂在猪生产中的应用

2.1 卵磷脂在断奶仔猪方面的应用

日粮中添加动物脂肪可以提高饲料转化率、平均日

增重，增加饲料的适口性以及减少仔猪的断奶应激[7,8]。

仔猪断奶时消化器官发育不成熟，对日粮中脂肪的消化

吸收效率低[9]，卵磷脂作为一种优质的乳化剂，能显著

提高仔猪对脂肪的消化能力，促进仔猪生长。Todorova

等[10]在断奶仔猪日粮中添加 1%的向日葵卵磷脂，发现

可以显著提高仔猪平均日增重以及显著降低血清胆固

醇。Mitchaothai 等[11]在野猪的仔猪日粮中添加 2.42%的

钙和 1.93%的卵磷脂，结果显示，添加高钙和卵磷脂可

以提高仔猪平均日增重和饲料转化效率，以及提高小肠

绒毛高度 / 隐窝深度的比例。Soares 等[12]研究发现，在

断奶仔猪日粮中添加 1 %的大豆卵磷脂并不影响脂肪的

消化率，但对不饱和脂肪酸的消化率有积极的影响。张

兆琴等[13]分别将 0%、0.25%、0.50%和 0.75%的大豆卵

磷脂添加到断奶仔猪日粮中，发现添加 0.5 %的卵磷脂

可以显著提高仔猪的日增重、平均日采食量和饲料转化

率。王远孝等[14]将 1.5 %的大豆卵磷脂添加到宫内发育

迟缓 （IUGR） 的仔猪代乳粉中，发现 IUGR 仔猪通过补

充大豆卵磷脂可显著提高空肠段、黏膜和非黏膜的绝对

和相对重量，且与正常体重猪相比无显著差异，可显著

提高空肠黏膜中的总抗氧化能力、谷胱甘肽过氧化物酶

和超氧化物歧化酶的活性，这表明大豆卵磷脂可缓解 IUGR 仔猪肠道黏膜中的氧化应激，以及降低 IUGR 仔猪

肠道黏膜中的热休克蛋白 70 的表达，缓解肠道黏膜的

损伤。

2.2 卵磷脂在生长育肥猪方面的应用

Meng 等[15]在育肥猪日粮中添加 0.4%的大豆卵磷

脂，结果发现，添加卵磷脂可以显著提高育肥猪皮下脂

肪的总不饱和脂肪酸含量和碘值，但对生长性能没有显

by young animals. However, the high proportion of oils and fats added to the diet of adult animals, the bile acid needed to digest and

decompose the oils and fats were far exceeds the amount that could be secreted in the body of livestock and poultry, and it cannot be

completely digested and absorbed. Emulsifier was a kind of surfactant. Adding emulsifier to the feed could dissolve oils and fats in water, which greatly improved the digestion and absorption of oils and fats. Lecithin was a kind of phospholipid-containing substance in

animal and plant tissues and yolk. As a high-quality emulsifier, in addition to being widely used in the food industry, it could also significantly improve the growth performance of animals in animal husbandry, increase the absorption and utilization of nutrients by the body,

and improve the economic benefits of animal production. This paper expounded the application progress of lecithin in pig production,

and provided theoretical basis for related research and production.

Key words: oils and fats; lecithin; pig production; application effect

饲养饲料 Husbandry and Forage

56

China Swine Industry

2023 年 第 5 期

著影响。王金合等[16]在育肥猪日粮中添加 0.4 %卵磷脂，

研究发现，添加卵磷脂可显著提高育肥猪的饲料转化率

以及肌肉的蒸煮损失，但不影响日增重、采食量、屠体

重和屠宰率等。Akit 等[17]在育肥母猪的日粮中添加 0.5

%的大豆卵磷脂，研究发现添加卵磷脂可以显著提高饲

料转化率，但对育肥母猪的日均采食量、日增重、屠宰

性能没有显著影响。Sun 等[18]分别在生长猪日粮中添加

0.1%的纯度为 60%和 97%大豆卵磷脂，研究表明，添

加大豆卵磷脂可以使生长猪的日增重和饲料转化率呈线

性增长，以及提高干物质、总能、氮的消化率和粪便乳

杆菌的数量。Akit 等[19]分别将 0、0.4%、2 %和 8 %的大

豆卵磷脂添加到育肥猪日粮中，结果发现添加卵磷脂可

以显著提高屠宰率，但对生产性能没有显著影响。Kim

等[20]分别将 0、2.5%和 5%的大豆卵磷脂添加到育肥猪

日粮中，研究发现，随着卵磷脂含量增加，育肥猪的日

增重和饲料转化率也逐渐增长，血清甘油三酯的含量也

升高，但血清总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇的含量呈

线性减少趋势。

2.3 卵磷脂在猪繁殖性能方面的应用

卵黄作为动物精液冷冻保护剂已被广泛用于动物精

液的冷冻保存[21,22]。但鸡蛋卵黄作为动物源卵磷脂，不

仅成分复杂而且还能与精液中的一种蛋白凝固酶发生作

用，不利于精子的生存[23]。而大豆卵磷脂富含卵磷脂和

低密度脂蛋白，已被证实能替代卵黄应用于动物精液冷

冻保存[24,25]。汪俊跃等[26]分别将高压均质处理后 1%、

2%、3%、4%、5%和 6%的大豆卵磷脂替代常规基础稀

释液中的卵黄 （20%），发现冷冻—解冻后添加 5%大豆

卵磷脂组的精子活力、活率、质膜完整率和顶体完整率

最高，显著高于对照组。刘鑫等[27]在猪精液的常规稀释

液中分别添加 0.3、0.6、0.9 g/L 的大豆卵磷脂，结果表

明，在 4℃下添加卵磷脂可以显著提高精子的有效存活

时间、总存活时间、精子质膜完整性和精子的活力，添

加 0.6 g/L 组的精子质量显著优于其他 2 组。在母猪上，

曹亚鸽等[28]在母猪妊娠 100 d 到产后 7 d 期间，每天在

饲料中补充 50 g 的大豆卵磷脂，结果发现，添加卵磷脂

可显著提高母猪的采食量，窝产活仔数、产健仔数。

3 小结

卵磷脂作为一种营养价值高且具有生物活性的功能

物质，已经成为人们日益关注的焦点。在饲料中添加卵

磷脂可以促进动物机体对营养物质的吸收，尤其是在日

粮中脂肪含量较高时，可以提高猪对脂肪的利用率，从

而提高生长性能；同时卵磷脂在提高母猪的繁殖性能以

及公猪精液低温保存方面也有较好的作用。

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2023 年 第 5 期

DOI：10.16174/j.issn.1673-4645.2023.05.013

收稿日期：2023-06-09

作者简介：杜海涛 （1986-），博士，研究方向为动物营养代谢病

不同缬氨酸添加量

对哺乳母猪生产性能的影响

杜海涛

渊新民金泰扬翔农牧有限责任公司袁 辽宁沈阳 110000冤

摘 要院 本试验旨在研究日粮中添加不同水平的缬氨酸对哺乳母猪采食量尧 背膘损失尧 断奶后发情间隔尧 仔猪生长性能等的

影响遥 试验选择胎次相同尧 背膘厚度相近且体况一致的 108 d 妊娠母猪 42 头袁 随机分为 3 组袁 分别为对照组 渊A 组冤尧 试

验 1 组 渊B 组冤尧 试验 2 组 渊C 组冤遥 A 组饲喂 野基础日粮冶袁 B 组饲喂 野基础日粮垣0.95 g/kg 缬氨酸冶袁 C 组饲喂 野基础日

粮垣1.9 g/kg 缬氨酸冶袁 每组 15 个重复袁 每个重复 1头猪遥 试验期共计 28 d袁 直至断奶结束遥 结果表明院 B 组哺乳母猪的

平均采食量显著高于对照组 渊 约0.05冤袁 C 组平均采食量也高于对照组袁 但差异不显著 渊 跃0.05冤曰 B 组仔猪日增重显著高

于对照组 渊 约0.05冤袁 C 组日增重高于对照组袁 但差异不显著 渊 跃0.05冤曰 B 组断奶仔猪数显著高于对照组 渊 约0.05冤袁 C

组断奶仔猪数高于对照组袁 但差异不显著 渊 跃0.05冤曰 B 组断奶平均重量尧 校正28 d断奶重均显著高于对照组 渊 约0.05冤袁

C 组断奶平均重量尧 校正28 d断奶重也高于对照组袁 但差异不显著 渊 跃0.05冤遥 结果表明袁 在哺乳期额外补充 0.95 g/kg

缬氨酸袁 提高了哺乳母猪的平均采食量袁 提升了仔猪的生长性能遥

关键词院 缬氨酸曰 哺乳母猪曰 生长性能曰 仔猪

中图分类号院 S828曰S816.4 文献标识码院 A 文章编号院 1673-4645(2023)05-0059-04

开放科学渊资源服务冤标识码渊OSID冤袁扫一扫袁了解文章更多内容

Effects of Different Valine Additions on the Performance of Lactating Sows

DU Haitao

（Xinmin Jintai Yangxiang Agriculture and Animal Husbandry Co., Ltd., Shenyang 110000, China）

Abstract: The aim of this experiment was to study the effects of adding different levels of valine to diets on feed intake, backfat loss,

postweaning estrous interval and piglet growth performance of lactating sows. Forty-two 108 days gestation sows with the same litter

size, similar backfat thickness and the same body condition were selected and randomly divided into three groups: control group (Group

A), test group 1 (Group B) and test group 2 (Group C). Group A was fed \"basal diet\", Group B was fed \"basal diet＋0.95 g/kg valine\" and

Group C was fed \"basal diet＋1.9 g/kg valine\", with 15 replicates in each group and 1 pig in each replicate. The total experimental period

Husbandry and Forage 饲养饲料

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China Swine Industry

2023 年 第 5 期

支链氨基酸 （BCAA） 是一组在碳链上具有支链结

构的脂肪族中性氨基酸，动物机体本身并不能合成此类

氨基酸。亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸并称为三大支链氨基

酸，缬氨酸属于哺乳母猪的第 3 种限制性必需氨基酸[1]，

具有促进机体生长，提供能量的作用，对畜禽营养调控

来说意义重大。近年来，缬氨酸在哺乳母猪生产中具有

广泛的研究，且部分研究表明，缬氨酸能够促进母猪乳

腺的发育、提高泌乳性能、改善乳品质、提升仔猪的断

奶体重、降低泌乳母猪背膘损失[2,3]。然而，哺乳母猪对

缬氨酸的需要量与母猪生理状况、生产水平和环境等因

素密切相关，此外，还受到日粮能量水平、支链氨基酸

间的拮抗和与其他营养素互作的影响[4]。本试验通过研

究在日粮中添加不同水平的缬氨酸对哺乳母猪采食量、

背膘损失、断奶后发情间隔、仔猪生长性能等的影响，

为缬氨酸在哺乳母猪日粮中的合理添加及科学应用提供

依据。

1 材料与方法

1.1 试验动物与设计

本试验选择胎次相同、背膘厚度相近且体况一致的

一胎妊娠 108 d“长×白”母猪 45 头，随机分为 3 组：

如表 1 所示，分别是对照组 （A 组）、试验 1 组 （B 组）

和试验 2 组 （C 组），其中对照组饲喂“基础日粮”，试

验 1 组饲喂“基础日粮＋0.95 g/kg 缬氨酸”，试验 2 组

饲喂“基础日粮＋1.9 g/kg 缬氨酸”，每组 15 个重复，

每个重复 1 头猪。试验期间每天对余料进行称重，统计当

日耗料量，试验期共计 28d，直至断奶结束。

1.2 试验材料

试验猪只由沈阳恒丰源扬翔种猪繁育有限公司顺华

母猪场提供，所用 L- 缬氨酸为沈阳 （希杰） 生物科技

有限公司生产。

1.3 营养水平

试验组和对照组用同一基础日粮，饲粮配方和营养

水平见表 2。

1.4 饲养管理

所有试验动物在同一栋猪舍，自由采食和饮水，由

专人负责试验猪只的日常饲养管理，试验期间按猪场常

规免疫程序进行防疫及消毒。

was 28 d until the end of weaning. The results showed that the average feed intake of group B was significantly higher than that of the

control group ( ＜0.05), and the average feed intake of group C was also higher than that of the control group, but the difference was

not significant ( ＞0.05); the daily weight gain of piglets in group B was significantly higher than control group ( ＜0.05), and the daily

weight gain of piglets in group C was higher than control group, but the difference was not significant ( ＞0.05); the number of weaned

piglets in group B was significantly higher than control group ( ＜0.05), and the number of weaned piglets in group C was significantly

higher than control group ( ＞0.05). The number of weaned piglets in Group B was higher than control group, but the difference was not

significant ( ＞0.05); the average weaning weight and corrected 28 days weaning weight of Group B were significantly higher than control group ( ＜0.05), and the average weaning weight and corrected 28 days weaning weight of Group C were also higher than control

group, but the difference was not significant ( ＞0.05). The results showed that additional supplementation of 0.95 g/kg valine during

lactation increased the average feed intake of lactating sows and enhanced the growth performance of piglets.

