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图 4:重组蛋白纯化 图 5:纯化后蛋白 WB 结果验证
表 1 抗原最佳包被浓度、血清最佳稀释度和酶标抗体稀释倍数的 P/N 范围
抗原包被浓度 8μg/mL 4μg/mL 2μg/mL 1μg/mL 0.5μg/mL 0.25μg/mL
P/N 范围 2.4-4.04 2.77-3.93 3.04-4.10 3.17-4.1 3.07-3.84 2.87-3.49
血清稀释倍数 25 倍稀释 50 倍稀释 100 倍稀释 150 倍稀释
P/N 范围 1.15-1.80 1.60-2.51 2.03-3.62 2.47-4.13
酶标稀释倍数 2W 4W 8W 16W
P/N 范围 1.12-3.14 1.61-3.94 1.75-4.26 1.81-3.96
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表 2:GP5 蛋白抗体试剂盒临床血清符合率试验
研发试剂盒
Hipra
阳性 阴性 合计
GP5 蛋白抗体试剂盒
阳性 104 2 106
阴性 13 51 64
合计 117 53 170
阳性符合率(敏感性) 88.89%
阴性符合率(特异性) 96.23%
总符合率 91.18%
序
号 稀释度 中和抗
体滴度
蓝耳病毒 GP5 抗体 蓝耳病毒 GP5 抗体
OD S/P 结果 OD S/P 结果
1 20 倍稀释 1:640 2.51 2.22 + 2.39 2.12 +
2 40 倍稀释 1:1280 2.14 1.88 + 2.11 1.86 +
3 80 倍稀释 1:2560 1.78 1.56 + 1.78 1.56 +
4 160 倍稀释 1:5120 1.39 1.20 + 1.31 1.13 +
5 320 倍稀释 1:10240 1.03 0.88 + 0.95 0.81 +
6 640 倍稀释 1:20480 0.64 0.53 + 0.65 0.53 +
7 1280 倍稀释 1:40960 0.42 0.33 - 0.42 0.33 -
8 2560 倍稀释 1:81920 0.29 0.21 - 0.27 0.19 -
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表 4:阳性稳定场 PRRSV-ELISA 检测结果
抗体检测结果 悦洋 -PRRSV-N PRRSV-GP5-
ELISA
病毒中和抗体滴度
≥ 8
阳性 5 30 25
阴性 29 4 9
阳性率 14.29% 85.71% 71.43%
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场所 消毒药 浓度 备注
进场消毒池 烧碱 1-2% 及时更换和添加消
毒液
人员:进场
洗手靴子消毒
碘消毒剂
或:复合戊二醛
1:200-800
1:200
1:200
执行洗手、更衣、
洗澡全套程序
浸泡至少 5 分钟,
并刷洗
物料进场 ;
车辆消毒
有机氯消毒剂 1:100-200 喷雾。停滞 30 分钟。
车辆应清洗轮胎后
消毒,停滞至少 30
分钟。
苯酚 1:100-300
复合戊二醛消毒剂 1:200
场内环境;
舍内带猪消毒
碘消毒剂 1:200 带猪消毒的频率:
每 周 2-7 次。 药 液
稀释后,每平方米
地 面 使 用 大 约 50-
100ml。
有机氯消毒剂 1:100-200
苯酚 1:100-300
复合戊二醛消毒剂 1:200
水线消毒
漂白粉 20g/T 水,下同
二氯异氰尿酸钠 4-6g
酸(如意酸) 500-1000ml
二氧化氯 50-100ml
猪舍终末消毒
泡沫清洗剂 ( 拳力
巴斯德 )
- 按产品说明使用。
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