Key words: valine; lactating sows; growth performance; piglets

表 1 试验分组及饲喂方案

项目

A 组

（对照组）

B 组

（试验 1 组）

C 组

（试验 2 组）

料号 210 210-1# 210-2#

缬氨酸/赖氨酸（dVal/Lys） 0.66 0.76 0.86

SID -Lys/% 0.95

SID -Val/% 0.627 0.722 0.817

饲喂模式 自由采食

饲养饲料 Husbandry and Forage

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China Swine Industry

2023 年 第 5 期

试验组按照母猪每日采食量进行氨基酸拌料饲喂，

具体操作为：送料工将饲料卸入栋舍小推车里，再将满

载饲料的小推车推入试验栋舍，预估称取当日所需饲料

量 （饲喂量根据猪只采食的多少决定，原则上做到自由

采食），按照比例称取相应氨基酸于小喷壶中使用自来

水稀释，均匀喷洒在称量完毕的饲料上，将拌料混匀，

再取适量配制好的饲料称重记录后，依次饲喂各个试验

猪只。

1.5 测定指标及方法

（1） 背膘损失：测定母猪妊娠 108 d 的背膘厚度、

断奶背膘厚度，以此计算背膘损失。

（2） 母猪采食量：准确记录每头母猪的每日采食

量，计算日采食量。

（3） 产仔性能：准确记录每头母猪的总产仔数、产

健仔数、死胎数、产木乃伊胎数、开始分娩时间、结束

分娩时间。

（4） 仔猪称重：以“窝”为单位，称量并记录仔猪

初生重。测定记录仔猪断奶重、断奶头数、断奶窝重。

1.6 数据处理

用 SPSS 22.0 软件的单因素方差分析进行统计分

析，数据结果以“平均值±标准误 （Mean±D）”表示。

2 结果与分析

2.1 不同缬氨酸添加量对哺乳母猪生产性能的影响

由表 3 可知，与 A 组相比，试验各组母猪的产程、

背膘损失和断奶发情间隔均无显著差异 （ ＞0.05）；B

组平均采食量显著高于对照组 （ ＜0.05），C 组平均采

食量也高于对照组，但差异不显著 （ ＞0.05）。

2.2 不同缬氨酸添加量对仔猪生长性能的影响

与对照组相比，试验各组间总产仔数、产健仔数、

产弱仔数和出生个体重均无显著差异 （ ＞0.05）；但 B

组日增重显著高于对照组 （ ＜0.05），C 组日增重也高

于对照组，但差异不显著 （ ＞0.05）；B 组断奶仔猪数

显著高于对照组 （ ＜0.05），C 组断奶仔猪数也高于对

照组，但差异不显著 （ ＞0.05）；B 组仔猪断奶平均重

量、校正 28 d 断奶重均显著高于对照组 （ ＜0.05），C

组断奶平均重量、校正 28 d 断奶重也高于对照组，但差

异不显著 （ ＞0.05）。

3 讨论

本试验结果表明，额外添加缬氨酸对哺乳母猪背膘

损失、产程和断奶发情间隔没有影响，与陈熠等[5]、李

根[6]的研究结果一致。当哺乳母猪日粮中缬氨酸与赖氨

酸的比值超过 90%，对母猪的背膘损失没有影响[7]。本

试验结果表明，添加缬氨酸提高了哺乳母猪的平均采食

量，与黄红英[8]、李方方等[8]的研究结果均一致，因此，

表2 基础饲粮组成及营养水平 渊风干基础冤

原料 含量/% 营养水平② 含量

玉米 69.00 消化能/（MJ/kg） 13.98

麦麸 3.30 粗蛋白/% 16.35

大豆粕 19.00 钙/% 0.73

鱼粉 2.00 有效磷/% 0.34

豆油 2.60 赖氨酸/% 0.95

碳酸氢钙 0.70 蛋氨酸/% 0.26

石粉 1.00 苏氨酸/% 0.59

食盐 0.40

预混料①

2.00

合计 100.00

注：①预混料为每千克饲粮提供：维生素 A 2 000 IU，维生素 D

200 IU，维生素 E 45 IU，维生素 K 0.5 mg，维生素 B1 1 mg，维

生素 B6 3.85 mg，维生素 B12 15 mg，泛酸 12 mg，烟酸 10.25 mg，

叶酸 1.35mg，生物素 0.21 mg，锰 20 mg，铁 100 mg，铜 20 mg，

碘 0.14 mg，硒 0.15 mg；②营养水平均为理论计算值。

表3 不同缬氨酸添加量对哺乳母猪生产性能的影响

组别

项目

A 组 B 组 C 组 P 值

背膘损失/mm 2.47±1.41 2.40±1.30 2.33±1.18 0.961

产程/h 4.41±1.45 4.14±1.82 3.63±0.85 0.319

平均采食量/kg 6.11±0.40a

6.41±0.31b

6.26±0.34ab 0.074

断奶发情间隔/d 4.82±1.45 4.45±1.14 4.64±1.23 0.711

注：同行肩标字母不同表示具有显著性差异 （ ＜0.05），肩标字母

相同或无肩标表示无显著性差异 （ ＞0.05），下同。

Husbandry and Forage 饲养饲料

61

China Swine Industry

2023 年 第 5 期

渊下转第 66页冤

在母猪妊娠后期或泌乳期添加缬氨酸均能增加哺乳母猪

的日采食量[9,10]。也有其他研究结果与本试验结果相反，

可能与实际饲喂条件、母猪的胎次、品种及健康状况、

氨基酸的模式不同有关。

对于哺乳仔猪来说，额外添加缬氨酸对总产仔数、

产健仔数、产弱仔数和仔猪出生个体重没有影响，但是

显著提高了哺乳仔猪实际断奶重、日增重、校正 28 d 断

奶重量以及断奶仔猪数。Tokach 等[11]发现，当日粮中赖

氨酸含量为 0.90%时，额外添加缬氨酸可以提高仔猪断

奶头均重；Moser 等[12]研究指出，缬氨酸含量能改善仔

猪日增重，与本试验结果一致。也有研究表明，添加缬

氨酸可以促进哺乳母猪泌乳性能，增加了乳中脂肪、干

物质和蛋白质含量，同时，缬氨酸在母猪乳腺组织中分

解代谢的主要含氮产物是谷氨酰胺，乳源性谷氨酰胺则

是仔猪肠道合成瓜氨酸和精氨酸的重要底物，瓜氨酸和

精氨酸对仔猪来说十分重要，属于营养性必需氨基酸，

而仔猪体内这 2 种氨基酸较为缺乏，因此在日粮中添加

缬氨酸能够促进乳源性谷氨酰胺的合成，从而提升哺乳

仔猪的生长性能[13,14]。本试验中，试验 2 组的提升效果

不如试验 1 组，这与其他人的研究中，缬氨酸添加量越

高，哺乳仔猪生长性能越好的结论并不一致，可能与赖

氨酸水平、日粮蛋白水平、母猪品种、胎次等不同有关。

哺乳期母猪动员组织储备限制性氨基酸的母猪与未动员

组织储备的母猪对限制性氨基酸的排序也有不同，前者

依次为赖氨酸、苏氨酸和缬氨酸，而后者依次为赖氨酸

和缬氨酸[15]。

4 小结

综上所述，在母猪哺乳期额外补充 0.95 g/kg 缬氨

酸，提高了哺乳母猪的平均采食量，提升了仔猪的生长

性能，但是在实际生产中，尤其是在日粮蛋白质降低、

赖氨酸等必需氨基酸添加量提高的条件下，哺乳母猪对

缬氨酸的需要量还有待做更多研究。

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表 3表不同剂量的益生菌制剂对仔猪血清免疫指标的影响 4 不同缬氨酸添加量对仔猪生长性能的影响

组别

项目

A 组 B 组 C 组 P 值

平均总产仔数/头 14.50±4.13 14.64±5.02 13.71±5.46 0.865

平均总健仔数/头 12.71±3.12 12.29±3.60 12.93±4.65 0.904

平均弱仔数/头 1.21±1.85 1.14±1.17 0.57±1.02 0.416

出生个体重/kg 1.40±0.14 1.36±0.19 1.33±0.19 0.594

断奶平均重量/kg 6.28±0.72a

6.95±1.05b

6.59±0.93

ab 0.089

日增重/g 190.7±0.03a

225.5±0.04b

215.1±0.04ab 0.03

断奶仔猪数/头 12.33±0.90a

13.07±0.92b

12.67±0.90ab 0.102

校正 28 d 断奶重量/kg 6.75±1.00a

7.67±0.97b

7.36±1.00ab 0.05

饲养饲料 Husbandry and Forage

62

China Swine Industry

2023 年 第 5 期

DOI：10.16174/j.issn.1673-4645.2023.05.014

收稿日期：2023-02-24

作者简介：林峰 （1985-），男，辽宁锦州人，硕士，主要从事畜牧技术推广应用相关工作

复合酸化剂对断奶仔猪抗氧化能力的影响

林 峰

渊辽宁省农业发展服务中心袁 辽宁沈阳 110161冤

摘 要院 酸化剂可以降低仔猪胃内酸性环境的 pH 值袁 促进仔猪胃内消化酶活性袁 减少仔猪多种应激症状遥 本文选择 180 头

体重尧 日龄相同的三元杂交断奶仔猪随机分为 3 个处理组袁 即对照组 渊基础日粮冤尧 试验组 1 渊基础日粮垣复合酸化剂 1冤尧

试验组 2 渊基础日粮垣复合酸化剂 2冤袁 每个处理 3 个重复袁 每个重复 20 头猪袁 进行酸化剂效果试验遥 结果表明袁 在断奶仔

猪的饲粮中加入酸化剂袁 可以适当缓解仔猪应激症状袁 同时显著提高仔猪 T-AOC 指标尧 提升SOD 酶活性尧 降低 MDA 活性袁

旨在研究饲料中添加酸化剂的积极作用袁 为进一步提高断奶仔猪成活率提供基础遥

关键词院 生猪曰 酸化剂曰 断奶仔猪曰 抗氧化能力

中图分类号院 S828曰S816 文献标识码院 A 文章编号院 1673-4645(2023)05-0063-04

开放科学渊资源服务冤标识码渊OSID冤袁扫一扫袁了解文章更多内容

1 酸化剂在断奶仔猪饲粮中的应用现状

酸化剂的使用可以追溯到 20 世纪 60 年代初的英

国，有学者[1]研究表明，酸化剂可以有效降低断奶仔猪

消化道内的大肠杆菌数量，以达到预防及治疗仔猪腹泻

的效果。随着对酸化剂在动物机体影响方面的深入研

究，到了 20 世纪 80 年代，酸化剂的使用范围已经从治

疗仔猪腹泻向促进仔猪生长发育转变，而且酸化剂的成

分也从单一酸向复合酸、无机酸向有机酸过渡。20 世纪

90 年代，我国学者开始研究饲粮中添加酸化剂对“仔猪

早期断奶综合征”的影响，虽然国内对酸化剂的研究起

步较晚，但目前已经发展到应用复合酸化剂、包被型酸

化剂等多种类型，研究结果进入世界前列[2]。

目前我国很多养猪场普遍采用仔猪早期断奶模式[3]，

即仔猪在 21～28 日龄断奶。从经济效益的角度看，早

期断奶不仅可以增加母猪的年产胎次和总产仔数，缩短

母猪的产仔间隔，提高母猪年生产力；还可以使仔猪更

早地吃上“开口料”，提高饲料利用率，降低饲养成本。

但是从生物学的角度看，早期断奶对仔猪生长发育存在

一定影响，因为仔猪在 28 日龄时的消化腺生长发育还

不健全，其胃内分泌的胃酸不足，胃消化酶的活性较低，

无法很好地消化固体饲料，而且仔猪肠道内的肠抑胃素

等使消化腺的分泌能力减弱。如果仔猪无法很好地消化

食物，再加之饲养环境较差和仔猪免疫系统不成熟，可

能会导致仔猪胃内非耐酸性的大肠杆菌等有害菌大量增

殖[4]，此外，在多种因素的影响下，仔猪早期断奶后，

很容易出现应激症状，仔猪常表现为断奶后腹泻、营养

不良、生长缓慢等，严重者甚至死亡[5]。经国内外学者

研究表明，在仔猪“开口料”中加入酸化剂等添加剂，

仔猪断奶后产生的不良症状会有明显地改善[6]。其主要

机理是酸化剂可以在仔猪胃肠内形成适宜的酸性环境，

降低饲料的酸碱值和系酸力，更好地激发仔猪胃肠道内

多种消化酶的活性，使仔猪肠道微生物区系更加丰富，

Husbandry and Forage 饲养饲料

63

China Swine Industry

2023 年 第 5 期

可有效地帮助早期断奶仔猪消化固体饲料，并抑制有害

细菌的生长等，从而达到预防“仔猪早期断奶综合征”

的目的，减少仔猪因早期断奶出现的减产情况，增加养

殖场效益[7]。Giesting 等[8]研究发现，在仔猪饲料中添加

酸化剂，可以有效辅助仔猪消化和缓解多种应激症状，

这是由于动物机体在能量转换过程中，产生了延胡索酸

和柠檬酸等有机酸，有机酸比碳水化合物生成能量的途

径要短，因此，仔猪在应激状态下合成三羧酸腺苷的时

间也随之缩短。同时有机酸还可以降低神经中枢兴奋

度，抑制动物机体活动，从而减轻应激反应造成的机体

能量供应不足等症状。国内相关学者也对此有相关试

验，据刘作华等[9]的报道，饲料中添加一定比例的复合

酸化剂，可以有效促进仔猪消化吸收率，并降低了腹泻

等疾病的发生。侯永清等[10]也分别就酸化剂对早期断奶

仔猪的营养物质消化率、肠道微生物区系、消化道酶活

性等指标的影响进行了试验，结论均是酸化剂作为添加

剂对仔猪的生长发育、疾病控制、缓解应激等具有积极

作用。王兴礼[11]也指出在无抗养殖中，酸化剂对猪肉品

质等有很好的促进作用。

2 影响机体抗氧化性的指标

动物的抗氧化能力可以反映机体的健康状况，动物

机体在各种生化反应中会不断产生自由基 （Free Radical），它是由单质或化合物的共价键发生均裂 （Homdytic Fission） 而产生的带有未成对电子的原子或基团，具

有高度的化学活性，在动物机体内形成一个有效的防御

系统。但自由基生成过量会放大活性氧的作用，引发脂

质过氧化反应，当生物膜中的多不饱和脂肪酸被氧化，

形成脂质过氧化酸，则会导致生物细胞代谢及功能障

碍，甚至凋亡。

一般衡量机体的抗氧化指标包括：总抗氧化能力

（T-AOC）、超氧化物酶 （SOD）、丙二醛 （MDA）。在内

外界环境刺激下，如空气污染、水污染、环境骤变、生

存压力大等致使机体发生过氧化反应，机体内产生过量

的自由基，对生物膜造成脂质过氧化损伤。SOD 在机体

内的作用是清除多余的自由基，自由基在生物体内产生

后，可以使细胞膜的脂质发生过氧化反应，终产物为丙

二醛 （MDA），其具有一定的细胞毒性，能引起生物体

内蛋白质、核酸等发生交联聚合反应，导致蛋白质变性。

超氧化物酶 （SOD） 的主要功能是催化超氧阴离子

自由基歧化为过氧化氢和氧气。SOD 在生物体内保证了

机体正常的代谢平衡，减少了应激反应造成的损伤。超

氧化物酶 （SOD） 主要功效有 3 个方面。①SOD 可以有

效提高植物的抗逆性，提高对不良环境的抵抗力；如增

加植物中 Fe-SOD 的过量表达，能够增强叶绿体质膜和

光合系统Ⅱ对甲基紫精和高盐胁迫的抗性。②抑制肿

瘤；超氧化物酶保护细胞免受损害的机理是，其可以清

除生物体内的超氧阴离子自由基，提高动物体内超氧化

物酶的含量，可以有效促进成纤维细胞的分裂增殖，对

创伤修复有着积极的作用，从而抑制因生物内环境引起

的肿瘤，防止肿瘤的恶化。SOD 还可以作为辐射防护

剂，其效果要优于其他治疗方式。③抗炎症作用；由于

超氧化物酶可以促进成纤维细胞的分化和白细胞的产

生，因此，在治疗胸膜炎上有一定作用；超氧化物酶可

以减少多形核白细胞在肺部的积累；超氧化物酶对特发

性直肠炎有改善作用；SOD 还可以用于辅助治疗关节

炎。因此，测定机体内抗氧化能力、SOD 和 MDA 的含

量，可以确定动物生理生化健康程度、膜系统受损程度

以及机体的抗逆性。

3 试验材料与方法

3.1 试验材料

试验选择 180 头三元杂交断奶仔猪，平均体重 8 kg，

日龄 （30±1） d。不同成分、不同浓度的复合酸化剂，

总抗氧化能力、丙二醛、超氧化物歧化酶检测试剂盒。

试验期为 30 d。试验采集了 18 头健康断奶仔猪的血液，

用离心机以 3 000rpm 离心 10 min，分离的血清 -20℃

保存备用。

3.2 试验方法

本试验采用 2 种复合酸化剂，其中复合酸化剂 1 含

乳酸、柠檬酸、富马酸，总酸含量为 70%；复合酸化剂

2 含乳酸、甲酸、磷酸，总酸含量为 75%。试验分组：

本试验将 180 头仔猪随机分为 3 个处理，每个处理 3 个

重复，每个重复 20 头猪。其中对照组饲喂无酸化剂的

基础日粮，试验组 1 日粮中加入复合酸化剂 1，试验组

饲养饲料 Husbandry and Forage

64

China Swine Industry

2023 年 第 5 期

2 日粮中加入复合酸化剂 2，复合酸化剂的添加量均为

0.5%，饲养期 28 d。

4 结果与分析

由表 1 可知，试验组 1 仔猪血液中的总抗氧化能

力、丙二醛、超氧化物歧化酶的含量均显著高于对照组

（ ＜0.05），试验组 2 的总抗氧化能力与对照组无显著

差异 （ ＞0.05），丙二醛和 SOD 显著高于对照组 （ ＜

0.05）；试验组 1 的超氧化物歧化酶值显著高于试验组 2

（ ＜0.05），结果表明，动物机体在同外界不断的接触

中，会持续的在体内产生自由基，当动物机体内的自由

基积累到一定程度时，会加速动物的衰老，甚至产生癌

细胞。丙二醛是脂质过氧化反应的终产物，随着丙二醛

的不断产生，细胞膜的损伤会持续加剧，因此，测定机

体内丙二醛的含量和抗氧化能力，可以确定动物生理生

化指标健康程度、细胞膜受损程度及机体的抗逆性。李

建平等[12]研究发现，在早期断奶仔猪的饲粮中添加一定

比例的柠檬酸，可显著提高仔猪血清中超氧化物酶活性

和总抗氧化能力。

5 讨论

本试验结果表明，在断奶仔猪的饲粮中加入酸化剂，

可以适当缓解仔猪应激症状，同时显著提高仔猪总抗氧

化能力指标、提升超氧化物歧化酶活性，降低丙二醛活

性。其机理是，复合酸化剂可以缩短仔猪应激状态下的

供能时间，其在动物机体内参与特定反应，从而达到减

缓机体应激，促进抗氧化酶活性，减少脂质过氧化物的

产生，提高断奶仔猪免疫应答能力[13]。同时，试验组 1

的酸化剂中柠檬酸对仔猪血液 中红细胞 C3b 受体

（RBC-C3bR） 的合成具有较好地促进作用，对仔猪血

清白细胞介素 -2 （IL-2） 水平有提高作用，可缓解仔猪

断奶初期的应激反应症状，减少能量供应不足等[14]。乳

酸杆菌作为免疫调节因子，在 pH 值较低的环境中生存，

其代谢产物乳酸可降低环境中 pH 值，且可有效防止大

肠杆菌等有害菌群的孳生，刺激肠道局部产生免疫应

答。

6 小结

抗氧化能力可以说明动物机体的健康状况，本文通

过在仔猪日粮中添加复合有机酸，测定了仔猪血清中总

抗氧化能力、丙二醛、超氧化物歧化酶等指标，发现添加

乳酸、柠檬酸、富马酸等复合酸化剂可以更好地防止仔

猪应激，提高仔猪血清中抗氧化因子的含量。

表 1 基础日粮组成及营养水平

日粮组成/% 营养水平①

玉米 54.03 粗蛋白/% 17.8

豆粕 11.8 粗脂肪/% 5.50

米糠粕 2.00 粗纤维/% 2.50

石粉 0.43 粗灰分/% 4.80

膨化大豆 10.00 代谢能/（MJ/kg） 12.88

豆油 1.00 钙/% 0.62

氢钙 0.70 磷/% 0.58

食盐 0.30 总赖氨酸/% 1.15

赖氨酸 0.30 总蛋氨酸/% 0.40

氯化胆碱 0.04 胆碱/mg 1 600

预混料 19.4

合计 100

注：①营养水平为计算值。

表2 复合酸化剂对断奶仔猪总抗氧化能力 表 3 不同剂量的益生菌制剂对仔猪血清免疫指标的影响 尧 超氧化物歧化酶和丙二醛的影响

指标 对照组 试验组 1 试验组 2

检测仔猪头数/头 6 6 6

总抗氧化能力/（U/mL） 3.98±0.78a

4.53±0.66b

4.01±1.23a

丙二醛/（nmoL/mL) 1.87±0.58a

1.47±0.53b

1.51±0.42b

超氧化物歧化酶/（U/mL） 54.94±14.97a

71.23±38.21c

66.70±17.48b

注：同行数据肩标字母不同表示差异显著 （ ＜0.05）；肩标字母相同或无字母表示差异不显著 （ ＞0.05）。

Husbandry and Forage 饲养饲料

65

China Swine Industry

2023 年 第 5 期

渊上接第62 页冤

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饲养饲料 Husbandry and Forage

66

China Swine Industry

2023 年 第 5 期

DOI：10.16174/j.issn.1673-4645.2023.05.015

收稿日期：2022-12-13

作者简介：王永生 （1979-），男，本科，中级畜牧师，主要从事畜牧兽医方面的研究推广工作

丝兰提取物对仔猪养分表观消化率的影响

王永生

渊山东省汶上县军屯乡人民政府袁 山东济宁 272514冤

摘 要院 本试验研究了不同水平的丝兰提取物对仔猪养分表观消化率的影响袁 并确定丝兰提取物在仔猪养殖中的最适添加

量遥 选择体重约为30 kg的断奶仔猪280头袁 随机分成4组袁 每组70头遥 各组仔猪分别饲喂添加0尧 100尧 200尧 400 g/吨

的丝兰提取物的试验饲料袁 饲养期 30 d遥 试验结束前 3 d袁 进行消化试验袁 检测各组仔猪的养分表观消化率遥 结果表明袁 在

仔猪生产中使用200 g/吨和 400 g/吨的丝兰提取物可以显著提高饲料中总能尧 粗蛋白尧 粗脂肪及干物质的表观消化率袁 其

中总能的表观消化率分别比对照组提高了4.39%和 5.46% 渊 约0.05冤曰 干物质的表观消化率分别比对照组提高了 5.02个百

分点和5.6 个百分点 渊 约0.05冤曰 粗蛋白的表观消化率分别比对照组提高了 4.27 个百分点和 5.45 个百分点 渊 约0.05冤曰

粗脂肪的表观消化率分别比对照组提高了 2.52 个百分点和 3.18 个百分点 渊 约0.05冤遥 而丝兰提取物对仔猪的粗纤维尧

钙尧 磷的表观消化率未产生显著影响遥 研究表明袁 在仔猪生产中使用 200 g/吨和 400 g/吨的丝兰提取物可有效提高机体对

饲料中养分的消化吸收利用率袁 综合养殖成本考虑袁 仔猪生产中丝兰提取物的最适添加水平为 200 g/吨遥

关键词院 仔猪曰 丝兰提取物曰 养分曰 表观消化率曰 断奶仔猪

中图分类号院 S828曰S816 文献标识码院 A 文章编号院 1673-4645(2023)05-0067-03

开放科学渊资源服务冤标识码渊OSID冤袁扫一扫袁了解文章更多内容

仔猪阶段的饲养管理对日后生猪的生长性能发挥具

有重要作用，改善此阶段仔猪的消化吸收能力及肠道健

康至关重要[1]。近年来，在仔猪养殖中，对植物提取物

的研究应用逐渐增多，在替抗方面也取得了较好的试验

结果[2-4]。其中，丝兰 （Yucca smalliana Fern） 别名软

叶丝兰、毛边丝兰、洋波萝，百合科丝兰属植物。丝兰

提取物作为 1 种新型饲料添加剂，可以促进动物机体健

康，调节消化道环境，改善畜产品品质，尤其对畜禽粪

便中的氨气、硫化氢、粪臭素等有害物浓度具有降低作

用，以达到改善饲养环境的效果[5-9]。王瑶[10]研究发现在

仔猪饲料中添加 200 mg/kg 的丝兰提取物可以促进仔猪

生长，降低腹泻率，使仔猪肠道中的有益菌群丰富度提

高，改善了肠道健康。蒲施桦等[11]研究发现，在生长猪

饲料中添加适量的丝兰提取物可以促进机体对蛋白质的

消化和吸收，降低粪尿中有害气体及恶臭物质的产生。

目前，丝兰提取物在仔猪养殖中的应用研究结果较少，

尤其是在营养物质表观消化率方面的研究。因此，本文

研究不同剂量的丝兰提取物对仔猪养分表观消化率的影

响，为丝兰提取物在仔猪生产中的高效推广与利用提供

数据参考资料。

1 试验材料与方法

1.1 丝兰提取物

本试验中的丝兰提取物购自山东某动物保健品有限

公司，其主要活性成分为皂角苷，有效含量大于 15%。

Husbandry and Forage 饲养饲料

67

China Swine Industry

2023 年 第 5 期

1.2 试验仔猪

试验选择体重约 30 kg 的健康断奶仔猪 280 头，随

机分成 4 组，每组 70 头。各组仔猪分别饲喂添加 0、

100、200、400 g/ 吨丝兰提取物的试验饲料。饲养期

30 d，试验结束前 3 d 进行消化试验，检测各组仔猪的

养分表观消化率。试验分组处理见表 1。

1.3 仔猪基础饲料配方

试验仔猪基础饲料参考 NRC （2012） 猪营养标准配

制，其原料组成及营养成分含量见表 2。

1.4 饲养管理

试验开始前，对猪舍进行清扫、消毒处理，保证养

殖环境卫生。正式试验开始前，仔猪先在养殖场地预饲

养 1 周，饲喂基础日粮。试验期间，所有试验仔猪由专

人饲养管理，仔猪自由采食，不间断饮水供给。按照仔

猪日常管理进行驱虫、免疫。每日打扫猪舍，保证饲养

环境干燥、卫生，猪舍内温度、湿度及通风应适宜。每

3 d 对猪舍进行消毒，饲养员每日仔细观察记录仔猪发

病情况。

1.5 养分表观消化率的测定

采用内源指示剂法测定饲料的养分表观消化率。试

验结束前 3 d，从每组试验猪中挑选 7 头仔猪进行消化

试验，每日收集粪样约 200 g，加入 10%的硫酸 10 mL

进行固氮，4℃保存备用。将 3 d 收集的粪样混合均匀，

65℃烘干后，室温回潮 24 h，粉碎过 40 目筛，装入自

封袋中，备用。养分表观消化率的计算公式为：某养分

的表观消化率＝[1－ （b÷n） × （c÷d） ]×100% （n

为日粮中某养分含量，b 为粪样中某养分含量，c 为日

粮中指示剂含量，d 为粪样中指示剂含量）。

2 试验结果与分析

由表 3 可知，在仔猪生产中使用 200 g/ 吨和 400 g/

吨的丝兰提取物可以显著提高饲料中总能、粗蛋白、粗

脂肪及干物质的表观消化率，其中总能的表观消化率分

别比对照组提高了 4.39%和 5.46% （ ＜0.05）；干物质

的表观消化率分别比对照组提高了 5.02 个百分点和 5.6

个百分点 （ ＜0.05）；粗蛋白的表观消化率分别比对照

组提高了 4.27 个百分点和 5.45 个百分点 （ ＜0.05）；

粗脂肪的表观消化率分别比对照组提高了 2.52 个百分点

和 3.18 个百分点 （ ＜0.05）。而丝兰提取物对仔猪的粗

纤维、钙、磷的表观消化率未产生显著性影响。研究表

明，在仔猪生产中使用 200 g/ 吨和 400 g/ 吨的丝兰提取

物可有效提高机体对饲料中养分的消化、吸收、利用率。

3 讨论

仔猪断奶后，来自母乳的免疫保护逐渐消失，加之

养殖环境及日粮的改变，导致仔猪产生断奶应激。此阶

段的仔猪机体免疫力较低，胃肠道消化功能较弱，断奶

应激会导致仔猪胃肠道内菌群紊乱，有害菌大量繁殖，

有益菌大量减少，胃肠道内环境失衡，引发仔猪腹泻，

表 1 试验分组处理

分组 处理

对照组 基础饲料

100 g/吨组 基础饲料＋100 g/吨丝兰提取物

200 g/吨组 基础饲料＋200 g/吨丝兰提取物

400 g/吨组 基础饲料＋400 g/吨丝兰提取物

表2 试验仔猪基础饲料配方和营养成分含量

日粮组成 含量/% 营养含量②

玉米 66.52 消化能/（MJ/kg） 13.88

豆粕 20.00 粗蛋白/% 18.02

鱼粉 3.00 钙/% 0.84

麸皮 5.00 总磷/% 0.63

豆油 1.00

食盐 0.30

DL-蛋氨酸 0.28

L-赖氨酸 0.30

磷酸氢钙 1.30

石粉 0.80

预混料①

1.50

合计 100.00

注：①预混料为每千克日粮提供：维生素 A 9 000 IU，维生素 D3 2 700

IU，维生素 E 24 IU，维生素 K3 5.5 mg；铜 38 mg，铁 88 mg，锰 20

mg，锌 85mg，碘 0.18mg，硒 0.25mg。②营养成分含量是计算值。

饲养饲料 Husbandry and Forage

68

China Swine Industry

2023 年 第 5 期

严重时甚至导致仔猪死亡。仔猪的断奶应激影响机体对

日粮中营养物质的消化吸收，阻碍机体的生长发育，给

养殖者带来严重的经济损失。因此，仔猪在断奶后，如

何提高机体的免疫力及消化能力对其机体健康及生长发

育至关重要。一般在仔猪断奶阶段，养殖企业会在仔猪

日粮中添加一些具有提高免疫力及抗应激的饲料添加剂

来改善断奶应激对机体的危害。近年来，植物提取物由

于低残留、安全、高效、绿色、无耐药等特点被广泛地

应用于断奶仔猪的养殖生产中。本试验中，在仔猪生产

中使用 200 g/ 吨和 400 g/ 吨的丝兰提取物，其总能、

干物质、粗蛋白、粗脂肪的表观消化率均有不同程度的

提高，表明丝兰提取物有效增强了机体对饲料中养分的

消化吸收利用率。战余铭等[12]研究发现，在断奶仔猪饲

料中添加 150 g/ 吨的丝兰提取物可有效提高饲料中干物

质、粗蛋白、总能及粗脂肪的消化率，与本研究结果类

似。丝兰提取物提高仔猪机体的消化吸收能力，与丝兰

提取物的有效成分 （皂苷） 有利于维持肠道酸碱平衡，

促进肠道绒毛发育，刺激消化酶产生，改善肠道健康有

关，丝兰提取物中皂苷能够改变动物肠道上皮细胞的形

态，降低细胞表面张力，提高渗透性，进而提高机体对

养分的吸收，是一款可以提高仔猪断奶应激，预防仔猪

断奶腹泻的优良添加剂，可以在养猪业中推广。

4 结论

本试验中，在仔猪生产中使用一定剂量的丝兰提取

物可以促进仔猪机体对总能、粗蛋白、粗脂肪及干物质

的消化吸收，改善机体对饲料中营养物质的利用率。综

合养殖成本考虑，仔猪生产中丝兰提取物的最适添加剂

量为 200 g/ 吨。

参考文献

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表 3 不同剂量的丝兰提取物对仔猪养分表观消化率的影响

指标 对照组 100 g/吨组 200 g/吨组 400 g/吨组 总标准误 P 值

总能/（MJ/kg） 83.56 85.04 87.23*

88.12*

4.03 0.039

干物质/% 81.20 83.17 86.22*

86.80*

3.82 0.036

粗蛋白/% 78.93 80.31 83.20*

84.38*

4.02 0.038

粗脂肪/% 75.31 76.62 77.83*

78.49*

3.28 0.042

粗纤维/% 56.49 56.80 57.29 57.58 2.10 0.629

钙/% 50.48 51.03 51.60 52.01 2.96 0.396

磷/% 48.39 49.04 49.58 50.19 2.38 0.518

注：“*”表示与对照组比较，具有显著性差异 （ ＜0.05）。

Husbandry and Forage 饲养饲料

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China Swine Industry

2023 年 第 5 期

DOI：10.16174/j.issn.1673-4645.2023.05.016

收稿日期：2023-05-08

基金项目：新疆维吾尔自治区青年科学基金项目 （2022272375）；石河子大学高层次人才科研启动项目 （RCZK202043）；石河子大学青年

创新培育人才项目 （CXPY202211）

作者简介：杜非凡 （2004-），男，本科，动物医学专业；陈星宇 （2003-），男，本科，动物医学专业；# 为同等贡献作者

* 通信作者：孙延鸣 （1965-），男，博士，教授，硕士生导师，研究方向为临床兽医学；张彦兵 （1991-），男，博士，副教授，研究方向

为临床兽医学

金银花源 miR2911 靶向非洲猪瘟病毒

基因区域分析

杜非凡 1# 陈星宇 1# 李 硕 1 张 昊 1 常怡悦 1 张自瑞 1 闫卫疆 2 肖 非 2 孙雪梅 2 盛金良 1

孙延鸣 1* 张彦兵 1,2*

渊

1石河子大学动物科技学院袁 新疆石河子 832003曰

2新疆泰昆集团股份有限公司袁 新疆昌吉 831203冤

摘 要院 金银花源miR2911是一种高丰度尧 性质稳定的抗病毒分子袁 在抗流感病毒感染尧 SARS-CoV-2 感染中具有一定效

果遥 然而袁 对于 miR2911 靶向 ASFV 基因区域的研究却鲜有报道遥 由此袁 本研究旨在分析 miR2911 靶向 ASFV 的基因区

域袁 从而进一步分析 miR2911 靶点在不同流行毒株中的保守性遥 利用 miRanda 软件成功预测了miR2911在 ASFV基因组

中存在的多个靶点袁 且靶向ASFV基因区域保守性很高遥 为后续深入研究miR2911在抗猪源病毒感染机理方面提供理论依据遥

关键词院 猪病曰 miR2911曰 病毒基因曰 非洲猪瘟曰 金银花

中图分类号院 S828曰S852.65 文献标识码院 A 文章编号院 1673-4645(2023)05-0070-04

开放科学渊资源服务冤标识码渊OSID冤袁扫一扫袁了解文章更多内容

Analysis of Honeysuckle miR2911 Targeting Gene Regions of ASFV

DU Feifan1#, CHEN Xingyu1#, LI Shuo1

, ZHANG Hao1

, CHANG Yiyue1

, ZHANG Zirui1

, YAN Weijiang2

, XIAO Fei2

, SUN

Xuemei2

, SHENG Jinliang1

, SUN Yanming1*

, ZHANG Yanbing1,2*

(

1College of Animal Science and Technology, Shihezi University, Shihezi 832003, China; 2Xinjiang Tycoon Group Co., Ltd., Changji

831203, China)

Abstract: Honeysuckle source miR2911 was a highly abundant and stable antiviral assay that played a key role in fighting against influenza virus and SARS-CoV-2 infection. However, studies on miR2911 targeting gene regions of ASFV have rarely been reported. In

this study, we aimed to analyze the gene regions of miR2911 targeting ASFV, and make a further analysis of the conservation of miR2911

targets in different epidemic strains. The miRanda software was used to successfully predict the presence of multiple targets of miR2911

猪病防控 Swine Disease

Prevention and Control

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China Swine Industry

2023 年 第 5 期

miRNA （microRNA） 是一类长约 19～25 nt 的非编

码 RNA，具有较高的保守性[1,2]。一般 miRNA 的成熟需

要经过 3 个阶段：在细胞核中转录得到 pri-miRNA、由

RNaseⅢ -Drosha 酶剪 切得 到 pre-miRNA、由 premiRNA 运转出核进入胞浆内并成熟 [3-7]。含有 miRNA 引

导链的 RISC 与靶 mRNA 的 3’UTR 不完全互补配对时

会阻碍靶蛋白的翻译，从而抑制目的基因的表达；miRNA 与靶 mRNA 发生完全互补配对时，靶 mRNA 则被

AGO2 蛋白降解[8]。由于 miRNA 序列、结构多样，其在

生物调控及蛋白质合成方面发挥着重要作用，包括病毒

细胞的增殖与凋亡、癌症治疗等方面[9,10]。

金银花是一种重要的药用植物，因为具有多种生物

活性，所以在生理上主要有解热、抗炎、抗菌、抗氧化等

作用，其作为中药材被广泛应用于治疗流感病毒等方面[11]。

2015 年 Zhou 等[12]发现灌服金银花汤后的小鼠体内

miR2911 丰度较高。由于 miR2911 的功能在于能够靶向

多种甲型流感病毒 （IAVs），所以化学合成的 miR2911

不但可以显著抑制 H1N1 的 PB2 和 SN1 蛋白的表达，

而且还能降低 H5N1 感染小鼠的死亡率。最新研究显

示，miR2911 可有效抑制 SARS-CoV-2 （新型冠状病

毒） 的复制，并且 miR2911 在 SARS-CoV-2 基因区域

存在多个抑制靶点[13]，因此，猜测金银花 miR2911 可能

具有较广泛的抗病毒作用。

非洲猪瘟病毒 （ASFV） 是一种双链 DNA 病毒，属

于非洲猪瘟病毒科 （Asfarviridae） 非洲猪瘟病毒属

（Asfivirus）。ASFV 病毒粒子直径一般可达 260～300 nm，

其基因组长度介于 170～193 kb，可编码 150～167 个

蛋白。并且 ASFV 是一种烈性病毒，急性期 ASFV 可引

起猪 100%的死亡率，感染 ASFV 的病猪症状包括嗜睡、

血性腹泻、高热、血管变化等[14,15]。目前已研发出的非

洲猪瘟灭活疫苗无法完全诱导生猪机体产生中和抗体，

且效果不佳，而基因缺失疫苗正在研发中。因此，针对非

洲猪瘟病毒缺乏有效的治疗手段，仍需要以防控为主。

鉴于 miR2911 具有强大的抗病毒功效，本文通过生

物信息学等方法，探讨金银花源 miR2911 对 ASFV 相关

基因靶向区域，以期为研发抗 ASFV 感染的药物提供理

论依据。

1 试验材料与方法

1.1 金银花 miR2911 序列获得

在 miRbase （http://www.mirbase.org/index.shtml）

数据库中，下载金银花源 miR2911 的成熟序列，5’

-GGCCGGGGGACGGACUGGGA-3’。

1.2 ASFV 全基因序列下载

进 入 NCBI （https://www.ncbi.nlm.nih.gov/） 数 据

库，搜索 ASFV 的全基因组序列，下载我国当前非洲猪

瘟病毒流行毒株的全基因组序列。

1.3 miRNA 靶向 ASFV 基因区域预测

在 windows 环境下，打开网页版本的 miRanda 软

件 （http://www.bioinformatics.com.cn/local_miranda_m

iRNA_target_prediction_120），在操作界面输入 miRNA

序列和 ASFV 全基因组序列，点击分析，则会运行程序

显示分析结果。

1.4 靶向区域进化树构建

在构建 miR2911 靶向 ASFV 基因区域进化树时，先

将每个病毒被靶向区域与其他流行毒株进行比对，从而

获取不同毒株相应靶向区域。每个毒株被靶向区域按照

一定顺序拼到一起，1 个毒株作为 1 个整体的基因序列，

利用 MAGE7 软件，按照临近法构建进化树，相当于多

基因法构建进化树。

2 结果与分析

2.1 miR2911 靶向 ASFV 基因区域预测

利用 miRanda 软件预测，首先，将 miR2911 分别

靶向 ASFV 的 NP1450L 基因、GL1340L 基因、MGF_

in the genomes of ASFV. The results showed that the gene regions targeting ASFV were highly conserved. It provided important supporting data for the subsequent in-depth study of the mechanism of miR2911 in the anti-swine virus infection.

Key words: swine disease; miR2911; viral genes; ASF; Honeysuckle

猪病防控 Swine Disease

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71

China Swine Industry

2023 年 第 5 期

110-5L-6L 基因及 EP1242L 基因等 4 个基因的 2 个区

域，其中对 NP1450L 基因 130 231～130 255 区域的靶

向性较好，其分值为 108 分，自由能 （Energy）为 -35.37

kCal/Mol。其次，miR2911 对 ASFV 的 G1340L 基因的

112 860～112 881 区域靶向时，其分值可以达到 102

分，自由能 （Energy） 为 -25.40 kCal/Mol；在靶向

ASFV 的 EP1242L 基因的 2 个区域 （69 000～69 022 和

67 435～674 54） 时，区域 69 000～69 022 的靶向性相

对较高，其分值可达 99 分，自由能可达到 -32.02

kCal/Mol；靶向 ASFV 的 MGF_110-5L-6L 基因的 10 218

~10 237 区域，其分值 为 93 分，自由 能为 -23.81

kCal/Mol。综合 miR2911 靶向 AFSV 的 4 个基因的各项

数据，表明 miR2911 具有潜在抑制 AFSV 中 NP1450L

基因和 ASFV G1340L 基因复制的能力 （图 1）。

2.2 miR2911 靶向 ASFV 基因区域序列进化树

分析

在 NCBI 数据库中，下载 miR2911 靶向 ASFV 基因

区域序列，将多个区域按先后串联，利用 MEGA 7.0 软

件中邻近法构建 miR2911 靶向病毒基因区域进化树，

miR2911 靶向 ASFV 的基因区域 100%同源 （图 2）。

3 讨论

金银花性甘、寒，具有多种生物活性，可起到清热

解毒，消炎退肿的作用；金银花与其他中药配伍后可预

防和治疗病毒性感染。据报道，金银花源 miR2911 通过

与病毒特定基因序列的相互作用，可以有效抑制病毒的

复制，在抗病毒方面发挥着重要作用。在畜禽养殖过程

中，抗病毒感染与治疗是当前全球范围内探讨的一个热

点话题。研究表明，miR2911 性质稳定，经口服可被动

物体吸收。鉴于 miR2911 的抗病毒作用，以 miR2911

为研究对象，通过应用 miRanda 软件分析 miR2911 靶

向 ASFV 基因的具体区域、分值及自由能的高低，从而

进一步分析 miR2911 靶向病毒区域的保守性，以期为治

疗猪病毒性传染病提供借鉴。

自 2018 年非洲猪瘟疫情在我国发生以来，猪主要

病毒性传染病防控形势愈发严峻，“老病未灭，新病又

起”是我国目前养猪业面临的主要问题。目前病毒性传

染病往往需要免疫疫苗进行防控，还没有特效治疗药

物。经研究考虑到金银花源 miR2911 在抵抗流感病毒感

染和新型冠状病毒感染时发挥的中药作用，猜测金银花

miR2911 可能在 ASFV 基因上存在潜在的靶向位点，并

利用 miRanda 软件成功预测了 miR2911 在 ASFV 基因

上的靶向位点。由于 miR2911 在猪病毒基因上的靶向区

域很多，所以将得分低于 82 分的全舍弃。miR2911 可

靶向 ASFV 的 4 个基因，其中在 ASFV 的 EP1242L 基因

上有 2 个靶向区域。

非洲猪瘟病毒中的 NP1450L、EP1242L 和 MGF_

110-5L-6L 等 3 个基因在病毒感染生猪过程中发挥重要

作用。NP1450L 蛋白与 RNA 聚合酶的最大亚基具有广

泛的相似性。而 EP1242L 蛋白类似于第 2 大 RNA 聚合

酶亚基。NP1450L 蛋白和 EP1242L 与真核 RNA 聚合酶

Ⅱ的亚基更相似；NP1450L 和 EP1242L 主要在非洲猪

图 1 miR2911 靶向 ASFV基因分析结果

注：“丨”表示碱基匹配；“:”表示碱基不匹配。

图 2 miR2911 靶向 ASFV基因多区域序列进化树

猪病防控 Swine Disease

Prevention and Control

72

China Swine Industry

2023 年 第 5 期

瘟病毒感染晚期开始表达。外源表达 MGF110-5L-6L

蛋白还可诱导高尔基体和过氧化物酶体的亚细胞定位与

形态发生显著改变，认为 MGF110-5L-6L 蛋白可能通

过影响内质网腔中氧化还原稳态、蛋白质分泌途径及相

关膜性细胞器发生等，而打破细胞的正常生理功能稳

态，导致猪只发病。已证实外源表达 MGF110-5L-6L

蛋白可诱导宿主细胞发生内质网应激和未折叠蛋白反

应，并通过活化 PERK 和 PKR 激酶触发 e IF2α 的磷酸

化，进而诱发综合应激反应，致使猪机体的细胞蛋白翻

译阻滞以及应激颗粒产生。

miR2911 在非洲猪瘟病毒基因中的靶点非常保守，

不同时期和不同地区的非洲猪瘟病毒分离毒株的靶点同

源性很高。因此，金银花源 miR2911 具有潜在抑制当前

非洲猪瘟病毒流行毒株复制的作用。下一步，将与其他

实验室合作，构建 miR2911 过表达质粒，在细胞水平验

证 miR2911 抑制上述病毒复制的能力；在此基础上，进

一步将 miR2911 导入酵母菌、马铃薯、番茄、苜蓿等植

物中，通过给猪只饲喂上述转基因菌株的植物，提高猪

抗病毒的能力。并通过检测猪只排毒情况和病理损伤程

度，在动物体内开展 miR2911 抗病毒感染作用。

4 结论

本试验通过生物信息学方法预测了 miR2911 对非洲

猪瘟病毒关键基因的靶向性并对此展开分析。miR2911

可较好地靶向非洲猪瘟病毒的 NP1450L 基因，显示出

miR2911 潜在抑制非洲猪瘟病毒复制的能力。根据遗传

进化树结果显示 miR2911 在非洲猪瘟病毒基因上的靶向

区域 100%同源，表明 miR2911 具有靶向不同流行非洲

猪瘟病毒毒株的能力。综上所述，本文发现 miR2911 对

于非洲猪瘟病毒具有潜在抑制作用，为进一步探索其抑

制原理及相关药物的研发提供理论依据。

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猪病防控 Swine Disease

Prevention and Control

73

China Swine Industry

2023 年 第 5 期

DOI：10.16174/j.issn.1673-4645.2023.05.017

收稿日期：2022-12-10

基金项目：新疆生产建设兵团第四师可克达拉市科技计划项目“第四师规模化猪场繁殖障碍性疾病综合防治研究”

作者简介：侯宫明珠 （1999-），女，汉族，湖北公安人，硕士研究生，研究方向为动物传染病诊断与防治

* 通信作者：屈勇刚 （1971-），男，博士，教授，硕士生导师，研究方向为动物传染病诊断与防治

2021 年新疆部分地区规模化猪场 O 型

口蹄疫病毒抗体检测与分析

侯宫明珠 1 邱国斌 2 陈朝阳 2 陈新华 2 李彦芳 1 屈勇刚 1*

渊

1石河子大学动物科技学院袁 新疆石河子 832003曰

2新疆生产建设兵团第四师畜牧兽医工作站袁 新疆可克达拉 835216冤

摘 要院 为了解 2021 年新疆不同地区规模化猪场 O 型口蹄疫的免疫水平袁 本试验采用液相阻断酶联免疫吸附试验 渊LPBELISA冤 方法对采自 3 个地区的 7 家规模化猪场的353 份血清样品进行抗体检测与分析遥 结果显示袁 O 型口蹄疫病毒抗体

平均阳性率为 76.77% 渊271/353冤袁 达到国家规定标准 渊70.00%冤曰 3 个地区的 O 型口蹄疫病毒抗体阳性率均高于

70.00%曰 7 个猪场中袁 仅有 B 场的抗体阳性率为 62.96%袁 低于国家规定标准袁 该场需要及时加强免疫袁 并科学合理地调

整其免疫程序遥 本结果可为新疆地区猪场O 型口蹄疫的防控提供依据遥

关键词院 猪 O型口蹄疫曰 抗体检测曰 酶联免疫吸附试验

中图分类号院 S828曰S852.65 文献标识码院 A 文章编号院 1673-4645(2023)05-0074-03

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Detection and Analysis of Antibody Against Serotype O Foot-and-mouth Disease

Virus in Large-scale Pig Farms in Xinjiang in 2021

HOU Gongmingzhu1

, QIU Guobin2

, CHEN Zhaoyang2

, CHEN Xinhua2

, LI Yanfang1

, QU Yonggang1*

(

1College of Animal Science and Technology, Shihezi University, Shihezi 832003, China; 2Animal Husbandry and Veterinary Workstation,

the Fourth Division of Xinjiang Corps, Kekedala 835216, China）

Abstract: In order to understand the immune level of serotype O foot-and-mouth disease virus in different large-scale pig farms in Xinjiang in 2021, 353 pig serum samples were collected from seven large-scale pig farms in three regions, tested and analyzed by liquid

phase blocking enzyme-linked immunosorbent assay (LPB-ELISA) method in this experiment. The results showed that the average antibody positive rate of serotype O FMDV was 76.77% (271/353), which reached the national requirement standard （70.00%） . The antibody positive rate of FMDV O virus in pigs in different areas was higher than 70.00%. The antibody positive rate of serotype O FMDV in

three regions were all higher than 70.00%. Among seven tested farms, the antibody positive rate of farm B was 62.96%, which was lower

猪病防控 Swine Disease

Prevention and Control

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2023 年 第 5 期

口蹄疫 （Foot and Mouth Disease, FMD） 是由口蹄

疫病毒 （Foot and Mouth Disease virus, FMDV） 引起的

一种传染性强、传播迅速的人畜共患传染病。FMDV 主

要侵害猪、牛、羊、鹿等偶蹄类动物，其中猪的易感性

较高，尤其仔猪，其死亡率可达 100.00%。口蹄疫在猪

群中一年四季均可发生[1]，且容易形成大规模发病，该

病不仅会给养猪企业造成重大经济损失，还危害公共卫

生安全。世界动物卫生组织 （OIE） 将其列为必须报告

的动物疫病，我国将其归为一类动物疫病[2]。

对易感动物进行免疫接种是防控此病最有效的措

施，目前，我国采取强制免疫政策来防控 FMD，免疫抗

体水平监测是了解疫苗免疫效果最有效的方法。液相阻

断 酶 联免 疫 吸 附 试 验 （Liquid-phase Blocking Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, LPB-ELISA） 是

目前用于评价 FMD 免疫水平普遍采用的试验技术，其

精确性、稳定性高于正向间接血凝试验 （PHA），且重复

性优于病毒中和试验 （VNT） [3]。本试验采用 O 型口蹄

疫病毒 LPB-ELISA 试剂盒对新疆部分地区规模化猪场

中的猪血清样品进行抗体水平检测，并对结果进行分

析，可为新疆地区猪场 O 型口蹄疫的防控提供依据，以

减少口蹄疫在猪场的发生，保障猪群安全。

1 材料与方法

1.1 试验样品

2021 年 1—12 月期间，从新疆 3 个地区 7 个规模

化养猪场随机采集猪全血样品，无菌分离血清 1 mL 放

入灭菌离心管中，共获得 353 份血清样品。

1.2 试验材料和仪器

口蹄疫 O 型抗体液相阻断 ELISA 抗体检测试剂盒购

自中国农业科学院兰州兽医研究所；全波长酶标仪购自

美国赛默飞世尔科技有限公司。

1.3 试验方法

1.3.1 样品处理

猪全血样品在室温下静置 2～3 h，待析出清亮血清

后，收集 1 mL 至无菌 EP 管中，依次编号。血清可直接

检测或置于 ４℃保存待检。

1.3.2 LPB-ELISA 检测法

检测盒中所有试剂需放置室温后再使用，使用前轻

微震荡混匀。严格按照检测试剂盒说明书进行操作。

1.3.3 结果判定

临界值的计算：４ 个病毒抗原的 OD450 nm 值，弃去

最大值和最小值，剩余数值的平均值再除以 2。当样

品抗体效价的 OD450 nm 值＞临界值时判定为阴性；当

OD450 nm 值≤临界值时判定为阳性。

1.3.4 数据分析

使用 Excel 软件和 SPSS 软件对试验数据进行统计

学分析。

2 试验结果

2.1 不同地区猪 O 型 FMDV 抗体检测结果

不同地区猪 O 型 FMDV 抗体水平如表 1 所示。3 个

地区 O 型 FMDV 抗体平均阳性率为 76.77% （271/353），

达到国家 70.00%的规定标准。3 个地区的 FMDV 阳性

率 均 高 于 国 家 标 准 ， 分 别 为 77.97% 、 78.72% 和

than the national standard. It was needed to strengthen immunization in time and adjust its immunization program scientifically and rationally in the farm. The results can provide a basis for the prevention and control of serotype O FMDV disease in pig farms in Xinjiang.

Key words: porcine serotype O foot-and-mouth disease; antibody detection; enzyme-linked immunosorbent assay

表 1 不同地区猪 O型FMDV抗体检测结果

地区编号 样品数量/份 阳性数/份 阳性率/% 平均 OD 值

1 236 184 77.97 0.63a

2 47 37 78.72 0.58a

3 70 50 71.43 0.73a

总计 353 271 76.77 0.64

注：同列数据肩标字母不同表示差异显著 （ ＜0.05），字母相同或

无字母表示差异不显著 （ ＞0.05），下同。

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Prevention and Control

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2023 年 第 5 期

渊下转第 84页冤

71.43%。其中 3 号地区的抗体平均 OD 值最高，为

0.73；2 号地区的平均 OD 值最低，为 0.58；各地区之

间的平均 OD 值差异不显著 （ ＞0.05）。

2.2 不同规模化猪场 O 型 FMDV 抗体检测结果

不同规模化猪场 O 型 FMDV 抗体水平如表 2 所示。

7 个规模化猪场 O 型 FMDV 抗体平均阳性率为 76.77%

（271/353），达到国家规定标准。在 7 个猪场中，有 6

个猪场的 FMDV 阳性率高于国家标准，分别为 A、C、

D、 E、F、G 猪 场 , 其 抗 体 阳 性 率 分 别 为 72.07% 、

70.45%、71.43%、91.80%、85.00%和 100.00%；只有

B 猪 场 的 FMDV 阳 性 率 为 62.96% ，低 于 国 家 标 准

（70%）。B 场的平均 OD 值最高，为 0.94，G 场的平均

OD 值最低，为 0.09；B 场与 E、F、G 场之间的差异显

著 （ ＜0.05），与 A、C、D 场差异均不显著 （ ＞0.05）。

3 讨论与分析

口蹄疫的主要发生区域为非洲、中东、亚洲及南美

洲部分地区[5]。在口蹄疫病毒的 ７ 个血清型中，O 型和

A 型是猪口蹄疫常见的血清型，其中 O 型口蹄疫病毒的

发病率最高[6]。目前，我国规定猪场每年需要接种 2 次

口蹄疫灭活疫苗，注射密度不低于 80%，并监测口蹄疫

病毒抗体水平，当口蹄疫病毒抗体水平低于 70%时，需

要及时进行加强免疫[7]。可见通过检测口蹄疫抗体水平

评估养猪场的免疫情况尤为重要[8]。养猪场应严格按照

国家相关规定开展口蹄疫防疫工作，并定期监测口蹄疫

疫苗免疫效果，这是保障猪场健康生产的有效方法之一。

常军帅等[9]曾对 2019—2020 年新疆部分地区猪 O

型口蹄疫病毒抗体水平进行监测，发现这些地区口蹄疫

病毒的平均阳性率高达 81.88% （339/414），明显高于

国家规定标准。赵陈霞等[10]对 2011—2020 年新疆兵团

六师猪 O 型口蹄疫病毒抗体水平进行监测，发现近 10

年内的该地区猪群口蹄疫病毒抗体水平平均阳性率为

77.96%，高于国家规定标准；从疫苗生产厂商、生猪生

长阶段和存栏规模等不同因素进行分析，猪 O 型口蹄疫

病毒抗体阳性率均达到国家规定标准。张小玉等[11]对

2020 年新疆 9 个规模化养猪场的整体 O 型口蹄疫病毒

体水平进行了监测，发现平均阳性率为 88.06%，也超

过了国家规定标准。本试验结果发现，新疆 3 个地区的

口蹄疫病 毒抗 体水 平阳 性率均 高于 国家 规定 标准

（70.00%）；在 7 个猪场中，仅有 B 场口蹄疫病毒抗体阳

性率为 62.96% （17/27），低于国家规定标准，需及时加

强免疫。试验结果表明，近些年新疆各养殖场猪 O 型口

蹄疫病毒抗体水平相对较高，口蹄疫疫苗的整体免疫效

果较好。

虽然，近些年猪 O 型口蹄疫防控工作取得较好成

果，但仍不能掉以轻心。科学饲养也是防控口蹄疫不可

或缺的重要环节。首先，养殖户要定期对养殖区域进行

清扫，做好相应的消毒工作，给猪群创造干净的饲养环

境。其次，要科学管理，在给猪只提供充足基础营养的

同时，保证微量元素和维生素的摄入，以提高猪的免疫

能力[12]。最后，采取自繁自养的饲养模式，尽量减少引

种。确需引种时，要确保引种地区不属于疫区，种猪经

过属地检疫合格后方可引进。引入种猪需要进行 30 d 的

隔离饲养观察，健康无疫后可以与猪群混群饲养。大规

模养猪场应定期对猪群进行抗体水平监测[13]，根据每次

的免疫效果不断优化免疫程序。研究发现，目前市面上

的口蹄疫疫苗对猪群的保护效果都很高[14]，而且大规模

养猪场的免疫效果普遍高于散养户[15,16]，中小养猪场需

加强生物安全防控及免疫制度。

4 小结

通过调查研究发现，新疆部分地区规模化养殖场

FMD 免疫效果良好，猪群 O 型口蹄疫病毒抗体水平高

于国家标准。完善的生物安全措施和科学的饲养管理是

表 2 不同规模化猪场 O型FMDV抗体检测结果

猪场编号 样品数量/份 阳性数/份 阳性率/% 平均 OD 值

A 111 80 72.07 0.78ab

B 27 17 62.96 0.94a

C 44 31 70.45 0.87a

D 70 50 71.43 0.73ab

E 61 56 91.80 0.25c

F 20 17 85.00 0.44bc

G 20 20 100.00 0.09c

总计 353 271 76.77 0.64

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DOI：10.16174/j.issn.1673-4645.2023.05.018

收稿日期：2023-04-07

基金项目：江苏省高等学校基础科学 （自然科学） 研究面上项目 （22KJB180001）；江苏农林职业技术学院青年扶持项目 （2022kj32）

作者简介：庄林林，博士，研究方向为体外诊断技术研究及应用

* 通信作者：申秋平，硕士，研究方向为畜禽病原微生物快速诊断技术研究及应用

猪圆环病毒 3 型快速检测方法研究进展

庄林林 陈欣雅 徐佳豪 宋春雷 申秋平 *

渊江苏农林职业技术学院袁 江苏镇江 212400冤

摘 要院 猪圆环病毒 3型可引起猪的皮疹尧 呼吸系统和泌尿系统功能障碍等遥 快速尧 准确地检测 PCV3 对于保障猪的健康和

生产具有重要意义遥 本文综述了当前国内外已报道的PCV3 快速检测方法袁 主要包括免疫学检测方法 渊酶联免疫吸附试验尧

免疫层析技术冤尧 基于 PCR的方法 渊常规 PCR尧 套式 PCR尧 多重 PCR尧 荧光定量 PCR尧 数字 PCR 及其他基于 PCR 的技术冤尧

等温扩增技术 渊环介导等温扩增尧 重组酶介导等温核酸扩增尧 重组酶聚合酶扩增尧 酶促重组等温扩增以及聚合酶螺旋反应冤尧

原位杂交技术以及宏基因组测序技术遥 本文还初步探讨了不同方法的原理尧 特性及优缺点袁 展望了未来 PCV3 快速检测方法

的发展方向袁 以期为快速尧 精准地检测及科学防控 PCV3提供参考遥

关键词院 生猪曰 猪圆环病毒 3 型曰 免疫学技术曰 PCR技术曰 等温扩增技术

中图分类号院 S828曰S852.65 文献标识码院 A 文章编号院 1673-4645(2023)05-0077-08

开放科学渊资源服务冤标识码渊OSID冤袁扫一扫袁了解文章更多内容

猪圆环病毒 （Porcine circovirus, PCV） 是一种单股

环状 DNA 病毒，是目前已知最小的动物病毒[1]。目前，

PCV 已被发现包含 4 种基因型：PCV1、PCV2、PCV3

和 PCV4。其中，PCV1 不表现严重的临床症状；PCV2

可引起猪繁殖与呼吸道综合征、断奶仔猪综合征、皮炎

及肾炎等疾病；PCV3 则可引起猪皮炎肾病综合征、繁

殖障碍及多系统炎症；PCV4 是由我国湖南大学生物学

院兽禽病毒学研究组于 2019 年发现的一种新 PCV 基因

型 （暂定为 PCV4）。

2016 年，美国 Phan TG 等[2]和 Palinski R 等[3]团队

近乎同时报道了 PCV3，患猪圆环病毒 3 型病的母猪表

现为心脏与多系统并发症、猪皮炎和肾病综合征，但检

测 PCV2 为阴性。通过全基因组分析发现，该病毒与圆

环病毒科成员具有相似的基因结构和特征，但其 Cap 蛋

白序列和同源性相似度较低。根据基因组序列不同，可

将 PCV3 分为：PCV 3a、PCV 3b 和 PCV 3c[3]。目前国

内已有 PCV3 感染犬的病例[4]，证实了 PCV3 具有跨物种

感染的潜在危害。当前仍无有效防控 PCV3 的疫苗，本

文通过对 PCV3 快速检测技术进行综述，以期为快速检

测及科学防控 PCV3 提供参考。

1 免疫学检测方法

1.1 酶联免疫吸附试验

酶联免疫吸附试验 （Enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA） 是将已知的抗原或抗体固定在载体

表面，加入酶标抗原或抗体进行免疫学反应并催化底物

显色的一种检测技术。该技术主要可分为 4 种：直接

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法、间接法、夹心法和竞争法。目前，应用于 PCV3 检

测的方法主要有间接 ELISA 和夹心 ELISA。

1.1.1 间接 ELISA

间接 ELISA 是将待检测的抗体加入已标记有特定抗

原的酶标板孔中，经过孵育、洗涤等步骤之后，加入酶

标记的抗体，通过酶催化底物显色，根据产生的色素即

可进行半定量或定量分析。为了建立间接 ELISA 并快速

检测 PCV3 的方法，Deng 等[5]利用 Ni2+-NTA 琼脂糖将

重组 PCV3 Cap 蛋白进行纯化，并将其作为抗原以检测

血清中的抗 PCV3 抗体。试验结果表明，该方法检测血

清中的抗体灵敏度可达 1∶3 200，且与 PCV1、PCV2、

猪细小病毒 （Porcine parvovirus, PPV）、猪伪狂犬病毒

（Porcine pseudorabies virus, PRV）、猪繁殖与呼吸综合

征 病 毒 （Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV） 等无交叉反应。该研究通过流行

病学调查表明，自 2015 年以来，PCV3 已在我国广泛传

播，2015—2017 年，我国猪场中 PCV3 的阳性率从

22.35%上升至 51.88%。葛玉凤等[6]通过诱导表达及纯化

PCV3-Cap 建立了一种间接 ELISA 方法，通过对反应条

件等进行优化，发现该方法对 PCV3 抗体的检测灵敏度

可达到 1∶25 600，具有优异的敏感性。何博等[7]以

ORF2 重组蛋白为包被抗原，建立了检测 PCV3 抗体的

间接 ELISA 方法，其对 PCV3 阳性血清的最低检出效价

可达 1∶20 480。刘相聪[8]利用原核表达 PCV3 Cap 蛋

白，并将其作为包被抗原建立了一种间接 ELISA 方法。

结果表明，该方法具有较高的敏感性、特异性和可重复

性，适于临床检测应用。

1.1.2 夹心 ELISA

夹心 ELISA 是一种常用的 ELISA 方法，其基本原理

是在特定的涂层板上，将目标抗原或抗体与高亲和力的

检测抗体或检测抗原进行结合，再通过酶标记的溶液与

目标分子和检测分子之间的特异性反应，形成特定的复

合物，最后通过酶标记物的作用产生信号，从而检测目

标分子的存在。夹心 ELISA 具有选择性好、灵敏度高、

适用范围广等优点，目前已广泛应用于生物医学等领

域。于俊楠等[9]通过优化单抗包被、2 种抗体的浓度等，

建立了一种可检测 PCV3 的夹心 ELISA 方法。结果表

明，该方法重复性良好 （变异系数≤5%），且与 PCV2、

猪口蹄疫病毒、猪乙型脑炎病毒、PRV 等病毒阳性血清

无交叉反应。临床样本验证结果显示，检测结果与 PCR

方法相同率达 84.6%。

1.2 免疫层析技术

胶体金免疫层析技术是以胶体金颗粒为显色媒介，

基于抗原抗体特异性反应原理形成免疫金复合物的一种

免疫学检测技术。该技术简单快速且肉眼可观察结果，

适于现场即时检测。高茵等[10]通过构建重组 PCV3 Cap

蛋白并优化标记 pH 值、SPA 标记浓度及划线浓度等，

建立了一种可快速检测 PCV3 的胶体金免疫层析方法。

结果表明，该试纸条具有良好的灵敏度和稳定性，且临

床检测结果与 ELISA 一致，表现出较好的临床适用性。

2 基于聚合酶链式反应的检测方法

2.1 常规聚合酶链式反应

聚 合 酶 链 式 反 应 （Polymerase chain reaction,

PCR） 是目前常用的一种 DNA 扩增及检测技术。PCR

过程主要包括 3 步：首先在 94～95℃下将模板 DNA 变

性成 2 条单链 DNA （变性）。其次将正、反向引物分别

结合到单链 DNA 上 （退火），最后在 DNA 聚合酶的作

用下，2 条引物的 3’端将沿着模板链分别延伸出一条

互补的 DNA 链 （延伸）。经过多个循环后，将形成大量

的 DNA 扩增产物。PCR 技术具有简单、快速、灵敏、

特异性高等优点。朱小甫等[11]通过构建 pGEM-T-PCV3

质粒，建立了一种检测 PCV3 的 PCR 方法。该方法检测

限为 50 copies/滋L，且与 PCV2、PRV、PPV、PRRSV、

猪瘟病毒、猪流行性腹泻病毒等常见猪源病毒均无交叉

反应。杨威等[12]建立的 PCR 方法检测限可达 1.13×10-3

ng/滋L，且具有良好的可重复性。杨晓伟等[13]为了解我国

西南地区 PCV3 的感染现状及其遗传特征，在基于

PCV3-Cap 基因上，设计特异性引物建立了检测 PCV3

的 PCR 方法。Shizuka 等[14]使用常规 PCR 方法在日本猪

群中首次发现 PCV3，且与毒株全基因组序列同源性为

99.5%，ORF2 蛋白同源性为 98.9%～99.2%。

2.2 套式 PCR

套式 PCR 属于 2 步 PCR 方法，该方法需使用 2 对

引物及进行 2 轮扩增。第 1 轮反应中使用 1 对通用引物

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（外引物） 扩增出目标 DNA 的初始片段，第 2 轮反应

（使用内引物） 以第 1 轮扩增片段为模板进行再次扩增。

因此，与常规 PCR 相比，套式 PCR 具有更高的敏感性

和特异性。同时，第 2 次反应能否进行也是对第 1 次反

应正确性的检验，因而套式 PCR 的准确性也大幅提升。

杨永宁等[15]通过设计内、外特异性引物，建立了套式

PCR 方法。结果显示，基于内、外引物的 PCR 检测限

分别为 0.17 ng 和 17 ng，比常规 PCR 高 100 倍。张静

等 [16] 建 立 的 套 式 PCR 最 低 检 测 限 可 达 1.74 ×10

copies/滋L，比常规 PCR 高 105 倍，与李卓昕等[17]建立

的荧光定量 PCR 灵敏度相近。经临床样本验证，该方法

检测结果与市售检测试剂盒具有较高的一致性。

2.3 多重 PCR

多重 PCR （Multiple PCR, mPCR） 是一种使用 2 对

以上引物，实现同时扩增多个目标核酸片段的 PCR 技

术，有效弥补了常规 PCR 只能扩增 1 个目标片段的不

足。多重 PCR 具有效率高且成本低等优势，已被广泛应

用于病原微生物检测、鉴定及遗传性疾病筛查等。目前，

在国内外猪群中已发现 PCV2 和 PCV3 混合感染的现象，

为了区分这 2 种基因型，Wang 等[18]建立了可 1 管式检

测 PCV2 和 PCV3 的双重 PCR。结果表明，该方法对

PCV3 的检测限为 2.23×106 copies/滋L，临床样本检测

表明 PCV2 和 PCV3 合并感染率为 14.8%。温海京等[19]

通过优化退火温度、引物浓度等，建立了一种检测

PCV2 和 PCV3 的双重 PCR 的方法来针对 PCV3 的检测限

为 800 copies/滋L。基于相似方法，朱家平等[20]建立的双重

PCR 检测限低至 10 copies/滋L。此外，为快速准确区分检

测 PCV1、PCV2 和 PCV3，Yang 等[21]通过设计 3 对特异

性引物从而建立了 mPCR 方法，针对 3 种病原的检测限均

低至 10 copies/滋L。经临床样本验证，该方法检测结果与

测序法和定量 PCR 一致，具有良好的临床适用性。

2.4 荧光定量 PCR

荧光定量 PCR （Quantitative PCR, qPCR） 是通过

检测 PCR 反应体系中的荧光强度来定量扩增产物的技

术。该技术在反应体系中需加入荧光染料或探针，染料

或探针可与扩增产物结合产生荧光信号。荧光信号的强

度与反应体系中扩增产物数量成正相关，从而实现 DNA

定量分析。Xu 等[22]基于 SYBR Green I 建立了可用于

PCV3 检测的 qPCR 方法，并对来自不同农场的部分毒

株的 Cap 基因进行了测序及分析，结果表明，该方法检

测限为 2.19×10 copies/滋L，且临床样本 PCV3 阳性率

为 31.18%。Zhao 等[23]使用 TB Green Ⅱ开发了 qPCR

方法，检测限为 78 copies/滋L，可用于快速检测 PCV3

感染。Yuan 等[24]基于 PCV3 Cap 蛋白保守区域设计了引

物和探针，开发的 qPCR 方法检测限为 10 copies/滋L，

同时，该方法具有较高的特异性，并在临床样品检测方

面表现出良好的应用性能。畅通等[25]利用 TaqMan 探针

建立的 qPCR 方法敏感性同样达到 10 copies/滋L。Deng

等[26]首次使用 SPF 仔猪模型对 PCV3 感染进行体内表征

研究，并利用组织病理学和 qPCR 进行 PCV3 检测。结

果表明，qPCR 方法检测限达 5.5 copies/滋L。Feng 等[27]

基于 PCV3 复制酶基因开发了基于 TaqMan 的 qPCR 方

法，该方法的检测极限为 1.5×101 copies/滋L。

此外，qPCR 方法同样可应用于多重检测，有利于

大幅提高检测效率。Zheng 等[28]基于 SYBR Green Ⅰ开

发了双重 qPCR 方法用于同时检测 PCV3 和 PRRSV。该

方法对 PCV3 的检测限为 49.3 copies/滋L，低于常规

PCR，可用于检测临床样本中上述 2 种病毒混合感染。

Li 等[29]根据 PCV2 Cap 和 PCV3 Rep 基因设计特异性引

物和探针，开发了可同时检测 PCV2 和 PCV3 的双重

qPCR 方法。结果显示，该方法对 PCV3 的检测限为

22.5 copies/滋L。 同 时 ， 临 床 样 本 检 测 结 果 表 明 ，

PCV2、PCV3 在样品中的混合感染率为 27.6%，适用于

快速检测 PCV 混合感染。

2.5 数字 PCR

数字 PCR （Digital PCR, dPCR） 是 20 世纪 末 由

Vogelstein 等学者研发的核酸绝对定量技术。通过使用

微流控技术将反应混合物分成数千乃至上万个微小的球

形微滴并分散在独立的反应室内，每个反应室内仅含有

1 个或 0 个目标分子。PCR 反应结束后，即可根据阳性

反应室比例准确计算初始样本中的目标分子数[30]。与

qPCR 相比，dPCR 无需制作标准曲线，具有更高的灵

敏度和精准度。dPCR 已成为检测 PCV3 感染具有前景

的分子诊断技术之一。刘雨琦[31]建立了检测 PCV3 的

dPCR 方法，确定了最适退火温度为 56.3℃、引物和探

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针终浓度分别为 400 nM 和 200 nM。分析显示，该方法

灵敏度可达 0.1 fg/滋L，同时具有良好的可重复性。李原

野等[32]基于 PCV3 ORF2 基因序列设计扩增引物，建立

的 dPCR 方法检测限为 16.35 copies/滋L，同时具有良好

的可重复性和特异性。此外，dPCR 同样可用于多靶标

精准检测。Liu 等[33]利用微滴数字 PCR 建立了可同时检

测 PCV2 和 PCV3 的方法。该方法针对 PCV3 的检测限

为 3 copies/滋L，低于 qPCR。吴朦晨等[34]通过对反应温

度、引物及探针工作浓度等进行优化，建立了三重

dPCR 方法。结果表明，该方法对 PCV3 的检测限为

11.54 copies/滋L，同样优于 qPCR 方法。

2.6 基于 PCR 的其他方法

2022 年，孙延举[35]联合 PCR 和 ELISA 建立了可用

于 PCV3 快速检测的 PCR-ELISA 方法。在该方法中，

以链霉亲和素作为包被抗原，标记生物素和地高辛的

PCR 产物作为一抗、HRP 标记的抗地高辛抗体作为二抗

进 行 ELISA 反 应。该 PCR-ELISA 方 法 的 检 测 限 为

5.58×102 copies/滋L，比常规 PCR 低 2 个数量级，且无

需凝胶电泳，可有效减少污染风险。为了分析我国

PCV3 和 PCV2 的流行趋势，Zhang 等[36]建立了双重纳

米 PCR （nano-PCR） 方法，扩增产物分别为 528 bp

（PCV2） 和 251 bp （PCV3） 2 个特异性片段。同时，该

方法检测限低至 9.16×101 copies/滋L，比常规双重 PCR

低 2 个数量级，且与其他常见猪病毒无交叉反应性。

3 等温扩增方法

3.1 环介导等温扩增技术

2000 年，Notomi 等[37]基于具有链置换活性的 DNA

聚合酶研发了可在等温条件下进行 DNA 高效扩增的方

法———环 介 导 等 温 扩 增 （Loop-mediated isothermal

amplification, LAMP） 技术。LAMP 技术利用 Bst DNA

聚合酶及内、外 2 对扩增引物可在 1 h 内扩增出 109～1010

个目标序列，具有简单快速、灵敏度高、仪器简单等优

势，目前已广泛应用于病原微生物鉴定、疫病监测、食

品安全等领域。Wang 等[38]建立了用于快速检测 PCV3

的 LAMP 方 法 ， 检 测 限 可 达 1 ×101 copies/滋L，与

Zheng 等[39]的研究结果一致。Zhang 等[40]开发了可目视

判断结果的 LAMP 方法，以实现 PCV3 的快速检测。该

方法灵敏度为 10 copies/滋L，且与其他猪病毒无交叉反

应。Park 等[41]基于 PCV3 Cap 基因设计引物、以羟基萘

酚蓝为反应指示剂开发了可目视检测 PCV3 的 LAMP 方

法，检测限为 50 copies/滋L，且具有较好的临床适用

性。为了实现 PCV3 实时检测，Kim 等[42]通过加入探针

建立了实时 LAMP 方法以特异性检测 PCV3。该方法灵

敏度为 50 copies/滋L，优于常规 LAMP 方法。此外，王

妍等[43]联合 LAMP 与侧向免疫层析 （Lateral flow dipstick.

LFD） 建立了 LAMP-LFD 方法并应用于 PCV3 的快速检

测，该方法检测限为 0.2 fg/μL，比常规 PCR 低 3 个数量

级，同时，该方法操作简单、快速，且检测结果优于 PCR

和常规 LAMP 方法，具有良好的临床应用价值。

3.2 重组酶介导等温核酸扩增技术

重组酶介导等温核酸扩增技术 （Recombinase aided amplification, RAA） 是一种等温核酸扩增技术。该技

术利用重组酶、DNA 聚合酶和单链结合蛋白，可在恒温

条件下从目标核酸片段扩增到大量的 DNA 产物。与

PCR 相比，RAA 具有操作简单、反应快速、无需热循环

仪等优点。Li 等[44]基于 PCV3 Cap 基因设计特异性引物

和探针，开发了一种可用于 PCV3 快速检测的 RAA 方

法。利用该方法，在 39℃下，30 min 内即可完成检测。

该方法灵敏度为 38 copies/滋L，在现场即时检测方面具

有应用潜力。为了缩短检测时间并实现实时监测，吴江

等[45]建立了实时荧光 RAA 方法。该方法可在 39℃下 20

min 内完成检测，且检测限达 102 copies/滋L，适于分子

检测条件有限的机构使用。

3.3 重组酶聚合酶扩增

重 组 酶 聚 合 酶 扩 增 （Recombinase polymerase

amplification, RPA） 是一种新型核酸等温扩增技术，可

以在常温 （37～42℃） 条件下进行快速、高效地扩增出

特定核酸序列[46]。该技术可利用聚合酶、重组酶和单链

DNA 结合蛋白等共同作用引导目标核酸不断解链、扩增

和释放。Wang 等[47]针对 PCV3 Cap 基因设计 RPA 引物

和探针，开发了用于快速检测 PCV3 的实时荧光 RPA 方

法。结果表明，该方法具有高特异性，灵敏度为 23

copies/滋L，可在 20 min 内完成检测。吴佳骏等[48]建立

猪病防控 Swine Disease

Prevention and Control

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China Swine Industry

2023 年 第 5 期

了靶向 PCV3 Cap 蛋白的实时 RPA 方法，灵敏度可达

4.56×102 copies/滋L，与常规 PCR 方法灵敏度相当。同

时，该方法与 PCV1、PCV2、PRRSV、PRV、猪塞内卡

病毒等无交叉反应。临床验证表明，该方法检测结果与

使用 PCR 检测结果一致。

3.4 酶促重组等温扩增技术

酶促重组等温扩增技术 （Enzymatic recombinase

amplification, ERA） 是近年来发展起来的新型核酸扩增

技术，其原理是采用介导 DNA 重组的酶来高效扩增目

标 DNA 序列。ERA 技术具有低温适应性、简单快速以

及高灵敏度 等优点。Zhang 等[49]将 ERA 与 CRISPR/

Cas12a 技术相结合，应用于 PCV3 快速检测。ERA-CRISPR/Cas12a 反应可以在单分子水平上检测 PCV3

DNA。同时，该方法具有高特异性，与 PCV1、PCV2、

PCV4 及其他猪病毒均没有交叉反应，并可在 1 h 内完

成检测。该技术具有良好的诊断应用前景，有望成为检

测病毒感染的重要工具手段。

3.5 聚合酶螺旋反应

聚合酶螺旋反应 （Polymerase spiral reaction, PSR）

是一种近年来发展的核酸等温扩增技术。通过在 2 条引

物的 5’端加上 1 段互为反向的序列，可以使引物以自

身为模板，按照自螺旋扩增的方式进行目标片段扩增。

该技术基于 PCR 引物的设计思路和 Bst DNA 聚合酶的

链置换活性，实现 1 对引物和 1 种酶在等温条件下对核

酸进行高效扩增[50]。PSR 反应体系简单，具有良好的特

异性和敏感性。Ji 等[51]建立了可高效检测 PCV3 的 PSR

方法。使用 62℃水浴，50 min 可完成 PCV3 目标基因扩

增，其检测限为 1.13×102 copies/滋L。试验表明，PSR

方法具有较高的特异性，且检出率高于 LAMP 方法，适

于资源条件有限的实验室使用。

4 原位杂交技术

原位杂交技术 （In situ hybridization, ISH） 是将核

酸探针与检测样品中靶核酸特异性杂交的方法[53]。该技

术的原理是使用 DNA 或 RNA 分子探针与已知目标 DNA

或 RNA 序列进行杂交，从而确定这些分子在细胞或组

织样本中的位置和数量。在 ISH 技术中，探针一般被标

记荧光或放射性等，可以被视觉或检测设备测量和检

测。ISH 技术可以对特定序列进行检测及定位，具有直

接、快速、特异等优点。Phan 等[2]使用 ISH 方法，将载

玻片与目标探针在 40℃的杂交缓冲液中反应 2 h。研究

表明，PCV3 在心肌细胞和心肌中的炎症细胞等多处存

在，而在肺组织切片中未能检测到 PCV3。Mora-D侏az

等[52]通过 ISH 方法在猪生殖期病例组织中分离出 PCV3。

同时，研究表明，PCV3 感染会引起猪的心肌炎和系统

性血管炎等多系统炎症。Taehwan 等[54]通过使用 PCV3

特异性 DNA 探针进行原位杂交来确认 PCV3 感染，首

次在流产胎儿中检测到 PCV3。

5 宏基因组测序分析

宏基因组测序分析技术是一种用于研究微生物群落

的高通量测序技术，可以快速获取微生物群落的全基因

组序列信息，并进行群落结构、功能和代谢通路等多个

方面的分析[55]。目前，宏基因组测序已经从分析单个基

因发展到可提供整个生态系统相关的复杂遗传信息。这

对发现新物种、分析生态系统构成、研究宏基因组的功

能和代谢途径等具有重要意义。PCV3 的发现也得益于

该技术，Palinski 等[3]通过 PCR 和宏基因组测序检测到母

猪流产的胎儿含有高水平的 PCV3，并通过滚环扩增证实

引起猪皮炎肾病综合征临床症状的病原为 PCV3。Franzo

等[56]通过宏基因组测序分析，检测出患有仔猪断奶发育不

全综合征的病例中存在 PCV3。宏基因组测序分析为病原

体的发现、溯源及组成等提供了高效快捷的方法。

6 小结与展望

猪圆环病毒 3 型 （PCV3） 在全球范围内传播广泛，

已引起养猪业的广泛重视。为了有效监测和控制其传

播，研究人员已经开发出多种快速检测方法，包括免疫

学方法、多种基于 PCR 的方法、等温扩增、原位杂交、

宏基因组测序技术等，为快速精准检测 PCV3 提供了有

力技术支持。免疫学方法尽管简单、快速且可监测抗体，

但目前在灵敏度和特异性方面仍有待加强。基于 PCR 的

方法虽然在 PCV3 检测中具有高灵敏度和特异性，但其

猪病防控 Swine Disease

Prevention and Control

81

China Swine Industry

2023 年 第 5 期

操作过程需要具有专业能力的技术人员，且检测结果观

察需依赖操作繁琐的凝胶电泳，或使用成本较高的荧光

探测设备。等温扩增技术作为 PCR 的可选替代方案，具

有设备简单、反应快速、支持目视判断结果等优势，但

目前相关技术在引物设计、反应体系成熟度及可重复性

等方面仍有待提升。原位杂交、宏基因组测序为 PCV3

检测提供了重要技术支持，但现有方法仍难以满足

PCV3 现场快速检测需求。

未来，随着 PCV3 研究的不断深入，研究人员将继

续优化现有快速检测方法，提高检测敏感性、特异性和

可重复性。同时，随着检测技术水平的不断提高，更精

准、快速和便捷的 PCV3 检测技术将被研发。此外，在

多学科交叉融合的发展趋势下，高通量、便携式、智能

化的一体化检测设备将不断被研发，为实现 PCV3 快速

精准检测提供新的方法与技术支撑。

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开展防控工作，确保猪场健康生产，以此推动新疆养猪

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DOI：10.16174/j.issn.1673-4645.2023.05.019

收稿日期：2023-01-03

基金项目：新疆维吾尔自治区科技厅地州科学基金项目 （2021D01F02）；伊犁州科研创新平台动物疫病检测重点实验室建设项目

作者简介：王传锋 （1982-），男，安徽淮南人，硕士，副教授，研究方向为预防兽医学

* 通信作者：皮志媛（1987-），女，新疆伊宁人，硕士，讲师，研究方向为预防兽医学

伊犁河谷猪瘟疫苗及胎牛血清中牛病毒

性腹泻病毒污染情况调查

王传锋 米青婕 皮志媛 *

渊伊犁职业技术学院袁 新疆伊宁 835000冤

摘 要院 目前袁 我国对生猪重大疫病的防控主要依赖疫苗免疫袁 且猪群疫病商品化疫苗主要以弱毒苗为主遥 猪瘟弱毒疫苗是

预防猪瘟最常用的理想疫苗袁 但是袁 部分生产厂家在猪瘟弱毒苗生产过程中袁 往往由于使用胎牛血清而出现外源病毒感染的

情况袁 如最常见的牛病毒性腹泻病毒 渊BVDV冤遥 BVDV 感染猪群后袁 可降低猪瘟疫苗的免疫效价袁 造成疾病传播的风险遥 为

调查伊犁河谷商品化猪瘟疫苗和胎牛血清中牛病毒性腹泻病毒污染的情况袁 本文对市售的5 家厂商生产的不同种类的猪瘟疫

苗和 6 家厂商生产的不同批号的胎牛血清袁 采用实时荧光定量 RT-PCR 方法进行 BVDV 检测遥 结果显示袁 猪瘟疫苗中 BVDV

核酸检测阳性率为18.2%袁 胎牛血清中 BVDV 核酸检测阳性率为 8.3%袁 这为伊犁河谷养猪场及科研单位选用安全可靠的猪

瘟疫苗与胎牛血清提供了技术支撑遥

关键词院 猪瘟疫苗曰 胎牛血清曰 牛病毒性腹泻病毒曰 污染曰 调查

中图分类号院 S828曰S852.65 文献标识码院 A 文章编号院 1673-4645(2023)05-0085-05

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Investigation of Bovine Viral Diarrhea Virus Contamination in Classical Swine Fever

Vaccines and Fetal Bovine Serum in the Ili Valley

WANG Chuanfeng, MI Qingjie, PI Zhiyuan*

（Yili Vocational and Technical College, Yining 835000, China）

Abstract: Currently, the prevention and control of major swine diseases in our country mainly relied on vaccination, and commercial vaccines for swine diseases were mainly based on attenuated vaccines. Attenuated vaccines for classical swine fever were the most commonly used and ideal vaccines for prevention. However, during the production of attenuated vaccines for classical swine fever, some

manufacturers often used fetal bovine serum, which could lead to contamination by exogenous viruses, such as bovine viral diarrhea

猪病防控 Swine Disease

Prevention and Control

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China Swine Industry

2023 年 第 5 期

猪瘟的防控主要依靠疫苗免疫，但猪瘟疫苗在临床

使用过程中常常出现免疫失败的现象。研究表明，这与

外源病毒的干扰有关，其中 BVDV 的干扰是猪瘟疫苗免

疫失败的重要原因之一。BVDV 自然感染猪会出现类似

猪瘟的临床症状，主要包括仔猪生长发育不良、僵猪、

贫血、结膜炎和腹泻等。猪感染 BVDV 后表现出的具体

临床症状和病理变化也不尽相同，如仔猪先天性感染

BVDV 可产生抗体，也可发展为持续性感染，并在感染

后数天内死亡；母猪自然感染 BVDV 后可出现受孕率降

低、流产和产死胎等现象；肥猪感染 BVDV 后主要以慢

性胃肠炎和败血症为特征，类似于慢性猪瘟。BVDV 广

泛存在于胎牛血清中，猪瘟疫苗的研制不可或缺的要使

用胎牛血清，若使用了被 BVDV 污染的胎牛血清，则该

病毒会大幅降低猪瘟疫苗的免疫质量，导致猪瘟疫苗免疫

失败。因此，检测胎牛血清和猪瘟疫苗中是否存在 BVDV

污染意义重大。本文采用实时荧光定量 （RT-PCR） 方法

对伊犁河谷市售猪瘟疫苗和胎牛血清进行 BVDV 检测，

以期为养猪企业选择猪瘟疫苗提供参考。

1 试验材料与方法

1.1 试剂与仪器

RNA 提取试剂盒和荧光定量 PCR 试剂均购自大连

宝 生 物 公 司 ； CFX96 荧 光 定 量 PCR 仪 购 自 美 国

BIO-RAD 公司。低温高速冷冻离心机购自上海卢湘仪

离心机仪器有限公司。涡旋振荡器购自深圳市科力易翔

仪器设备有限公司；恒温水浴锅购自北京亚欧德鹏科技

有限公司。

1.2 猪瘟疫苗和胎牛血清

新疆伊犁河谷地区市面所售的来自不同厂家的猪瘟

疫苗和胎牛血清，具体信息见表 1。

1.3 引物合成

参照陈其兵等[1]合成引物及探针的方法，设计荧光

定量所需引物及探针，交由上海生工生物工程技术服务

有限公司合成。

上游引物 PF 5’-GAGTACAGGGTAGTCGTCAGT

GG-3’

下游引物 PR 5’-CTCTGCAGCACCCTATCAGG3’

荧光探针 PB 5’FAM-AGATGCCACGTGGACGAG

GGC-BHQ1 3’

1.4 RNA 的提取

取稀释后的猪瘟疫苗 250 滋L 加入 750 滋L Trizol，

振荡混匀后室温放置 5 min，再加入氯仿溶液 250 滋L，

充分振荡混匀后室温放置 10 min，4℃ 12 000 rpm 离心

15 min，取 500 滋L 上清液，加入等量的异丙醇溶液混

匀，静置 30 min 后，4℃ 12 000 rpm 离心 10 min，弃

去上清，用 1 mL 75%的乙醇洗涤沉淀物，4℃ 12 000

rpm 离心 5 min 弃去上清，将离心管在室温下静置干燥

20 min，然后加入 30 滋L ddH20，充分溶解后 -20℃保

存备用。

1.5 荧光定量 RT-PCR

反应体系为：2×One Step RT-PCR BufferⅢ 10 滋L，

virus (BVDV), which was the most common. BVDV infection in pig populations could reduce the immune efficacy of classical swine fever

vaccines and pose a risk of disease transmission. In order to investigate the contamination of BVDV in commercialized classical swine

fever vaccines and fetal bovine serum in the Yili Valley, this study used real-time fluorescence quantitative (RT-PCR) to detect BVDV in

different types of classical swine fever vaccines produced by 5 manufacturers and different batches of fetal bovine serum produced by

6 manufacturers. The results showed that the positive rate of BVDV nucleic acid detection in classical swine fever vaccines was 18.2%,

and the positive rate of BVDV nucleic acid detection in fetal bovine serum was 8.3%. This provided technical support for the selection of

safe and reliable classical swine fever vaccines and fetal bovine serum in pig farms and research institutions in the Yili Valley.

Key words: CSFV vaccines; bovine serum; bovine viral diarrhea virus; contamination; investigation

猪病防控 Swine Disease

Prevention and Control

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China Swine Industry

2023 年 第 5 期

10 滋M TaqMan 探针 0.4 滋L，10 滋M 上游引物 0.4 滋L，

10 滋M 下游引物 0.4 滋L、TaKaRa ExTaq HS 0.4 滋L、

Prime-Script RT Enzyme MixⅡ 0.4 滋L、Rox Reference

Dye 0.4 滋L、DEPC H2O 5.6 滋L、模板 2 滋L。

反应条件为: 42℃ 5 min，95℃ 10 s；95℃ 5 s，

60℃ 40 s （收集荧光 FAM，40 个循环）。

2 结果与分析

对来自伊犁河谷地区市场上销售的 11 份猪瘟疫苗

和 12 份胎牛血清进行 BVDV 实时荧光定量 RT-PCR 检

测。结果显示，猪瘟疫苗中共检出 2 份 BVDV 阳性样

品，阳性率为 18.2%，阳性样本均为细胞源猪瘟疫苗，

分别来自于国内疫苗生产厂家 B 和 E。胎牛血清检出 1

份 BVDV 阳性样品，阳性率为 8.3%，阳性样本为 H 生

产厂家 H-1 批号样品，具体见表 2。

3 讨论

3.1 BVDV 感染对猪瘟疫苗的免疫干扰

在国内猪瘟弱毒疫苗中，时常有猪瘟疫苗被外源病

原 污 染 的 报 道 ，且 污 染 源 常 为 牛 病 毒 性 腹 泻 病 毒

（BVDV） 和支原体[2]。牛病毒性腹泻病毒自首次被报道

以来，在全世界很多畜牧业发达国家中流行[3]，如澳大

利亚、德国等国家的猪群中 BVDV 抗体阳性率达 3%～

40%，荷兰达 15%～20%。各种年龄的牛都可感染牛病

毒性腹泻病毒，以幼龄牛易感性最高，在垂直传播后，

会产生病毒血症[4]。

表 3 不同剂量的益生菌制剂对仔猪血清免疫指标的影响 表 1 待检生物制剂样品信息

编号 生物制剂 厂家 生产批号 样品种类

1 A-1 猪瘟耐热保护剂活疫苗（细胞源）

2 A-2 猪瘟乳兔组织活疫苗（组织苗）

3

A

A-3 猪瘟脾淋活疫苗（组织苗）

4 B-1 猪瘟活疫苗（细胞源）

5

B

B-2 猪瘟脾淋活疫苗（组织苗）

6 C-1 猪瘟活疫苗（传代细胞源）

7

C

C-2 猪瘟乳兔组织活疫苗（组织苗）

8 D-1 猪瘟活疫苗（兔源—脾淋源）

9

D

D-2 猪瘟活疫苗（细胞源）

10 E-1 猪瘟耐热保护剂活疫苗（兔源）

11

猪瘟疫苗

E

E-2 猪瘟活疫苗（细胞源）

12 F-1 国产血清

13

F

F-2 国产血清

14 G-1 进口血清

15

G

G-2 进口血清

16 H-1 国产血清

17

H

H-2 国产血清

18 I-1 进口血清

19

I

I-2 进口血清

20 J-1 国产血清

21

J

J-2 国产血清

22 K-1 进口血清

23

胎牛血清

K

K-2 进口血清

猪病防控 Swine Disease

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China Swine Industry

2023 年 第 5 期

受 BVDV 感染的猪瘟疫苗，往往会导致猪瘟免疫失

败。主要原因是 BVDV 可以对猪瘟疫苗的免疫产生干

扰，不仅能抑制猪瘟抗体的产生，而且还可以刺激猪体

产生大量的 BVDV 抗体。因此，在生产过程中猪场内猪

瘟抗体明明很高，但却依然时有猪瘟的发生，究其原因

是在检测的抗体中，猪瘟保护抗体很少，大部分可能为

BVDV 抗体[5]。

3.2 BVDV 存在于胎牛血清中造成猪瘟弱毒疫苗

的污染

目前，我国规模化牛场中牛病毒性腹泻病毒的感染

率很高，很多地方对该病还未引起足够重视。陶洁等[6]

于 2017—2020 年间对上海不同区猪场的血液样品，利

用多重 RT-PCR 方法进行 BVDV 检测与分析。结果表

明，上海地区猪群 BVDV 的总体检出率为 7.14%，且呈

现逐年递增的趋势。笔者曾调查过伊犁地区规模化牛场

BVDV 的感染率，个别牛场的感染率高达 90%以上。胎

牛血清是细胞培养的重要原料，以含 BVDV 的血清作为

原料时，就会污染所制备的生物制品[7]，如猪瘟细胞苗

生产过程中会使用到牛睾丸细胞及胎牛血清，在猪繁殖

与呼吸综合症 （蓝耳病） 疫苗生产工艺的传代细胞培养

中也会使用到胎牛血清，如果胎牛血清中含有 BVDV 病

原或抗体，会使猪瘟细胞苗和猪蓝耳病疫苗遭到污染[8]。

温树波等[9]从进口胎牛血清中成功分离到 1 株非致细胞

病变型 BVDV 1b 亚型毒株。李艳萍等[10]从商品化的胎牛

血 清 中 分 离 到 1 株 致 细 胞 病 变 （CP） 型 BVDV

（GS2018 株）。张超等[11]从进口胎牛血清中分离出 １ 株

BVDV-2 型非致细胞病变毒株，从脱脂奶粉中检测到

BVDV 抗体，表明进口胎牛血清和脱脂奶粉中都存在

BVDV 抗原和抗体污染。鞠厚斌[12]等对国内市售的胎牛

血清进行荧光 RT-PCR 检测牛病毒性腹泻病毒。结果显

示，胎牛血清 BVDV 核酸阳性率为 50%。刘阳等[13]研究

发现猪瘟脾淋苗与细胞苗都能刺激机体产生免疫应答，

无论是标准剂量还是加大剂量，细胞苗的免疫效果都优

于脾淋苗。

细胞苗的广泛使用，一定程度上增加了猪瘟疫苗被

BVDV 污染的风险。这给疫苗的使用和推广带来了很多

潜在的风险，使用无 BVDV 污染并且无 BVDV 抗体的牛

供应细胞和血清是生产高安全性猪瘟疫苗的关键。加强

对疫苗等生物制剂的制作工序及生产原料的监管，是企

业和政府职能部门当务之急的重要工作，应当引起足够

的重视。

3.3 改善弱毒疫苗生产工艺袁 有效防范外源性感染

改进弱毒疫苗等生物制剂的生产工艺，也是当前破

解疫苗中 BVDV 污染现状的一个有效途径。目前，有疫

苗生产企业在使用放射性钴 -60 对血清等进行辐射操

作，以期杀灭血清中的 BVDV；也有一些生物制剂厂家

表 2 表伊犁河谷地区市售生物制剂样品中 3 不同剂量的益生菌制剂对仔猪血清免疫指标的影响 BVDV感染情况检测结果

检测结果

生物制剂名称 厂家

阴性数/份 阳性数/份 可疑数/份

总阳性数/份 阳性率/%

A 3 0 0

B 1 1 0

C 2 0 0

D 2 0 0

猪瘟疫苗

E 1 1 0

2 18.2

F 2 0 0

G 2 0 0

H 1 1 0

I 2 0 0

J 2 0 0

胎牛血清

K 2 0 0

1 8.3

猪病防控 Swine Disease

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China Swine Industry

2023 年 第 5 期

在研究无血清的细胞培养基，避免因原料污染而导致疫

苗出现问题；还有企业在研究胎牛血清替代品，如马血

清等。

3.4 分子生物学方法能有效检测 BVDV

建立特异性强、准确率高的检测方法是筛查猪瘟疫

苗及胎牛血清中牛病毒性腹泻病毒污染的关键。于新友

等[14]建立的双重荧光 PCR 方法灵敏度高、特异性强、精

密性好，可用于猪用疫苗中外源病毒的快速检测及猪用

疫苗等生物制品的质量控制。本文利用已成熟的 BVDV

实时荧光定量 RT-PCR 方法对样品进行检测，对检测出

的阳性样品送第三方检测机构复检，结果相似度 100%。

检测结果表明，伊犁河谷市售的猪瘟疫苗和胎牛血清存

在 BVDV 的污染，这为伊犁河谷市规模化猪场选择安全

性高的生物疫苗提供了依据。但同时疫苗中 RT-PCR 检

测 BVDV 也存在一定问题，若疫苗中存在灭活的少量

BVDV 也能被检测到，因此，检测到的病毒有可能是灭

活的 BVDV。如何在有限的时间内区分 BVDV 的活性，

是值得学者研究的方向。

4 小结

目前，新疆部分地区大型规模养猪场猪瘟抗体合格

率普遍高于中、小型规模养猪场，说明大型规模养猪场

在猪瘟的防控方面具有一定优势[15]，中小规模猪场还存

在一定的猪瘟野毒感染风险。伊犁地区的生猪存栏量较

大，且以中小型规模猪场为主，每年猪用疫苗的使用量

相当大，这也使很多疫苗生产厂家为了抢占伊犁生猪市

场，打价格战造成疫苗质量得不到保障。伊犁河谷市所

售的猪瘟疫苗种类繁多，猪场使用疫苗后，生猪时常出

现类似猪瘟的临床表现，这也提示养殖企业要加强对猪

源 BVDV 的检测，为伊犁地区生猪产业的健康发展提供

保障。

参考文献

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猪病防控 Swine Disease

Prevention and Control

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China Swine Industry

2023 年 第 5 期

DOI：10.16174/j.issn.1673-4645.2023.05.020

收稿日期：2023-03-27

作者简介：郑教雀 （1989-），男，福建宁德人，硕士，高级兽医师，执业兽医师，主要从事动物疫病预防控制工作

基于 CNKI 的猪伪狂犬病净化文献计量

与可视化分析

郑教雀

渊福建省宁德市动物疫病预防控制中心袁 福建宁德 352100冤

摘 要院 猪伪狂犬病是一种急性尧 高度接触性传染病袁 具有一定的免疫抑制性袁 危害极大袁 净化是猪伪狂犬病防控的重要途

径袁 养猪场开展猪伪狂犬病净化工作是很有必要的遥 本文采用文献计量学方法袁 从定量的角度分析我国猪伪狂犬病净化研究

趋势及现状袁 从而为我国猪伪狂犬病净化研究提供可借鉴的思路和方法遥

关键词院 生猪曰 伪狂犬病曰 净化曰 文献曰 可视化分析

中图分类号院 S828曰S852.65 文献标识码院 A 文章编号院 1673-4645(2023)05-0090-06

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近年来，生猪规模化养殖场中猪伪狂犬病净化工作

日益受到从业者们的关注。猪伪狂犬病 （Porcine Pseudorabies, PR） 是一种急性、高度接触性传染病，也是

一种免疫抑制性疫病，是危害养猪业的重大传染病之

一。该病病原为猪伪狂犬病病毒 （Pseudorabies virus,

PRV），主要侵害猪的神经系统与生殖系统；猪群感染该

病毒后，仔猪常出现震颤、划水等神经症状，妊娠母猪

多表现为繁殖障碍，公猪表现为不育，育肥猪、成年猪

则表现为呼吸困难、生长缓慢[1]。净化是猪伪狂犬病防

控的重要途径，也是猪伪狂犬病防控的最终目标，它不

仅能提高生猪的生产性能、产品质量，还能促进产业提

质增效、农牧民增产增收，2021 版 《动物防疫法》 更是

明确将部分疫病“净化”纳入动物防疫的方针和要求，

表明了开展动物疫病净化的必要性[2]。

本文采用文献计量学方法，以 CNKI 数据库作为数

据源，对我国猪伪狂犬病净化研究文献的数量、核心作

者、研究机构等信息进行梳理、统计分析。目的是从定

量的角度分析猪伪狂犬病净化工作的研究趋势及现状，

并得出结论，继而提出针对性建议。为我国猪伪狂犬病

净化研究提供可供借鉴的思路和方法[3]。

1 材料和方法

1.1 研究对象

以中国知网 （CNKI） 数据库作为数据源，选用“高

级检索”检索文献，检索方式选择“精确”，检索范围为

总库，检索主题为“伪狂犬、净化”或“伪狂犬病、净

化”。时间限定为 2000 年 1 月 1 日至 2022 年 11 月 30

日，共检索到相关文献 1 190 篇：其中期刊 928 篇、研

究生论文 183 篇、会议论文 48 篇、报纸 2 篇、成果 29

篇。文献类型数量分布情况见表 1。

1.2 研究方法

对上述检索出的 1 190 篇文献，利用 CNKI 的检索

猪病防控 Swine Disease

Prevention and Control

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China Swine Industry

2023 年 第 5 期

结果计量可视化分析功能和 Excel 软件，对我国猪伪狂

犬病净化领域年度发文数量、核心作者、研究机构、资

助基金、研究热点、被引情况、期刊、研究层次等进行

分析，利用 VOSviewer 软件分析工具进一步对作者合作

网络、研究热点等进行分析。

2 结果与分析

2.1 逐年发表数量分析

年度发文量分布能很好地反映研究领域的发展历程

及现状。CNKI 数据库收录的有关猪伪狂犬病净化研究

文献年度分布情况如图 1 所示。可以看出，文献产出量

总体呈先上升、后震荡下降态势，根据文献产出量的年

度分布，作者将猪伪狂犬病净化研究划分为 3 个阶段[4]。

缓慢增长期 （2000—2013 年），在这 14 年间共发

表猪伪狂犬病净化类研究论文 319 篇，年均发表量为

22.79 篇，各年份发文量均在 50 篇以下，其中 2013 年

发文量最多为 49 篇。猪伪狂犬病净化研究的第 1 篇文

献是 2000 年 1 月 5 日侯安祖发表于 《河南畜牧兽医》

的 《猪伪狂犬病的诊断和防制》，该篇文章截至检索时

间被下载次数为 31 次。此阶段猪伪狂犬病净化研究逐

渐受到科研人员的重视。

快 速 增 长 期 （2014—2016

年），从 2014 年开始，猪伪狂犬

病净化研究的发文量迅速增多，

这 3 年共发表论文 334 篇，占统

计年限 （2000—2022 年） 发文总

量的 28.07%，年均论文发表量为

111.33 篇，远高于缓慢增长期的

年均发文量。此阶段猪伪狂犬病

净化研究受到各从业者的广泛关

注。

震 荡 回 落 期 （2017—2022

年），在这 6 年中相关研究的累计

发文量共 537 篇，占统计年限发文总量的 45.13%，年

均发文量 89.5 篇。此阶段各从业者对猪伪狂犬病净化研

究的热度有所下降。可能原因有以下 2 点：一方面由于

环保压力越来越大，全国范围内开展了禁养区规划、禁

养区猪场拆迁的浪潮，从业者关注点转移；另一方面由

于非洲猪瘟、新冠肺炎等疫情影响，研究人员对猪伪狂

犬病的关注有所减退。

2.2 核心作者分析[5]

2.2.1 核心作者测评及分析

本文所称的核心作者是指对猪伪狂犬病净化工作发

展具有较大贡献的科研人员。

2000—2022 年猪伪狂犬病净化研究，以第一作者

（含独立作者） 发文最多的为杨汉春，共计发表论文 14

篇，依据文献计量学常用的普赖斯定律进行统计计算：

Mp＝0.749 Npmax

1/2＝0.749×141/2＝2.803，取整，即发表

3 篇或 3 篇以上论文的作者入选为核心作者候选人。

2000—2022 年猪伪狂犬病净化研究，发文被引频次

累计最高作者是杨汉春，达 214 次，参考上述普赖斯定

律，Mc＝0.749 Ncmax

1/2＝0.749×2141/2＝10.957，取整，

确定出核心作者候选人的发文累积最低被引量为 11次。

表 3 不同剂量的益生菌制剂对仔猪血清免疫指标的影响 表1 文献类型数量分布情况表

文献类型 期刊 博士论文 硕士论文 国内会议 国际会议 报纸 成果

篇数/篇 928 24 159 42 6 2 29

百分比/% 77.98 2.02 13.36 3.53 0.50 0.17 2.44

图 1 2000要2022年猪伪狂犬病净化研究文献逐年发文量走势图

猪病防控 Swine Disease

Prevention and Control

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China Swine Industry

2023 年 第 5 期

对符合以上 2 个标准之一的作者进行统计，并去除

重复项后，最终确定核心作者候选人有 114 位。共计发

文 252 篇，所发文的被引频次共计 2 887 次。参考钟文

娟 《基于普赖斯定律与综合指数法的核心作者测评—以

< 图书馆建设 > 为例》 [5]，按照下方公式计算出核心作者

候选人的综合指数，综合学术水平值≥100 为核心作者。

注：公式中，xi 指的是待测评人发文总量，x 指所

有待测核心作者发文总量 / 所有待测核心作者人数；yi

指的是待测评人论文被引用累计频次，y 为所有待测核

心作者论文被引频次总量 / 所有待测核心作者人数。

按公式对 114 位核心作者候选人的综合学术水平值

进行测评，其中综合学术水平值大于等于 100 的作者共

计 35 位，详见表 2，即为 2000—2022 年猪伪狂犬病净

化研究的核心作者。

2.2.2 核心作者群分析

通常将发文量较多、影响较大的作者集合称为核心

作者群。普赖斯定律认为，某领域要形成核心作者群，

则该领域的核心作者发文总量占比需超过 50%。由表 2

可知，猪伪狂犬病净化研究领域的 35 位核心作者共发

文 133 篇，占发文总量的 11.18%。该比例远小于普赖

斯定律占比超 50%的要求，说明猪伪狂犬病净化研究领

域尚未形成稳定的核心作者群。

使用 VOSviewer 软件进一步对核心作者的合作网络

进行分析，发现目前该研究领域形成了 3 个小型合作团

体，大部分合作团体均为单位内合作，尚未形成大的研

究网络，具体情况如图 2 所示。该网络图进一步证明了

猪伪狂犬病净化研究领域尚未形成稳定的核心作者群。

2.3 研究机构分析

为明确研究机构对猪伪狂犬病净化领域研究的贡

献，同时了解研究机构的地域分布及性质，作者对参与

猪伪狂犬病净化领域研究的机构进行了统计分析[4,6]。

CNKI 数据库中 2000—2022 年猪伪狂犬病净化研究领域

发文量 10 篇以上的研究机构如图 3 所示。

从图 3 可以看出，发文量 10 篇以上的研究机构有

18 个，共发文 328 篇，占发文总量的 27.56%。发文量

最多、贡献最大的机构是贵州大学，为 29 篇，占发文

总量的 2.44%；发文量第 2 位到第 5 位的分别是华中农

业大学、南京农业大学、河南农业大学和山东农业大学，

发文量分别为 27、26、25 篇和 20 篇，其余 13 个研究

机构发文量均低于 20 篇。

对研究机构地域分布情况进行分析发现，主要研究

力量聚集在我国中部、东部和西南地区。其中华中农业

大学、河南农业大学、河南省动物疫病预防控制中心和

湖南农业大学 4 个研究机构合计发文量最多，达 85 篇；

华东地区所属山东农业大学、南京农业大学、扬州大学

表2 综合指数法测定的 表 3 不同剂量的益生菌制剂对仔猪血清免疫指标的影响 2000要2022年猪伪狂犬病净化研究核心作者

作者

发文

篇数/篇

被引

频次/次

综合

指数

发文

年度

作者

发文

篇数/篇

被引

频次/次

综合

指数

发文

年度

作者

发文

篇数/篇

被引

频次/次

综合

指数

发文

年度

杨汉春 14 214 739.18 2004—2020 卫秀余 5 12 136.79 2003—2013 孙圣福 2 35 114.34 2011—2021

周绪斌 11 114 473.89 2007—2009 戴爱玲 2 45 134.09 2011—2015 伍少钦 4 12 114.17 2015—2021

解伟涛 9 96 393.11 2014—2018 党占国 2 45 134.09 2016 齐向涛 2 34 112.37 2013—2014

何启盖 5 103 316.46 2012—2015 王 军 3 30 127.09 2012—2022 郝 飞 3 22 111.29 2012—2013

邓仕伟 2 133 307.83 2006—2007 赵东升 2 41 126.19 2008 张显浩 1 44 109.49 2015

章 勇 4 101 289.89 2018—2022 华利忠 1 52 125.29 2017 刘翠权 1 43 107.52 2011

赵胜杰 6 23 181.13 2018—2021 刘 芳 2 39 122.24 2012 张淼洁 3 19 105.37 2017—2018

李 达 4 43 175.37 2015—2016 胡玲玲 4 16 122.07 2017—2018 牛建强 2 30 104.47 2006—2007

万遂如 5 30 172.33 2013—2016 张渊魁 4 15 120.09 2007—2010 邱美珍 2 30 104.47 2012—2014

宋春莲 4 37 163.53 2012—2019 张鲁安 3 26 119.19 2005—2008 倪 娇 1 41 103.57 2007

王继春 2 50 143.96 2015—2018 彭 峰 4 14 118.12 2009—2019 刘国信 4 5 100.35 2018—2021

孙广力 5 15 142.71 2000—2003 肖伦征 5 2 117.05 2012—2018

猪病防控 Swine Disease

Prevention and Control

92

China Swine Industry

2023 年 第 5 期

图2 2000要2022年猪伪狂犬病净化研究领域核心作者合作网络

和福建农林大学 4 个研究机构合计

发文量次之，为 77 篇；西南地区

所属贵州大学、贵州省动物疫病预

防控制中心、云南农业大学 3 个研

究机构合计发文量居第 3 位，为

58 篇；其余 7 个研究机构分布在

华北、华南、西北、东北等 4 个地

区，合计发文 108 篇。

从研究机构的学科性质来看，

以农业院校为主，动物疫病预防控

制中心类单位次之，综合性大学紧

随其后，由此反映出农业院校对猪

伪狂犬病净化领域研究的重视。

2.4 基金资助分析

基金论文不仅衡量了该论文的

科研实力、水平，还是所研究领域

社会地位的重要标志[4]。在 1 190

篇猪伪狂犬病净化的研究文献中，

共有 35 个基金资助了猪伪狂犬病

净化的研究，涉及论文 92 篇，基

金论文占比为 7.73%。其中国家重

点研发计划支持的论文为 16 篇，

国家自然科学基金支持的论文为

12 篇，国家科技支撑计划支持的

论文为 9 篇，现代农业产业技术体

系建设专项资金支持的论文为 6

篇，国家星火计划、中央高校基本

科研业务费专项资金项目支持的论

文各 2 篇，长江学者和创新团队发

展计划、中央级科技基础性工作专

项资金项目、国家科技攻关计划各

1 篇，这 9 个国家基金支持的论文占基金论文总数的

54.35%。除国家基金外，猪伪狂犬病净化研究还得到了

山西省、吉林省、贵州省、广西省等省市地区基金项目

的支持。基金可以为猪伪狂犬病净化研究奠定一定的物

质基础，还在一定程度上促进了猪伪狂犬病净化研究的

深入与发展。

2.5 研究热点分析 [6-7]

关键词作为作者对论文主题的精炼描述，是贯穿全

文的主要线索。对多篇文章中的高频关键词进行分析，

可以得到当前猪伪狂犬病净化研究领域的热点。将根据

检索方法检索出的 1 190 条信息导入 VOSviewer，选取

被引次数在 10 次以上的关键词，筛选出符合要求的关

图3 2000要2022年猪伪狂犬病净化研究机构分布图

猪病防控 Swine Disease

Prevention and Control

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China Swine Industry

2023 年 第 5 期

图4 关键词共现知识图谱

键词共 89 个，分别属于 6 个

聚类，详见图 4。

聚类 1 包括 19 个节点，

主要包括关键词伪狂犬病、免

疫、净化等；聚类 2 包括 18

个节点，主要包括关键词猪伪

狂犬病、伪狂犬病病毒、伪狂

犬病疫苗、净化措施等；聚类

3 包括 18 个节点，主要包括

关键 词 种 猪 场、疫 病 净 化、

PRRSV 等；聚类 4 包括 15 个

节 点 ， 主 要 包 括 关 键 词

gE-ELISA、流 行病 学、PRV

等；聚类 5 包括 13 个节点，

主要包括关键词 ELISA、gB

抗体、gE 抗体等；聚类 6 包

括 6 个节点，主要包括关键词

临床症状、防治措施、诊断

等。图中每个关键词即为 1 个

节点，点的大小代表被引频次的高低，节点间的连线表

示 2 个词同时出现在同组文献中，连线越明显，共同出

现程度越强。

2.6 高频被引文章分析

被引频次不仅可以反映出研究成果的影响力；还反

映出互引文献之间的内在联系[8]。CNKI 数据库在统计范

围内，猪伪狂犬病净化领域方向被引频次排名前 10 名

的文献见表 3。

由表 3 可以看出，被引频次排名前 10 的文章，被

引频次均高于 40 次。被引频次最高的是邓仕伟等在

2006 年发表于 《动物医学进展》 的 《我国伪狂犬病流行

现状及新特点》 一文，被引频次为 112 次；排名第 2 位

的是何启盖等发表的 《猪伪狂犬病流行病学特征、净化

技术及其应用示范》 一文，被引频次是 94 次；排名第 3

位的是杨汉春发表的 《2014 年猪病流行情况与 2015 年

表 3 不同剂量的益生菌制剂对仔猪血清免疫指标的影响 表 3 被引频次排名前10 名的文献

题名 第一作者 文献来源 发表年度 被引频次/次

我国伪狂犬病流行现状及新特点 邓仕伟 动物医学进展 2006 年 112

猪伪狂犬病流行病学特征、净化技术及其应用示范 何启盖 中国畜牧杂志 2015 年 94

2014 年猪病流行情况与 2015 年流行趋势及防控对策 杨汉春 猪业科学 2015 年 63

2013 年河南省猪伪狂犬野毒感染血清学调查 解伟涛 中国动物传染病学报 2014 年 59

猪伪狂犬病病毒新流行变异毒株的研究进展 华利忠 江苏农业学报 2017 年 53

猪伪狂犬病活疫苗（Bartha K61 株）对变异株的保护效力 王继春 畜牧与兽医 2015 年 52

2007 年规模化猪场伪狂犬病野毒血清流行病学系统监测与分析 周绪斌 猪业科学 2008 年 52

2012 年—2013 年我国集约化猪场猪伪狂犬病病毒感染情况的调查 张显浩 动物医学进展 2015 年 44

广西 395 个规模猪场猪呼吸道疾病综合征的病原学调查及防控措施 刘翠权 南京农业大学 2011 年 44

近期部分规模化猪场猪伪狂犬病野毒抗体监测情况调查 倪娇 中国畜牧兽医 2007 年 41

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